专利名称：阿加曲班中间体的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种制备阿加曲班中间体的方法。
背景技术：
1978年日本Mitsubishi化学公司S.Okamoto等首次报导了阿加曲班(Argatroban)一水化物抗凝血酶活性US 4 101 653。随后20多年期间，众多研究者对Argatroban的生物活性及作为医药的价值进行了深入研究。1981年，S.Okamoto在动物体内与肝素进行了比较Okamoto，S.et al.，Biochem.Biophys.Res.Commun.101,440(1981)；T.Kumoto等对其立体选择活性进行了报导Kumada，T.et al.，Thromb.Res.24，285(1981)；1984年，R.Kumato进行了临床血液透析评价Kikumoto，R.et al.，Biochemistry 23，85(1984)；1986年该作者报导了Argatroban抑制哺乳动物凝血酶活性，可作为治疗和预防血栓药剂和血小板凝聚抑制剂。Argatroban的一水合物可作为选择性抗血栓剂、治疗慢性动脉堵塞和脑血栓等JP 61-48829。1992年和1993年，Taparelli和J.A.Jakubowski先后报导了Argatroban抗凝血酶的可逆性Taparelli，C.，Trends Pharmacol.Sci.，1993，14，366，Jakubowski，J.A.et al，Rep.Med.Chem.，1992，27，99；90年代L.R.Buch等多位研究者报导了相关研究Buch，L.R.，Cadiosvasc.Drug Rev.，1991，9，247，Stmpcnewski，J.D.et al.，AcademicSan Diego，1991；Vol.26，p299，Brundish，D.et al.，J.Med.Chem.1999；42，4584，Shebuski，R.J.，AcademicSan Diego.1999；Vol.26，p98。1992年日本批准作为非肠道使用抗凝血酶药剂[Hijikata-Okunomiya，A.，et al，Thromb.Hemostasis，1992，18，l35。
阿加曲班的化学名称(2R，4R)-1-[(2S)-5-[(Aminoiminomethyl)amino]-1-oxo-2-[[(1，2，3.4-tetrahydro-3-methyl-8-quinolinyl)sulfonyl]amino]pentyl]-4-methyl-2-piperidinecarboxylic acid，其化学成分是21(R)和21(S)的混合物，通常是64～6536～3US 6 440 417，Cossy.J.，et al，Bioorganic&Medicine Chemistry Letters，11(2001)，1989-1992，Journal ofPharmaceutical Sciences，Vol.82，No.6，672(1993)，其结构式为 Ia X＝H，Y＝CH3，21-(R)-ArgatrobanI Argagroban(21(R)21(S)＝6535) Ib X＝CH3，Y＝H，21-(S)-Argatroban
现报导的Argatroban(阿加曲班)合成路线都是以硝基-L-精氨酸为起始原料、以哌啶羧酸酯或喹啉磺酰氯缩合先后次序不同，构成两条主要路线。当首先与哌啶羧酸酯缩合时，称氨基保护法硝基-L-精氨酸的氨基用t-Boc保护、再与哌啶羧酸酯缩合、去Boc保护基、与喹啉磺酰氯缩合、酯水解、氢化去硝基得Argatroban。若首先与喹啉磺酰氯缩合时称非保护法硝基精氨酸与喹啉磺酰氯缩合后再与哌啶羧酸酯缩合、酯水解、氢化去硝基得目标产物。具体说包括氨基保护法1.硝基精氨酸t-Boc保护后与(2R，4R)哌啶甲酸酯缩合EP 8746，US 4258192，US4201863，JP 81-15,267，US 6440417，特许公报平2-31055。反应路线如图1。
2.硝基精氨酸t-Boc保护后与反式哌啶羧酸酯缩合、分离、拆分，再与喹啉磺酰氯缩合Cossy.J.，et al，Bioorganic & Medicine Chemistry Letters，11(2001)，1989-1992。具体反应路线如图2。
非保护法当L-精氨酸直接与喹啉磺酰氯缩合时反应副产物多、不易分离，不适合于工业化生产特许公报 平1-35000。硝基-L-精氨酸为原料时反应产品单一，操作简易，适于工业化生产EP 823 430。具体反应路线如图3。
