专利名称：含前列腺素类化合物和苄醇的溶液的制作方法
技术领域：
本发明涉及前列腺素类化合物改进制剂的制备方法，所述前列腺素类化合物例如是前列腺素F2α缓血酸胺盐(dinoprost tromethamine)，该化合物在市场上的商标为Lutalyse。
美国专利3917864(该文献在此引入作为参考)描述并请求保护前列腺素F2α缓血酸胺盐，该化合物在市场上的商标为Lutalyse。当适当给药时，该化合物能够在多种哺乳动物，尤其是畜牧动物如马、牛和猪中引起黄体退化。这种活性组分常常被配制为用于注射给药的溶液。目前，我们提供了一种意外的和新的注射用前列腺素F2α缓血酸胺盐溶液制剂，它优越于常规的市售制剂。这种新制剂的制备方法适用于前列腺素F2α缓血酸胺盐和其他前列腺素类药物。
本发明涉及新的制剂，包括组合物本身和通过加工制备的产品，以及用于制备这些制剂的新方法。该制剂包括含有前列腺素如前列腺素F2α缓血酸胺盐和苄醇的溶液，苄醇可以占约1.2-2.0％，整个溶液的pH被调至约5.5-7.5，或更优选pH是约6-7并且首选是约6.4-6.6，或约6.5。前列腺素F2α缓血酸胺盐的浓度是1-10mg/ml，优选3-7mg/ml且更优选5mg/ml。苄醇的浓度可以是约12-20mg/ml并且前列腺素F2α缓血酸胺盐的浓度可以是约4-6mg/ml。在终溶液中，优选的前列腺素F2α缓血酸胺盐浓度是约5mg/ml且优选的苄醇浓度是约16.5mg/ml。可以将该溶液的pH调至约6.5或6.6。
本发明还公开了通过特定方法制备的产品。将前列腺素和苄醇的溶液的pH调至约5.5-7.5，更优选约6-7且首选约6.4-6.7，或约6.5，其中苄醇的浓度是约1.2-2％，更优选1.4-1.8％，首选1.65％，同时其中前列腺素F2α缓血酸胺盐的浓度是1-10mg/ml，所述制备方法是a)将前列腺素F2α缓血酸胺盐溶解在水中且随后加入稀释苄醇，或将苄醇稀释并将前列腺素F2α加入该苄醇水溶液中(其中稀释苄醇可以是约4至1.2％，优选1.2至3.3％，更优选1.8至2.6％的苄醇溶液并且首选是2.0％的苄醇溶液)或b)将前列腺素F2α溶解在一个容器中并将苄醇在另一个容器中溶于水中，采用4.0-1.2％，优选1.2-3.3％，更优选1.8至2.6％和首选2.0％的苄醇溶液，随后将这两个容器中的内含物混合。此后用弱酸或弱碱调至pH5.5-7.5或更优选约6至7，如果必要，pH最终应被调至5.5-7.5，或优选是约6-7，或更优选是约6.5。通过这种方法配制的前列腺素可以是前列腺素F2α缓血酸胺盐。在这种方法中，可以在与前列腺素F2α缓血酸胺盐在水溶液中混合之前或之后将苄醇水溶液的pH调至5.5-7.5。可以采用酸或碱如HCl或NaOH调节pH。苄醇的终浓度可以是约1.2至2.0％或优选是也1.4至1.8％，更优选是约1.6-1.7％或约1.65％，也就是终溶液中苄醇在水中的浓度是16.5mg/ml。
本发明还公开了一种用于制备前列腺素的药物制剂的方法，该方法包括Ⅰ)首先将前列腺素溶解在水中，随后加入苄醇；或Ⅱ)用水将苄醇稀释成为约4％或更稀的溶液，随后加入前列腺素。如果选用前一制备方法，可以通过a)将前列腺素F2α缓血酸胺盐溶解在水中并且加入4％-1.2％的苄醇稀溶液，将pH调整约5.5-7.5，或约6-7或约6.5；或b)在一个容器中将前列腺素F2α缓血酸胺盐溶解在水中并且将苄醇在另一容器中溶于水中，随后将两个容器的内容物混合在一起并且用弱酸或碱调至pH为5.5-7.5，或约6-7或约6.5。所述前列腺素可以是前列腺素F2α缓血酸胺盐。苄醇在这种制备方法中的浓度可以是1.2-2.0％，或1.4-1.8％,1.5-1.7％,1.6-1.7％，优选1.65或1.65mg/ml。
