甲磺酸萘莫司他在治疗结直肠癌方面的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药技术领域。更具体地，设及甲横酸糞莫司他在治疗结直肠癌方面 的应用。
【背景技术】
[0002] 甲横酸糞莫司他(化famostat Mesilate)是一种蛋白酶抑制剂，主要通过抑制肥 大细胞的类膜蛋白酶发挥抗炎作用，已经被FDA批准用于膜腺炎、弥漫性血管内凝血的治 疗，同时还可W被用于血液透析过程中的抗凝剂。
[0003] 最近有研究表明，甲横酸糞莫司他可W发挥一定程度上杀死膜腺癌细胞，并在裸 鼠动物模型中有一定的抗膜腺癌的作用。
[0004] 目前，未见有甲横酸糞莫司应用于其他癌症等其他疾病领域的报道。
【发明内容】
[0005] 本发明要解决的技术问题是克服现有甲横酸糞莫司他的应用局限和不足，提供甲 横酸糞莫司他的一种新应用，即在治疗结直肠癌方面的应用。
[0006] 本发明的目的是提供甲横酸糞莫司他在制备治疗肠癌的药物方面的应用。
[0007] 本发明另一目的是提供一种治疗结直肠癌的药物。
[000引本发明上述目的通过W下技术方案实现： 甲横酸糞莫司他在制备治疗肠癌的药物方面的应用。
[0009] 进一步优选地，所述肠癌为结直肠癌。
[0010] 更进一步，所述结直肠癌为I到IV期结直肠癌;优选地，所述结直肠癌为IV期结直 肠癌。
[0011] 另外，上述应用是指甲横酸糞莫司他在制备抑制肠癌细胞增殖的药物方面的应 用。
[0012] 优选地，所述肠癌细胞为人结肠癌细胞HCT 116、人结肠癌细胞SW620和/或人结肠 腺癌细胞SW 1116。
[0013] 另外，更进一步地，上述应用是指甲横酸糞莫司他在制备抑制结直肠癌细胞转移 的药物方面的应用。
[0014] 更进一步地，上述应用是指甲横酸糞莫司他在制备诱导结直肠癌细胞调亡的药物 方面的应用。
[001引其中，所述甲横酸糞莫司他的化学结构式如下式（I)所示：
另外，一种治疗肠癌的药物，该药物包含甲横酸糞莫司他。
[0016] 优选地，所述药物还包括其药学上可接受的载体。
[0017] -种预防肠癌的药物，该药物包含甲横酸糞莫司他。
[0018] 本发明研究显示，甲横酸糞莫司他对结直肠癌具有很好的防治效果，因此可应用 于结直肠癌的防治方面。
[0019] 另外，本发明研究还证明了甲横酸糞莫司他和奥沙利销联合用药，对结直肠癌具 有更显著的治疗效果，因此甲横酸糞莫司他和奥沙利销二者联用在制备治疗肠癌的药物中 的应用，也在本发明的保护范围之内。
[0020] -种预防和/或治疗肠癌的药物，该药物包含甲横酸糞莫司他和奥沙利销。
[0021] 优选地，所述药物还包括其药学上可接受的载体。
[0022] 本发明具有W下有益效果： 本发明提供了甲横酸糞莫司他的一种新应用，即应用于治疗结直肠癌，甲横酸糞莫司 他能够显著抑制结直肠癌细胞的生长和增殖，能够显著的抑制结直肠癌的生长和体积增 大，诱导结直肠癌细胞的调亡，抑制结直肠癌细胞的转移，对结直肠癌具有显著的疗效，可 应用于结直肠癌的防治方面。
[0023] 本发明不仅为结直肠癌的治疗提供了一种新的治疗药物和治疗途径，还为甲横酸 糞莫司他的应用提供了新的领域。
[0024] 另外，本发明还提供了甲横酸糞莫司他和奥沙利销联合用药治疗结直肠癌的新方 案，对结直肠癌具有更显著的治疗效果。
【附图说明】
[0025] 图1为甲横酸糞莫司他处理结直肠癌细胞后存活细胞比例。
[0026] 图2为甲横酸糞莫司他对裸鼠动物成瘤的影响。
[0027] 图3为甲横酸糞莫司他抑制ΙκΒα的憐酸化的结果。
[0028] 图4为甲横酸糞莫司他抑制化k的憐酸化的结果。
[0029] 图5为甲横酸糞莫司他对结直肠癌细胞增殖影响。
[0030] 图6为甲横酸糞莫司他对结直肠癌细胞侵袭和转移的影响。
