一种黄芪多糖钙的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药领域，具体涉及一种黄芪多糖钙的制备方法。
【背景技术】
[0002] 黄苗多糖（Astragaluspolysaccharide，APS)是中药黄苗的主要活性成分之一， 具有增强免疫、抗病毒病、抗脂质过氧化损伤、抗肿瘤等作用。目前，市场上黄芪多糖多靠提 取而来，有水提、酶提、微波提取方法等，但存在提取率低、稳定性差、纯化难度大、操作步骤 复杂、能耗高或周期长等问题。
[0003] 钙是一种二价阳离子，是人体内含量最多的矿物元素之一。在构成人体的所有 元素中，它仅次于碳、氢、氧、氮排列于第五位。钙在人体中的总量达到1300g，约为体重的 1. 5-2. 0%。其中99%的钙存在于骨骼和牙齿中，而血液及其它体液组织中的钙仅占总量的 1%。钙作为一种极其重要的常量元素，分布于全身各处，在机体的物质代谢及生命的维持过 程中发挥着重大作用。钙是骨骼和牙齿构成的重要组分。它主要以钙基磷灰石结晶的形式 构成骨的无机部分，维持骨骼和牙齿坚硬的组织结构。钙形成的无机成分与骨中其它有机 成分如胶原蛋白、粘多糖、弹性蛋白等共同结合在一起而形成骨骼，从而使机体能够抵抗外 界机械压力及支持身体各组织器官，以维持机体的正常生命活动。
[0004] 妈是动物生命活动所必需的元素，是动物机体新陈代谢的源泉，动物的生命活动 如神经物质的传递、心脏搏动、肌肉收缩等等都在利用、消耗钙侧。所以，动物体内的钙含量 虽少，但在维持机体的正常机能中，却起着非常重要的作用。细胞外液中钙的作用有：（1) 降低神经肌肉的兴奋性：(2)降低毛细血管和细胞膜的通透性；（3)维持正常的肌肉收缩： (4) 维持神经冲动的正常传导；(5)参与正常的血液凝固。此外，已知钙激活许多酶，其中有 些与上述机能有关，有些还说明钙还有其他重要的作用。近年来，越来越多的资料表明钙是 重要的代谢调节物。
[0005] 骨质疏松症（ostcoporosissyndrome)是一种与年龄有关，原因不明的非特异性 骨代谢障碍疾病。主要导致易骨折甚至自发性骨折，使病人被迫卧床，生活不能自理，继发 栓塞性疾病和由于生理心理的痛苦引发心脑血管疾病，还有造成自伤自残性结果的可能。 其生化特点为：骨骼的化学成分正常，单位体积中骨矿含量减少；形态学特点为：骨密度下 降；组织学特点为：单位体积内骨组织量减少，骨皮质变薄，海绵骨的骨小梁数量和体积均 减低，髓腔增宽，骨骼承受力的负荷能力下降，除临床上发生疼痛外，四肢和脊柱因承重而 继发畸形甚至骨折。原发性骨质疏松症常发生于45岁以上年龄组，美国估计有患者20万 人，45岁以上因本症造成自发性骨折者每年约130万人，治疗耗费约61亿美元.我国上海 调查资料证明，我国骨质疏松发病率男性为8. 7%，女性为24. 5%。1997年我国骨科专家提供 的研宄结果表明，我国60岁以上的老年人群中约80%患有不同程度的骨质疏松，女性患病 是男性的6倍，我国目前估计现有骨质疏松症患者约8400余万人。如果不采取措施加以控 制，按目前的条件和环境状况，随着老龄人口的增加，到2010年估计患病人数将达1亿，到 2050年将超过2亿，因此，防治骨质疏松症己成为当今国际上的研宄热点。业已证明，黄芪 多糖钙具有防治骨质疏松症和提高免疫、保护大脑神经的作用。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是克服现有方法制备的黄芪多糖钙得率低的问题，提供一种提高得 率的黄芪多糖钙的制备方法。
[0007] 本发明实现上述目的所采用的技术方案如下： 一种黄芪多糖钙的制备方法，包括如下步骤： (1) 黄芪药材用浓度为5wt%、pH=9的乙醇提取，过滤，滤液浓缩至无醇后，烘干得到黄 芪多糖提取物； (2) 步骤（1)得到的黄芪多糖提取物用水溶解，再加入氯化钙溶液，调节pH至9-11，于 60-90°C反应 6-48h; (3) 从步骤（2)的反应液中纯化得到黄芪多糖钙。
[0008] 进一步，步骤（1)提取时的料液比为1:10 (g/mL)，温度为90°C，提取2次，每次提 取时间90min。
[0009] 进一步，步骤（2)中，氯化钙与黄芪多糖提取物的质量比为0.4:1，反应温度为 80°C，时间 24 小时，pH=10。
[0010] 进一步，所述纯化过程为：反应液经浓缩后，加入Na2C03溶液进行沉淀，除去沉淀 物后，装入透析袋透析除去游离钙，然后加入乙醇进行醇沉，醇沉物经洗涤、干燥即得到黄 芪多糖钙。
【附图说明】
[0011] 图1黄芪多糖钙的红外光谱。
[0012] 图2黄芪多糖的红外光谱。
[0013]图3黄芪多糖钙的紫外光谱。
[0014]图4黄芪多糖的紫外光谱。
