一种改善睡眠的组合物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及保健品技术领域，尤其涉及一种改善睡眠的组合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 现代快节奏的生活和逐渐剧烈的各种竞争关系，使人们精神压力越来越大，精神 的长期紧张和一系列的不规律生活节奏，致使的失眠一直困扰着大多数人。据统计，我国的 失眠者为总人口的20%~30%，其中中老年人约占70%。长期失眠易引起心烦易乱、疲乏 无力，甚至以头痛、多梦、多汗、记忆力减退，还可引起一系列临床症状，并诱发一些心身性 疾病。因身体病痛而导致工作效率的降低，使失眠者心理压力增大，如此恶性循环，发生神 经衰弱、内分泌失调等，甚至向更加严重的方向发展至精神病。
[0003] 所以，治疗失眠的药物需求大增，治疗失眠的药物也以各种状态被发明和生产。然 而这些药物不仅效果大多得不到肯定，并且，安眠药在体内大多是经过肝脏、肾脏代谢的， 长期服用会增加肝肾的负担，有的还会引起肝脏肿大、肝区疼痛、黄疸、浮肿、蛋白尿、血尿 及恶心、腹胀、食欲不振、便秘等肝肾功能损害及肠胃反应。有的安眠药还会导致精神不振、 智力减退，血压下降等蓄积中毒症状，甚至引起呼吸循环功能障碍情况。因此，老年人应用 安定类药物更应小心。
[0004] 因此，提供副作用小，且改善睡眠效果显著的具有重要的意义。
【发明内容】
[0005] 有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种改善睡眠的组合物及其制备方 法，本发明提供的改善睡眠的组合物无副作用且改善睡眠的效果显著。
[0006] 本发明提供了一种改善睡眠的组合物，包括苹果干细胞冻干粉、褪黑素和维生素 B6〇
[0007] 其中，苹果干细胞不仅可以快速激活机体内休眠的干细胞，而且还能积极修复受 损的干细胞，刺激人类角质细胞和纤维母细胞的增生，增加皮肤弹性，具有抗衰老和美容生 发的奇效。苹果干细胞具有植物干细胞的特性：强大的抗氧化和抗衰老活性，能显著提高人 体免疫力和抗癌能力。
[0008] 褪黑素是一种内源性物质，分泌是有昼夜节律的，一般在凌晨2-3点达到高峰。夜 间褪黑素水平的高低直接影响到睡眠的质量。随着年龄的增长，体内自身分泌的褪黑素明 显下降，平均每10年降低10-15%，导致睡眠紊乱以及一系列功能失调，而褪黑素水平降 低、睡眠减少是人类脑衰老的重要标志之一。
[0009] 维生素^主要作用在人体的血液、肌肉、神经、皮肤等。主要功能有抗体的合成、 消化系统中胃酸的制造、脂肪与蛋白质利用、维持钠/钾平衡（稳定神经系统）以及改善睡 目民。缺乏维生素B6的通症，一般缺乏时会有食欲不振、食物利用率低、呕吐、失眠等症状。严 重缺乏者会有贫血、关节炎、小孩痉挛、头痛、等。
[0010] 本发明将苹果干细胞冻干粉、褪黑素和维生素B6进行复配后能够具有显著的改 善睡眠的功能，且无毒副作用。实验表明，本发明提供的组合物的改善睡眠的效果显著优于 单独使用各组分的作用，经小鼠急性毒性试验结果显示小鼠没有发现异常，没有发生中毒 或死亡现象。且本发明提供的组合物在0. 5g/kg的剂量下能够有效提高戊巴比妥钠阈下剂 量小鼠入睡发生率。
[0011] 在本发明的实施例中，苹果干细胞冻干粉、褪黑素和维生素B6的质量比为（20~ 60) :(0.5 ~I) :(0.5 ~1)〇
[0012] 在一些实施例中，苹果干细胞冻干粉、褪黑素和维生素B6的质量比为 20:0.5:0.5〇
[0013] 在一些实施例中，苹果干细胞冻干粉、褪黑素和维生素B6的质量比为20:0. 5:1。
