呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶和腺嘌呤磷酸核糖转移酶基因。此外，可以采用抗 代谢物抗性作为选择的基础:dhfr，其赋予抗性;gpt，其赋予对霉酸酸的抗性;neo，其赋予 对氨基糖苷G418的抗性；以及hygro，其赋予对潮霉素的抗性。
[0061]如本文所使用的，术语"细胞"、"细胞系"和"细胞培养物"可以互换使用。所有这些 术语还包括其子代，其为任意和全部后代。应理解，由于有意突变或非有意突变，所有子代 可以是不相同的。在表达异源核酸序列的上下文中，"宿主细胞"指原核或真核细胞，并且其 包括任何能够复制载体和/或表达由载体编码的异源基因的可转化生物体。宿主细胞可被 用作并且已被用作载体的接受体。宿主细胞可以是"转染的"或"转化的"，其指外源核酸被 转移入或引入宿主细胞的过程。经转化细胞包括原代对象细胞及其子代。
[0062]宿主细胞可来自原核生物或真核生物，这取决于期望结果是载体的复制还是编码 载体的核酸序列的部分或全部的表达。许多细胞系和培养物可用作宿主细胞，并且他们可 获自美国模式菌种保藏中心(AmericanTypeCultureCollection，ATCC)，ATCC是作为活 培养物和遗传材料的收藏所的组织(atcc.org)。本领域技术人员可根据载体骨架和期望结 果来确定合适的宿主。例如，可以将质粒或粘粒引入原核宿主细胞用于许多载体的复制。用 于载体复制和/或表达的用作宿主细胞的细菌细胞包括DH5a、JM109和KC8,以及许多市售细 菌宿主例如SURE*Competent CelIs和Solopack? Gold CelIs(StratageUe%La Jolla)。或者，可以将细菌细胞例如大肠杆菌LE392用作噬菌体病毒的宿主细胞。
[0063]用于载体的复制和/或表达的真核宿主细胞的实例包括HeLa、NIH3T3、Jurkat、 293、0)8、010、3&〇8和?(：12。来自多种细胞类型和生物体的许多宿主细胞是可得的并且为本 领域技术人员所已知。类似地，病毒载体可与真核宿主细胞或原核宿主细胞(特别是允许载 体复制或表达的那些)联合使用。
[0064]-些载体可以采用使其在原核细胞和真核细胞二者中复制和/或表达的控制序 列。本领域技术人员还会理解孵育所有上述宿主细胞以维持它们并使得载体复制的条件。 还理解和已知的是使得大规模生产载体以及生产由载体编码的核酸及其同源多肽、蛋白质 或肽的技术和条件。
[0065] C.炎性疾病状态
[0066] 1.慢性伤口
[0067]慢性伤口是在大多数伤口愈合的一系列阶段和可预测量的时间内不愈合的伤口； 通常认为在3个月内不愈合的伤口是慢性的。慢性伤口似乎停留在伤口愈合阶段中的一个 或更多个。例如，慢性伤口通常在炎性阶段停留太长时间。在急性伤口中，分子(例如胶原） 的产生和降解之间有精确的平衡；在慢性伤口中，失去了该平衡，并且降解起到太大的作 用。
[0068]慢性伤口可永远不会愈合或者可需要数年来愈合。这些伤口对患者造成严重的精 神压力和生理压力以及对患者和整个医疗保健系统造成重大经济负担。急性伤口和慢性伤 口在伤口愈合类型谱的相对端，它们以不同速率向愈合进展。大多数慢性伤口可分为3类： 静脉溃疡、糖尿病性溃疡和压力溃疡。未落在这些类别中的一小部分伤口可以是由于例如 放射中毒或局部缺血的原因。
