用于治疗异常细胞生长的组合疗法的制作方法

用于治疗异常细胞生长的组合疗法
1.相关申请的交叉引用
2.本技术要求于2020年1月31日提交的美国临时专利申请号62/968,615和2020年11月18日提交的美国临时专利申请号63/115,433的优先权和权益，每一个都通过引用整体并入本文。


背景技术：

3.令人信服的证据表明，粘着斑激酶(fak)，一种细胞质的非受体酪氨酸激酶，在细胞存活、增殖、迁移、侵袭和粘附中起重要作用(clark and brugge 1995,science 268:233-239)且它的异常激活与肿瘤转移潜能的增加有关(owens等人1995,cancer research 55:2752-2755)。某些非受体酪氨酸激酶如fak、ick、src、abl或丝氨酸/苏氨酸激酶(例如细胞周期蛋白依赖性激酶)的选择性抑制剂可用于治疗哺乳动物的异常细胞生长，特别是癌症。fak也称为蛋白酪氨酸激酶2，ptk2。据报道，fak表达和/或活性在一系列恶性肿瘤中上调，包括葡萄膜黑色素瘤和甲状腺癌、前列腺癌、宫颈癌、结肠癌、直肠癌、口腔上皮癌、卵巢癌和乳腺癌。
4.kirsten大鼠肉瘤2病毒癌基因同源物(kras)是一种小型gtp酶，是ras癌基因家族的成员。kras充当在非活性(gdp结合)和活性(gtp结合)状态之间循环的分子开关，以将从多个酪氨酸激酶接收的上游细胞信号转导到下游效应器，以调节包括细胞增殖在内的各种过程(例如，参见alamgeer等人，(2013)current opin pharmcol.13:394-401)。kras基因突变在癌症中很常见，例如胰腺癌、肺腺癌、结直肠癌(crc)、胆囊癌、甲状腺癌和胆管癌(kodaz等人,ejmo 2017)。在大约30％的肺腺癌患者、40％的crc患者和67％的胰腺腺癌患者中观察到kras突变。虽然kras是肺腺癌和胰腺癌的主要驱动因素，但kras不是结直肠癌的主要起始事件(mccormick，2015)。
5.ras/raf/mek/erk信号转导途径的成分也代表了治疗异常细胞生长例如癌症的机会。ras/raf/mek/erk信号转导途径的某些组分，例如ras、raf、mek和erk的选择性抑制剂可用于治疗哺乳动物的异常细胞生长，特别是癌症。
6.由于与异常细胞生长(例如癌症)相关的疾病和病症的严重性和广度，需要有效的治疗手段和治疗方法。本文所述的化合物、化合物组合、组合物和方法针对此目的。


技术实现要素：

7.本文部分提供了组合(例如，如本文所述的化合物，例如，kras g12c抑制剂与fak抑制剂和/或mek抑制剂或双重raf/mek抑制剂的组合)，其可用于例如在需要的受试者中治疗异常细胞生长(例如，癌症)的方法。
8.因此，在一个方面，本文提供在需要的受试者中治疗癌症的方法，该方法包括向该受试者给药kras g12c抑制剂(例如，ars-853、ars-1620、ars-3248、ly3499446、amg-510和mrtx849)或其药学上可接受的盐与fak抑制剂(例如，地法替尼、tae226、bi-853520(in10018)、gsk2256098、pf-03814735、bi-4464、vs-4718和apg-2449)或其药学上可接受的
盐的组合，从而治疗该受试者。
9.在另一方面，本文提供在需要的受试者中治疗癌症的方法，该方法包括向该受试者给药kras g12c抑制剂(例如，ars-853、ars-1620、ars-3248、ly3499446、amg-510和mrtx849)或其药学上可接受的盐与mek抑制剂(例如，曲美替尼、考比替尼、比尼替尼、司美替尼、pd-325901、ci-1040、ch5126766、mek162、azd8330、gdc-0623、瑞法替尼、派吗色替、wx-554、hl-085、ch4987655、tak-733、cinq-03、g-573、pd184161、pd318088、pd98059、ro5068760、u0126和sl327，例如，ch5126766)或其药学上可接受的盐的组合，从而治疗该受试者。
10.在一方面，本文公开了在需要的受试者中治疗癌症的方法，该方法包括向该受试者给药kras g12c抑制剂(例如，ars-853、ars-1620、ars-3248、ly3499446、amg-510和mrtx849)或其药学上可接受的盐与双重raf/mek抑制剂(例如，ch5126766)或其药学上可接受的盐的组合，从而治疗该受试者。
11.本文还提供在需要的受试者中治疗癌症的方法，该方法包括向该受试者给药kras g12c抑制剂(例如，ars-853、ars-1620、ars-3248、ly3499446、amg-510和mrtx849)或其药学上可接受的盐与fak抑制剂(例如，地法替尼、tae226、bi-853520(in10018)、gsk2256098、pf-03814735、bi-4464、vs-4718和apg-2449)或其药学上可接受的盐和mek抑制剂(例如，曲美替尼、考比替尼、比尼替尼、司美替尼、pd-325901、ci-1040、ch5126766、mek162、azd8330、gdc-0623、瑞法替尼、派吗色替、wx-554、hl-085、ch4987655、tak-733、cinq-03、g-573、pd184161、pd318088、pd98059、ro5068760、u0126和sl327)或其药学上可接受的盐的组合，从而治疗该受试者。
12.在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂选自ars-853、ars-1620、ars-3248、ly3499446、amg-510和mrtx849，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂为amg-510或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂为mrtx849或其药学上可接受的盐。
13.在一些实施方案中，所述fak抑制剂选自地法替尼、tae226、bi-853520(in10018)、gsk2256098、pf-03814735、bi-4464、vs-4718和apg-2449，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述fak抑制剂为地法替尼或其药学上可接受的盐。
14.在一些实施方案中，所述方法进一步包括施用mek抑制剂。
15.在一些实施方案中，所述mek抑制剂选自曲美替尼、考比替尼、比尼替尼、司美替尼、pd-325901、ci-1040、ch5126766、mek162、azd8330、gdc-0623、瑞法替尼、派吗色替、wx-554、hl-085、ch4987655、tak-733、cinq-03、g-573、pd184161、pd318088、pd98059、ro5068760、u0126和sl327，或其药学上可接受的盐。
16.在一些实施方案中，所述mek抑制剂为双重raf/mek抑制剂。
17.在一些实施方案中，所述mek抑制剂为ch5126766或其药学上可接受的盐。
18.在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂以约100mg至约2000mg给药。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂每天一次给药。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂每天两次。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂口服给药。
19.在一些实施方案中，所述fak抑制剂(例如，地法替尼)每天两次给药。在一些实施方案中，所述fak抑制剂(例如，地法替尼)每天一次给药。在一些实施方案中，所述fak抑制
剂(例如，地法替尼)以约100mg至约1000mg给药。在一些实施方案中，所述fak抑制剂(例如，地法替尼)以约200mg至约400mg给药。在一些实施方案中，所述fak抑制剂(例如，地法替尼)口服给药。
