长春西汀在制备抗肺纤维化药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及长春西汀在制备抗肺纤维化药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 肺纤维化（pulmonary fibrosis, PF)是一种原因不明、以弥漫性肺泡炎和肺泡结 构紊乱最终导致肺间质纤维化为特征的疾病。是许多肺间质疾病的最终结局。主要病理 特点为肺间质和肺泡腔内纤维化和炎细胞浸润混合存在。就其解剖部位来说，虽发生在肺 间质系统，但影响常常肺泡及支气管。就其病因而言，它是炎症、感染、变态反应、免疫、肉芽 月中、肿瘤、增生、阻塞等多种因素所致肺疾病。目前的治疗药物以糖皮质激素、免疫抑制剂、 免疫调节剂为主，但尚无特效药。
[0003] 长春西汀（别名：卡兰，长春西丁，阿扑长春胺酸乙酯，长春乙酯；外文名： Vinpocetine, Calan)是从夹竹桃科小蔓长春花中提取的Π 引噪生物碱长春胺经结构改造所 得衍生物，能抑制磷酸二酯酶活性、增加血管平滑肌松弛信使C-GMP的作用，是一种优良的 脑血管疾病药物。
[0004] 长春西汀有增加红细胞变形能力，能提高血液流动性并改善微循环，降低血黏度 及抑制血小板凝聚作用，并具有增进和改善大脑氧的供给，能选择性的增加脑部血流量，改 善血液流动性和微循环促进脑组织摄取葡萄糖、增加脑耗氧量、改善脑部新陈代谢。
[0005]目前长春西汀临床用于治疗由于大脑血液循环障碍而引起的精神性或神经性症 状，如因脑栓塞、脑出血后遗症、脑动脉硬化症等引起的眩晕、头沉、头昏、头痛、记忆力减 退、行动障碍、语言障碍等。此外，还可应用于高血压脑病、脑血管痉挛、脑动脉内膜炎、进行 性脑血管硬化。在眼科方面，用于视网膜和脉络膜血管硬化及血管痉挛。在耳科方面，用于 治疗老年性耳聋、眩晕等。
[0006] 长春西汀的药理作用复杂多样，有的还未得到很好的证实，作用机制也还不明确。 已有报道其具有脑血管扩张和加强代谢活性的作用。目前还没有一个作用机制能解释该药 在临床应用中所有的好处。体内试验表明，在正常情况下或动脉缺氧时，长春西汀能增加脑 部血流，而对外周血流没有明显的影响，因此说明长春西汀具有选择性血管扩张作用。但 是，这种选择性作用在离体试验中并未得到证实，其他研究者的体内试验也没有证实这种 脑血管扩张效应。在动物研究中报道长春西汀具有脑代谢刺激活性，在缺氧和三烷基锡引 起脑水肿时能延长生存率。抗缺氧的活性也在室息性缺氧和低比重性或贫血性缺氧模型中 有报道。
【发明内容】
[0007] 本发明的技术目的是提供一种抗肺纤维化的药物。
[0008] 本发明采用的技术方案是：
[0009] 长春西汀在制备抗肺纤维化药物中的应用。
[0010] 本发明经过研究表明，长春西汀有对抗博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠模型的肺纤 维化病作用，能够预防和治疗上述模型的肺纤维化，因此可将长春西汀用于制备抗肺纤维 化药物。
[0011] 本发明提供了一种长春西汀治疗肺纤维化疾病的应用，所述应用的方法一般是， 将长春西汀用冰醋酸溶解，再用生理盐水稀释后注射给药；或将长春西汀与其他人体可接 受的药用辅料制成片剂、胶囊等口服剂型给药，用于治疗肺纤维化。
[0012] 本发明采用博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠模型，研究了不同浓度长春西汀的作 用，发现长春西汀具有明显的治疗肺纤维化的作用，对肺纤维化动物模型胶原的生成有明 显的抑制作用。
[0013] 通常推荐的剂量用量是：l_10mg/kg。
[0014] 本发明经过研究表明，长春西汀对肺纤维化动物模型TGFP有明显的抑制作用， 可用于制备抗肺纤维化药物。本发明开拓了长春西汀有利于肺纤维化机制及治疗药物的研 究，为新的治疗肺纤维化的药物提供了实验基础。
【附图说明】
