专利名称：霉酚酸盐的包有肠溶衣的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及霉酚酸。
霉酚酸，本文中也称之为MPA，于1896年首次分离，并已就其作为潜在的有商业利益的药物进行了广泛研究。已知其具有抗肿瘤、抗病毒、免疫抑制、抗牛皮癣和抗炎活性〔参见例如，W.A.Lee等人，药学研究(1990),7,p.161-166，并结合在此文中参考〕。Lilly科学家们已在出版物上发表了关于MPA作为抗癌剂的文章，参见例如，M.J.Sweeney等人，癌症研究(1972),32,1795-1802,ICI科学家们也发表了这方面的文章，参见例如，GB 1,157,099和1,203,328，以及其作为免疫抑制剂的文章，参见例如，A.Mitsui等人，抗菌素杂志(1969)22,p.358-363。在上面提到的W.A.Lee等人的文章中，据说已试图通过制造衍生物来提高MPA的生物利用率或特异性。酸的低生物利用率被认为是由未确定的因素如药物在胃肠腔中的络合，狭窄的吸收窗，吸收前的代谢等而引起的。已有关于制备吗啉代乙酯，也称作霉酚酸莫非替尔(有时在本文中也称之为MMF)，的描述，它具有比MPA高得多的生物利用率(MMF为100％，而MPA为43％)。目前这种衍生物已引入商业中作为免疫抑制剂用于治疗或预防器官或组织移植排斥，每日剂量为口服约200mg到约3g，例如口服约2g。患者对MMF的顺应性不理想，特别是由于副作用例如胃肠副作用，其起因不明。
经过排除试验后，现在我们已发现当霉酚酸盐在包有肠溶衣或适宜于在肠例如在十二指肠、空肠和/或回肠的上部释放时是有效的、耐受性好的、特别针对免疫抑制性适应证尤其是治疗或预防器官、组织或细胞例如在移植后的同种移植或异种移植排斥，或者治疗或预防免疫介导的疾病(自身免疫疾病)的药物，并具有值得关注的生物利用率和稳定性特性。另外，需要给药的单位剂型也比MMF小，这使得给药更容易。
一方面，本发明提供了包含霉酚酸盐的药物组合物，该组合物适于在肠道的上部释放霉酚酸盐(下文中称之为本发明组合物)。该组合物也可以任何常规方式，优选以适于防止霉酚酸盐在胃中释放并确保其在肠道上部释放的方式进行改造。另一方面，本发明提供了包含包衣的药学上可接受的霉酚酸盐的药物组合物。
这样的盐是阳离子盐，例如碱金属盐，特别是钠盐。霉酚酸钠盐是已知的，例如在南非专利68/4959中。我们优选使用一钠盐。这可通过从丙酮/乙醇，如果需要加水，中重结晶而以结晶形式得到；Mpt.189-191℃。
更具体地说，本发明提供了一种口服应用的单位剂型的包有肠溶衣的固体组合物，该组合物的核心含有固体或液体形式的霉酚酸钠。
术语“核心”包含霉酚酸钠(或其他阳离子盐)，如果需要，与另外的生理学上可接受的物质结合，它可被肠溶衣包裹。在宽范围的意义上，术语“核心”不仅包含片剂，小丸或颗粒，而且包含胶囊，例如明胶或淀粉的软或硬胶囊。这样的核心可用常规方法制备。我们已发现霉酚酸盐，特别是钠盐，尤其适于制备片剂。当使用片剂核心时，它们优选硬度为约10到70N。
小丸或颗粒在应用了下文中描述的肠溶衣后可以就这样使用，或者填充到胶囊例如硬明胶胶囊中。另一方面，如果需要，该胶囊也可以是包肠溶衣的，例如以常规方式。
该核心中也可存在其他药学上可接受的成分，例如在药物组合物的制备中常用的那些，例如填充剂如乳糖，助流剂如二氧化硅，和润滑剂如硬脂酸镁。