20.在一些实施方案中，所述fak抑制剂在施用kras g12c抑制剂之前施用。在一些实施方案中，所述fak抑制剂在施用kras g12c抑制剂之后施用。在一些实施方案中，所述fak抑制剂与kras g12c抑制剂一起施用。
21.在一些实施方案中，所述mek抑制剂至少一周一次给药(例如，一周一次、一周两次、一周三次、一周四次、一周五次或一周六次)。在一些实施方案中，所述mek抑制剂一周一次给药。在一些实施方案中，所述mek抑制剂一周两次给药。在一些实施方案中，所述mek抑制剂每天一次给药。在一些实施方案中，所述mek抑制剂每天两次给药。在一些实施方案中，所述mek抑制剂以约0.1mg至约100mg给药。在一些实施方案中，所述mek抑制剂口服给药。
22.在一些实施方案中，所述mek抑制剂为双重raf/mek抑制剂。在一些实施方案中，所述双重raf/mek抑制剂在施用kras g12c抑制剂之前施用。在一些实施方案中，所述双重raf/mek抑制剂在施用kras g12c抑制剂之后施用。在一些实施方案中，所述双重raf/mek抑制剂与kras g12c抑制剂一起施用。
23.在一些实施方案中，所述癌症为具有kras g12c突变的癌症。
24.在一些实施方案中，所述癌症为肺腺癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌(crc)、子宫内膜癌、膀胱尿路上皮癌、乳腺浸润性小叶癌、宫颈鳞状细胞癌、皮肤黑素瘤、子宫颈内腺癌、肝细胞癌、胰腺癌、双相型胸膜间皮瘤、肾透明细胞癌、肾透明细胞癌、胃腺癌、管状胃腺癌、子宫癌肉瘤、或子宫恶性混合性mullerian瘤。
25.考虑到随后的发明详述、实施例和权利要求，其他目的和优点对于本领域技术人员将变得显而易见。
26.附图简述
27.图1a显示了kras g12c突变nsclc和crc细胞系中vs-6766与amg-510或mrtx849之间的协同评分(loewe模型)。
28.图1b显示了amg-510或mrtx849单独或与vs-6766组合(左)和vs-6766单独或与amg-510或mrtx849组合(右)对h2122 kras g12c突变nsclc中肿瘤细胞系活力的剂量反应。
29.图2显示了示出kras g12c突变nsclc和crc细胞系中vs-6766和amg-510或mrtx849(左)与地法替尼和amg-510或mrtx849(右)之间的协同评分(loewe模型)的热图。
30.图3显示用100nm vs-6766和100nm amg-510或mrtx849处理4和48小时的kras g12c mt nsclc细胞系中perk的免疫印迹蛋白印迹分析。
31.图4显示用100nm vs-6766和100nm amg-510或mrtx849处理4和48小时的kras g12c mt nsclc细胞系中kras途径靶标(pmek、perk和p-p90rsk)的免疫印迹蛋白质印迹分析。
32.图5显示了kras途径靶标(pmek和perk)的免疫印迹蛋白的印迹分析以及通过蛋白质印迹光密度测定法对pmek和perk的定量。
33.图6显示了用vs-6766+/-faki+/-amg-510处理10天的h2122荷瘤小鼠中肿瘤体积的变化。
34.图7显示了用vs-6766+/-faki+/-amg-510处理21天的h358荷瘤小鼠中肿瘤体积的
变化。
35.发明详述
36.如本文大体描述，本发明提供可用于在需要的受试者中治疗异常细胞生长(例如，癌症)的方法和化合物组合。
37.定义
[0038]“约”和“近似”一般意味着在考虑到测量的性质或精度的情况下测量的量的可接受的误差程度。示例性的误差度在给定值或数值范围的百分之20(％)内，通常在10％内，更通常地在5％内。
[0039]
如本文所用，“药学上可接受的盐”是指在合理医学判断范围内适用于接触人类和低等动物的组织而无过度毒性、刺激、过敏反应等且与合理效益/风险比相称的那些盐。药学上可接受的盐是本领域众所周知的。例如，berge等人在j.pharmaceutical sciences(1977)66:1
–
19中详细描述了药学上可接受的盐。本发明的化合物的药学上可接受的盐包含衍生自合适的无机和有机酸和碱的那些。药学上可接受的无毒酸加成盐的实例是氨基与无机酸(诸如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和过氯酸)或与有机酸(诸如乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸)或通过使用本领域所用的其它方法(例如离子交换)形成的盐。其它药学上可接受的盐包括己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一烷酸盐、戊酸盐等。衍生自适当碱的药学上可接受的盐包括碱金属盐、碱土金属盐、铵盐和n
+
(c1–4烷基)4盐。代表性碱金属盐或碱土金属盐包括钠盐、锂盐、钾盐、钙盐、镁盐等。在适当时，另外的药学上可接受的盐包括无毒铵、季铵和胺阳离子，其使用抗衡离子诸如卤化物、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低级烷基磺酸根和芳基磺酸根来形成。
[0040]
如本文所述，“药学上可接受的载体”是指不破坏与其一起配制的化合物的药理学活性的无毒载体、助剂或媒介物。可用于本发明的组合物中的药学上可接受的载体、助剂或媒介物包括，但不限于，离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(诸如人血清白蛋白)、缓冲物质(诸如磷酸盐)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、盐或电解质(诸如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐)、胶体二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯基吡咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。
[0041]
如本文所用，考虑施用的“受试者”包括但不限于人类(即，任何年龄组的男性或女性，例如儿科受试者(例如，婴儿、儿童、青少年)或成人受试者(例如，年轻成人、中年成人或老年人))和/或非人类动物，例如哺乳动物，例如灵长类动物(例如，食蟹猴、恒河猴)、牛、猪、马、羊、山羊、啮齿动物、猫和/或狗。在某些实施方案中，受试者是人。在某些实施方案中，受试者是非人类动物。术语“人”、“患者”和“受试者”在本文中可互换使用。
[0042]
疾病、障碍和病症在此可互换使用。
g12c抑制剂与fak抑制剂和/或双重raf/mek抑制剂组合来减少。在一些实施方案中，如本文所述的组合可以改善受试者中反应(例如，抗肿瘤反应)的深度和/或持续时间。
[0056]
本文所述方法的预期受试者可鉴定为(例如，通过筛选，例如测序)具有kras g12c突变。
[0057]
kras g12c抑制剂
[0058]
示例性kras g12c抑制剂包括，但不限于:
[0059]
mrtx849(阿达格拉西布)，其具有以下结构：
[0060][0061]
amg-510(索托拉西布)，其具有以下结构：
[0062][0063]
ars-1620，其具有以下结构：
[0064][0065]
ars-853，其具有以下结构：
[0066][0067]
ly3499446(eli lilly)；和
[0068]
ars-3248(araxes pharma/wellspring biosciences)。
[0069]
在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂选自ars-853、ars-1620、ars-3248、ly3499446、amg-510和mrtx849，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂为amg-510或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂为mrtx849或其药学上可接受的盐。
[0070]