[0014] 在一些实施例中，苹果干细胞冻干粉、褪黑素和维生素B6的质量比为20:1:0. 5。
[0015] 在一些实施例中，苹果干细胞冻干粉、褪黑素和维生素B6的质量比为20:1:1。
[0016] 在一些实施例中，苹果干细胞冻干粉、褪黑素和维生素 B6的质量比为 60:0. 5:0. 5〇
[0017] 在一些实施例中，苹果干细胞冻干粉、褪黑素和维生素B6的质量比为60:0. 5:1。
[0018] 在一些实施例中，苹果干细胞冻干粉、褪黑素和维生素B6的质量比为60:1:0. 5。
[0019] 在一些实施例中，苹果干细胞冻干粉、褪黑素和维生素B6的质量比为60:1:1。
[0020] 在一些实施例中，苹果干细胞冻干粉、褪黑素和维生素B6的质量比为 30:0. 7:0. 7〇
[0021] 本发明采用的苹果干细胞冻干粉可为市场购得也可采用本发明提供的方法制备， 其实施皆在本发明的保护范围之内。作为优选，苹果干细胞冻干粉以本发明提供的方法制 得，该方法以苹果新生枝条为原料，经诱导形成愈伤组织后增殖培养并扩大培养获得苹果 干细胞，再冻干后制得。该苹果干细胞冻干后直接用于本发明提供组合物的制备，该冻干粉 中黄酮和多酚类物质含量丰富。
[0022] 苹果干细胞冻干粉的制备方法包括以下步骤：
[0023] 步骤1 :苹果新生枝条杀菌、去除木质部和髓后，接种于诱导培养基，诱导培养获 得形成层细胞；
[0024] 步骤2 :所述形成层细胞经继代培养，接入增殖培养基，摇床培养获得单细胞；
[0025] 步骤3 :将所述单细胞接种于增殖培养基经扩大培养，获得苹果干细胞；
[0026] 步骤4 :将所述苹果干细胞反复冻融后冻干、粉碎，获得苹果干细胞冻干粉；
[0027] 所述诱导培养基为含有NAA、BA和水解酪蛋白的MS固体培养基；
[0028] 所述增殖培养基为含有2, 4-D、BA、水解酪蛋白和活性炭的MS液体培养基。
[0029] 在本发明的实施例中，杀菌包括以下步骤：
[0030] 步骤1 :将苹果新生枝条以水冲洗后，以浓度为10~1000mg/L的L-抗坏血酸溶 液浸泡；
[0031] 步骤2 :以体积分数为60 %~95 %的乙醇水溶液浸泡后以无菌水冲洗；
[0032] 步骤3 :以体积分数为10%~100%的过氧化氢水溶液浸泡后以无菌水冲洗。
[0033] 作为优选，苹果新生枝条的长度为10cm。
[0034] 作为优选，L-抗坏血酸的浓度为120mg/L。
[0035] 优选的，步骤1中所述浸泡的时间为Imin。
[0036] 作为优选，乙醇水溶液中乙醇的体积分数为75 %。
[0037] 优选的，步骤2中所述浸泡的时间为Imin。
[0038] 作为优选，步骤2中无菌水的体积为2L。
[0039] 作为优选，过氧化氢水溶液中过氧化氢的体积分数为30 %。
[0040] 优选的，步骤3中所述浸泡的时间为20min。
[0041 ] 优选的，步骤3中所述冲洗的时间为IOmin。
[0042] 以本发明提供的杀菌方法对苹果新生枝条进行杀菌能够充分的杀除苹果新生枝 条上所携带的真菌、细菌或病毒。以便保证苹果新生枝条在培养过程中不被干扰，从而保证 苹果新生枝条上的细胞更加快速的去分化。而实验表明，本发明提供的方法能够有效将苹 果新生枝条细胞去分化，经诱导和扩大培养，48天左右即可获得大量的苹果干细胞。
[0043] 在本发明实施例中，NAA、BA和水解酪蛋白的质量比为0.5 :2 :1。
[0044] 优选的，诱导培养基中NAA的浓度为0. 5mg/L。
[0045] 优选的，诱导培养基中BA的浓度为2. Omg/L。
[0046] 优选的，诱导培养基中水解酪蛋白的浓度为1.0 mg/L。
[0047] 作为优选，诱导培养基为固体培养基，其中琼