术语“肠溶衣”包含任何药学上可接受的防止活性剂在胃中释放而在肠道中充分崩解(通过与接近中性或碱性的肠液接触)的包衣，以使活性剂通过肠道壁吸收。各个国家的药典中已公布了用于测定包衣是否是肠溶衣的各种体外试验。
更具体地说，本文中所用的术语“肠溶衣”是指在与象在36到38℃下HCl的pH为1这样的人工胃液的接触中保持完整至少2小时，优选之后在30分钟内在象pH 6.8的KH2PO4缓冲液这样的人工肠液中离解的包衣。
包衣的厚度可变化并根据，特别是，其在水和酸中的穿透性而定。对于1号明胶胶囊，典型的包衣可以是约16-30，例如16到20或到25mg。类似的厚度可用于其他制剂。
一般说来，令人满意的结果是得到5-100μm，优选20-80μm厚度的包衣。该包衣适宜选自大分子聚合物。合适的聚合物列于例如L.Lachman等人，工业药剂学的理论与实践，第三版，1986,p.365-373,H.Sucker等人，药物工艺学，Thieme,1991,p.355-359,Hagers Handbuch der pharmazeutischen Praxis，第四版，第7卷，739到742页和766到778页，(Springer Verlag,1971)和Remington’s药物科学，第十三版，1689到1691页(Mack Publ.,Co.,1970)，它包含例如纤维素酯衍生物，纤维素醚，丙烯酸树脂，如甲基丙烯酸酯共聚物和马来酸与邻苯二甲酸衍生物的共聚物。
优选膜是用乙酸邻苯二甲酸纤维素和乙酸1,2,4-苯三酸纤维素；含有至少40％甲基丙烯酸的甲基丙烯酸共聚物例如由甲基丙烯酸及其酯得到的共聚物；和特别是邻苯二甲酸羟丙甲基纤维素制成的。
甲基丙烯酸酯包括例如以比例约为1∶1的甲基丙烯酸与甲基丙烯酸甲酯或乙酯计，分子量在100,000道尔顿以上的那些。典型的产品包括Endragit L，例如L 100-55，由Rohm GmbH,Darmstadt,Germany出售。
典型的乙酸对苯二甲酸纤维素的乙酰含量为17-26％，对苯二甲酸酯含量为30-40％，粘度约45-90cP。
典型的乙酸1,2,4-苯三酸纤维素的乙酰含量为17-26％，苯三甲酰(trimellityl)含量为25-35％，粘度约15-20cS。合适的乙酸1,2,4-苯三酸纤维素的实例是市售产品CAT(Eastman KodakCompany，美国)。
邻苯二甲酸羟丙甲基纤维素，一般具有20,000到100,000道尔顿，例如80,000到130,000道尔顿的分子量，例如羟丙基含量为5-10％，甲氧基含量为18-24％，而邻苯二甲酰含量为21-35％。
合适的乙酸对苯二甲酸纤维素的实例是市售产品CAP(EastmanKodak,Rochester N.Y.，美国纽约)。
合适的邻苯二甲酸羟丙甲基纤维素的实例是商标为HP50，羟丙基含量为6-10％，甲氧基含量为20-24％，邻苯二甲酰含量为21-27％，分子量约为84,000道尔顿的市售产品，它可从Shin-EtsuChemical Co.Ltd.，日本，东京得到，和商标为HP55，羟丙基含量、甲氧基含量和邻苯二甲酰含量分别为5-9％、18-22％和27-35％，分子量为78,000道尔顿的市售产品，它可从相同的供应商得到。
优选包衣为HP50。
包肠溶衣过程可按常规方式进行，例如用肠溶衣溶液喷淋核心。