在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂至少每天一次给药。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂每天一次给药。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂每天两次。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂口服给药。
[0071]
在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂以约10mg至约2000mg，例如，约100mg至约2000mg、约100mg至约1500mg、约100mg至约1000mg、约100mg至约800mg、约100mg至约600mg、约100mg至约400mg、约100mg至约200mg、约200mg至约2000mg、约200mg至约1500mg、约200mg至约1000mg、约200mg至约800mg、约200mg至约600mg、约200mg至约400mg、约400mg至约2000mg、约400mg至约1500mg、约400mg至约1000mg、约400mg至约800mg、约400mg至约600mg、约600mg至约2000mg、约600mg至约1500mg、约600mg至约1000mg、约600mg至约800mg、约800mg至约2000mg、800mg至约1500mg、约800mg至约1000mg、约600mg至约2000mg、约600mg至约1500mg、约600mg至约1000mg、约600mg至约800mg给药。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂以约100mg给药。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂以约200mg给药。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂以约300mg给药。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂以约400mg给药。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂以约500mg给药。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂以约600mg给药。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂以约700mg给药。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂以约800mg给药。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂以约900mg给药。在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂以约1000mg给药。
[0072]
fak抑制剂
[0073]
fak蛋白酪氨酸激酶的有效抑制剂可适用于在哺乳动物，特别是人中作为抗增殖剂(例如，抗癌剂)、抗肿瘤剂(例如，有效对抗实体瘤)、抗血管生成剂(例如，停止或防止血管增殖)的治疗用途。本文所述的化合物，例如fak抑制剂，可用于预防和治疗本文所述的疾病或病症(例如异常细胞生长，例如癌症(例如本文所述的癌症))。本文所述的化合物，例如fak抑制剂，可用于预防和治疗非血液恶性肿瘤、多种人类过度增殖性疾病，例如以下的恶性和良性肿瘤：肝脏、肾脏、膀胱、乳腺、胃、卵巢、结直肠癌、前列腺癌、胰腺癌、肺癌、外阴癌、甲状腺癌、肝癌、肉瘤、胶质母细胞瘤、头颈癌和其他增生性疾病，例如皮肤良性增生(例如牛皮癣)和前列腺良性增生(例如bph)，以及预防和治疗间皮瘤等疾病。在一些实施方案中，本文所述的化合物，例如fak抑制剂，抑制蛋白酪氨酸激酶2(pyk2)。
[0074]
示例性fak抑制剂包括，但不限于，地法替尼，其具有以下结构：
[0075]
或其药学上可接受的盐。地法替尼也称为vs-6063(例
如，vs-6063游离碱)或pf-04554878。vs-6063和相关化合物也公开于例如，美国专利号7,928,109，将其内容在此引入作为参考。在一些实施方案中，vs-6063可形成药学上可接受的盐(例如，vs-6063盐酸盐)。
[0076]
在一些实施方案中，所述fak抑制剂为vs-4718，其具有以下结构:
[0077]
或其药学上可接受的盐。
[0078]
在一些实施方案中，所述fak抑制剂为tae226，其具有以下结构:
[0079]
或其药学上可接受的盐。
[0080]
在一些实施方案中，所述fak抑制剂为gsk2256098，其具有以下结构:
[0081]
或其药学上可接受的盐。
[0082]
在一些实施方案中，所述fak抑制剂为pf-03814735，其具有以下结构:
[0083]
或其药学上可接受的盐。
[0084]
在一些实施方案中，所述fak抑制剂为bi-4464，其具有以下结构:
[0085]
或其药学上可接受的盐。
[0086]
在一些实施方案中，所述fak抑制剂为bi-853520(in10018；boehringer ingelheim)。在一些其它实施方案中，所述fak抑制剂为apg-2449(ascentage pharma group)。
[0087]
在一些实施方案中，所述fak抑制剂选自地法替尼、tae226、bi-853520、gsk2256098、pf-03814735、bi-4464、vs-4718和apg-2449，或其药学上可接受的盐。例如，所述fak抑制剂为地法替尼或其药学上可接受的盐。
[0088]
在一些实施方案中，所述fak抑制剂(例如，地法替尼)至少每天一次给药。例如，在一些实施方案中，所述fak抑制剂(例如，地法替尼)每天两次给药。在一些实施方案中，所述fak抑制剂(例如，地法替尼)每天一次给药。
[0089]
在一些实施方案中，所述fak抑制剂(例如，地法替尼)以约100mg至约1000mg给药，例如，约100mg至约800mg、约100mg至约600mg、约100mg至约400mg、约100mg至约200mg、约200mg至约1000mg、约400mg至约1000mg、约600mg至约1000mg、约800mg至约1000mg、约200mg至约800mg、约200mg至约600mg、约200mg至约400mg、约400mg至约800mg、或约400mg至约600mg。在一些实施方案中，所述fak抑制剂(例如，地法替尼)以约200mg至约400mg给药。在一些实施方案中，所述fak抑制剂(例如，地法替尼)以约100mg给药。在一些实施方案中，所述fak抑制剂(例如，地法替尼)以约200mg给药。在一些实施方案中，所述fak抑制剂(例如，地法替尼)以约300mg给药。在一些实施方案中，所述fak抑制剂(例如，地法替尼)以约400mg给药。在一些实施方案中，所述fak抑制剂(例如，地法替尼)以约500mg给药。在一些实施方案中，所述fak抑制剂(例如，地法替尼)以约600mg给药。在一些实施方案中，所述fak抑制剂(例如，地法替尼)口服给药。
[0090]
mek抑制剂
[0091]
mek抑制剂可为促分裂原-活化蛋白激酶(mapk)酶mek1和/或mek2(例如，mapk/erk途径)的小分子或生物抑制剂。
[0092]
mek抑制剂的实例包括，但不限于，曲美替尼(也称为mekinst，gsk1120212)，其具有以下结构：
[0093][0094]
考比替尼(也称为gdc-0973，xl518)，其具有以下结构：
[0095][0096]
比尼替尼，其具有以下结构：
[0097][0098]
ci-1040(也称为pd184352)，其具有以下结构：
[0099][0100]
pd-325901，其具有以下结构：
[0101][0102]
司美替尼(也称为azd6244)，其具有以下结构：
[0103][0104]
mek162，其具有以下结构：
[0105][0106]
azd8330，其具有以下结构：