Ethyl(2R，4R)-1-[NG-nitro-N2-(tert-butoxycarbonyl)-L-arginyl]-4-methyl-2-piperidinecarboxylate(I)是氨基保护法制备Argatroban的关键中间体，文献报导EP 8746，US 4258192，以硝基-L-精氨酸为原料，与碳酸二叔丁酯反应，转化为NG-硝基-N2-tBoc-L-精氨酸，接着与氯甲酸异丁酯反应，生成相应的酸酐，与(2R，4R)-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯反应，生成化合物I，此法后两步反应都不完全，产物中含有前两步原料，不易分离提纯，要求低温-20～-25℃，试剂氯甲酸异丁酯毒性大，需要从光气制备，来源受到限制，操作条件差，产率低等缺点，其反应如下
发明内容
本发明的目的是提供一种阿加曲班中间体的制备方法。本发明是在各种合成路线的基础上，对氨基保护法进行了重要改进。采用DCC(N，N-二环己基碳二亚胺)脱水缩合，一步反应、操作简单、条件温和、收率高、产物质量好，易工业化生产。
本发明提供的阿加曲班中间体的制备方法包括采用NG-硝基-N2-tBoc-L-精氨酸与(2R，4R)-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯缩合，用DCC作为脱水剂，其反应如下 具体的步骤在二氯甲烷溶剂中依次加入(2R，4R)-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯，DCC和NG-硝基-N2-tBoc-L-精氨酸，在-5～35℃下搅拌反应1-5小时，反应结束。加入50ml水，搅拌0.5-1小时，将反应液冷至0℃，过滤除去固体，滤液分层，除去水层，有机层分别用5-10％氢氧化钠溶液洗涤两次，用5-10％柠檬酸溶液洗一次，再用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，蒸出二氯甲烷，得黄色固体产物。
反应物(2R，4R)-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯与NG-硝基-N2-tBoc-L-精氨酸的摩尔比1∶1.0～1.2；反应物与DCC的摩尔比1∶1～1.05；反应物与二氯甲烷的重量比1∶20～50。
本发明提供的阿加曲班中间体的制备方法是将文献氨基保护法两步反应一步完成，原料DCC安全易得，操作简单，反应完全，反应温度-5～35℃，收率提高到85～90％，产物(中间体I)易提纯，易工业化生产。
图1硝基精氨酸t-Boc保护后与(2R，4R)哌啶甲酸酯缩合反应路线图示。
图2硝基精氨酸t-Boc保护后与反式哌啶羧酸酯缩合、分离、拆分，再与喹啉磺酰氯缩合反应路线图示。
图3非保护法反应路线图示。
具体实施例方式
实施例1.NG-硝基-L-精氨酸的制备300ml四口反应瓶内加入165克浓硫酸，搅拌下加入34.8克(0.2mol)L-精氨酸，搅拌至透明，加入20.0克(0.4mol)硝酸铵，室温搅拌反应3小时。反应结束，将反应液倾入600克的冰水中，用约370克氨水(17％)中和，控制pH6.5，析出白色固体，过滤、水洗，用900克水重结晶后得NG-硝基-L-精氨酸35.7克，含量98.5％(HPLC定量分析法)，收率80.3％。
实施例2.NG-硝基-N2-tBoc-L-精氨酸的制备300ml四口反应瓶内加入100ml水，搅拌下加入4.4克(1.1mol)氢氧化钠，搅拌溶解后冷却，加入20.0克(0.091mol)NG-硝基-L-精氨酸和52克叔丁醇，搅拌片刻，得透明溶液，在液温＜10℃加入25.9克(0.119mol)碳酸二叔丁酯，室温搅拌16小时，反应液pH为8。加入450ml石油醚，搅拌，静置分层，分去石油醚，水相加入200ml甲基叔丁基醚，搅拌冷却下滴加14.5克浓盐酸，调节pH为1.5，继续搅拌，析出白色固体，过滤，甲基叔丁基醚洗涤，干燥得17.4克NG-硝基-N2-tBoc-L-精氨酸(HPLC定量分析法)，含量96.5％，收率57.8％。
实施例3.(2R，4R)-1-〔NG-硝基-N2-(叔丁基氧基羰基)-L-精氨酸〕-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯的制备5000ml四口反应瓶中，加入3000ml二氯甲烷，搅拌下，加入(2R，4R)-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯112.8g(0.655mol)，约0.5小时全部溶解。室温搅拌下，加入DCC134.8克(0.655mol)，继续搅拌0.5小时，加入NG-硝基-N2-tBoc-L-精氨酸209.0克(0.655mol)，在室温搅拌2小时，TLC检测(溶剂系统为乙酸乙酯)，原料基本消失，反应结束。加入600ml水，搅拌0.5小时，将反应液冷至0℃，过滤除去副产物脲，滤液分层，除去水层，有机层用950ml10％氢氧化钠溶液洗涤两次，用600ml10％柠檬酸溶液洗涤至中性，再用600ml饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，常压蒸出二氯甲烷，最后减压脱除残留二氯甲烷，得黄色固体280.4克，含量98.3％(HPLC定量分析法)，收率89.0％。
实施例4.