[0015] 图1模型组、对照组、预防组对博莱霉素诱导肺纤维化损伤的Masson染色照片， 20X镜拍照，标尺=10 μ m，图1中，A组：BLM模型组；B组：正常对照组；C组：DEX阳性对照 组；D组：长春西汀预防低剂量lmg/kg组；E:组长春西汀预防中剂量3mg/kg组；F组：长 春西汀预防高剂量10mg/kg组。
[0016] 图2模型组、对照组、治疗组对博莱霉素诱导肺纤维化损伤的Masson染色照片， 20X镜拍照，标尺=10 μ m，图2中，A组：BLM模型组；B组：正常对照组；C组：DEX阳性对照 组；D组：长春西汀治疗低剂量lmg/kg组；E:组长春西汀治疗中剂量3mg/kg组；F组：长 春西汀治疗高剂量10mg/kg组。
[0017] 图3长春西汀预防组和治疗组对肺组织胶原含量的影响柱状图。数据以均值 土SEM表示，η = 6-8, *表示P〈0. 05, ***表示P〈0. 001，均是与BLM模型组进行比较。
[0018] 图4长春西汀预防组和治疗组对肺组织MPO活性的影响柱状图，数据以均值土 SEM 表示，η = 6-8, *表示P〈0. 05, ***表示P〈0. 001，均与BLM模型组进行比较。
[0019] 图5长春西汀预防组和治疗组的ashcroft评分柱状图。数据以均值土SEM表示， η = 6-8, *P〈0. 05,均与BLM模型组进行比较。
【具体实施方式】
[0020] 下面以具体实验来对本发明的技术方案进行说明，但本发明的保护范围不限于 此。
[0021] 实施例1
[0022] 1材料与方法
[0023] I. 1实验动物、药品、试剂和仪器
[0024] 药品：
[0025] 长春西汀（sigma, V6383)批号 Lot Il8M68O3V ;辅料为：（0· 25_2· 5% )乙酸、生 理盐水。博莱霉素（简称BLM):日本化药株式会社，批号：410102 ;地塞米松磷酸钠注射液 (浙江省仙琚制药股份公司）；
[0026] 动物：
[0027] C57小鼠，雄性，8周，体重在20_22g，由浙江大学动物实验中心提供，动物合格证 号：2007000526749。动物饲养及操作过程均遵守浙江大学《实验动物管理条例》要求。
[0028] 试剂：
[0029] 胶原测定试剂盒：Biocolor ;小鼠 TGF- β IELISA试剂盒：R&D公司；MPO测定试剂： sigma公司；焚光定量PCR仪CFX96型：Bio-Rad ;垂直电泳槽、电泳仪：Biorad公司。
[0030] 1. 2模型建立与实验分组
[0031] 根据本实验室建立的小鼠肺纤维化造模方法，对小鼠进行4 %水合氯醛麻醉 (280mg/kg)，然后有创气道给药法滴入生理盐水配制的博莱霉素（2. 5g/L)，剂量为2. 5mg/ kg，记为模型组（简称BLM)。空白对照组滴入同等体积的生理盐水，记为对照组（简称 Con)。地塞米松组腹腔注射：2mg/kg，记为阳性对照组（简称Dex)。
[0032] 长春西汀溶液配制方法：溶液配制方法：称量IOOmg长春西汀，加入1ml冰醋酸溶 解，作为原液，使用时取原液进行稀释，取25ul原液，加入975ul生理盐水稀释39倍，得到 高剂量药物（1)，取（l)300ul，加入700ul生理盐水，得到中剂量药物（2);取（l)lOOul，加 入900ul生理盐水，得到低剂量药物（3)。腹腔注射给药剂量分别为100ul/25g体重小鼠： 低剂量lmg/kg、中剂量3mg/kg、高剂量10mg/kg。冰醋酸的终浓度分别是0. 25%、0. 75%、 2. 5%。采用腹腔注射用药。
[0033] 实验方案：预防组采用了 BLM用药后1-8天早期连续给药一周方案，希望能明确其 对早期炎症的作用。治疗组采用了 BLM用药后14-21天后期连续给药一周方案，希望能明 确对后期纤维化进展的影响。预防组14天处理、治疗组21天处理，进行支气管肺泡灌洗及 留取肺组织进行病理学、蛋白及分子生物学检测等。
[0034] 1