[0107]
[0108]
tak-733，其具有以下结构：
[0109][0110]
gdc-0623，其具有以下结构：
[0111][0112]
瑞法替尼(也称为rdea119；bay 869766)，其具有以下结构：
[0113][0114]
派吗色替(也称为as4987655)，其具有以下结构：
[0115][0116]
ro4987655(也称为ch4987655)，其具有以下结构：
[0117][0118]
ch5126766(vs-6766)，其具有以下结构：
[0119]
[0120]
cinq-03，其具有以下结构：
[0121][0122]
g-573，其具有以下结构：
[0123][0124]
pd184161，其具有以下结构：
[0125][0126]
pd318088，其具有以下结构：
[0127][0128]
pd98059，其具有以下结构：
[0129][0130]
ro5068760，其具有以下结构：
[0131][0132]
sl327，其具有以下结构：
[0133][0134]
u0126，其具有以下结构：
[0135][0136]
wx-554(wilex)；和hl-085(shanghai kechow pharma)。
[0137]
在一些实施方案中，所述mek抑制剂选自曲美替尼、考比替尼、比尼替尼、司美替尼、pd-325901、ci-1040、ch5126766、mek162、azd8330、gdc-0623、瑞法替尼、派吗色替、wx-554、hl-085、ch4987655、tak-733、cinq-03、g-573、pd184161、pd318088、pd98059、ro5068760、u0126和sl327，或其药学上可接受的盐。
[0138]
在一些实施方案中，所述mek抑制剂至少一周一次给药(例如，一周一次、一周两次、一周三次、一周四次、一周五次或一周六次)。在一些实施方案中，所述mek抑制剂一周一次给药。在一些实施方案中，所述mek抑制剂一周两次给药。在一些实施方案中，所述mek抑制剂每天一次给药。在一些实施方案中，所述mek抑制剂每天两次给药。在一些实施方案中，所述mek抑制剂以约0.1mg至约100mg给药，例如，约0.1mg至约50mg、约0.1mg至约10mg、约0.1mg至约5mg、约0.1mg至约4mg、约0.1mg至约3mg、约0.1mg至约2mg、约0.1mg至约1mg、约1mg至约10mg、约1mg至约20mg、约1mg至约40mg、约1mg至约60mg、约1mg至约80mg、约1mg至约100mg、约10mg至约100mg、约20mg至约100mg、约40mg至约100mg、约60mg至约100mg、或约80mg至约100mg。在一些实施方案中、所述mek抑制剂以约0.1mg、0.2mg、0.5mg、1mg、1.5mg、3mg、4mg、5mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、65mg、70mg、75mg、80mg、85mg、90mg、95mg、或100mg给药。在一些实施方案中，所述mek抑制剂口服给药。
[0139]
在一些实施方案中，所述mek抑制剂为双重raf/mek抑制剂。在一些实施方案中，所述mek抑制剂为ch5126766或其药学上可接受的盐。
[0140]
在一些实施方案中，所述双重raf/mek抑制剂至少一周一次给药(例如，一周一次、一周两次、一周三次、一周四次、一周五次或一周六次)。在一些实施方案中，所述双重raf/mek抑制剂一周一次给药。在一些实施方案中，所述双重raf/mek抑制剂一周两次给药。在一些实施方案中，所述双重raf/mek抑制剂每天一次给药。在一些实施方案中，所述双重raf/mek抑制剂每天两次给药。在一些实施方案中，所述双重raf/mek抑制剂以约0.1mg至约100mg给药。在一些实施方案中，所述双重raf/mek抑制剂口服给药。
[0141]
在一些实施方案中，所述双重raf/mek抑制剂在施用kras g12c抑制剂之前施用。在一些实施方案中，所述双重raf/mek抑制剂在施用kras g12c抑制剂之后施用。在一些实施方案中，所述双重raf/mek抑制剂与kras g12c抑制剂一起施用。
[0142]
疾病和障碍
[0143]
异常细胞生长
[0144]
如本发明所用，除非另外指明，否则异常的细胞生长是指不依赖于正常调节机制(例如，失去接触抑制)的细胞生长。这包括以下异常生长：(1)增殖的肿瘤细胞(肿瘤)，例如，通过表达突变的酪氨酸激酶或过表达受体酪氨酸激酶；(2)其他增殖性疾病的良性和恶性细胞，例如其中发生异常酪氨酸激酶活化；(3)通过例如受体酪氨酸激酶增殖的任何肿瘤；(4)通过例如通过异常的丝氨酸/苏氨酸激酶激活而增殖的任何肿瘤；和(5)其它增殖性疾病的良性和恶性细胞，例如其中发生异常的丝氨酸/苏氨酸激酶活化。异常的细胞生长可以指以下的细胞生长：上皮细胞(例如癌，腺癌)；间质(例如肉瘤(例如平滑肌肉瘤，尤因氏肉瘤))；造血系统(例如淋巴瘤、白血病、骨髓增生异常(例如恶变前))；或其他(例如，黑素瘤、间皮瘤和其他未知来源的肿瘤)细胞。
[0145]
肿瘤性疾病
[0146]
异常的细胞生长可指肿瘤性疾病。“肿瘤性疾病”是以具有自主生长或复制能力的细胞为特征的疾病或障碍，例如特征在于增殖性细胞生长的异常状态或病症。由于异常的细胞生长或分裂而导致的组织异常肿块或“新生物”可以是良性的、恶化前的(原位癌)或恶性的(癌症)。
[0147]
肿瘤性疾病的例子包括：癌、肉瘤、转移性疾病(例如由前列腺、结肠、肺、乳腺和肝起源的肿瘤)、造血系统肿瘤性疾病，例如白血病、转移性肿瘤。用于治疗的化合物可以是有效改善肿瘤性疾病的至少一种症状(例如减少的细胞增殖、减少的肿瘤质量等)的量。
[0148]
癌症
[0149]
本发明的发明方法可用于预防和治疗癌症，包括例如，实体瘤、软组织肿瘤及其转移。所公开的方法也用于治疗非实体癌。示例性的实体瘤包括，不同器官系统的恶性肿瘤(例如，肉瘤、腺癌和癌)，例如肺、乳腺、淋巴、胃肠道(例如，结肠)和泌尿生殖器(例如，肾、泌尿道上皮或睾丸肿瘤)、咽、前列腺和卵巢的恶性肿瘤。示例性的腺癌包括，结肠直肠癌、肾细胞癌、肝癌(例如，肝细胞癌)、肺的非小细胞癌、胰腺癌(例如，转移性胰腺癌)和小肠癌。
[0150]
癌症可以包括间皮瘤；神经纤维瘤病；例如，2型神经纤维瘤病、1型神经纤维瘤病；肾癌；肺癌，非小细胞肺癌；肝癌；甲状腺癌；卵巢癌；乳腺癌；神经系统肿瘤；神经鞘瘤；脑膜瘤；神经鞘瘤病；听神经瘤；腺样囊性癌；室管膜瘤；室管膜肿瘤，或任何其他表现出降低的merlin表达和/或突变，和/或nf-2基因缺失和/或启动子超甲基化的肿瘤。在一些实施方案中，所述癌症为肾癌。
[0151]
癌症可以包括特征在于包含癌症干细胞、癌症相关的间充质细胞或肿瘤起始癌细胞的癌症。癌症可以包括已被表征为富含癌症干细胞、癌症相关间充质细胞或肿瘤形成癌细胞的癌症(例如，富集了经历了上皮-间质转化的细胞的肿瘤或转移性肿瘤)。
[0152]
癌症可以是原发性肿瘤，即位于肿瘤生长开始的解剖部位。癌症也可以是转移性的，即除了肿瘤生长开始的解剖部位以外至少出现第二解剖部位。癌症可以是复发性癌症，即在治疗后以及在不可检测癌症的一段时间之后复发的癌症。复发性癌症可以在解剖学上位于原始肿瘤附近，例如在解剖学上靠近原始肿瘤；在原始肿瘤区域内，例如在原始肿瘤附近的淋巴结中；或远离原始肿瘤，例如在解剖学上远离原始肿瘤的区域。
[0153]
癌症也可包括例如，但不限于上皮样癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、结肠直肠癌(例如转移性结肠直肠癌，例如转移性kras突变型)、前列腺癌、头颈癌、黑素瘤(例如kras突变的局部晚期或转移性恶性皮肤黑素瘤)、急性骨髓性白血病和胶质母细胞瘤。示例性的乳腺癌包括三阴性乳腺癌、基底样乳腺癌、claudin-low型乳腺癌、侵袭性、炎症、化生和晚期her-2阳性或er阳性癌症，其对治疗有抗性。
[0154]
所述癌症也可包括具有kras g12c突变的癌症。
[0155]
所述癌症也可包括肺腺癌、结肠直肠癌(crc)、子宫内膜癌、膀胱尿路上皮癌、乳腺浸润性小叶癌、宫颈鳞状细胞癌、皮肤黑素瘤、子宫颈内腺癌、肝细胞癌、胰腺癌、双相型胸膜间皮瘤、肾透明细胞癌、肾透明细胞癌、胃腺癌、管状胃腺癌、子宫癌肉瘤、或子宫恶性混合性mullerian瘤。
