专利名称：一种高纯度毛兰素的制备方法
技术领域：
本发明属于天然药物化学领域，特别涉及一种高纯度毛兰素的制备方法。
毛兰素(Erianin)，中文系统名:3_羟基_4，3’，4’，5’ -四甲氧基联苄；分子式:
毛兰素为联苄类化合物，易溶于乙醇、氯仿、丙酮、甲醇等有机溶剂，极微溶于水。 通过实验发现毛兰素能明显抑制胃癌细胞SGC-7901增殖，表现为浓度依赖性，48小时IC5tl 为0.056 yg / ml，研究发现，毛兰素可以快速抑制胃癌细胞SGC-7901的端粒酶活性，8小时就可见端粒酶活性抑制，48小时就可以抑制端粒酶活性的80%。
二十世纪九十年代我国学者从石斛中分离提取出毛兰素，其提取方法是用氯仿或苯为提取溶媒并用超声处理30分钟进行提取，提取物再经硅胶柱柱层析分离得白色不定形的毛兰素结晶粉末。中国专利申请(03115752.1)公开了从石斛中提取毛兰素的方法，包括应用超临界CO2萃取和柱层析法以无水乙醇、甲醇、丙酮等为夹带剂，以CO2等位提取介质从兰科植物石斛中提取抗肿瘤成分毛兰素，对所得的粗提物再以石油醚:醋酸乙酯溶液为洗脱剂进行硅胶柱柱层析分离及重结晶等步骤获得精提物。传统硅胶柱制备高纯度毛兰素，分离步骤复杂，溶剂用量大，分离过程样品得率低，污染严重，不适合工业化生产。发明内容
本发明的目的是解决现有技术的不足和缺陷，提供一种高效，简便的高纯度毛兰素的制备方法。
为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案:一种高纯度毛兰素的制备方法，其特征在于:取鼓槌石斛原料粉碎，加入5 10倍量 7(Γ100%甲醇溶液超声提取2-3次，提取液浓缩后用氯仿溶液萃取，收集萃取液回收试剂， 浓缩液再用高速逆流色谱仪分离，紫外检测器在线监测，收集流分减压干燥即得。
所述的高速逆流色谱仪分离条件为:取氯仿、甲醇、水，按5 10:2 4:3、混合，取上相做固定相、下相为流动相，主机转速70(Tl000rpm,流速为l 4ml/min。
本发明的积极效果是:采用高速逆流色谱法分离，制备周期短，操作简单，制备量大，而且样品不损失，对环境友好，适合工业化生产。
背景技术：
C18H22O5 ;分子结构 式如下
下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
:实施例1:鼓槌石斛原料粉碎，称3kg，每次用15L80%甲醇溶液超声提取30分钟，提取3次，提取液减压浓缩至500ml，加等体积氯仿萃取3次，合并萃取液回收氯仿得萃取物。取氯仿、甲醇、水，按5:2:3混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速 800rpm,同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为2ml/min，用流动相溶解萃取物，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得白色粉末毛兰素4.2g，经HPLC检测，含量98.8%，经UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。
实施例2:鼓槌石斛原料粉碎，称3kg，每次用30L90%甲醇溶液超声提取30分钟，提取2次，提取液减压浓缩至800ml，加等体积氯仿萃取2次，合并萃取液回收氯仿得萃取物。取氯仿、甲醇、水，按10:4:7混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速 900rpm,同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为3ml/min，用流动相溶解萃取物，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得白色粉末毛兰素4.8g，经HPLC检测，含量98.1%，经UV、IR、MS、2H NMR、13CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。
权利要求
1.一种高纯度毛兰素的制备方法，其特征在于取鼓槌石斛原料粉碎，加入5^10倍量 7^100%甲醇溶液超声提取2 3次，提取液浓缩后用氯仿溶液萃取，收集萃取液回收试剂，浓缩液再用高速逆流色谱仪分离，紫外检测器在线监测，收集流分减压干燥即得。
2.根据权利要求I所述的高纯度毛兰素的制备方法，其特征在于所述的高速逆流色谱仪分离条件为取氯仿、甲醇、水，按5 10:2 4:3、混合，取上相做固定相、下相为流动相， 主机转速700 IOOOrpm,流速为I 4ml/min。
全文摘要
本发明公开了一种操作简便、污染小的高纯度毛兰素的制备方法，工艺步骤为取鼓槌石斛原料粉碎，加入5~10倍量70~100%甲醇溶液超声提取2~3次，提取液浓缩后用氯仿溶液萃取，收集萃取液回收试剂，浓缩液再用高速逆流色谱仪分离，紫外检测器在线监测，收集流分减压干燥即得。采用本发明制备毛兰素，产品纯度高，易于实现产业化放大。
文档编号C07C41/34GK103254045SQ20131019436
公开日2013年8月21日 申请日期2013年5月23日 优先权日2013年5月23日
发明者刘东锋, 杨成东 申请人:南京泽朗医药科技有限公司