3，5-二叔丁基水杨酸铜在制备用于治疗高转移性乳腺癌药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及医药技术领域，具体地指一种3,5-二叔下基水杨酸铜在制备用于治疗 高转移性乳腺癌药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 乳腺癌是目前全世界妇女中最常见的癌症。全球每年大约有50万人死于乳腺癌， 对妇女的生命和生活质量已经构成了严重的威胁。乳腺癌也成为了中国女性最常见的癌 症;每年中国乳腺癌新发数量和死亡数量分别占全世界的12.2%和9.6 %。随着生活节奏加 快和工作压力的加重，乳腺癌患者呈现低龄化和高发的态势。目前对于乳腺癌的治疗主要 采用手术切除、化疗等方式，但对于高转移性的乳腺癌，现有的治疗手段均无法获得良好的 治疗效果。
[0003]抑制乳腺癌细胞的转移和侵袭是治疗转移性乳腺癌的关键，因此有效抑制乳腺癌 细胞转移和侵袭的药物是治疗转移性乳腺癌的希望。一种有效治疗转移性乳腺癌的新药将 会给转移性乳腺癌患者和家人带来希望，并减轻患者的痛苦，提高生活质量，另一方面还可 W减轻社会的经济负担。
[0004]申请号为201410280227.6的中国专利中公开了金属络合-(3,5-二叔下基水杨酸） (金属为化、Fe、Al、化、化、Mg、化)作为一种常用的抗静电剂和荷电控制剂，广泛应用于除静 电领域和墨粉制造行业。现有技术中报道，微量元素Cu的某些馨合物包括3,5-二异丙基水 杨酸铜化2(3,5-dips)2对肿瘤的促进和形成过程具有抑制作用，但未披露该馨合物的具体 应用，因此应用于临床需要进一步研究。
【发明内容】
[000引本发明的目的就是要解决上述【背景技术】的不足，提供一种3,5-二叔下基水杨酸铜 在制备用于治疗高转移性乳腺癌药物中的应用，有效抑制癌细胞的转移。
[0006]本发明的技术方案为：
[0007]3,5-二叔下基水杨酸铜在制备用于治疗高转移性乳腺癌药物中的应用。
[000引3,5-二叔下基水杨酸铜的分子结构式如下式(I)所示。
[0009]
[0010] 优选的，所述3,5-二叔下基水杨酸铜的给药剂量为离体时10-25μΜ。
[0011] 优选的，3,5-二叔下基水杨酸铜制成的药物类型为注射剂、粉针剂、口服剂、口含 片、喷雾剂、胶囊、栓剂中的一种。
[0012] 所述的3,5-二异丙基水杨酸铜可W制成治疗高转移性乳腺癌复方药物，也可W单 独制成治疗高转移性乳腺癌药物。
[0013] 本发明中高转移性乳腺癌细胞是指MDA-MB-231和ΒΤ-20细胞。本发明中，通过"划 痕愈合"法检测了3，5-二叔下基水杨酸铜对MDA-MB-231和ΒΤ-20细胞迁移能力的影响，结果 显示3,5-二叔下基水杨酸铜对104-18-231和81'-20细胞的迁移能力显示浓度依赖性的抑 审IJ。然后，在高浓度血清诱导下，检测高转移性乳腺癌MDAMB-231细胞透过"Chamber小室"能 力的改变并给W药物处理2地后，结果显示药物在10~25M浓度内，浓度依赖性抑制MDA-MB-231 细胞侵袭能力 。综合实验结果分析 ，确定药物 3 ， 5-二叔下基水杨酸铜可W用于特异性预 防和治疗高转移性乳腺癌。
[0014] 本发明的有益效果为：
[0015] 1.对3,5-二叔下基水杨酸铜发掘了新的医疗用途，开拓了一个新的应用领域。
[0016]2.制备3，5-二叔下基水杨酸铜的原料3，5-二叔下基水杨酸、铜盐来源广泛，制得 的3，5-二叔下基水杨酸铜纯度高，能够保证工业化生产。
[0017] 3.3,5-二叔下基水杨酸铜配置成的药物可为多种剂型，如:注射剂、粉针剂、口服 剂、口含片、喷雾剂、胶囊、栓剂等。
【附图说明】
[0018]图1为3，5-二叔下基水杨酸铜对MDA-MB-231和BT-20细胞的转移能力的影响
[0019] 图2为3,5-二叔下基水杨酸铜对MDA-MB-231细胞的侵袭能力的影响。
【具体实施方式】
[0020] 下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步的详细说明。
[0021 ] 3,5-二叔下基水杨酸铜对MDA-MB-231和BT-20细胞的转移能力的影响
[002引 1.实验材料
[0023] 1.1细胞株
[0024] 人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和BT-20购自中国典型培养物保藏中屯、（China CenterforTypeCultureCollection,CCTCC)〇