[0156]
其他癌症包括但不限于，葡萄膜黑素瘤、脑癌、腹部癌症、食道癌、胃肠道癌、神经胶质瘤、肝癌、舌癌、神经母细胞瘤、骨肉瘤、卵巢癌、视网膜母细胞瘤、维尔姆氏瘤、多发性骨髓瘤、皮肤癌、淋巴瘤、血液和骨髓癌(例如，晚期恶性血液病、白血病，例如，急性骨髓性白血病(例如，原发性或继发性)、急性淋巴母细胞白血病、急性淋巴细胞白血病、t细胞白血病、恶性血液病、晚期骨髓增生性疾病、骨髓增生异常综合征、复发性或难治性多发性骨髓瘤、晚期骨髓增生性疾病)、视网膜癌、膀胱癌、宫颈癌、肾癌、子宫内膜癌、脑膜瘤、淋巴瘤、皮肤癌、子宫癌、肺癌、非小细胞肺癌、鼻咽癌、神经母细胞瘤、实体瘤、恶性血液病、鳞状细胞癌、睾丸癌、甲状腺癌、间皮瘤、脑癌、外阴癌、肉瘤、肠癌、口腔癌、内分泌癌、唾液腺癌、精母细胞性精原细胞瘤、散发性甲状腺髓样癌、非增殖性睾丸细胞、恶性肥大细胞相关的癌症、非霍奇金淋巴瘤和弥漫性大b细胞淋巴瘤。
[0157]
在一些实施方案中，所述肿瘤为实体瘤。在一些实施方案中，所述实体瘤是局部晚期的或转移性的。在一些实施方案中，所述实体瘤是标准治疗后难治性的(例如，耐药的)。
[0158]
本发明所述的方法可以减少、改善或完全消除所述障碍和/或其相关症状，以防止其恶化、减缓进展速度或者在最初消除所述障碍后最小化其复发率(即避免复发)。合适的剂量和治疗方案可以根据所使用的具体化合物、组合和/或药物组合物以及化合物、组合和/或药物组合物的递送模式而变化。在一些实施方案中，所述方法以统计学显著的方式增加用本发明所述组合治疗的受试者的平均生存期、增加无进展存活的平均长度和/或降低复发率。
[0159]
在一些实施方案中，所述癌症是肺癌(例如，非小细胞肺癌(nsclc)，例如，kras突变的nsclc；转移性癌症)、骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头或颈的癌症、皮肤或眼内黑素瘤、子宫癌、卵巢癌(例如，不可切除的低级卵巢癌、晚期或转移性卵巢癌)、直肠癌、肛门区域的癌症、胃癌、结肠癌、乳腺癌(例如，三阴性乳腺癌(例如，不表达雌激素受体、孕酮受体和her2/neu的基因的乳腺癌))、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、宫颈癌、阴道癌、外阴癌、霍奇金病、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌症、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、前列腺癌、慢性或急性白血病、淋巴细胞淋巴瘤、膀胱癌、肾癌或输尿管癌、肾细胞癌、肾盂癌、中枢神经系统(cns)的肿瘤、原发性cns淋巴瘤、脊髓肿瘤、脑干胶质瘤、垂体腺瘤、间皮瘤(例如，恶性胸膜间皮瘤，例如，手术可切除的恶性胸膜间皮瘤)或一种或多种上述癌症的组合。在一些实施方案中，所述癌症为转移性的。在一些实施方案中，所述异常的细胞生长是局部复发的(例如，所述受试者患有局部复发性疾病，例如，癌症)。
[0160]
其它疗法
[0161]
在一些实施方案中，本文所述的方法和组合物与另外的疗法(例如，癌症治疗)一起施用。在一个实施方案中，可以将一种或多种化合物的混合物或药物组合物与本发明所述的组合，一起施用于有此需要的受试者。在又一个实施方案中，一种或多种化合物或组合物(例如药物组合物)可与本发明所述的组合例如fak抑制剂联合免疫疗法一起施用，以用于治疗或预防各种疾病，包括例如癌症、糖尿病、神经变性疾病、心血管疾病、凝血、炎症、潮红、肥胖、衰老、应激等。在各种实施方案中，包含本发明所述化合物或药物组合物的组合疗法可以指(1)包含与本发明所述的组合联合的一种或多种化合物；和(2)本发明所述的一种或多种化合物或药物组合物与本发明所述的组合共同施用，其中本发明所述的化合物或药物组合物尚未配制在相同的组合物中。在一些实施方案中，本发明所述组合与另外的治疗(例如，另外的癌症治疗)一起施用。在一些实施方案中，所述另外的治疗(例如，另外的癌症治疗)可以同时(例如同一时间)、以相同或分开的组合物施用或依次施用。依次施用是指在施用另外的例如第二治疗(例如，化合物或疗法)前(例如，少于5、10、15、30、45、60分钟；1、2、3、4、6、8、10、12、16、20、24、48、72、96或更多小时；4、5、6、7、8、9或更多天；1、2、3、4、5、6、7、8或更多个周之前，立即)施用一种治疗。第一种和第二种化合物或疗法的施用顺序也可以颠倒。
[0162]
示例性的癌症治疗包括例如：化学疗法、靶向疗法如抗体疗法、免疫疗法和激素疗法。以下提供这些治疗中的每一个的实例。
[0163]
化学疗法
[0164]
在一些实施方案中，本文所述的组合与化学疗法一起施用。化学疗法是用可以破坏癌细胞的药物治疗癌症。“化学疗法”通常是指细胞毒性药物，其与靶向疗法相反，通常影响快速分裂细胞。化疗药物以各种可能的方式干扰细胞分裂，例如，dna的复制或新形成的染色体的分离。尽管可由于许多癌细胞无法修复dna损伤而大多数正常细胞通常能够修复而产生一定程度的特异性，但大多数形式的化学疗法都靶向所有快速分裂的细胞，并且不是特异性地针对癌细胞。
[0165]
用于癌症治疗的化疗剂的实例包括，例如，抗代谢物(例如，叶酸、嘌呤和嘧啶衍生物)和烷化剂(例如，氮芥类、亚硝基脲类、铂类、烷基磺酸盐、肼类、三氮烯类、氮丙啶类、纺锤体毒素、细胞毒剂、拓扑异构酶抑制剂等)。示例性药剂包括阿柔比星、放线菌素；alitretinon、六甲蜜胺、氨基蝶呤、氨基酮戊酸、氨柔比星、安吖啶、阿那格雷、三氧化二砷、天冬酰胺酶、阿曲生坦、贝洛替康、贝沙罗汀、苯达莫司汀(endamstine)、博来霉素、硼替佐米、白消安、喜树碱、卡培他滨、卡铂、卡波醌、卡莫氟、卡莫司汀、塞来昔布、苯丁酸氮芥、氮芥、顺铂、克拉屈滨、氯法拉滨、克瑞他酶、环磷酰胺、阿糖胞苷、达卡巴嗪、放线菌素d、柔红霉素、地西他滨、地美可辛、多西他赛、多柔比星、乙法昔罗、伊利司莫、依沙芦星、依诺他滨、表柔比星、雌莫司汀、依托格鲁、依托泊苷、氟尿苷、氟达拉滨、氟尿嘧啶(5fu)、福莫司汀、吉西他滨、gliadel植入物、羟基脲(hydroxycarbamide)、羟基脲(hydroxyurea)、伊达比星、异环磷酰胺、伊立替康、伊洛福芬、伊沙匹隆、拉洛他赛、亚叶酸钙、多柔比星脂质体、柔红霉素脂质体、洛尼达明、洛莫司汀、硫蒽酮、甘露舒凡、马索罗酚、美法仑、巯基嘌呤、美司钠、甲氨蝶呤、氨基酮戊酸甲酯、二溴甘露醇、米托胍腙、米托坦、丝裂霉素、米托蒽醌、奈达铂、尼莫司汀、奥利默森、奥马西他辛、奥他赛(ortataxel)、奥沙利铂、紫杉醇、培门冬酶、培美曲塞、
喷司他丁、吡柔比星、匹杉琼、普卡霉素、卟吩姆钠、泼尼莫司汀、丙卡巴肼、雷替曲塞、雷莫司汀、鲁比替康、沙帕他滨、司莫司汀、塞西马集(sitimagene ceradenovec)、赛特铂(strataplatin)、链脲菌素、他拉泊芬、替加氟-尿嘧啶、替莫泊芬、替莫唑胺、替尼泊苷、替司他赛、睾内酯、戊四硝酯(tetranitrate)、噻替派、噻唑呋林、硫鸟嘌呤、替吡法尼、拓扑替康、曲贝替定、三亚胺醌、曲他胺、三铂(triplatin)、维甲酸、曲奥舒凡、曲磷胺、乌拉莫司汀、戊柔比星、维替泊芬、长春碱、长春新碱、长春地辛、长春氟宁、长春瑞滨、伏立诺他、佐柔比星，和本文所述的其它细胞生长抑制剂或细胞毒剂。
[0166]
由于某些药物联合使用比单独使用效果更好，因此经常同时或依次使用两种或多种药物。通常，两种或更多种化疗剂作为组合化疗使用。在一些实施方案中，所述化疗剂(包括组合化疗)可以与本文所述的组合联合使用。
[0167]
靶向治疗
[0168]