还可以采用不同但相关的制备方法，其中将前列腺素F2α加入水中，随后将pH升高至8.0或更高，此后加入苄醇(纯净的或稀释苄醇)，随后用弱酸或碱将pH降至5.5-7.5，或约6-7或约6.5。
前列腺素F2α缓血酸胺盐在该制备方法中的浓度是1-10mg/ml，优选3-7mg/ml，更优选是4-6mg/ml，特别优选5mg/ml。在这种制备方法中，苄醇水溶液中pH的调节是在苄醇与水混合之后但在前列腺素F2α缓血酸胺盐加入苄醇水溶液之前和/或将苄醇水溶液加入前列腺素F2α缓血酸胺盐水溶液之后进行，或者在制备苄醇水溶液之前或之后和在将前列腺素F2α缓血酸胺盐加入该稀释醇水溶于之前或之后调节pH，如果采用该步骤或上述任一步骤，对于上述任一或两个pH调节步骤来说，pH最终可调至约pH5.5-7.5或优选6.0-7.0，或更优选约6.4-6.6或约6.5。在该方法中，苄醇的浓度可以是约1.2-2.0％,或1.4-1.8％,1.5-1.7％,1.6-1.7％，优选1.65或1.65mg/ml。
前列腺素F2α缓血酸胺盐是一种前列腺素，参见US 3917864，该专利在此引入作为参考。在本发明之前，人们普遍相信多数前列腺素，特别是前列腺素F2α缓血酸胺盐，必须在碱性溶液中配制以生成化学上和物理上稳定的药物溶液。例如，参见Mats Hamberg,Lian-Ying Zhang,Sune Bergstroem的“15(S)-15甲基-前列腺素F2α缓血酸胺盐(Carboprost)的pH依赖性降解”，《欧洲药物科学杂志》(Eur.J.Pharm.SCi.)3(1),27-38(英文)1995。该研究发现，当所用缓冲液的pH值由9.1升至更高时前列腺素的氨丁三醇盐的稳定性逐渐提高，结论是在缓冲剂保持pH 9.55时所述药物可以在37℃下至少保藏1年，降解率仅为3-4％。该研究是确信前列腺素在较高pH时更稳定的典型。本发明人目前发现一种新的用于制备前列腺素F2α缓血酸胺盐新制剂且无需碱性配方的方法。避免使用在保持前列腺素F2α缓血酸胺盐或其他前列腺素化学上稳定和溶液中常用的碱可以使可注射制剂在注射部位的并发症比高pH的溶液少。
这种新制剂和所述前列腺素制备方法除了这些与pH有关的重大改进以外，本发明人还发现制备可注射溶液的新方法，其优点是减少溶液的微生物污染。本发明人创造出一种新的制备前列腺素F2α缓血酸胺盐灭菌溶液的方法，该溶液中含有高浓度苄醇但仍然是澄清溶液。通常采用本发明中所用的苄醇水平和pH，人们将认为前列腺素无法是溶液且形成沉淀；但由于一种或多种适合保存和注射的制剂的独特方式，本发明制备的制剂是真溶液，该溶液澄清且含有溶解的药物，没有沉淀。
制造可注射前列腺素药物制剂的科研人员面临许多矛盾。首先，如上所述，前列腺素药物通常在高pH下更稳定。这是由于当pH降低时，出现两种主要的负面影响。前列腺素药物变得不稳定且在化学上逐渐降解，在溶液中出现其物理沉淀。当pH低于约6时，所述前列腺素药物，如前列腺素F2α缓血酸胺盐在液体溶液中不稳定。不幸的是，升高pH将导致其他问题。当溶液作为多次用药瓶使用时，可注射药物溶液会生长和污染上微生物。注射时反复将针头插入和拔出药物有时导致污染物进入药瓶中。附加的防腐剂如苄醇常常加入上述溶液中以抑制因可能的污染导致的微生物生长。不幸的是，苄醇对微生物生长的抑制作用本身在高pH下受到抑制。由于含苄醇溶液的pH升高，微生物在该溶液中的生长也增加。因此，前列腺素药物制造商面临的是无选择余地的选择，不是选择药物稳定性良好但污染和药物沉淀几率增大的高pH，就是选择更易于抑制微生物污染但化学稳定性或有效期缩短的低pH。
