1%TFA水溶液稀释后通过OasisHLB柱；1SF-NFP吸附于OasisHLB柱上，接着用1mL水 淋洗HLB柱；淋洗后的OasisHLB柱用氮气以80mL/min的速度吹干；1SF-NFP用8mL的无 水乙醚从OasisHLB柱上洗下，并通过自制的硫酸钠柱干燥；将1SF-NFP收集在新的反应瓶 中，在室温下用氮气吹干乙醚，得到干燥的1SF-NFP，检测其放化纯度>99%。
[0026] 4)向干燥的含1SF-NFP的反应瓶中加入300yg的精氨酸乙酯盐酸盐，200yL 的DMS0和20yL的DIPEA，在40°C保持10min。用0.7mL5%醋酸水溶液淬灭反应并 加10mL水进行稀释，稀释液通过OasisHLB柱，并用2mL的水淋洗OasisHLB柱。用2 mL乙醇洗脱吸附在OasisHLB柱上的产物，用氮气吹干乙醇，制备得到的A(2-lsF-氟丙酰 基）精氨酸乙酯。进一步用50yL浓度为lmol/L的NaOH在室温下对其进行水解10 min后，用50yL浓度为lmol/L的HC1中和，制备得到的A(2-1SF-氟丙酰基）-Z-精氨酸 溶液，用生理盐水稀释并通过0.22ym无菌滤膜后使用。
[0027] 对标准品FP-Arg与lsF_FP_Arg进行鉴定色谱分析，见图4。
[0028] 对荷瘤裸鼠（NCI-H1299)进行PET/CT显像实验 材料：人非小细胞肺癌NCI-H1299荷瘤裸鼠；其中人非小细胞肺癌细胞株购自中科院 上海细胞所，本实验室通过体外细胞培养、胰酶处理后，于裸鼠前腋皮下接种，得到人非小 细胞肺癌NCI-H1299荷瘤裸鼠模型。
[0029]显像剂：lsF-FP-Arg以及对比用 1SF-FDG。
[0030] 荷瘤裸鼠腹腔注射0. 2ml5%水合氯醛，显像剂包括lsF-FP-Arg和1SF-FDG分别溶 解在适当的生理盐水中，向荷瘤裸鼠尾静脉注射3. 7-7. 4MBq(0. 1~0. 2mCi)的显像剂，将 裸鼠置于PET上，分别于30min、60min、90min、120mim对荷瘤裸鼠（NCI-H1299)进行PET/ CT的全身扫描，PET图像和CT图像自行融合，记录横断面、冠状面、全身三维断层图像、MIP (maxmium-intensityprojection)图像以及SUV值。通过观察肿瘤与其他组织放射性吸收 的强度，评价显像剂的效果。结果见图5,其中红色箭头是肿瘤的位置。
[0031] 从图5显像结果可知，显像剂，(2-lsF_氟丙酰基）-Z-精氨酸主要集中在肺肿 瘤处，随着时间的推移(包括30min、60min、90min、120min)，肿瘤中的放射活性比较好，肾 脏和肝脏中对显像剂有中度摄取，而在脑部与肌肉的摄取比较低；通过对显影图的分析得 知：显影剂lsF-FP-Arg在肿瘤与肌肉的放射活性比值大于2倍，最高达2. 71倍；而显影剂 lsF-FP-Arg在肿瘤与脑部的放射活性比值在2. 8~3. 1倍之间。显像剂lsF-FP-Arg随着时 间的增长，与肿瘤部位的氨基酸受体结合的越来越多，其中90min~120min时，由于药物在 肾脏和肝脏中被大部分代谢，显像剂lsF-FP-Arg在肿瘤的浓聚最高。
[0032] 从显影图5中还可以看出，显影剂f(2-18F_氣丙酰基）-Z-精氨酸在血、心、肺、 肝、胰、肾、脾、骨的分布较少，随着时间的推移，分布越来越少，基本可以忽略不计，显示出 良好的特异性和稳定性。
[0033] 而图5中对人非小细胞肺癌NCI-H1299荷瘤裸鼠注射1SF-FDG后60min的显像图 中，可以看出显像剂1SF-FDG主要蓄积在肿瘤和脑部等位置，其中肿瘤与脑部的放射活性比 值约为0. 96倍，显影剂1SF-FDG在脑部的摄取会影响其对肿瘤摄取的区分，造成假阳性。
[0034] 图6为lsF-FP-Arg在荷瘤裸鼠（NCI-H1299)各部分放射性分析柱状图，是对图5 结果的进一步说明，其中A部分是PET/CT显像实验中显像剂lsF-FP-Arg随着时间的推移在 人非小细胞肺癌NCI-H1299荷瘤裸鼠中的肿瘤/肌肉/大脑/肝脏中的放射活性（％ID/g) 分析，B部分为人非小细胞肺癌NCI-H1299荷瘤裸鼠中上述几部分显影剂放射性的比值。
[0035] 本发明用辅助基团标记精氨酸制备得到，(2-lsF_氟丙酰基）-Z-精氨酸，该显像 剂在人非小细胞肺癌荷瘤裸鼠模型中对非小细胞肺癌具有较好的靶向性，脑部与肌肉的摄 取比较低，具有良好的安全性和稳定性。因此本发明的lsF-FP-Arg显像剂未来可能成为较 好的肺癌显像剂。此外，因为lsF-FP-Arg显像剂在荷瘤裸鼠（NCI-H1299)大脑中的摄取不 高，未来有可能成为较好的特异性脑癌显影剂，以及肝脏和肾脏外各种其他癌症的显像剂。