[0069]静脉和动脉溃疡。静脉溃疡，其通常发生于腿中，占慢性伤口的约70%至90%，并 且主要影响年长者。认为他们是由于由存在于静脉中用以防止血液回流的瓣膜功能不当引 起静脉高压。由功能障碍引起的局部缺血与再灌注损伤的组合引起导致伤口的组织损伤。
[0070]糖尿病性溃疡。慢性伤口的另一主要原因糖尿病日益流行。由于慢性溃疡，糖尿病 患者具有比一般人群高出15%的截肢风险。糖尿病引起神经病，其抑制伤害感受和疼痛感 知。因此，开始时患者可能未注意到腿和足的小伤口，并可能因此未能防止感染和重复损 伤。此外，糖尿病引起免疫损害和对小血管的损伤，阻止组织的充分充氧，其可以造成慢性 伤口。压力也在糖尿病性溃疡的形成中起作用。
[0071]压力溃疡。另一主要类型的慢性伤口是压力溃疡，其通常发生在抑制通常经受压 力的身体部分(例如脚跟、肩胛和骶骨)运动的病症(例如麻痹)的患者中。压力溃疡是由在 对组织的压力大于毛细血管中的压力因而限制血液流进所述区域时的局部缺血引起的。与 皮肤相比需要更多氧和营养物的肌组织示出对长时间压力的最差影响。如在其他慢性溃疡 中的一样，再灌注损伤伤害组织。
[0072]慢性伤口可以只影响表皮和真皮，或者他们可影响组织直至筋膜。起初，它们可以 由与引起急性伤口相同的事件(例如手术或意外创伤)形成，或者他们可以因全身感染、血 管、免疫或神经机能不全、或合病例如瘤形成或代谢紊乱而形成。损伤变为慢性的原因是例 如反复创伤、连续压力、局部缺血或疾病的因素超出机体处理损伤的能力。
[0073]虽然最近在慢性伤口的研究方面实现了很大进步，但其愈合的研究进展慢于预 期。这部分地因为动物研究是困难的，因为动物不获得慢性伤口，这是因为他们通常具有快 速收缩的疏松皮肤，并且他们通常不会变得足够老或者患相关疾病例如神经病或慢性衰弱 疾病。但是，现在目前的研究了解了引起慢性伤口的一些主要因素，其中为局部缺血、再灌 注损伤和细菌定植。
[0074]局部缺血。局部缺血是伤口形成和持续的重要因素，尤其是当其反复发生时(其经 常如此)或者当与患者的老龄组合时。局部缺血使组织变得发炎以及细胞释放吸引嗜中性 粒细胞的因子例如白细胞介素、趋化因子、白三烯和补体因子。
[0075]在其对抗病原体时，嗜中性粒细胞也释放损伤细胞的炎性细胞因子和酶。它们的 重要工作之一是产生活性氧簇(R0S)以杀伤细菌，对于此它们使用称为髓过氧物酶的酶。由 嗜中性粒细胞和其它白细胞产生的酶和ROS通过损伤DNA、脂质、蛋白质、ECM和加速愈合的 细胞因子来损伤细胞并阻止细胞增殖和伤口闭合。嗜中性粒细胞在慢性伤口中停留的时间 比在急性伤口中长，并且促成了这样的事实：慢性伤口具有较高水平的炎性细胞因子和 R0S。因为来自慢性伤口的伤口流体具有过多的蛋白酶和R0S，所以流体本身可以通过抑制 细胞生长和分解ECM中的生长因子和蛋白质来抑制愈合。
[0076] 细菌定植。因为伤口环境中较多的氧使得白细胞产生R0S以杀伤细菌，所以组织充 氧不足的患者(例如在手术过程中经历体温降低的那些)有较高的感染风险。宿主对细菌存 在的免疫应答延长炎症时间，推迟愈合并损伤组织。感染不仅可引起慢性伤口，还可引起坏 疽、失去受感染肢体以及患者死亡。