用于肠溶衣的合适的溶剂是例如有机溶剂，如醇诸如乙醇，酮诸如丙酮，卤代烃如CH2Cl2或这样的溶剂的混合物，例如乙醇/丙酮，如1∶1到10∶1。
通常向这样的溶液中加入软化剂如邻苯二甲酸二正丁酯或甘油三乙酸酯，例如以包衣物质比软化剂为1∶约0.05-约0.3的比例。
如果需要邻苯二甲酸纤维素和其他酸性包衣物质，可以制成铵盐并可使用水溶液。
可以使用流化床包衣机进行包衣。
通常在喷淋前将核心在室温下或加热到不超过40℃进行处理，例如用40℃-不超过70℃的热空气的方式。为了避免核心粘着，喷淋过程优选中断一定时间间隔，然后再次加热核心。不过也有可能，例如通过根据排气和/或核心的温度自动调节喷淋量而不中断喷淋过程来进行。
喷淋压可在宽范围内变化，一般令人满意的结果是用约1到约1.5巴的喷淋压得到。
如标准测试所示，本发明组合物可用作免疫抑制剂。
本发明组合物的活性和特性可用下面的标准试验说明
a)临床试验，例如观察肾移植后6个月的首次急性排斥发作或治疗失败，或者在用本发明开始治疗后6个月内维持的无排斥状态。本发明组合物以0.5到2.0g/天，例如约1.5g/天的剂量给药，当在移植手术期间给药时急性排斥率降低，并且患者在移植手术后3个月或更久时间内保持无排斥状态。因此本发明组合物可以在移植后最初72小时期间以约0.5g的剂量给药，每天给药两次，并结合常用类固醇和环孢菌素，例如NEORAL，对于肾移植，环孢菌素剂量是常用剂量，例如约8±3mg/kg。类固醇给药剂量，对于泼尼松来说，是在移植后4天内为约2.5mg/kg，之后一周为1mg/kg，之后两周为0.6mg/kg，再之后一个月是0.3mg/kg。
b)动物试验，例如观察大鼠的肾同种移植反应。在该试验中，利用首尾相接吻合术将雌性fisher 344大鼠的一个肾移植到肾切除的WF受体大鼠的单侧(左侧)肾小管上。输尿管吻合术也是首尾相接的。在移植当天开始治疗并持续14天。移植后7天进行对侧肾切除术，使受体仅依赖供体肾的性能工作。将移植受体的存活看作是机能移植的参数。一般本发明组合物的剂量为约1到30mg/kg，口服。
本发明组合物特别适用于以下疾病a)治疗和预防先天性或转基因器官、组织或细胞同种移植或异种移植排斥，例如用于治疗例如心脏、肺、心-肺联合的、肝、肾、胰、皮肤、胰岛细胞、神经细胞或角膜移植的受体；包括治疗和预防急性排斥；治疗和预防超急性排斥如与异种移植排斥有关的；以及治疗和预防慢性排斥如与移植-血管疾病有关的。本发明组合物还显示可用于治疗和预防移植物抗宿主疾病，如骨髓移植术后。
b)治疗和预防自身免疫疾病，例如免疫介导的疾病和炎性疾病，特别是与包括免疫学因素的病原学有关的炎性疾病，如关节炎(例如类风湿性关节炎，慢性进行性关节炎和变形性关节炎)和风湿病。可以应用本发明组合物的具体的免疫介导疾病包括自身免疫血液学疾病，包括但不限于溶血性贫血，再生障碍性贫血，单纯红细胞贫血和自发血小板减少症，系统性红斑狼疮，多软骨炎，硬皮病，韦格纳颗粒团形成，皮肌炎，多肌炎，慢性活动性肝炎，原发性胆汁性肝硬变，重症肌无力，牛皮癣，史蒂文斯-约翰逊综合征，天疱疮，自发性口炎性腹泻，炎性肠疾病(包括例如溃疡性结肠炎和节段性回肠炎)，内分泌眼病，格雷夫斯病，肉样瘤病，多发性硬化，青少年糖尿病(I型糖尿病)，非传染性眼色素层炎(之前和之后)，干性角膜结膜炎和春天发作的角膜结膜炎，间质性肺纤维化，牛皮癣性关节炎，脉管炎，肾小球肾炎(有及没有肾病综合征，例如包括自发性肾病综合征或最小改变的肾病)和青少年皮肤肌炎。
