一种大球盖菇栽培基质及其制备方法与流程

文档序号:12689306阅读:1007来源:国知局

本发明属于食用菌栽培基质技术领域,具体涉及一种食用菌栽培基质,以及一种以松毛为主料制备大球盖菇栽培基质的方法。



背景技术:

松针,别名松毛、猪鬃松毛、山松须,为松科植物的针状叶,植物来源主要有云南松、黑松、黄山松、红松、油松、马尾松、湿地松、华山松等。松针是一种可再生的自然资源,分布范围广泛,中国松树包含10个属120余种,松针资源丰富,现有松林面积约6100万~6700万公顷,松针蕴含量在一亿吨以上,每年可获得松针200万~300万吨,且松树分布区域密集,如果不能妥善利用,会造成山林火灾。松针富含丰富的油分,能够减少水分的蒸腾以及叶片吸水,阻碍渥堆过程中松针的降解,如何加快松针降解速度是本发明需要解决的一个重要问题。

我国是全球畜禽养殖第一大国,每年畜禽粪便产生量达30亿吨以上,由于资金不足和技术落后等原因,我国畜禽粪便有效处置率不到30%,大量畜禽粪便未经任何处理随意排放或不经无害化处理直接施入农田,给我国农田生态环境带来了巨大压力,也给公众健康带来威胁。

枯草芽孢杆菌和毕赤酵母菌株分别具有油烃和油脂的降解能力,添加二者的复合菌剂,有利于对松针所含油分的降解,加快其腐熟过程。

目前,松针用来栽培食用菌尚未有报道,是松针综合开发利用的一片空白,因此,本发明以松针和畜禽粪便为主料,同时添加复合菌剂制备大球盖菇栽培基质,有着巨大的应用潜力。



技术实现要素:

本发明目的在于针对松毛为主料开发出一种生物有机肥大球盖菇栽培基质,以解决山区松毛大量闲置易引发火灾的问题,同时还添加了畜禽粪便,也为解决农村生态环境提供了新途径。

为了实现本发明的上述目的,本发明提供了如下的技术方案:

一种大球盖菇栽培基质,该栽培基质是由松毛、畜禽粪便、复合菌剂、尿素、过磷酸钙、辅料所组成,所述组分的质量百分比为:松毛70%,畜禽粪便20%,尿素0.1%,过磷酸钙1%,辅料8.9%,复合菌剂占与松毛的质量比为1:20,所述的复合菌剂包含枯草芽孢杆菌菌株和毕赤酵母工程菌菌株。

根据所述的大球盖菇栽培基质,所述的栽培基质由所述各组分混合后腐熟获得,由复合菌剂的制备和原料腐熟步骤制备而得。

根据所述的大球盖菇栽培基质,其中所述松毛的含水率为60%。

根据所述的大球盖菇栽培基质,其中所述的畜禽粪便包括鸡粪、猪粪、牛粪、羊粪中的一种或几种。

根据所述的大球盖菇栽培基质,其中所述的辅料为草木灰。

根据所述的大球盖菇栽培基质,其中所述的复合菌剂中的枯草芽孢杆菌菌剂由以下步骤获得:

a)一级种子培养:从斜面中勾取一环菌种接入装有30mL一级种子培养基的250mL三角瓶中,37℃,200r/min,振荡培养20h,得一级种子液;

b)二级种子培养:一级种子液30mL接种到装有270mL二级种子培养基的1000mL三角瓶,37℃,200r/min,振荡培养20h,得二级种子液;

c)30L发酵罐发酵培养:调节初始pH=7.0,二级种子液200mL接到30L发酵罐,以70%的罐装量,pH值7.5,温度37℃,前期通风1:0.8,后期通风1:1发酵条件进行枯草芽孢杆菌的发酵培养。