[0077] 如同局部缺血，细菌定植和感染通过使较大数目的嗜中性粒细胞进入伤口部位来 损伤组织。在有慢性伤口的患者中，可能有时间产生对抗生素有抗性的细菌。此外，携带抗 药性细菌菌株例如抗甲氧西林金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus，MRSA)的患者有 更多慢性伤口。
[0078] 生长因子和蛋白质水解酶。慢性伤口与急性伤口相比的不同之处还在于其蛋白质 水解酶(例如弹性蛋白酶)和基质金属蛋白酶(MMP)水平较高，但其生长因子(例如血小板衍 生生长因子和角质形成细胞生长因子)的浓度较低。
[0079] 因为生长因子(GF)在及时伤口愈合中是必要的，所以不充足的GF水平可以是慢性 伤口形成中的重要因素。在慢性伤口中，生长因子的形成和释放可以被阻止，所述因子可以 被螯合并且无法进行其代谢作用，或者被细胞或细菌蛋白酶过度降解。
[0080] 慢性伤口（例如糖尿病性溃疡和静脉溃疡)还由成纤维细胞未能产生充足的ECM蛋 白质以及由角质形成细胞未能使伤口上皮化引起。慢性伤口中成纤维细胞基因表达不同于 急性伤口。
[0081] 虽然所有伤口都需要一定水平的弹性蛋白酶和蛋白酶以正确愈合，但浓度太高是 有害的。伤口区域的白细胞释放弹性蛋白酶，其增加炎症，破坏组织、蛋白聚糖和胶原，并损 伤生长因子、纤连蛋白和抑制蛋白酶的因子。弹性蛋白酶的活性由人血清白蛋白增加，人血 清白蛋白是见于慢性伤口中的最丰富的蛋白质。但是，白蛋白不足的慢性伤口尤其不太可 能愈合，因此在未来，调节伤口的该蛋白质水平可证实有助于愈合慢性伤口。
[0082] 由白细胞释放的过量基质金属蛋白酶也可使伤口变为慢性。MMP分解ECM分子、生 长因子和蛋白酶抑制因子，因而增加降解同时减少构建，使生产和降解之间的精密折衷失 衡。
[0083] 2.急性伤口 /创伤
[0084]生理创伤是严重的和改变机体的生理损伤，例如除去肢体。钝力创伤是通过由或 用钝物施加的影响或其他力引起的一类生理创伤，而穿透性创伤是其中皮肤或组织被对象 穿过的一类生理创伤。创伤还可描述为未计划的(例如事故)或者计划的(在手术的情况下） 二者。二者均可表征为中度至严重的组织损伤、血液损失和/或休克，并且二者均可引起后 续感染，包括脓毒症。本发明用以处理创伤，包括预处理(在医疗过程的情况下)和创伤发生 后进行的处理二者。
[0085]手术。手术对患者采用可操作的人工和仪器技术来研究和/或治疗病理学病症例 如疾病或损伤，以帮助提高机体功能或外观，或者有时出于一些其它原因。本发明可解决由 手术引起的创伤，如在下文中进一步限定的。
[0086] -般而言，当一个过程涉及切患者的组织或者闭合之前持续的伤口时，认为该过 程是手术。如果不必然落在该范畴内的其它过程例如血管成形术或内镜检查涉及常规手术 过程或设置的话(所述常规手术过程或设置例如使用灭菌环境、麻醉、杀菌条件、典型手术 器具及缝合或吻合），则它们可被认为是手术。认为所有形式的手术都是侵入过程;所谓的 无创手术通常指不穿透所针对结构的切除术(例如，角膜的激光消融）或者放射手术过程 (例如，肿瘤的照射）。手术可持续数分钟至数小时。
[0087]手术过程通常通过紧急性、过程的类型、所涉及的机体系统、侵袭的程度和特殊器 具来分类。进行任选手术以纠正不危及生命的病症，并且任选手术在患者的要求下根据外 科医生和手术机构的可获得性而实施。紧急手术是必须快速进行以挽救生命、肢体或功能 性能力的手术。进行探索性手术以辅助或确认诊断。治疗性手术治疗在之前经诊断的病症。