在一些实施方案中，本发明的组合与靶向疗法一起施用。靶向疗法由使用特异性针对癌细胞的失调蛋白的药剂组成。小分子靶向疗法药物通常是在癌细胞内对突变、过表达或其他关键蛋白上的酶结构域的抑制剂。突出的实例是酪氨酸激酶抑制剂，例如阿西替尼(axitinib)、博舒替尼(bosutinib)、西地尼布(cediranib)、达沙替尼(desatinib)、厄洛替尼(erolotinib)、伊马替尼、吉非替尼、拉帕替尼、来他替尼(lestaurtinib)、尼洛替尼(nilotinib)、司马沙尼(semaxanib)、索拉非尼、舒尼替尼和凡德他尼(vandetanib)，还有细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂例如alvocidib和seliciclib。单克隆抗体疗法是另一种策略，其中所述治疗剂是特异性结合癌细胞表面上的蛋白质的抗体。实例包括，通常用于乳腺癌的抗her2/neu抗体曲妥珠单抗和通常用于多种b细胞恶性肿瘤的抗cd20抗体利妥昔单抗和托西莫单抗。其它示例性抗体包括但不限于，西妥昔单抗、帕尼单抗、曲妥珠单抗、阿仑单抗、贝伐珠单抗、依决洛单抗和吉妥珠单抗。示例性的融合蛋白包括，阿柏西普(aflibercept)和地尼白介素(denileukin diftitox)。在一些实施方案中，靶向治疗可以与本文所述的组合组合使用。
[0169]
靶向疗法还可以涉及小肽作为“归巢装置”，其可以结合细胞表面受体或影响肿瘤周围的细胞外基质。如果核素在细胞附近衰变，附着于这些肽(例如rgd)的放射性核素最终会杀死癌细胞。这种疗法的一个例子包括
[0170]
免疫治疗
[0171]
在一些实施方案中，本文所述的组合与免疫疗法一起施用。癌症免疫疗法是指旨在诱导患者自身免疫系统对抗肿瘤的多种治疗策略。
[0172]
产生针对肿瘤的免疫反应的现代方法包括针对浅表性膀胱癌的囊泡内bcg免疫疗法，以及使用干扰素和其他细胞因子在患有肾细胞癌和黑色素瘤的受试者中诱导免疫反应。同种异体造血干细胞移植可以被认为是一种免疫疗法，因为供体的免疫细胞通常会以移植物抗肿瘤效应攻击肿瘤。在一些实施方案中，免疫治疗剂可以与本文所述的组合联合使用。
[0173]
激素治疗
[0174]
在一些实施方案中，所描述的组合与激素疗法一起施用。通过提供或阻断某些激素可以抑制某些癌症的生长。激素敏感性肿瘤的常见例子包括某些类型的乳腺癌和前列腺
癌。去除或阻断雌激素或睾酮通常是一种重要的附加治疗。在某些癌症中，施用激素激动剂，例如孕激素可能对治疗有益。在一些实施方案中，激素治疗剂可以与本文所述的组合联合使用。
[0175]
放射治疗
[0176]
本文所述的组合可以与定向的能量或颗粒，或与放射性同位素治疗(例如放射疗法，例如放射肿瘤学)组合使用来治疗增殖性疾病，例如癌症，例如与癌症干细胞相关的癌症。本文所述的组合可以与定向的能量或颗粒或放射性同位素治疗同时或依次施用于受试者。例如，本文所述的组合可以在定向的能量或颗粒，或在放射性同位素治疗之前、期间或之后施用，或其组合。定向的能量或颗粒疗法可以包括全身照射、局部身体照射或点照射。定向的能量或颗粒可来源于加速器、同步加速器、核反应、真空管、激光器或放射性同位素。疗法可以包括外射线放射疗法、远距放射疗法、近距离放射疗法、密封源放射疗法、系统放射性同位素疗法或非密封源放射疗法。治疗可以包括摄入放射性同位素(例如放射性碘、钴、铯、钾、溴、氟、碳)，或放置在放射性同位素附近。外射线放射疗法可包括暴露于定向的a粒子、电子(例如β粒子)、质子、中子、正电子或光子(例如无线电波、毫米波、微波、红外线、可见光、紫外线、x射线或伽马射线)。辐射可以被引导到需要治疗的受试者的任何部分。
[0177]
手术
[0178]
本文所述的组合可以与手术(例如手术探查、介入、活组织检查)组合使用来治疗增殖性疾病，例如癌症，例如与癌症干细胞相关的癌症。本文所述的组合可以与手术同时或依次施用于受试者。例如，本文所述的组合可以在手术之前(术前)、手术期间或之后(术后)或其组合施用。手术可以是活组织检查，其中收集一个或多个细胞用于进一步分析。活组织检查可以例如用解剖刀、针、导管、内窥镜、刮铲或剪刀完成。活组织检查可以是切除活组织检查、切口活组织检查、中心活组织检查或针吸活组织检查，例如针吸活检。手术可涉及移除疑似或被鉴定为癌性的局部组织。例如，该过程可涉及移除癌变、肿块、息肉或痣。该操作可涉及移除大量的组织，如乳房、骨骼、皮肤、脂肪或肌肉。该操作可涉及移除例如肺、喉、舌、膀胱、宫颈、卵巢、睾丸、淋巴结、肝脏、胰腺、脑、眼睛、肾脏、胆囊、胃、结肠、直肠或肠的器官或节结的一部分或全部。在一个实施方案中，癌症是乳腺癌，例如三阴性乳腺癌，手术是乳房切除术或肿块切除术。
[0179]
抗炎剂
[0180]
本文所述的组合可以与抗炎剂一起施用。抗炎剂可包括，但不限于，非甾体抗炎剂(例如，水杨酸盐类(阿司匹林(乙酰水杨酸)、二氟尼柳、双水杨酯)、丙酸衍生物(布洛芬、萘普生、非诺洛芬、酮洛芬、氟比洛芬、奥沙普秦、洛索洛芬)、乙酸衍生物(吲哚美辛、舒林酸、依托度酸、酮咯酸、双氯芬酸、萘丁美酮)、烯醇酸(昔康)衍生物(吡罗昔康、美洛昔康、替诺昔康、屈噁昔康、氯诺昔康、伊索昔康)、灭酸衍生物(灭酸酯类)(甲芬那酸、甲氯芬那酸、氟芬那酸、托芬那酸)、选择性cox-2抑制剂(coxibs)(塞来昔布)、硫酰替苯胺(尼美舒利)。甾类(例如氢化可的松(皮质醇)、醋酸可的松、泼尼松、泼尼松龙、甲基泼尼松龙、地塞米松、倍他米松、曲安西龙、倍氯米松、醋酸氟氢可的松、醋酸脱氧皮质固酮、醛固酮)。
[0181]
镇痛剂
[0182]
本发明的方法可以与镇痛剂一起施用。镇痛药包括但不限于，阿片类(例如吗啡、可待因、羟考酮、氢可酮、二氢吗啡、度冷丁、丁丙诺啡、曲马朵、文拉法辛)、扑热息痛和非甾
体抗炎剂(例如，水杨酸盐类(阿司匹林(乙酰水杨酸)、二氟尼柳、双水杨酯)、丙酸衍生物(布洛芬、萘普生、非诺洛芬、酮洛芬、氟比洛芬、奥沙普秦、洛索洛芬)、乙酸衍生物(吲哚美辛、舒林酸、依托度酸、酮咯酸、双氯芬酸、萘丁美酮)、烯醇酸(昔康)衍生物(吡罗昔康、美洛昔康、替诺昔康、屈噁昔康、氯诺昔康、伊索昔康)、灭酸衍生物(灭酸酯类)(甲芬那酸、甲氯芬那酸、氟芬那酸、托芬那酸)、选择性cox-2抑制剂(coxibs)(塞来昔布)、硫酰替苯胺(尼美舒利)。
[0183]
止吐药
[0184]
本文所述的组合可以与止吐药一起施用。止吐药可包括，但不限于，5-ht3受体拮抗剂(多拉司琼(anzemet)、格兰塞隆(kytril，sancuso)、昂丹司琼(zofran)、托烷司琼(navoban)、帕洛诺司琼(aloxi)、米氮平(remeron))、多巴胺拮抗剂(多潘立酮、奥氮平、氟哌利多、氟哌啶醇、氯丙嗪、异丙嗪、丙氯拉嗪、甲氧氯普胺(reglan)、阿立必利、丙氯拉嗪(compazine、stemzine、buccastem、stemetil、phenotil)、nk1受体拮抗剂(阿瑞匹坦(emend)、抗阻胺药(赛克力嗪、苯海拉明(苯那君)、茶苯海明(gravol，dramamine)、美克洛嗪(bonine，antivert)、异丙嗪(pentazine，非那根，promacot)、羟嗪)、苯二氮卓(劳拉西泮、咪达唑仑)、抗胆碱药(天仙子碱)、甾类(地塞米松)。
[0185]
组合
[0186]
如本文在施用本文所述的化合物或本文所述的疗法的上下文中使用的短语“组合”和术语“共同施用”、“共同给药”或“共同提供”，是指在受试者患有疾病或障碍(例如本文所述的疾病或障碍，例如癌症)的过程中将两种(或更多种)不同的化合物或疗法递送至受试者，例如在受试者被诊断患有疾病或病症(例如，本文所述的疾病或病症，例如癌症)之后并且在疾病或病症被治愈或消除或治疗已因其他原因停止之前，将两种(或更多种)不同的化合物或疗法递送至受试者。
[0187]
在一些实施方案中，在第二次递送开始时仍然在进行一种化合物或疗法的递送，从而在施用方面存在重叠。这在本发明中有时被称为“同时”或“同时递送”。在其他实施方案中，在其他化合物或疗法递送开始之前结束一种化合物或疗法的递送。在任一情况中的一些实施方案中，由于联合施用，治疗(例如，化合物、组合物或治疗的施用)更有效。例如，第二种化合物或疗法更有效，例如与在不存在第一种化合物或疗法的情况下施用第二种化合物或疗法所见相比，使用更少的第二种化合物或疗法可以见到等效的效果，或者，所述第二种化合物或疗法在更大的程度上减轻症状，或者对于第一种化合物或疗法可见相似的情况。在一些实施方案中，相比于在用不存在其他化合物或疗法递送的一种化合物或疗法的情况下所观察到的情况，该递送使得症状的减轻或与该障碍有关的其他参数的减少程度更大。该两种化合物或疗法的效果可以部分相加、全部相加或者大于加合(例如，协同的)。当递送第二种时，递送可以使得递送的第一化合物或疗法的效果仍然是可检测的。
[0188]