[0036] 对荷瘤裸鼠（SPC-A-1)进行PET/CT显像实验 材料：人肺腺癌SPC-A-1荷瘤裸鼠；其中人肺腺癌细胞株购自中科院上海细胞所，本实 验室通过体外细胞培养、胰酶处理后，于裸鼠前腋皮下接种，得到人肺腺癌SPC-A-1荷瘤裸 鼠模型。
[0037]显像剂：lsF-FP-Arg以及对比用 1SF-FDG。
[0038] 荷瘤裸鼠腹腔注射0. 2ml5%水合氯醛，显像剂包括lsF-FP-Arg和1SF-FDG分别 溶解在适当的生理盐水中，向荷瘤裸鼠尾静脉注射3. 7-7. 4MBq(0. 1~0. 2mCi)的显像 剂，将裸鼠置于PET上，分别于30min、60min、90min、120mim对荷瘤裸鼠（SPC-A-1)进行 PET-CT的全身扫描，PET图像和CT图像自行融合，记录横断面、冠状面、全身三维断层图像、 MIP(maxmium-intensityprojection)图像以及SUV值。通过观察肿瘤与其他组织放射性 吸收的强度，评价显像剂的效果。结果见图7,其中红色箭头是肿瘤的位置。
[0039] 从图7显像结果可知，显像剂在SPC-A-1肿瘤的显像随着时间的推移（30min、 6〇1^11、9〇111111、12〇111111)，分别为2.69、3.61、4.23、4.76%10/^，也就是说随着时间的增长， 显像剂与肿瘤部位的氨基酸受体结合的越来越多，其中90min~120min时，由于药物在肾 脏和肝脏中被大部分代谢，显像剂lsF-FP-Arg在肿瘤的浓聚最高。此时，肿瘤与肌肉的放 射活性比值大于2倍（2.31~2.63倍)，肿瘤与脑部的放射活性比值约为2倍（1.7~2. 2 倍)。
[0040] 图7中对人肺腺癌SPC-A-1荷瘤裸鼠注射1SF-FDG后60min的显像图中，可以看出 显像剂1SF-FDG主要蓄积在肿瘤和脑部等位置，其中肿瘤与脑部的放射活性比值约为0. 67 倍，显影剂1SF-FDG在脑部的摄取会影响其对肿瘤摄取的区分，造成假阳性。
[0041] 本发明用辅助基团标记精氨酸制备得到，(2-lsF_氟丙酰基）-Z-精氨酸，该显像 剂在人肺腺癌荷瘤裸鼠模型中对人肺腺癌具有较好的靶向性，脑部与肌肉的摄取比较低。 因此本发明的lsF-FP-Arg显像剂未来可能成为较好的肺癌显像剂以及肝脏和肾脏外各种 其他癌症的显像剂。
【主权项】
1. 一种用于PET/CT的显像剂，其特征在于，显像剂为，(2-lsF-氟丙酰基）-Z-精氨酸， 其结构式为2. -种用于肺癌的鉴别诊断和疗效监测中的显像剂，其特征在于：显像剂如权利要求 1所述。3. -种PET/CT用显像剂的制备方法，其特征在于：显影剂A(2-1SF-氟丙酰基）-Z-精 氨酸是由辅助基团4-硝基苯-2-lsF-丙酸酯与Z-精氨酸乙酯盐酸盐进行酰胺化反应，并进 一步水解制备得到。4. 根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述酰胺化反应中所使用的溶剂为 二甲基亚砜。5. 根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述酰胺化反应中需加入N，N-二异 丙基乙胺提供碱性环境。6. 根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：酰胺化反应条件为40°C反应9~12 min〇
【专利摘要】本发明公开了一种用于PET/CT的显像剂。所述显像剂为<i>N</i>-(2-18F-氟丙酰基)-<i>L</i>-精氨酸，它是由辅助基团4-硝基苯-2-18F-丙酸酯与<i>L</i>-精氨酸乙酯盐酸盐进行酰胺化反应，并进一步水解制备得到。本发明的显像剂在人肺癌荷瘤裸鼠模型中对肺癌具有较好的靶向性，在脑部与肌肉的摄取比较低，具有良好的安全性和稳定性；且显像效果优于18F-FDG，显像维持时间长。因此本发明的18F-FP-Arg显像剂未来可能成为较好的肺癌显像剂以及肝脏和肾脏外各种其他癌症的显像剂。
【IPC分类】C07C279/14, A61K51/04, A61K101/02, C07C277/08
【公开号】CN105214105
【申请号】CN201510451352
【发明人】臧林泉, 高思远
【申请人】广东药学院
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年7月28日