本发明组合物的合适剂量当然将，例如根据所治疗的病情(例如疾病类型或抵抗力的性质)、所用的MPA盐、预期的效果和给药的方式而变化。
不过，一般令人满意的结果是，例如以每天每kg动物体重约1到约30mg盐的剂量口服给药而得到的，每天给药一次或分剂给药但不超过4次。因此对于患者来说，合适的日剂量是200mg-3g盐，口服，例如从约50到100％的霉酚酸莫非替尔。对于优选的一钠盐来说，该盐的剂量是霉酚酸莫非替尔的约2/3。
有代表性的单位剂型含有从约50mg，例如100mg，到约1.5g的药学上可接受的霉酚酸盐。
本发明组合物的生物利用率特性可以用常规方法进行测定，例如通过给比哥(beagle)狗口服来测定。剂量一般是每个动物50mg盐，例如约3-5mg盐/kg动物体重。狗是成年的(约10kg，例如6-14kg)并对其禁食。给药3小时后给予约200g食物。在给药前和给药后10、30及45分钟、1、1.5、2、3、4、6、8、12及24小时时，从头静脉采集血样。利用HPLC分析(用UV检测)测定游离MPA的血浆浓度。
在相对生物利用率试验中，如上所述，以3.8mg盐/kg动物体重的剂量给雄性比哥狗口服下文中描述的实施例1组合物，以及对应于实施例1组合物但含有相等量的MPA或商业上可得到的MMF的MPA或MMF制剂。
结果如下MPA(AUC相对生物利用实施例1 MPA MMF率，Frel[ng.hr.ml-1]均值4612(218) 3579(174) 2709(100)中间值 4204(168) 2911(182) 2513(100)SD939 1889 1363CV 20 53 50Cmax[ng/ml](相对Cmax)均值5391(313) 3683(227) 2052(100)中间值 5359(367) 2719(172) 1462(100)SD1847 2504 945CV(％) 34(46) 68(87) 46(0)实施例1组合物的AUC和Cmax的变异系数(CV)(分别为20％和34％)显著低于对照组合物，这表明施用实施例1组合物的受试动物间和受试动物内变异性较小。
实施例1组合物的曲线下面积(AUC)和Cmax高于对照组合物。
自然，用标准临床生物利用率试验可以断定本发明组合物的有利的生物利用率特性。例如，以200mg-1.5g的剂量，给12名健康志愿者服用单剂实施例1组合物和MPA，以及MMF，试验交叉进行。可以观察到实施例1组合物的增高的AUC和Cmax。
本发明组合物有优于MMF的令人惊异的耐受性，包括较小的胃肠副作用如腹泻和高热。它们显示出较小的长期副作用，例如在结肠中的。
本发明组合物可以作为唯一的活性成分给药，或者与另一种免疫抑制剂，例如与其他免疫抑制剂一起同时或分开给药，例如在抑制免疫的应用中，如预防和治疗移植物对宿主疾病，移植排斥，或免疫介导的疾病时，本发明组合物可以与环孢菌素或子囊菌素，或者它们的免疫抑制类似物如环孢菌素A,FK-506(tacrolimus)等，雷怕霉素；皮质类甾醇；环磷酰胺；硫唑嘌呤；甲氨喋呤；brequinar；来氟米物；咪唑立宾；脱氧精胍菌素；其类似物，以及免疫抑制单克隆抗体如对白细胞受体的单克隆抗体，例如MHC,CD2,CD3,CD4,CD7,CD25,CD28,CTLA4,B7,CD45，或CS58或它们的配体；或者其他免疫调制化合物结合使用。