在一些实施方案中，第一化合物或疗法和第二化合物或疗法可以同时(例如，相同时间)、在相同或分开的组合物中、或依次施用。依次施用是指在施用另外的(例如，例如化合物或疗法)前(例如，少于5、10、15、30、45、60分钟；1、2、3、4、6、8、10、12、16、20、24、48、72、96或更多小时；4、5、6、7、8、9或更多天；1、2、3、4、5、6、7、8或更多个周之前，立即)施用一种化合物或疗法。第一种和第二种化合物或疗法的施用顺序也可以颠倒。
[0189]
本文所述的组合可以是异常细胞生长(例如癌症)的一线治疗，即其用于先前未曾
施用过另一种旨在治疗癌症的药物的患者；癌症的二线治疗，即它用于有需要的受试者，该受试者之前曾服用过另一种旨在治疗癌症的药物；癌症的第三或第四次治疗，即，它用于先前已施用两种或三种其他旨在治疗癌症的药物的受试者。
[0190]
在一些实施方案中，fak抑制剂和kras g12c抑制剂以产生协同(例如治疗)效果的量(例如剂量)施用。
[0191]
在一些实施方案中，所述fak抑制剂在施用kras g12c抑制剂之前施用。在一些实施方案中，所述fak抑制剂在施用kras g12c抑制剂之后施用。在一些实施方案中，所述fak抑制剂与kras g12c抑制剂一起施用。
[0192]
在一些实施方案中，所述kras g12c抑制剂和mek抑制剂以产生协同(例如治疗)效果的量(例如剂量)施用。
[0193]
在一些实施方案中，所述mek抑制剂在施用kras g12c抑制剂之前施用。在一些实施方案中，所述mek抑制剂在施用kras g12c抑制剂之后施用。在一些实施方案中，所述mek抑制剂与kras g12c抑制剂一起施用。
[0194]
在一些实施方案中，所述fak抑制剂、kras g12c抑制剂和mek抑制剂以产生协同(例如治疗)效果的量(例如剂量)施用。在一些实施方案中，所述mek抑制剂和fak抑制剂与kras g12c抑制剂同时施用。
[0195]
给药和剂量
[0196]
本发明的组合可以口服、肠胃外、局部、直肠或通过植入型药盒施用，优选通过口服施用或通过注射施用。在一些情况下，组合物(例如药物组合物)的ph可以用药学上可接受的酸、碱或缓冲剂调节以增强该组合物的稳定性或功效。
[0197]
在一些实施方案中，所述受试者口服给药该组合物(例如，药物组合物)。在一些实施方案中，组合物(例如药物组合物)以任何口服可接受的剂型口服施用，所述剂型包括但不限于液体-凝胶片剂或胶囊剂、糖浆剂、乳剂和水性悬浮液。液体-凝胶可根据需要包含明胶、增塑剂和/或遮光剂，以获得合适的稠度，并且可涂覆有批准使用的肠溶包衣，例如虫胶。当作为口服剂量使用时，可以加入另外的增稠剂，例如，树胶如黄原胶、淀粉如玉米淀粉或麸质，以达到组合物(例如药物组合物)所需的稠度。如果需要，可加入一些甜味剂和/或调味剂和/或着色剂。
[0198]
在一些实施方案中，向受试者施用适于口服施用的形式的组合物(例如药物组合物)，例如片剂、胶囊剂、丸剂、粉剂、缓释制剂、溶液剂和悬浮液。组合物(例如药物组合物)可以是适合以精确剂量单次施用的单位剂型。除了本发明所述的化合物之外，药物组合物还可以包含药学上可接受的载体，且还可任选包含一种或多种药学上可接受的赋形剂，例如，稳定剂、稀释剂、粘合剂和润滑剂。此外，片剂可以包含其它药用制剂或药物、载体和/或佐剂。示例性的药物组合物包括压制片剂(例如直接压制的片剂)。
[0199]
还提供了包含活性成分或治疗成分(例如本发明所述的化合物)的片剂。除了活性成分或治疗成分之外，片剂还可以包含大量的惰性材料，例如载体。药学上可接受的载体可以是无菌液体，例如水和油，包括石油、动物、植物或合成来源的那些油，如花生油、芝麻油等。盐水溶液和含水右旋糖也可以用作液体载体。因此，根据本发明使用的口服剂型可以以常规方式使用一种或多种药学上可接受的载体配制，所述载体包含赋形剂和助剂，其有助于将活性成分加工成可药用的制剂。赋形剂可以使被压制的材料具有良好的粉末流动性和
压制特性。赋形剂的实例描述于例如由raymond c rowe、paul j.sheskey和sian c.owen编辑的handbook of pharmaceutical excipients(第5版)中；出版商：制药出版社。
[0200]
对于口服施用，活性成分(例如本发明所述的化合物)可以容易地通过将活性成分与本领域公知的药学上可接受的载体组合来进行配制。这些载体能够将本发明的活性成分配制成片剂、丸剂、胶囊剂、液体剂、凝胶剂、糖浆剂、浆剂、粉剂或颗粒剂、在水或非水介质中的混悬剂或溶液等，以用于受试者的口服摄取。可以使用固体赋形剂制备口服使用的药物制剂，任选研磨所得的混合物，并且在加入合适的助剂(如果需要)后加工颗粒混合物以获得例如片剂。可需要合适的赋形剂如稀释剂、粘合剂或崩解剂。
[0201]
剂量可以根据使用的剂型和使用的施用途径而变化。确切的剂型、施用途径和剂量可以由各医生根据患者的病症来选择(参见例如，fingl等，1975，“the pharmacological basis of therapeutics”)。可能需要比上面列举的剂量更低或更高的剂量。任何特定受试者的具体剂量和治疗方案将取决于多种因素，包括所用具体化合物的活性、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、施用时间、排泄速率、药物组合、疾病、病症或症状的严重程度和病程、受试者对疾病、病症或症状的处置以及主治医师的判断。治疗过程可以包括一或多次分开施用本发明所述的化合物。治疗过程可以包括本发明所述化合物的一个或多个周期。
[0202]
在一些实施方案中，本发明在药物施用周期的上下文中使用的周期是指将药物施用于患者的时间段。例如，如果药物以21天的周期施用，则定期施用为例如以每日一次或每天两次施用21天。一种药物可以施用超过一个周期。休息期可介于两个周期之间。休息周期可以是1、2、4、6、8、10、12、16、20、24小时、1、2、3、4、5、6、7天或1、2、3、4周或更久。
[0203]
如果需要，口服剂型可以存在于包装或分配器装置中，例如fda批准的试剂盒，其可以包含一种或多种含有活性成分的单位剂型。包装可以例如包括金属或塑料箔，例如泡罩包装。包装或分配器装置可以伴有施用说明。该包装或分配器还可以附有与该容器有关的政府机构规定形式的通知，其规定药物的制造、使用或销售，该通知反映由该机构批准的该组合物或人或兽医施用的形式。例如，这种通知可以是由美国食品和药物管理局批准的用于处方药的标签或者批准的产品插页。
实施例
[0204]
为了可以更充分地理解本文描述的本发明，提出以下实施例。本技术中描述的实施例用于说明本文提供的药物组合物和方法，并且不应以任何方式解释为限制它们的范围。
[0205]
以下缩写可用于以下实施例中：dmso：二甲基亚砜；hpcd：2-羟丙基-β-环糊精；hpmc：羟丙基甲基纤维素；po：经口；qd：一天一次；bid：一天两次；g12ci：g12c抑制剂；faki：fak抑制剂
[0206]
实施例1.双重raf/mek抑制剂vs-6766与kras g12c抑制剂在临床前实体瘤模型中的协同抗肿瘤功效
[0207]
该研究研究了用g12c抑制剂与双重raf/mek抑制剂(例如，vs-6766)+/-fak抑制剂的组合对ras、raf和mek的垂直药理学阻断，发明人已考虑它们将产生优异的通路阻断和抗肿瘤功效。
[0208]
材料和方法
[0209]
体外3d增殖试验
[0210]
使用了kras g12c突变nsclc(h2122、h358、h2030、h1373)和结肠直肠癌(crc；sw837和sw1463)。简而言之，96孔板涂有50μl matrigel(100％)，并在37℃和5％co2下孵育30分钟，以使matrigel固化。将细胞接种在100μl的2％matrigel培养基中。孵育过夜(17-22小时)后，用vs-6766+/-g12c抑制剂+/-地法替尼处理细胞7天。使用细胞活力celltiter-glo 3d测定法测量细胞活力。通过将平均活力/抑制与源自单一药剂活性的两种不同的无效参考模型进行比较来评估组合效果。进行bliss、loewe和highest single agent协同作用分析以确定协同作用得分。
[0211]
蛋白质印迹
[0212]
