脂的质量分数为1%。
[0048] 作为优选，诱导培养基的pH值为6. 0。
[0049] 在本发明的实施例中，步骤1中所述的接种为，每g去除木质部和髓的苹果新生枝 条接种于IOcm 2的诱导培养基。
[0050] 在一些实施例中，诱导培养为暗培养；温度为25°C ;时间为10天。
[0051] 经诱导培养后，形成层组织为均一生长的平板状组织，而其他组织则为不规则的 聚集生长物。
[0052] 在一些实施例中，继代培养为暗培养；温度为25°C ;时间为10天。
[0053] 在本发明的实施例中，继代培养采用遇到培养基，每g形成层细胞接种于IOcm2的 诱导培养基。
[0054] 经10天的继代培养，形成层细胞形成愈伤组织，每IOcm2的诱导培养基上约有愈 伤组织20. 8g。
[0055] -些实施例中，增殖培养基中，2, 4-D、BA、水解酪蛋白和活性炭的质量比为 2:1:1:1〇
[0056] 优选的，增殖培养基中2, 4-D的浓度为2. Omg/L。
[0057] 优选的，增殖培养基中BA的浓度为1.0 mg/L。
[0058] 优选的，增殖培养基中水解酪蛋白的浓度为1.0 mg/L。
[0059] 优选的，增殖培养基中活性炭的浓度为I. 0mg/L。
[0060] 作为优选，增殖培养基的pH值为6. 0。
[0061] 在本发明的实施例中，每g愈伤组织接入20mL增殖培养基。
[0062] 作为优选，摇床培养时，增殖培养基中还添加经灭菌的直径为0. 5cm的玻璃珠。
[0063] 优选的，玻璃珠的添加量为100g/L增殖培养基。
[0064] 实施例中，培养采用三角瓶，1000 mL三角瓶中加入200mL增殖培养基。
[0065] 在本发明的实施例中，摇床培养的条件为每小时用20W的白炽灯照射10min。
[0066] 在一些实施例中，摇床培养的温度为25°C ;转速为120转/分钟；时间为14天。
[0067] 作为优选，在摇床培养7天后加入新鲜的增殖培养基。
[0068] 作为优选，加入新鲜的增殖培养基的体积为原增殖培养基的2倍。
[0069] 添加新鲜的增殖培养基后，其中细胞的密度为I X IOVml。
[0070] 采用本发明提供的方法进行摇床培养，愈伤组织成为单细胞悬液，细胞增殖速度 较快，用100目的不锈钢筛网过滤，除去细胞团、玻璃珠和残渣，获得细胞密度约〇. 5~ IXlOVmlo
[0071] 作为优选，步骤3中接种的密度为IX 104/ml。
[0072] 在一些实施例中，扩大培养具体为：于20L的生物反应器中添加 5L增殖培养基，培 养7天后添加增殖培养基至细胞浓度为I X 105/ml，再培养7天。
[0073] 本发明提供的改善睡眠组合物的制备方法为，将苹果干细胞冻干粉、褪黑素和维 生素B6混合，制得改善睡眠组合物。
[0074] 具体的，本发明提供的改善睡眠组合物的制备方法为：将苹果干细胞冻干粉在 4°C低温中粉碎，过100目筛；将褪黑素和维生素B6分别进行粉碎、过100目筛后与过筛后 的苹果干细胞冻干粉混合。
[0075] 本发明还提供了一种改善睡眠的保健品，包括本发明提供的改善睡眠的组合物。
[0076] 作为优选，本发明提供的改善睡眠的保健品还包括保健品中可接受的辅料。
[0077] 作为优选，本发明提供的抗辐射的保健品的剂型为片剂。
[0078] 本发明提供了一种改善睡眠的片剂，包括本发明提供的改善睡眠的组合物、崩解 剂、稀释剂、粘合剂、增稠剂和润滑剂。
[0079] 在一些实施例中，本发明提供的改善睡眠的片剂包括本发明提供的改善睡眠的组 合物、微晶纤维素、预胶化淀粉、交联羧甲基纤维素纳、聚维酮K30、二氧化硅和硬脂酸镁。