如果开始时采用pH约8的标准溶液和约9或10mg/ml的典型苄醇浓度，一般足以防止微生物的生长或获得预期的(微生物)致死率，仅仅降低pH将无法制备适当的药物制剂。因为微生物的问题，在高pH下必须增高苄醇水平。；然而，为了令前列腺素如前列腺素F2α缓血酸胺盐维持在溶液内，对提高苄醇浓度的方式是苛刻的。
本发明人发现且在此公开在非碱性环境中制备前列腺素制剂的秘诀，其中用具有有效苄醇水平的任选制剂获得稳定药物的澄清溶液。
前列腺素制剂可以在含苄醇的非碱性环境中制备，条件是苄醇的浓度高于常规浓度，另一条件是按照本申请的顺序混合组分。
在溶液的配制中，通常将最不易溶组分的加入安排在第一位，最后加入较易溶的组分。在此，我们改变了常规步骤，以使前列腺素F2α缓血酸胺盐保持在溶液中。如果将前列腺素F2α缓血酸胺盐加入水中，随后加入纯苄醇，前列腺素F2α缓血酸胺盐将自溶液中沉淀出来。在此我们提出，将前列腺素F2α缓血酸胺盐溶于水中，随后加入已溶解在水中的苄醇溶于。或者，可以将苄醇溶于水中，随后将前列腺素F2α缓血酸胺盐溶解在该稀释苄醇溶液中。苄醇在水中的溶解度约为4％。还可以接受苄醇的任何溶液。我们优选通过在一个容器中溶解前列腺素F2α缓血酸胺盐且令苄醇在另一容器中溶解的稀释苄醇(其中该稀释苄醇可以是约4至1.2％，优选1.2至3.3％，更优选1.8至2.6％且首选2.0％的溶液，或b)，采用的是约4-1.2％，优选1.2-3.3％，更优选1.8-2.6％且首选2.0％苄醇溶液。最终的pH被调至约5.5-7.7,6.0-7.0或6.5。这可以在一个或两个容器中利用下列任一方法来完成我们描述若干种通用方法。
Ⅰ)首先将前列腺素如前列腺素F2α缓血酸胺盐和适量的稀(约4至1.2％)苄醇溶解在水中，在此注意，或是首先将苄醇加入到水中，或是将前列腺素加入水中；随后用适当的酸或碱调节pH，例如无机酸或碱(如盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH))，或有机酸或碱。
Ⅱ)可以首先在一个容器中将前列腺素F2α缓血酸胺盐溶解在水中并且在另一容器中用水稀释苄醇。将容器混合，再将pH调至约5.5-7.5,6-7或6.5，加入水达到最终的体积且混合溶液。
Ⅲ)或者，将前列腺素溶解在水中且令pH升高至约8.0，优选高于8.0(或在加入前列腺素之前升高pH)，随后在加入未稀释(纯净)或稀释的苄醇，随即降低pH。为了重复操作，对于方法Ⅲ，应在将前列腺素溶解之后升高pH，随后加入纯净或稀释的苄醇，由此pH降低至约5.5-7.5，更优选约6-7或首选6.5。优选的前列腺素是前列腺素F2α缓血酸胺盐。
对于上述任一方法，优选的苄醇终浓度是1.2％至2.0％，更优选1.4％至1.8％，首选约1.65％，或其中制剂的每1ml终体积含有5mg前列腺素F2α缓血酸胺盐和16-17mg的苄醇，更优选每1ml水中混入16.5ml苄醇，用HCl或NaOH的溶液调节pH。可以应用任何酸溶液，1-10％的酸或碱溶液更适用。高浓度可能需要较大的体积。对于体积较大的溶液，可以将4.0kg的前列腺素F2α缓血酸胺盐和13.2kg的苄醇混合为水的溶液且用10％HCl或NaOH溶液调节pH，并且令水溶液的终体积达到800L。