所述的一级种子培养基配方为:1%可溶性淀粉、1%大豆蛋白胨、0.5%酵母粉、0.02%硫酸镁、水30mL,pH调为7.2;二级种子培养基配方为:2%豆粕、0.6%玉米淀粉、0.3%葡萄糖、0.3%酵母粉、0.06%硫酸镁、0.02%硫酸锰、0.2%磷酸氢二钾、0.1%磷酸二氢钾、水200mL、pH调为7.2;发酵液培养基为(按24L装液量计算):1%豆粕、0.4%玉米淀粉、0.2%葡萄糖、0.3%酵母粉、0.1%硫酸镁、0.03%硫酸锰、0.2%磷酸氢二钾、0.1%磷酸二氢钾、水22L,接种前调节pH=7.0。

根据所述的大球盖菇栽培基质,其中所述的复合菌剂中的毕赤酵母工程菌菌剂由以下步骤获得:

a)种子及发酵产酶培养:挑取试管斜面保藏菌种于YPD培养基中,30℃摇床培养14h,获得毕赤酵母工程菌种子液,YPD培养基成分为葡萄糖2%,酵母浸粉1%,蛋白胨2%,蒸馏水,pH自然,121℃,湿热灭菌30min;

b)发酵罐扩大培养:采用10L发酵罐进行放大培养,按5%(V/V)的接种量,将毕赤酵母工程菌种子液接入装有6L发酵培养基的发酵罐中,30℃、400r/min培养至溶氧达80%时,发酵培养基配方为葡萄糖2%,蛋白胨2%,酵母浸粉1.5%,硫酸镁0.05%,磷酸二氢钾0.11%,磷酸氢二钾0.044%,发酵初始pH为8,上述培养基121℃,湿热灭菌30min。

根据所述的大球盖菇栽培基质,其中所述的复合菌剂是将枯草芽孢杆菌菌液和毕赤酵母菌液按1:1混合,干燥温度为75℃、调节菌液pH为7.2、载体为麸皮,水分含量为5%,混合菌液和载体按体积比1:2混合。

根据所述的大球盖菇栽培基质,其中所述的腐熟包括如下步骤:

a)将松毛长度截成3-5cm长的小段,将复合菌剂与松毛按质量比1:20混合均匀;

b)畜禽粪便拍散,不要成团,畜禽粪便可由鸡粪、猪粪、牛粪、羊粪的一种或几种的组合;

c)预先调湿:将松毛与复合菌剂和辅料草木灰充分混合,并调节湿度达到60%,畜禽粪便的湿度也调节至60%;

d)选取一块便于排水,干净、平整的场地,先铺一层松毛、草木灰和复合菌剂的混合物,要求宽度为1.5m,长度视料多少而定,均匀撒上尿素和过磷酸钙,厚度为2cm,然后铺上一层畜禽粪便,如此往复,最上面一层铺上畜禽粪便,控制堆高在2m,每隔一周从上到下,从内到外翻堆,待其自然降温,堆肥成棕褐色,没有氨气味,没有酸臭味,手握松软,成沫,且无扎手感,纤维轻拉即断,即为发酵结束,所得腐熟物即可作为大球盖菇的栽培基质。

本发明同时还提供了一种制备所述的大球盖菇栽培基质的方法,该方法包括复合菌剂的制备和原料腐熟步骤,所述的复合菌剂包含枯草芽孢杆菌和毕赤酵母工程菌菌株,先分别制备枯草芽孢杆菌发酵液和毕赤酵母工程菌发酵液:然后将枯草芽孢杆菌菌液和毕赤酵母菌液按1:1混合,干燥温度为75℃、调节菌液pH为7.2、载体为麸皮,水分含量为5%,混合菌液和载体按体积比1:2混合,再进行原料腐熟;

所述的复合菌剂中的枯草芽孢杆菌菌剂由以下步骤获得:

a)一级种子培养:从斜面中勾取一环菌种接入装有30mL一级种子培养基的250mL三角瓶中,37℃,200r/min,振荡培养20h,得一级种子液;

b)二级种子培养:一级种子液30mL接种到装有270mL二级种子培养基的1000mL三角瓶,37℃,200r/min,振荡培养20h,得二级种子液;

c)30L发酵罐发酵培养:调节初始pH=7.0,二级种子液200mL接到30L发酵罐,以70%的罐装量,pH值7.5,温度37℃,前期通风1:0.8,后期通风1:1发酵条件进行枯草芽孢杆菌的发酵培养。