【具体实施方式】
[0015] 以下结合实施例对本发明做进一步详细说明。
[0016] 实施例1 1材料与试剂黄芪：购于黄河药材市场，经鉴定为正品。所用化学试剂均为市购分析 纯。
[0017] 2仪器：尼高力红外光谱仪Nicolet5700;透析袋（Thermo7000MWC0USA)，磁 力加热搅拌器（78-1，江苏省金坛市医疗仪器厂），紫外分光光度计（UV-920,北京瑞 丽分析仪器公司），离心机（北京瑞丽分析仪器公司），转蒸发仪（RE52-86A上海亚荣 生化仪器厂），真空干燥箱（DZF-6020型，上海博讯实业有限公司医疗设备厂)，电子天平 (AB104-N，MettlerToledoGroup)，数显水浴锅（HH-5,江苏省金坛市医疗仪器厂）。
[0018] 3黄芪多糖的提取： 准确称取10. 〇g黄苗，加入l〇〇mL乙醇（5wt%)，用氢氧化钠（10%)调节pH至9,在90°C条件下提取90min，提取2次，过滤后合并提取液，浓缩至无醇后，烘干得到黄芪多糖提取 物，质量为2. 8897g。准确称量提取物10.Omg，溶解于5mL蒸馏水中，分别采用硫酸-蒽酮 比色定糖法和DNS比色定糖法测定总糖和单糖含量，分别为6. 766 5mg和0.138mg，计算 得多糖含量为6. 628 5mg，多糖提取率为19. 15%。
[0019] 在同样的条件下用水替代上述的乙醇（5wt%)，相应地多糖提取率为15%。
[0020] 4黄芪多糖钙的合成 取lg上述干燥的黄芪多糖提取物溶解于100mL蒸馏水中，加入5-25wt%的氯化钙溶 液1-2. 5mL，将反应液在室温下搅拌均勾，同时滴入2mol/LNaOH使pH保持在9-11之间。 再将反应温度升至60-90°C，反应6-48h后，自然冷却到室温，反应液在旋转蒸发仪上浓缩 至2. 5mL，用G4玻璃砂芯漏斗过滤，除去沉淀，向清液中加入5mL2mol/LNa2C03溶液，有 大量白色沉淀产生，离心直到无沉淀产生，上清液装入透析袋透析24h，除去游离钙，向上述 溶液中加入2倍体积的无水乙醇，产生沉淀，静置24h，离心得粗多糖钙络合物。粗产物分 别用甲醇、丙酮、乙醚洗涤，然后干燥，即得到黄芪多糖钙。
[0022] 由黄芪多糖及其钙盐的红外图谱比较，由于钙盐有Ca-0键，所以对照发现 3670CHT1处有新峰。而且在2890cnT1及880cnT1处差异显著，故确实为新盐生成。
[0023] 对照图3、4紫外图谱可以看出由于钙盐的生成，使得其吸收峰向后移动（295nm 到 315nm)〇
【主权项】
1. 一种黄芪多糖钙的制备方法，包括如下步骤： (1) 黄芪药材用浓度为5wt%、pH=9的乙醇提取，过滤，滤液浓缩至无醇后，烘干得到黄 芪多糖提取物； (2) 步骤（1)得到的黄芪多糖提取物用水溶解，再加入氯化钙溶液，调节pH至9-11，于 60-90 °C 反应 6-48h ; (3) 从步骤（2)的反应液中纯化得到黄芪多糖钙。2. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1)提取时的料液比为1 :10,温 度为90°C，提取2次。3. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（2)中，氯化钙与黄芪多糖提取 物的质量比为0.4 :1，反应温度为80°C，时间24小时，pH=10。4. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述纯化过程为：反应液经浓缩后， 加入Na2CO3溶液进行沉淀，除去沉淀物后，装入透析袋透析除去游离钙，然后加入乙醇进行 醇沉，醇沉物经洗涤、干燥即得到黄芪多糖钙。
【专利摘要】本发明公开一种黄芪多糖钙的制备方法。该制备方法包括如下步骤：（1）黄芪药材用浓度为5wt%、pH=9的乙醇提取，过滤，滤液浓缩至无醇后，烘干得到黄芪多糖提取物；（2）步骤（1）得到的黄芪多糖提取物用水溶解，再加入氯化钙溶液，调节pH至9-11，于60-90℃反应6-48h；（3）从步骤（2）的反应液中纯化得到黄芪多糖钙。采用本发明方法能明显提高黄芪多糖钙的得率，适于工业化应用。
【IPC分类】A61P25/00, A61K31/715, A61K36/481, A61P37/04, A61P19/10, C08B37/00
【公开号】CN104940277
【申请号】CN201510335542
【发明人】梁剑平, 刘宇, 陶蕾, 郝宝成, 王学红, 尚若锋, 杨珍, 郭文柱, 郭志廷, 赵凤舞, 贾忠, 陈虹
【申请人】中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2015年6月17日