适合于本发明的pH范围是pH约5.5-7.5，优选pH约6-7或首选pH6.5或6.6。
前列腺素F2α缓血酸胺盐的浓度可以是1-10mg/ml，优选是3-7mg/ml，更优选4-6mg/ml并且特别优选5mg/ml。
苄醇的最终浓度是约1.2％至2.0％w/v(重量/体积)或12至20mg/ml，优选14-18mg/ml，更优选16-17mg/ml或首选16.5mg/ml。用于制备终溶液的苄醇浓度是约4至1.2％，更优选1.2至3.3％，更优选1.8至2.6％的苄醇溶液，并且首选2.0％的苄醇溶液。
根据上述制备方法，所属领域普通技术人员应能够实施本发明的全部方面。下列具体实施例举例说明但不限定本发明的范围。
将预定量的前列腺素F2α缓血酸胺盐和苄醇溶解在注射用水中。注射用水是指适合于注射的按照美国药典(U.S.P.)规定的水溶液。用氢氧化钠或盐酸水溶液调节pH。所述溶液经灭菌级滤膜过滤来灭菌并且在无菌条件下经管线内滤器填充至药瓶中。将循环参数设定在使最低处理致死率相当于原内毒素浓度降低了3个对数。通过蒸汽灭菌法将橡皮塞灭菌。循环参数设定在使最低处理致死率相当于原孢子浓度降低了6个对数且最低F0值为15分钟。
下文提供多个流程以更直观地描述本发明的方法和步骤。流程还提供的附加说明，但不应将其视为限定实施描述。
流程以下流程提供了混合制剂的一种可行方式。下面是制备方法的一个流程框图。
流程2a以下流程提供了混合制剂的一种可行方式。下面是制备方法的一个流程框图。
流程2b以下图表提供了混合制剂的一种可行方式。下面是制备方法的一个流程框图。
流程3以下流程提供了混合制剂的一种可行方式。下面是制备方法的一个流程框图。
流程4以下流程提供了混合制剂的一种可行方式。下面是制备方法的一个流程框图。
选择和称重制剂所必需的组分苄醇和前列腺素F2α缓血酸胺盐。由以下公式计算出前列腺素F2α的量用量=A/B,A是必要的活性量，B=该批次前列腺素F2α的实际效价/100。
对于一个50.0kg的批次，需要250g前列腺素F2α的活性，其等效于335.5g的前列腺素F2α缓血酸胺盐(如果该药物的效价结果是100％)。利用一个批次的效价为98.0％的前列腺素F2α缓血酸胺盐，计算出用量335.5/0.98=342.35g前列腺素F2α缓血酸胺盐。
选择两个制备容器并且将组分称重。向第一容器中加入约10ml的注射用水。加入计算的且称重量的前列腺素F2α缓血酸胺盐并混合。向第二容器中加入35ml的注射用水。
加入所需量的苄醇并混合。用1％的盐酸溶液和/或1％氢氧化钠溶液将pH调节至pH=6.5。
将第一容器中的内容物转移第二个容器中且混合。用1％的盐酸溶液和/或1％氢氧化钠溶液将pH调节至pH=6.6。加注射用水达到终体积并混合，如果必要再次调节pH。
对于实际的制备方法，还可以采取下列附加步骤如果必要，可以取样进行染菌量试验，该溶液经灭菌滤膜(如0.22微米的滤膜)过滤，装入灭菌药瓶中。该溶液可以通过无菌滤膜过滤灭菌且在无菌条件下经管线内滤膜填充到药瓶。可以将容器灭菌并通过干热法除去致热原。将循环参数设定在使最低处理致死率相当于原内毒素浓度降低了3个对数。通过蒸汽灭菌法将橡皮塞灭菌。循环参数设定在使最低处理致死率相当于原孢子浓度降低了6个对数且最低F0值为15分钟。在规定时间取样弥补重量。用灭菌塞封闭药瓶且用盖子密封。取样分析。