当本发明组合物与这样的其他免疫抑制剂一起共同给药时，其他免疫抑制剂的剂量可以减少到，例如当它们单独使用时剂量的1/2-1/3。
对于环孢菌素，典型的使用剂量是，例如1-10，如1-2mg/kg/天。
另一方面，本发明提供了如下文的权利要求书中定义的用途，方法和组合物。
本文中不再对赋形剂进行详细描述，它们是已知的，或可以从例如药物赋形剂手册，第二版，Ainley Wade和Paul J.Weller编，美国药学协会，华盛顿，美国和药物出版社，伦敦；以及Lexikon der Hilfsstoffefür Pharmazie,Kosmetik and angrenzende Gebiete,H.P.Fiedler编，第4版，Edito Cantor,Aulendorf and earlier editions中得到。
下面利用实施例来描述本发明组合物实施例1组分胶囊内容物MPA一钠盐 53.43mg(=50mg MPA)乳糖(100/200目的1∶1混合物)256.57mg二氧化硅(Aerosil) 3.1mg硬脂酸镁 1.55mg314.65mg
1号胶囊肠溶衣(约17mg)邻苯二甲酸羟丙甲基纤维素(HP50)9份甘油三乙酸酯 1份方法将胶囊成分混合并填充到1号胶囊中。该胶囊在流化床包衣机中用肠溶衣成分的乙醇溶液(含有10％丙酮)进行涂敷。每个胶囊上的包衣约为17mg。该胶囊符合本文中描述的肠溶衣测试，在2小时内在人工胃液(pH1,HCl)中没有崩解。该组合物是稳定的，例如在室温下在2年内稳定。
如果需要，可以用类似方法制备含有534.3mg MPA一钠盐的大胶囊，只是减少乳糖的用量。它们在临床试验中有良好的耐受性。
实施例2如实施例1制备1号胶囊。如下所述制备肠溶衣溶液邻苯二甲酸羟丙甲基纤维素(HP50) 270g甘油三乙酸酯 30g丙酮 900g乙醇1800g将600g该肠溶衣溶液用于1kg胶囊(约2400)。应用于每个胶囊的包衣的量约为25mg，得到的膜厚度为5-6mg/cm2。
权利要求
1．一种包含霉酚酸盐的药物组合物，该组合物适于在肠道的上部释放霉酚酸盐。
2．包含包有肠溶衣的药学上可接受的霉酚酸盐的药物组合物。
3．如权利要求1或2的包有肠溶衣的药学上可接受的霉酚酸盐或组合物在用于免疫抑制，特别是用于预防或治疗先天性或转基因器官、组织或细胞同种移植或异种移植排斥；用于治疗或预防免疫介导的和/或炎性疾病的药剂的制备中的应用；可任意与另一种免疫抑制剂同时或分开给药。
4．对个体进行免疫抑制的方法，它包含给予需要这样的免疫抑制的个体治疗有效量的如权利要求1或2的包有肠溶衣的药学上可接受的霉酚酸盐或组合物，任意地与另一种免疫抑制剂同时或分开给药。
5．一种组合物，它含有如权利要求1或2的包有肠溶衣的药学上可接受的霉酚酸盐或组合物以及另一种用于同时、先后或分开给药的免疫抑制剂。
6．按照上述任一项权利要求所述的组合物、用途或方法，其中盐是一钠盐。
7．按照上述任一项权利要求所述的组合物、用途或方法，其中存在另一种免疫抑制剂，例如环孢菌素。
全文摘要
本发明提供了包含霉酚酸盐的药物组合物,该组合物适于在肠道上部释放霉酚酸盐。
文档编号A61K38/00GK1215991SQ97193760
公开日1999年5月5日 申请日期1997年4月10日 优先权日1996年4月12日
发明者B·哈伯林, C·P·马克, A·梅恩泽, J·旺德舍尔 申请人:诺瓦提斯公司