[0080] 在一些实施例中，本发明提供的改善睡眠的片剂中，本发明提供的改善睡眠的组 合物、微晶纤维素、预胶化淀粉、交联羧甲基纤维素纳、聚维酮K30、二氧化硅和硬脂酸镁的 质量比为（21 ~62) : (20 ~40) : (10 ~20) : (3 ~6) : (2 ~3) :0· 5 :1。
[0081] 作为优选，本发明提供的改善睡眠的片剂中，本发明提供的改善睡眠的组合物、微 晶纤维素、预胶化淀粉、交联羧甲基纤维素纳、聚维酮K30、二氧化硅和硬脂酸镁的质量比为 31. 4 :30 :15 :4 :2· 5 :0· 5 :1〇
[0082] 本发明提供的改善睡眠的片剂的制备方法为将本发明提供给的改善睡眠的组合 物、崩解剂和稀释剂混合后，加入粘合剂的水溶液制软材，经制粒、干燥后与增稠剂、润滑剂 混合，压片制得改善睡眠的片剂。
[0083] 具体的，该方法具体包括：
[0084] 步骤1 :将聚维酮K30配制成质量分数为5%~10%的水溶液，作为粘合剂；
[0085] 步骤2 :4°C，将本发明提供的改善睡眠的组合物、微晶纤维素、预胶化淀粉、交联 羧甲基纤维素钠混合，加入所述粘合剂制软材后制粒；
[0086] 步骤3 :放置12小时后干燥经整粒后与二氧化硅、硬脂酸镁混合后压片制得改善 睡眠的片剂。
[0087] 本发明将苹果干细胞冻干粉、褪黑素和维生素 B6进行复配后能够具有显著的改 善睡眠的功能，且无毒副作用。实验表明，本发明提供的组合物的改善睡眠的效果显著优于 单独使用各组分的作用，经小鼠急性毒性试验结果显示小鼠没有发现异常，没有发生中毒 或死亡现象。且本发明提供的组合物在0. 5g/kg的剂量下能够有效提高戊巴比妥钠阈下剂 量小鼠入睡发生率。
【具体实施方式】
[0088] 本发明提供了一种改善睡眠的组合物及其制备方法，本领域技术人员可以借鉴本 文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术 人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳 实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
【发明内容】
、精神和范围内对本文的方法和 应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
[0089] 本发明采用的仪器皆为普通市售品，皆可于市场购得。
[0090] 下面结合实施例，进一步阐述本发明：
[0091] 实施例1苹果干细胞冻干粉的制备
[0092] 1、培养基的配方：
[0093] L 1 诱导培养基：MS 固体培养基 +ΝΑΑ0. 5mg/L+BA 2mg/L+CH lmg/L，pH 值为 6. 0 ;
[0094] I. 2 增殖培养基：MS 液体培养基 +2, 4-D 2. Omg/L+BA 1.0 mg/L+CHl. Omg/L+AC 1.〇11^/1，？!1值为6.0;
[0095] 2、苹果枝条的杀菌
[0096] 选择无化肥农药污染、绿色种植的苹果树，按照一定的评判标准挑选10支IOcm长 新生枝条；用无菌水2L洗涤新生枝条表面附着物；将新生枝条放进120mg/L L-抗坏血酸中 浸泡1分钟；将新生枝条放入75%的乙醇溶液中杀菌1分钟，用2L无菌水冲洗干净；再放 入30 %的过氧化氢溶液中杀菌20分钟，并用无菌水冲洗10分钟。
[0097] 3、形成层组织的诱导
[0098] 将灭菌的苹果新生枝条用接种刀剥离形成层、韧皮部、皮质和表皮等组织，丢弃木 质部和髓；将获得的组织接种至新鲜的固体培养基中，以每Ig组织接种IOcm 2固体培养基 的密度进行接种，在受控的暗室内25°C连续培养10