化指标；另取一部分病变部位的结肠组织，抽提蛋白，采用WB检测册-1蛋白的表达。 阳0川 3.结果
[0032] 3. 1大体观察结果正常对照组大鼠结肠粘膜皱葉纹理清晰，未见充血、水肿及溃 瘍。模型对照组大鼠结肠肠管变粗，肠腔局部膨胀增大，肠壁外周粘连严重，肠粘膜坏死、溃 瘍形成，病变表面有黑或黄色膜状物附着，其附近粘膜充血、水肿明显；Hyp低剂量组，结肠 粘膜溃瘍面积缩小，其旁粘膜充血、水肿明显；Hyp中、高剂量组，结肠粘膜溃瘍面积明显缩 小，偶有充血、水肿，肠壁粘连减轻，病理性膨胀和肠段缩短减轻。
[0033] 3. 2Hyp对大鼠结肠湿重指数的影响正常对照组大鼠结肠湿重指数（全结肠湿重 /结肠全长）最小。模型对照组大鼠结肠与周围的组织器官和脂肪粘连，导致结肠湿重增 加，因此结肠湿重指数显著增加，与正常对照组比较差异具有统计学意义（P<〇. 01)。各给药 组与模型对照组比较结肠湿重指数均明显降低，差异具有统计学意义（P<〇. 05)，见表1。
[0034] 表1.Hyp对TNBS-乙醇诱导的大鼠溃瘍性结肠炎扣C)结肠湿重指数变化的影响 (-化'）
[0035]
[0037] 与正常对照组比较：*冲<0. 01 ;与模型对照组比较：#P<0. 05,> <0. 01 ;
[0038] 3. 3Hyp降低溃瘍性结肠炎大鼠结肠组织中MP0活性由实验结果可知，与正常对 照组比较，模型对照组结肠组织中MPO活性显著升高（P<0. 01);各给药组结肠组织中MPO活性较模型对照组明显降低（P<〇. 01)，见表2。
[0039] 3. 4Hyp降低溃瘍性结肠炎大鼠结肠组织中MDA含量
[0040] 由实验结果可知，正常对照组结肠组织中MDA(丙二醒）含量最低；与正常对照组 比较，模型对照组大鼠结肠组织中MDA含量显著升高（P<0.01);与模型对照组比较，各给药 组结肠组织中MDA含量显著降低（P<0. 05)，见表2。
[0041] 3. 5Hyp增加溃瘍性结肠炎大鼠结肠组织中SOD活力与G甜含量
[0042] 由实验结果可知，与正常对照组比较，模型对照组结肠组织中SOD活力与G甜含量 显著下降（p<0. 01);与模型对照组比较，Hyp各剂量组结肠组织中G甜含量和SOD活力随剂 量增加呈显著升高趋势（P<〇. 05)，见表2。 阳0创表2.金丝桃巧（Hyp)对S硝基苯横酸讯旭巧诱导的大鼠溃瘍性结肠炎扣C)结 肠组织生化指标的影响（；±s)
[0044]
W45] 与正常对照组比较：*冲< 0. 05 ;与模型对照组比较：#P< 0. 05, < 0. 01
[0046] 3. 6Hyp提高溃瘍性结肠炎大鼠结肠组织中册-1蛋白的表达
[0047] 由WB实验结果可知，与正常对照组比较，模型对照组结肠组织中册-1蛋白的表达 明显降低；与模型对照组比较，Hyp各剂量组结肠组织中册-1蛋白的表达呈剂量依赖性的 显著升高，见图1。 阳04引结论
[0049] 溃瘍性结肠炎是一种原因不明的非特异性的炎症性肠病，病变主要限于结肠粘膜 及粘膜下层，且W溃瘍和炎性细胞浸润为主。因此对UC的评价主要集中在溃瘍和炎症。TNBS(l〇〇mg/kg)造模后，在急性期出现大量炎性细胞浸润，W中性粒细胞为主，中性粒细胞 被认为能引起组织损伤和粘膜功能障碍。当中性粒细胞向结肠腔内移行时，它们释放大量 毒性介质，破坏粘膜屏障。MP0是中性粒细胞中含量较高的一种酶（在单核和巨隧细胞中也 有少量存在），其含量的增高可W反映中性粒细胞在某一组织中浸润，间接反映炎症在组织 中的存在。