5000ml四口反应瓶中，加入250ml二氯甲烷，搅拌下，加入(2R，4R)-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯17.2g(0.1mol)，搅拌使其溶解，加入DCC25克(0.12mol)，搅拌0.5小时后，加入NG-硝基-N2-tBoc-L-精氨酸32克(0.1mol)，在0～-5℃搅拌4小时，TLC检测，原料基本消失，反应结束。加入50ml水，搅拌1小时，将反应液冷至0℃左右，过滤除去固体，滤液分层，除去水层，有机层用50ml5％氢氧化钠溶液洗涤两次，用50ml10％柠檬酸溶液洗一次，再用50ml饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，除去二氯甲烷，得黄色固体41.9克，含量98.7％(HPLC定量分析法)，收率87.5％。
对比实施例100ml四口反应瓶加入50ml THF和3.2克硝基精氨酸(0.06mol)，搅拌得一混浊液。将液温冷至-15～-20℃，滴加1克(0.01mol)三乙胺，再滴加1.3克(0.01mol)氯甲酸异丁酯，然后在此温度下反应10分钟，滴加1.72克(0.01mol)(2R，4R)-4-甲基哌啶甲酸乙酯。10分钟后液温升至室温，搅拌过夜，反应结束。减压除去溶剂，加入65ml乙酸乙酯和25ml水，固体全溶后静置、分层，除去水层，乙酸乙酯层用15ml5％碳酸钠溶液洗、15ml10％柠檬酸溶液洗、25ml水洗后无水硫酸钠干燥，减压脱除溶剂，得黄色油状物，重量2.12克，含量97.8％(HPLC定量分析法)，收率45.6％。
权利要求
1.一种阿加曲班中间体的制备方法，其特征在于它是采用NG-硝基-N2-tBoc-L-精氨酸与(2R，4R)-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯缩合，用DCC作为脱水剂，其反应如下 具体的步骤在二氯甲烷溶剂中依次加入(2R，4R)-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯，DCC和NG-硝基-N2-tBoc-L-精氨酸，在-5～35℃下搅拌反应1-5小时，反应结束。加入50ml水，搅拌0.5-1小时，将反应液冷至0℃，过滤除去固体，滤液分层，除去水层，有机层分别用5-10％氢氧化钠溶液洗涤两次，用5-10％柠檬酸溶液洗一次，再用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，蒸出二氯甲烷，得黄色固体产物。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的反应物(2R，4R)-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯与NG-硝基-N2-tBoc-L-精氨酸的摩尔比1∶1.0～1.2。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的反应物与DCC的摩尔比1∶1～2。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的反应物与二氯甲烷的重量比1∶20～50。
全文摘要
本发明涉及一种阿加曲班中间体的制备方法，它是采用N
文档编号C07D211/00GK1951916SQ20061012933
公开日2007年4月25日 申请日期2006年11月10日 优先权日2006年11月10日
发明者宋洪海 申请人:天津市炜杰科技有限公司