注意下列考虑原因。本体溶液的pH在过滤之前可以用酸或碱(如盐酸或氢氧化钠)的稀释溶液调节。在将苄醇加入注射用水中以后，在5、10和15分钟时由流体制备罐的顶部和底部取样，以便证实在活性组分前列腺素F2α缓血酸胺盐加入之前已均匀溶解。在向苄醇溶液加入前列腺素F2α缓血酸胺盐溶液和令溶液达到预定体积之后，由在混合15和25分钟之后由流体制备罐的顶部和底部取样以确定效价和均匀性。
科学研究显示，通过欧盟药典和美国药典的测定，本发明的制剂制备方法具有可接受水平的防腐功效。
权利要求
1．含有前列腺素和苄醇的pH被调至约5.5-7.5的溶液。
2．权利要求1的溶液，其中所述前列腺素是前列腺素F2α缓血酸胺盐。
3．权利要求2的溶液，其中苄醇的浓度是约1.2至2.0％(w/v)或约12-20mg/ml。
4．权利要求3的溶液，其中前列腺素F2α缓血酸胺盐的浓度是1-10mg/ml。
5．权利要求2的溶液，其中苄醇的浓度是约1.4-1.8％或14-18mg/ml并且前列腺素F2α缓血酸胺盐的浓度是约4-6mg/ml。
6．权利要求5的溶液，其中在终溶液中前列腺素F2α缓血酸胺盐的浓度是约5mg/ml和苄醇的浓度是约16.5mg/ml。
7．权利要求6的溶液，其中pH调至约6.5或6.6。
8．前列腺素和苄醇的调至pH约5.5-7.5的溶液，其中苄醇的终浓度是约1.2至2.0％(12-20mg/ml)，和其中前列腺素的浓度是1-10mg/ml，该溶液通过以下方法制备将1)前列腺素和2)苄醇溶解在水中，并且用酸或碱调至pH约5.6至7.5。
9．权利要求8的溶液，其中在加入苄醇之前将前列腺素溶于水中，和其中首先用水将苄醇稀释至约1.2％-4.0％的浓度，随后将其加入前列腺素和水的混合物中。
10．权利要求9的溶液，其中所述前列腺素是前列腺素F2α缓血酸胺盐。
11．权利要求10的溶液，其中首先用水将苄醇稀释至约1.2至3.3％的浓度且将苄醇的最终浓度调至约1.4至1.8％(14-18mg/ml)，其中pH被调至约6.0至7.0，其中前列腺素的浓度是4-6mg/ml。
12．权利要求11的溶液，其中首先将苄醇用水稀释至约1.8至2.6％的浓度且用HCl或NaOH调节pH，将苄醇的终浓度调至1.6至1.7％(16-17mg/ml)。
13．权利要求12的溶液，其中首先将苄醇用水稀释至约2.0％的浓度，并且在终溶液中苄醇的浓度是水的约1.65％(16.5mg/ml)。
14．权利要求8的溶液，其中将苄醇加入水中以使其稀释至约4％至1.2％，或在将前列腺素溶解在苄醇和水的混合物中之前稀释。
15．权利要求14的溶液，其中所述前列腺素是前列腺素F2α缓血酸胺盐。
16．权利要求15的溶液，其中首先将苄醇用水稀释至约1.2至3.3％的浓度且将苄醇调至终浓度未约1.4至1.8％(14-18mg/ml)，其中pH被调至约6.0至7.0和其中前列腺素F2α缓血酸胺盐的浓度是约4-6mg/ml。
17．权利要求16的溶液，其中首先将苄醇用水稀释至约1.8至2.6％的浓度并用HCl或NaOH调节pH，将苄醇的终浓度调至1.6至1.7％(16-17mg/ml)。
18．权利要求8的溶液，其中前列腺素和苄醇分别单独溶解在水中，并且苄醇是溶液或形成至多10％的苄醇乳液，将两种溶液混合。
19．权利要求18的溶液，其中所述前列腺素是前列腺素F2α缓血酸胺盐。