因此，MP0被作为评价肠道炎症严重程度的指标。本实验中正常对照组大鼠结 肠组织MP0活性在各组中最低，模型对照组MP0活性在各组中最高，说明了模型对照组中性 粒细胞浸润及肠道炎症损伤最严重；与模型对照组比较，Hyp低、中、高剂量组结肠组织中 的MP0活性明显降低，表明GSPE能够减轻中性粒细胞浸润程度，缓解炎症。同时，上述试验 结果可知，模型对照组MDA值显著高于正常对照组，而超氧化物歧化酶SOD和册-1表达显 著低于正常对照组，说明脂质过氧化作用增强，组织抗氧化能力下降，从而导致氧自由基堆 积，氧自由基损伤生物膜；而Hyp各给药组MDA含量明显下降，SOD和册-1表达显著升高， 表明Hyp在治疗溃瘍性结肠炎损伤中的抗炎作用可能与减轻脂质过氧化反应，清除氧自由 基、增强内源性抗氧化酶活性密切相关。
[0050] W上结果表明，金丝桃巧对溃瘍性结肠炎有良好的活性，可用于治疗溃瘍性结肠 炎，其日剂量在Img-lOOOmg。可片剂、胶囊等固体口服制剂的方式给药，也可非肠 道给药方式给药。
[0051] 实施例2金丝桃巧片剂的制备
[0052] 金丝桃巧200g，加淀粉200g，微晶纤维素60g，硬脂酸酸儀2g，混匀，制粒，干燥，过 筛后压片（1000片），即得金丝桃巧的片剂。
[0053] 实施例3金丝桃巧胶囊剂的制备
[0054] 金丝桃巧300g，加淀粉300g，硬脂酸酸儀2g，混匀，制粒，干燥，过筛后装胶囊 (1000粒），即得金丝桃巧的胶囊剂。
[0055] 实施例4金丝桃巧颗粒剂的制备
[0056] 金丝桃巧lOOg，加薦糖粉500g，糊精250g，用沸腾干燥制粒机喷雾制粒，整粒，即 得金丝桃巧的颗粒剂。
[0057] 实施例5金丝桃巧注射液的制备
[0058] 金丝桃巧lOg，溶于适量注射用水中，充分揽拌溶解，定容至1000ml，混匀，微精 滤，灌封，或灌装烙封，l〇(TC流通蒸汽灭菌30分钟，即即得金丝桃巧的注射液。
[0059] 实施例6金丝桃巧急性毒性试验 W60] 选取体重18~22g的小鼠40只，雌雄各半，按每天2次灌胃给予小鼠金丝桃巧 5000mg/kg，连续给药7天，观察小鼠有无急性毒性反应。 阳〇6U 结果显示，每天2次给予小鼠金丝桃巧5000mg/kg，连续7天，未见明显急性毒性反 应。
【主权项】
1. 金丝桃苷在制备治疗结肠炎药物中的用途。2. 如权利要求1所述的用途，其特征在于所述结肠炎为溃疡性结肠炎。3. 如权利要求1所述的用途，其特征在于：所述药物含有I-1000 mg的金丝桃苷和药用 辅料。4. 如权利要求3所述的用途，其特征在于：所述药物为药学上可接受的任何一种剂型。5. 如权利要求4所述的用途，所述剂型包括片剂、胶囊、颗粒剂、口服液或注射剂。
【专利摘要】本发明公开一种金丝桃苷治疗溃疡性结肠炎的用途。金丝桃苷可使结肠组织中的MPO活性明显降低。能够减轻中性粒细胞浸润程度，缓解炎症。同时，金丝桃苷可明显缩小结肠粘膜溃疡面积，减轻结肠充血、水肿，肠壁粘连。
【IPC分类】A61K31/7048, A61P1/04, A61P1/00
【公开号】CN105147712
【申请号】CN201510654152
【发明人】陈剑鸿, 蔡永青, 李小丽, 辛海燕, 王显凤, 江山
【申请人】中国人民解放军第三军医大学第三附属医院
【公开日】2015年12月16日
【申请日】2015年10月10日