[002引1.2药品及试剂 3, 5-二叔下基水杨酸铜 由鼎巧化学合成 DMSO 类NSigma公I|:1广|试
[0026]DMEM、1640及胎牛血清 美国访bco产品 青霉素-链霉素溶液 安特捷生物技术有限公司 MTT 类NSigma公lij产品 膜蛋白酶 碧云天生物技术研究所 超净实验台SZX型 上海浦东跃欣科仪厂
[0027] (:化培养箱HH，CP型 上海博迅实业有眼公司 微量移液枪 P2.5等 大龙医疗设备有限公司
[0028] 2.实验方法：
[0029] 2.1细胞培养
[0030] 人高转移性乳腺癌细胞株MDA-MB-231用含有10%FBS、青霉素100yg/ml、链霉素 100μg/ml的1640培养液于37°C，C〇2体积分数为5 %的细胞培养箱内培养。
[0031 ] 2.2"划痕愈合"法检测不同浓度药物对MDA-MB-231细胞迁移能力的影响
[0032] 取对数生长期MDA-MB-231和BT-20细胞W2X105个/孔的细胞密度接种于6孔培养 板中，置于细胞C〇2培养箱内培养6-化待细胞贴壁后，用白色枪头划痕，分别加入不同浓度 的3，5-二叔下基水杨酸铜，终浓度为ΙΟμΜ，25μΜ，对照组加同样体积（1ml)的1640培养液，继 续培养7化或96h，观察处理后迁移速率的改变，并对独立重复试验结果进行统计分析，
[0033] 如图1所示，其中图A和B均为MDA-MB-231细胞，C和D均为BT-20细胞，[Cu(salH)2化20)2]指3,5-二叔下基水杨酸铜溶解后形成的铜盐，图中control表示对照组，lOiiM和25μΜ 表示加入3,5-二叔下基水杨酸铜后溶液终浓度为lOiiM和25μΜ，结果显示3,5-二叔下基水杨 酸铜抑制了MDA-MB-231和ΒΤ-20细胞迁移。
[0034] 3,5-二叔下基水杨酸铜对MDA-MB-231细胞的侵袭能力的影响 [003引 2.实验材料
[0036] 1.1细胞株(上述转移能力实验）
[0037] 1.2药品及试剂 3, 5-二叔了基水杨酸铜 由鼎龙化学合成 Transwellchamber 尖间Comi口g公Iij DMSO 类NSigma公！I'j产品 DMEM、1640及撇牛血請 美国G化co产品
[0038] 膜蛋白晦 碧云天生物技术研究所 PBS 博古德生物有限公司 压力蒸汽灭菌锅YX-400B 上海Η申医疗器械有限公司 焚光显微镜1X71 扫本饼ympus公司 倒置显微镜永新XD-2胞 南京江南永新光学有限公司
[0039] 2.1Transwell法检测细胞侵袭能力的改变
[0040]取对数生长期MDA-MB-231细胞W2X105个/孔的细胞密度接种于6孔培养板中，置 于细胞C〇2培养箱内培养6-化待细胞贴壁后，分别加入不同浓度的3，5-二叔下基水杨酸铜， 终浓度为1〇μΜ，25μΜ，对照组加同样体积对应的培养液，继续培养24h，将细胞收集制成细 胞悬液并转1XΙΟ5个细胞到Transwe11chamber上室中（上室为无血清培养基），下室中加 200μ1含10%FBS(胎牛血清）的培养基，继续培养2化后，弃去上室中的培养基并用棉签擦拭 确保培养基清除完全，再每孔加入1〇化1甲醇，解育2min后，用5%的结晶紫溶液染色5min， 最后用PBS(憐酸缓冲液)漂洗两次。拍照计数，如图2所示，结果显示3,5-二叔下基水杨酸铜 可W浓度依赖性的抑制MDA-MB-231细胞侵袭能力。
【主权项】
1.3,5_二叔丁基水杨酸铜在制备用于治疗高转移性乳腺癌药物中的应用，所述3,5_二 叔丁基水杨酸铜的分子结构式如下式(I)所示。2. 如权利要求1所述的3，5-二叔丁基水杨酸铜在制备用于治疗高转移性乳腺癌药物中 的应用，其特征在于，所述3，5-二叔丁基水杨酸铜的给药剂量为离体时10-25μΜ。3. 如权利要求1所述的3，5-二叔丁基水杨酸铜在制备用于治疗高转移性乳腺癌药物中 的应用，其特征在于，所述3,5_二叔丁基水杨酸铜制成的药物类型为注射剂、粉针剂、口服 剂、口含片、喷雾剂、胶囊、栓剂中的一种。
【专利摘要】本发明公开了3，5-二叔丁基水杨酸铜在制备用于治疗高转移性乳腺癌药物中的应用及3，5-二叔丁基水杨酸铜的给药剂量，本发明通过实验证明了3，5-二叔丁基水杨酸铜可抑制乳腺癌细胞的转移，浓度依赖性的抑制乳腺癌细胞侵袭。本发明对3，5-二叔丁基水杨酸铜发掘了新的医疗用途，开拓了一个新的应用领域。
【IPC分类】A61K31/60, A61P35/00
【公开号】CN105412125
【申请号】CN201510780189
【发明人】徐金华, 柳昀熠, 范丽梅, 童玉华
【申请人】江汉大学
【公开日】2016年3月23日
【申请日】2015年11月13日