20．权利要求19的溶液，其中单独溶于水中的苄醇的浓度是约1.8至2.6％，并且苄醇在混合溶液中的终浓度是约1.4至1.8％(14-18mg/ml)，其中混合溶液中的pH被调至约6.0至7.0，和其中前列腺素F2α缓血酸胺盐在混合溶液中的浓度是约4-6。
21．权利要求20的溶液，其中所述酸或碱是HCl或NaOH，将苄醇的终浓度调至约1.6至1.7％(16-17mg/ml)。
22．权利要求11的溶液，其中在与前列腺素F2α缓血酸胺盐的水溶液混合之前，将苄醇水溶液的pH调至约6至7。
23．一种制备前列腺素药物制剂的方法，其中包括将前列腺素溶于水中和将苄醇溶于水中，随后用酸或碱将pH调节至约5.5至7.5，其中最终的苄醇溶液是约1.2至2.O％(12-20mg/ml)和其中前列腺素的浓度是1-10mg/ml。
24．权利要求23的方法，其中在加入苄醇之前将前列腺素溶于水中，和其中在加入到前列腺素水溶液之前，用水将苄醇稀释至约4.0至1.2％的浓度。
25．权利要求24的方法，其中前列腺素是前列腺素F2α缓血酸胺盐。
26．权利要求25的方法，其中苄醇用水稀释至约3.3-1.2％的浓度，和最终的苄醇浓度被调至约1.4至1.8％(14-18mg/ml)，其中将pH调至约6.0至7.0和其中前列腺素F2α缓血酸胺盐的浓度是4-6mg/ml。
27．权利要求26的方法，其中苄醇用水稀释至约2.6-1.8％的浓度，用HCl或NaOH调节pH且将苄醇的终浓度调至约1.6至1.7％(16-17mg/ml)。
28．权利要求27的方法，其中苄醇用水稀释至约2.0％的浓度，和苄醇在终溶液中的终浓度是水的约1.65％(16.5mg/ml)。
29．权利要求28的方法，其中在将前列腺素溶解在苄醇和水的混合物之前，将苄醇加入水中以将其稀释为4-10％的乳液或约4至1.2％的溶液。
30．权利要求29的方法，其中所述前列腺素是前列腺素F2α缓血酸胺盐。
31．权利要求30的方法，其中苄醇用水稀释至约3.3至1.2％的浓度，和将苄醇的终浓度调至约1.4至1.8(14-18mg/ml)，其中pH被调至约6.0至7.0和其中前列腺素F2α缓血酸胺盐的浓度是4-6mg/ml。
32．权利要求31的方法，其中苄醇用水稀释至约2.6至1.8％的浓度，用HCl或NaOH调节pH且将苄醇的终浓度调至约1.6至1.7％(16-17mg/ml)。
33．权利要求23的方法，其中将前列腺素和苄醇分别单独溶解在水中且将两个溶液混合。
34．权利要求33的方法，其中所述前列腺素是前列腺素F2α缓血酸胺盐。
35．权利要求34的方法，其中苄醇用水稀释至约3.3-1.2％的浓度，和将苄醇在混合溶液中的终浓度调至约1.4至1.8(14-18mg/ml)，其中pH被调至约6.0至7.0和其中前列腺素F2α缓血酸胺盐的浓度是4-6mg/ml。
36．权利要求35的方法，其中苄醇用水稀释至约2.0％的浓度，所述酸或碱是弱HCl或NaOH且将苄醇的终浓度调至约1.6至1.7％(16-17mg/ml)。
37．权利要求26的方法，其中在与前列腺素F2α缓血酸胺盐水溶液混合之前，将苄醇水溶液的pH调至6至7。
全文摘要
本发明涉及新的制剂和用于制备前列腺素,特别是前列腺素F
文档编号A61K31/5575GK1301178SQ9980626
公开日2001年6月27日 申请日期1999年6月8日 优先权日1998年6月17日
发明者R·G·雷 申请人:法玛西雅厄普约翰美国公司