将kras g12c突变nsclc细胞(h2122、h358、h1373和sw1573)接种在10厘米培养皿中。孵育过夜(17～22小时)后，用100nm vs-6766+/-100nm g12c抑制剂处理细胞。化合物处理后4和48小时，收集细胞，并使用含有蛋白酶抑制剂的ripa缓冲液制备细胞裂解物。使用针对pmek、mek、perk、erk、p-p90rsk、p90rsk和肌动蛋白的抗体进行蛋白质印迹测定。
[0213]
异种移植肿瘤小鼠研究
[0214]
使用kras g12c突变nsclc h2122和h358肿瘤细胞和balb/c裸小鼠。通过将1x107肿瘤细胞悬液皮下接种到受体小鼠的右侧腹中来启动肿瘤攻击。在研究期间每周测量肿瘤大小(mm3)和体重3次。在常规监测时，检查动物的肿瘤生长和治疗对正常行为的任何影响，例如活动能力、食物和水的消耗(仅通过观察)、体重增加/减少、眼睛/毛发消光和任何其他异常效果。
[0215]
对于药效学研究，一旦肿瘤达到200-300mm3的平均体积，将小鼠分为4组(n＝5)：载体1(5％dmso，10％hpcd在无菌水中)+载体2(2％hpmc，1％吐温80在无菌水中)，vs-6766在载体1(0.3mg/kg po qd，5天)+载体2，amg-510在载体2(30mg/kg po qd，5天)+载体1,和vs-6766+amg-510。
[0216]
对于功效研究，一旦肿瘤达到150-200mm3的平均体积，将小鼠分为10组(n＝10)：载体1(5％dmso，10％hpcd在无菌水中)+载体2(2％hpmc，1％吐温80在无菌水中)，vs-6766在载体1中(0.3mg/kg po qd，28天)+载体2，amg-510在载体2中(30mg/kg po qd，28天)+载体1，vs-6766+amg-510，vs-4718(0.5％cmc-na，0.1％吐温80在无菌水中)(50mg/kg po bid，28天)+载体2，vs-4718+vs-6766，vs-4718+amg-510，vs-4718+amg-510+vs-6766，曲美替尼(0.3mg/kg po qd，28天)(0.5％羟丙基甲基纤维素和0.2％吐温-80在蒸馏水中(ph 8.0))+载体2，和曲美替尼+amg-510。当肿瘤体积》2,000mm3时，对小鼠实施安乐死。
[0217]
结果
[0218]
在体外3d增殖测定中，vs-6766与索托拉西布和阿达格拉西布在降低一组kras g12c mt nsclc和结肠直肠癌细胞系的活力方面具有协同作用(图1、2)。在图1b中，使用loewe additivity模型分析药物的效果以确定组合的效果是否反映了个体药物反应的加和(蓝线(中线)：如果药物仅仅是加和的，则预期癌症生长抑制)或协同作用(红线(下线)：偏离蓝线(中线)，指示协同作用)。在图2中，地法替尼还显示出与索托拉西布和阿达格拉西布在降低一组kras g12c mt nsclc和结肠直肠癌细胞系的活力方面具有协同作用。
[0219]
因此，vs-6766作为单一药剂有效抑制kras-g12c nsclc细胞系中的ras通路信号传导(pmek、perk、p-p90rsk)，并且vs-6766+g12ci的组合显示相对于单独g12ci的ras通路
信号传导的深度和持续时间的改善(图3、4)。图3显示vs-6766+g12c抑制剂对perk的抑制在一组kras g12c mt nsclc细胞系中优于单独的mrtx849或amg-510。图4显示在一组kras g12c mt nsclc细胞系中，相对于单独的g12c抑制剂，向amg-510或mrtx849添加vs-6766增加了mek/erk信号传导的抑制深度和持续时间。类似地，在h2122 kras g12c nsclc异种移植模型中，vs-6766与索托拉西布的组合显示出相对于单独的索托拉西布改善了肿瘤中pmek和perk的抑制作用(图5)。每天通过口服管饲法将0.3mg/kg的vs-6766、30mg/kg的amg-510或组合给药于携带h21222细胞系异种移植物的小鼠(n＝5/组)，持续5天。在最终剂量后2、8和24小时收获肿瘤。
[0220]
vs-6766和faki在体内增强amg-510在h2122 kras g12c突变nsclc中的功效(图6)。在h2122 kras g12c mt nsclc异种移植模型中，与vs-6766(0.3mg/kg qd)组合可增强索托拉西布(30mg/kg qd)对肿瘤生长的抑制作用，而曲美替尼(0.3mg/kg qd)在增强索托拉西布功效方面的效果要差得多。索托拉西布单一疗法在0/10小鼠中诱导》20％的肿瘤消退，而vs-6766、曲美替尼或fak抑制剂与索托拉西布的组合在治疗10天后分别在5/10、1/10和4/10小鼠中诱导肿瘤消退。引人注目的是，vs-6766、索托拉西布和fak抑制剂的三重组合使10/10小鼠的肿瘤减少≥35％。在h358 kras g12c mt nsclc模型中观察到类似的结果(图7)。
[0221]
结论
[0222]
vs-6766作为单一疗法在ras通路中提供垂直阻断。在kras-g12c mt nsclc和crc细胞系中观察到vs-6766+g12ci的协同作用。与单独的g12ci相比，vs-6766组合在体外和体内提供了更好的erk通路阻断。vs-6766和faki都增强了g12ci在h2122和h358异种移植模型中的功效。g12ci+vs-6766+faki三重组合在所有小鼠中产生肿瘤消退。这些结果支持双重raf/mek抑制剂(例如vs-6766)
±
fak抑制剂(例如地法替尼)与g12c抑制剂的组合用于治疗kras g12c mt nsclc和crc的临床评估。
[0223]
等效物和范围
[0224]
在权利要求书中，除非相反地指示或另外从上下文显而易见，否则例如“一(a/an)”和“所述”的冠词可以意指一或大于一。除非相反地指示或另外从上下文显而易见，否则如果一个、一个以上或所有的群组成员存在、使用于既定产品或方法中或另外与其有关，那么在群组的一或多个成员之间包括“或”的权利要求书或说明书被视为满足。本发明包括群组中恰好一个成员存在、使用于既定产品或方法中或另外与其有关的实施例。本发明包括一个以上或所有的群组成员存在、使用于既定产品或方法中或另外与其有关的实施例。
[0225]
此外，本发明涵盖其中来自一或多条所列权利要求的一或多个限制、要素、条款和描述性用语被引入到另一条权利要求中的所有变化、组合和排列。举例来说，附属于另一权利要求的任何权利要求可以经修改以包括在附属于同一基本权利要求的任何其它权利要求中可见的一或多个限制。在要素以清单形式(例如以马库什群组(markush group)形式)呈现时，所述要素的每一子组也被公开，并且可以从所述群组去除任何要素。应理解，一般来说，在本发明或本发明的方面被称为包含具体要素和/或特征时，本发明的或本发明的方面的某些实施例由此类要素和/或特征组成或主要由此类要素和/或特征组成。出于简单的目的，那些实施例尚未专门地以这些词语阐述在本文中。还应注意，术语“包含”和“含有”打算为开放的并且允许包括额外要素或步骤。在给出范围时，包括端点。此外，除非另外指明
或另外从上下文和本领域的普通技术人员的理解显而易见，否则表示为范围的值可以在本发明的不同实施例中采用所述范围内的任何特定值或子范围，除非上下文另外明确规定，否则达到所述范围下限的单位的十分之一。
[0226]
本技术提及各种颁予的专利、公开的专利申请、杂志文章和其它出版物，其都以引用的方式并入本文中。如果任何并入的参考文献与本说明书之间存在冲突，那么应以本说明书为准。另外，属于现有技术内的本发明的任何具体实施例可以从权利要求中的任何一或多者明确排除。因为此类实施例被认为是本领域的普通技术人员已知的，所以其可以被排除，即使所述排除在本文中并未明确阐述。本发明的任何具体实施例可以出于任何原因从任何权利要求排除，无论与现有技术的存在相关与否。
[0227]
本领域的技术人员顶多使用常规实验即可识别或能够确定本文所述的特定实施例的许多等效物。本文所述的本发明的实施例的范围并不打算限于上述描述，而是实际上如所附权利要求书中所阐述。本领域的普通技术人员将了解，可以在不脱离如随附权利要求书中定义的本发明的精神或范围的情况下对本说明书作出各种改变和修改。