[0031] 图7为甲横酸糞莫司他单用或联合奥沙利销处理结直肠癌细胞后存活细胞比例。
【具体实施方式】
[0032] W下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明 做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试 剂、方法和设备。
[0033] 除非特别说明，W下实施例所用试剂和材料均为市购。
[0034] 实施例1甲横酸糞莫司他对结肠癌细胞及成瘤的影响 1、实验材料 (1)药物：甲横酸糞莫司他。
[00巧](2)结直肠癌细胞:人结肠癌细胞肥T 116和人结肠腺癌细胞SW 1116。
[0036] (3)调亡试剂盒。
[0037] (4)雌性裸鼠，4-5周。
[0038] 2、实验分组 (1)对照组:空白对照，即结直肠癌细胞不经过任何药物处理。
[0039] (2)实验组:使用甲横酸糞莫司他处理结直肠癌细胞。
[0040] 3、流式细胞术检测甲横酸糞莫司他对结直肠癌细胞调亡的影响 (1)我们在六孔板中铺好结直肠癌细胞，待其贴壁后，加入200μΜ的甲横酸糞莫司他处 理细胞4她，然后通过流式细胞术检测细胞调亡情况。
[0041 ] 具体方法如下； 1)对数生长期的肥Τ 116和SW 1116细胞用膜酶消化后，取4 X 105细胞均匀铺到六孔板 中。
[0042] 2)1化后细胞贴壁，于不同时间点更换成含有200?χΜ甲横酸糞莫司他的培养基。
[0043] 3)消化细胞之后，根据调亡检测试剂盒的方法处理细胞，Annexin V和ΡΙ染色完成 之后通过流式细胞仪检测细胞调亡情况。
[0044] (2)实验结果 结果如图1所示，图1中显示的Annexin V和PI双阴性（即存活细胞)比例，使用甲横酸糞 莫司他处理后，结直肠癌细胞的死亡数超过一半，甚至几乎完全被杀死。表明甲横酸糞莫司 他能够诱导结直肠癌细胞调亡。
[0045] 4、甲横酸糞莫司他对成瘤的影响 (1)在体内动物模型中，我们给裸鼠皮下注射肠癌细胞（IX 106/只），待肿瘤体积达到 100mm3后，给予甲横酸糞莫司他(30mg/kg，一周立次)腹腔注射治疗，观察肿瘤的变化情况。
[0046] 具体方法如下； 1)培养对数生长期的肠癌肥T 116细胞，膜酶消化后，计数成1 X lOVml浓度，用PBS重 悬之后通过冰盒运输至动物实验室。
[0047] 2)选取4-5周龄的裸鼠，随机分为两组，并在每只裸鼠的皮下接种10化1上述细胞 悬液。
[004引3)观察裸鼠成瘤情况，并测量其最长径化)和最短径(S)，待肿瘤体积(V=LXS2/2) 达到100 mm3后，开始给予治疗组裸鼠甲横酸糞莫司他(30mg/kg，一周Ξ次)腹腔注射。
[0049] 4)每Ξ天测量一次裸鼠肿瘤体积，3周后处死动物，取出瘤体并拍照。
[(Κ)加](2)实验结果 结果如附图2所示，治疗组(η=8)肿瘤体积比对照组明显缩小，表明甲横酸糞莫司他能 够显著的抑制结直肠癌的生长和体积增大，对结直肠癌具有显著的疗效。
[0051]实施例2甲横酸糞莫司他对结直肠癌细胞信号通路蛋白表达的影响 1、实验材料 (1)药物：甲横酸糞莫司他。
[0化2] (2)结直肠癌细胞:人结肠癌细胞肥Τ 116、SW620和人结肠腺癌细胞SW 1116。
[0化3] (3)ΙκΒα，ρ- IκBα，Erk，p-ErkW及GAPDH抗体。
[0054] 2、免疫印记方法检测甲横酸糞莫司他对结直肠癌细胞信号通路蛋白表达的影响 (1) 我们在六孔板中铺好结直肠癌细胞，待其贴壁后，加入50μΜ、100μΜ的甲横酸糞莫司 他处理细胞2地，然后通过免疫印记方法检测甲横酸糞莫司他对结直肠癌细胞信号通路蛋 白表达。
[0化日]具体方法如下； 1)对数生长期的HCT 116、SW 1116和SW 620细胞用膜酶