其中一级种子培养基配方为:1%可溶性淀粉、1%大豆蛋白胨、0.5%酵母粉、0.02%硫酸镁、水30mL,pH调为7.2;二级种子培养基配方为:2%豆粕、0.6%玉米淀粉、0.3%葡萄糖、0.3%酵母粉、0.06%硫酸镁、0.02%硫酸锰、0.2%磷酸氢二钾、0.1%磷酸二氢钾、水200mL、pH调为7.2;发酵液培养基为(按24L装液量计算):1%豆粕、0.4%玉米淀粉、0.2%葡萄糖、0.3%酵母粉、0.1%硫酸镁、0.03%硫酸锰、0.2%磷酸氢二钾、0.1%磷酸二氢钾、水22L,接种前调节pH=7.0;

所述的毕赤酵母工程菌菌剂由以下步骤获得:

a)种子及发酵产酶培养:挑取试管斜面保藏菌种于YPD培养基中,30℃摇床培养14h,获得毕赤酵母工程菌种子液,YPD培养基成分为葡萄糖2%,酵母浸粉1%,蛋白胨2%,蒸馏水,pH自然,121℃,湿热灭菌30min;

b)发酵罐扩大培养:采用10L发酵罐进行放大培养。按5%(V/V)的接种量,将毕赤酵母工程菌种子液接入装有6L发酵培养基的发酵罐中,30℃、400r/min培养至溶氧达80%时,发酵培养基配方为葡萄糖2%,蛋白胨2%,酵母浸粉1.5%,硫酸镁0.05%,磷酸二氢钾0.11%,磷酸氢二钾0.044%,发酵初始pH为8,上述培养基在121℃,湿热灭菌30min;

所述的原料腐熟包括如下步骤:

a)将松毛长度截成3-5cm长的小段,将复合菌剂与松毛按质量比1:20?混合均匀;

b)畜禽粪便拍散,不要成团,畜禽粪便可由鸡粪、猪粪、牛粪、羊粪的一种或几种的组合;

c)预先调湿:将松毛与已制备好的复合菌剂和辅料草木灰充分混合,并调节湿度达到60%,畜禽粪便的湿度也调节至60%;

d)选取一块便于排水,干净、平整的场地,先铺一层松毛、草木灰和复合菌剂的混合物,要求宽度为1.5m,长度视料多少而定,均匀撒上尿素和过磷酸钙,厚度为2cm,然后铺上一层畜禽粪便,如此往复,最上面一层铺上畜禽粪便,控制堆高在2m,每隔一周从上到下,从内到外翻堆,待其自然降温,堆肥成棕褐色,没有氨气味,没有酸臭味,手握松软,成沫,且无扎手感,纤维轻拉即断,即为发酵结束,所得腐熟物为大球盖菇的栽培基质。

用本发明的栽培基质与传统肥料相比,不仅提高了大球盖菇的产量,同时对其品质也有提升,说明以松毛为主料,添加畜禽粪便和复合菌剂制备大球盖菇栽培料,不仅解决了林区松毛闲置,农村畜禽粪便对环境安全造成的隐患,是一种对环境友好且原材料便于获得的新型大球盖菇栽培基质。本发明的大球盖菇栽培基质是由松毛、畜禽粪便、复合菌剂、尿素、过磷酸钙、辅料混合后腐熟获得。大球盖菇栽培基质营养丰富,能够大大提高大球盖菇的产量和品质,同时,该栽培基质以松毛和畜禽粪便为原料,消除了大量松毛闲置易引发山林火灾的隐患,同时对畜禽粪便的利用也有效缓解了环境压力,有利于长期可持续发展。

具体实施方式

下面用本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容,但并不以此来限定本发明。

实施例1

松毛和牛粪制备大球盖菇栽培基质的方法。

1、复合菌剂的制备:

1)枯草芽孢杆菌菌剂的制备:

a)一级种子培养:从斜面中勾取一环菌种接入装有30mL一级种子培养基的250mL三角瓶中,37℃,200r/min,振荡培养20h,得一级种子液;

b)二级种子培养:一级种子液30mL接种到装有270mL二级种子培养基的1000mL三角瓶,37℃,200r/min,振荡培养20h,得二级种子液;

c)30L发酵罐发酵培养:调节初始pH=7.0,二级种子液200mL接到30L发酵罐,以70%的罐装量,pH值7.5,温度37℃,前期通风1:0.8,后期通风1:1发酵条件进行枯草芽孢杆菌的发酵培养。

其中一级种子培养基配方为:1%可溶性淀粉、1%大豆蛋白胨、0.5%酵母粉、0.02%硫酸镁、水30mL,pH调为7.2。二级种子培养基配方为:2%豆粕、0.6%玉米淀粉、0.3%葡萄糖、0.3%酵母粉、0.06%硫酸镁、0.02%硫酸锰、0.2%磷酸氢二钾、0.1%磷酸二氢钾、水200mL、pH调为7.2;发酵液培养基为(按24L装液量计算):1%豆粕、0.4%玉米淀粉、0.2%葡萄糖、0.3%酵母粉、0.1%硫酸镁、0.03%硫酸锰、0.2%磷酸氢二钾、0.1%磷酸二氢钾、水22L,接种前调节pH=7.0;

2)毕赤酵母工程菌菌剂由以下步骤获得:

a)种子及发酵产酶培养:挑取试管斜面保藏菌种于YPD培养基中,30℃摇床培养14h,获得毕赤酵母工程菌种子液,YPD培养基成分为葡萄糖2%,酵母浸粉1%,蛋白胨2%,蒸馏水,pH自然,121℃,湿热灭菌30min;

b)发酵罐扩大培养:采用10L发酵罐进行放大培养。按5%(V/V)的接种量,将毕赤酵母工程菌种子液接入装有6L发酵培养基的发酵罐中,30℃、400r/min培养至溶氧达80%时,发酵培养基配方为葡萄糖2%,蛋白胨2%,酵母浸粉1.5%,硫酸镁0.05%,磷酸二氢钾0.11%,磷酸氢二钾0.044%,发酵初始pH为8,上述培养基在121℃,湿热灭菌30min;将上述枯草芽孢杆菌菌液和毕赤酵母菌液按1:1混合,干燥温度为75℃、菌液pH为7.2、载体为麸皮,水分含量为5%,菌液和载体按体积比1:2混合;

2、松毛、畜禽粪便和复合菌剂腐熟步骤为:

1)各原材料按如下比例:松针70%,畜禽粪便20%,尿素0.1%,过磷酸钙1%,草木灰8.9%;

2)将松毛长度截成3-5cm长的小段,将复合菌剂与松毛按质量比1:20混合均匀;牛粪拍散,不要成团,将松毛与复合菌剂和草木灰充分混合,并调节湿度达到60%,畜禽粪便的湿度也调节至60%;

3)选取一块便于排水,干净、平整的场地,先铺一层松毛、草木灰和复合菌剂的混合物,要求宽度为1.5m,长度视料多少而定,均匀撒上尿素和过磷酸钙,厚度为2cm,然后铺上一层畜禽粪便,如此往复,最上面一层铺上畜禽粪便,控制堆高在2m,每隔一周从上到下,从内到外翻堆,待其自然降温,堆肥成棕褐色,没有氨气味,没有酸臭味,手握松软,成沫,且无扎手感,纤维轻拉即断,即为发酵结束,所得腐熟物即作为大球盖菇的栽培基质。

实施例2

松毛和猪粪、羊粪制备大球盖菇栽培基质的方法

1、复合菌剂的制备:

1)枯草芽孢杆菌菌剂的制备:

a)一级种子培养:从斜面中勾取一环菌种接入装有30mL一级种子培养基的250mL三角瓶中,37℃,200r/min,振荡培养20h,得一级种子液;

b)二级种子培养:一级种子液30mL接种到装有270mL二级种子培养基的1000mL三角瓶,37℃,200r/min,振荡培养20h,得二级种子液;

c)30L发酵罐发酵培养:调节初始pH=7.0,二级种子液200mL接到30L发酵罐,以70%的罐装量,pH值7.5,温度37℃,前期通风1:0.8,后期通风1:1发酵条件进行枯草芽孢杆菌的发酵培养。

其中一级种子培养基配方为:1%可溶性淀粉、1%大豆蛋白胨、0.5%酵母粉、0.02%硫酸镁、水30mL,pH调为7.2。二级种子培养基配方为:2%豆粕、0.6%玉米淀粉、0.3%葡萄糖、0.3%酵母粉、0.06%硫酸镁、0.02%硫酸锰、0.2%磷酸氢二钾、0.1%磷酸二氢钾、水200mL、pH调为7.2;发酵液培养基为(按24L装液量计算):1%豆粕、0.4%玉米淀粉、0.2%葡萄糖、0.3%酵母粉、0.1%硫酸镁、0.03%硫酸锰、0.2%磷酸氢二钾、0.1%磷酸二氢钾、水22L,接种前调节pH=7.0。

2)毕赤酵母工程菌菌剂由以下步骤获得:

a)种子及发酵产酶培养:挑取试管斜面保藏菌种于YPD培养基中,30℃摇床培养14h,获得毕赤酵母工程菌种子液,YPD培养基成分为葡萄糖2%,酵母浸粉1%,蛋白胨2%,蒸馏水,pH自然,121℃,湿热灭菌30min;

b)发酵罐扩大培养:采用10L发酵罐进行放大培养。按5%(V/V)的接种量,将毕赤酵母工程菌种子液接入装有6L发酵培养基的发酵罐中,30℃、400r/min培养至溶氧达80%时,发酵培养基配方为葡萄糖2%,蛋白胨2%,酵母浸粉1.5%,硫酸镁0.05%,磷酸二氢钾0.11%,磷酸氢二钾0.044%,发酵初始pH为8,上述培养基121℃,湿热灭菌30min;将上述枯草芽孢杆菌菌液和毕赤酵母菌液按1:1混合,干燥温度为75℃、菌液pH为7.2、载体为麸皮,水分含量为5%,菌液和载体按体积比1:2混合;

2、松毛、畜禽粪便和复合菌剂腐熟步骤为:

1)各原材料按如下比例:松针70%,畜禽粪便20%,尿素0.1%,过磷酸钙1%,草木灰8.9%;

2)将松毛长度截成3-5cm长的小段,将复合菌剂与松毛按质量比1:20混合均匀;猪粪和羊粪混合拍散,不要成团,将松毛与复合菌剂和草木灰充分混合,并调节湿度达到60%,畜禽粪便的湿度也调节至60%;

3)选取一块便于排水,干净、平整的场地,先铺一层松毛、草木灰和复合菌剂的混合物,要求宽度为1.5m,长度视料多少而定,均匀撒上尿素和过磷酸钙,厚度为2cm,然后铺上一层畜禽粪便,如此往复,最上面一层铺上畜禽粪便,控制堆高在2m,每隔一周从上到下,从内到外翻堆,待其自然降温,堆肥成棕褐色,没有氨气味,没有酸臭味,手握松软,成沫,且无扎手感,纤维轻拉即断,即为发酵结束,所得腐熟物即作为大球盖菇的栽培基质。

对实施例1、2获得的栽培基质用来栽培大球盖菇,并以传统栽培基质(木屑、玉米芯)实为对照,采收结束后分别统计大球盖菇的产量以及品质,结果见下表:

表1施加松毛生物有机肥对花生产量品质的影响

由表1可以看出:用本发明的栽培基质与传统肥料相比,不仅提高了大球盖菇的产量,同时对其品质也有提升,说明以松毛为主料,添加畜禽粪便和复合菌剂制备大球盖菇栽培料,不仅解决了林区松毛闲置,农村畜禽粪便对环境安全造成的隐患,是一种对环境友好且原材料便于获得的新型大球盖菇栽培基质。

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