[0088]截肢涉及切去身体部分，通常是肢体或趾。再植涉及重新连接切断的身体部分。重 建手术涉及重建机体受损的、切断的或者畸形的身体部分。进行整容手术以改善在其它方 面正常的结构的外观。切除术是从患者切除器官、组织或其他身体部分。移植手术是通过将 来自其它人(或动物)另一器官或身体部分插入患者来替换器官或身体部分。从活人或动物 除去器官或身体部分用于移植也是一种手术类型。
[0089]当手术在一个器官系统或结构上进行时，可通过所涉及的器官、器官系统或组织 来进行分类。实例包括心脏手术(在心脏上进行）、胃肠手术(在消化道及其附属器官内进 行)和整形外科手术(在骨和/或肌肉上进行）。
[0090]微创手术涉及将小型化器具插入体腔或结构中的较小外切口，如在腹腔镜手术或 血管成形术中。相反，开放手术过程需要大切口以到达目的区域。激光手术涉及使用激光代 替解剖刀或类似的手术器具来切割组织。显微手术涉及外科医生使用手术显微镜来观察小 结构。机器人手术采用手术机器人(例如DaVinci或Zeus手术系统)来在外科医生的指导下 控制器具。
[0091] 3.自身免疫/炎性疾病
[0092]本发明涵盖治疗多种自身免疫和/或炎性疾病状态，例如脊椎关节病、强直性脊椎 炎、银肩病性关节炎、反应性关节炎、肠病性关节炎、溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、肠易激疾 病、炎性肠病、类风湿性关节炎、幼年型类风湿关节炎、家族性地中海热、肌萎缩性脊髓侧索 硬化症、舍格伦综合征、早期关节炎、病毒性关节炎、多发性硬化症或银肩病。这些疾病的诊 断和治疗在文献中有很多记录。
[0093] 4.化学治疗、放射治疗和细胞因子治疗毒性
[0094]多种形式的癌症治疗(包括化学治疗、放射治疗和细胞因子)与癌症患者中的毒性 (有时为严重毒性)相关。在毒性至少部分是由组蛋白的胞外作用引起的程度下，本发明寻 求使用本发明的药物组合物来降低该毒性，从而减轻或缓解患者部分的不适以及允许更高 剂量的治疗。
[0095]口腔癌(世界范围内第6常见的癌症)是头颈癌的亚型，它是位于口腔中的任何癌 性组织生长。它可以作为在任何口腔组织中发生的原发性病变产生，通过从远端发源部位 转移或者通过从相邻解剖学结构（例如鼻腔)扩展，或者口腔癌可以在口的任意组织中发 生，并且可以为多种组织学类型：畸胎瘤、产生自大或小唾液腺的腺癌、产生自扁桃体或其 他淋巴组织的淋巴瘤，或来自口腔粘膜的产色素细胞的黑素瘤。有数种类型的口腔癌，但约 90%是鳞状细胞癌，发生在构成口和唇的组织中。口腔癌最常涉及舌。其还可发生在口底、 颊衬、牙龈(齿龈）、唇或上颚（口腔顶部）。在显微镜下大多数口腔癌看起来非常相似，并且 被称为鳞状细胞癌。它们是恶性的并且倾向于快速扩散。
[0096]超过80 %的口腔癌患者用放射治疗来治疗，而这些个体中的至少75 %将产生口腔 粘膜炎。口腔粘膜炎是慢性口腔溃疡。该疾病常常发生于所有癌症类型的放射治疗患者、因 器官移植进行放射治疗的患者（以消除移植物的排斥)和经历常规放射治疗的患者。严重的 口腔粘膜炎极其疼痛，并且不利于食物/液体摄取，因此通常是癌症治疗最严重的并发症。 口腔