专利名称：一种提纯制备高纯度荧光素及荧光素盐的新方法
技术领域：
本发明涉及一种提纯制备高纯度荧光素及荧光素盐的新方法，属于化学提纯领域。
背景技术：
高纯度荧光素二钠盐被广泛应用于眼底造影的注射制剂中，高纯度的荧光素二钠一般是 从髙纯度的荧光素制得，所以制备高纯度的荧光素钠盐，关键便是制得高纯度的荧光素。工业荧光素一般是从间苯二酚和苯酐热縮合而得，其中含有大量的杂质，主要有未反应 的间苯二酚以及酚酞及丫啶黄等，传统的荧光素提纯方法是用荧光素溶于碱液中，用活性碳 吸附杂质，再酸化析出荧光素，然后重复多次碱溶、酸化、过滤洗涤的过程。该工艺虽然可 得到符合药典要求的产物，但是用HPLC或薄层分析即可发现，仍有一些极性比较强的杂质 未被除去。问题的关键是，这些杂质在碱性条件下易溶于水，此时活性炭对其吸附性明显降 低，而在酸性条件下，这些杂质又很容易和荧光素共沉淀。所以用传统方法很难得到高纯度 的荧光素。《有机制备化学手册》，中巻，韩广甸等P280页，介绍了用荧光素重结晶的方法加以提 纯。由于荧光素有两种变体一不溶于醇醚的红色变体和溶于甲醇和乙醇的黄色变体，黄色变 体受热易转变为稳定的红色变体。在制备荧光素时，低温酸化析出的为黄色变体，此种变体 可溶于甲醇或乙醇。但从水中析出的黄色变体含有大量水分，不容易过滤，也不容易干燥， 而且在加热干燥或加热溶解过程中，黄色变体易转变为不溶解的红色变体，实际操作中非常 困难，并且产率低、废水产生量大。 发明内容为了克服上述技术困难，本发明利用荧光素或荧光素钠形成双乙酰荧光素的方法，极大 地改善了荧光素与杂质的分离效果。在制备双乙酰荧光素时，当双乙酰荧光素结晶析出时， 由于使用冰乙酸等强极性溶剂，大部分杂质由于易溶于溶剂而得以除去。此时的双乙酰荧光 素由于易溶于许多有机溶剂，如乙酸乙酯等，而杂质的极性比较强，在极性稍差的溶剂中， 用活性炭或硅胶吸附，可以很好地除去杂质。从而得到高纯度的双乙酰荧光素。再经过皂化、 酸化、成盐可以很容易得到高纯度的荧光素和荧光素盐。反应方程式如下本发明提纯制备高纯度荧光素及荧光素盐的新方法具有如下优点1、 与以前工艺比较，工序减少，操作简单，便于实现工业化。2、 双乙酰化合物容易形成漂亮的大型结晶，非常容易与杂质分离，便于提纯与精制。3、 由于避开了多次酸碱精制工序，从而极大地降低了废水的产生量，有利于环保治理。4、 所用溶剂可重复回收利用，回收溶剂后的残渣为杂质富集物，便于集中处理。5、 无论产率还是产品纯度都得到极大提高。 下面通过实施例对本发明进行具体描述 实施例一称取荧光素粗品100g于1000ml三口烧瓶中,加入冰乙酸430ml,乙酸酐73.5g(0.72mo1)、 吡啶34ml，搅拌加热回流至荧光素全部溶解，继续搅拌反应30分钟，得浅橙色溶液。冷却 到室温，析出片状晶体，过滤，用冷甲醇洗涤至近无色，再用50ml乙醚洗涤。所得固体于 50"6(TC干燥至恒重，得到纯品双乙酰荧光素101.2g。(产率81.0%) mp:203 205'C。薄层 显示为单一点。将纯品双乙酰荧光素100g (0.24mol)加入到1000ml三口烧瓶中，加入266ml甲醇，搅 拌均匀，慢慢加入257g2P/。甲醇钠溶液(l.OOmol)，充分搅拌反应至固体物质完全溶解，得 红色溶液，继续搅拌反应30分钟，然后慢慢加入300ml36"/。乙酸，搅拌反应5小时，过滤， 用50ml冷甲醇洗涤，再用水洗涤至浅黄色。所得固体于100"、 30mmHg真空干燥至恒重， 得纯品荧光素73.4g,产率92.0%。薄层分析显示为单一物质，HPLC纯度99.8%。精确称取纯品荧光素49.83g(0.15mo1)、分析纯无水碳酸钠16.05g(0.15mo1),共混于瓷蒸 发皿中，加入150ml水溶解，于蒸汽浴上加热蒸发至干。转移至真空干燥相中，于10(K115'C /30mmHg干燥至恒重，研碎，得橙色粉末状物质荧光素二钠盐56.40g ,产率100。/。， HPLC 纯度99.8%。 实施例二称取荧光素粗品100g于1000ml三口烧瓶中，加入丙酮550ml，乙酸酑73.5g (0.72mol)、 吡啶34ml,搅拌加热回流至荧光素全部溶解，继续搅拌反应30分钟，得浅橙色溶液。冷却 到室温，析出片状晶体，过滤，用冷甲醇洗涤至近无色，真空干燥，所得固体于乙酸乙酯中 加热回流溶解，加活性炭10g回流15分钟，趁热过滤，所得滤液减压浓縮至300ml,冷却结 晶，过滤，冷甲醇洗涤，所得固体于50 60'C干燥至恒重，得纯品双乙酰荧光素87.3g。(产 率69.9%) mp:203 205'C。薄层显示为单一点。将纯品双乙酰荧光素75g C0.18mo1)加入到1000ml三口烧瓶中，加入200ml甲醇，搅 拌均匀，慢慢加入156g20。/。氢氧化钠溶液(0.78mol)，充分搅拌反应至固体物质完全溶解， 得红色溶液，继续搅拌反应30分钟，然后慢慢加入225g36^乙酸，搅拌反应5小时，过滤， 用50ml冷甲醇洗涤，再用水洗涤至浅黄色。所得固体于100'C、 30mmHg真空干燥至恒重， 得纯品荧光素55.0g，产率:91.9%。薄层分析显示为单一物质，HPLC纯度99.6%。精确称取纯品荧光素49.83 g(0.15mo1)、分析纯无水碳酸钠16.05g(0.15mo1),共混于瓷蒸发皿中，加入150ml水溶解，于蒸汽浴上加热蒸发至干。转移至真空干燥相中，于100~115*0 /30mmHg干燥至恒重，研碎，得橙色粉末状物质荧光素二钠盐56.40g ，产率100%, HPLC 纯度99.6%。 实施例三称取粗品荧光素二钠盐112.9g于1000ml三口烧瓶中，加入二甲基甲酰胺350ml,乙酸酐 73.5g (0.72mol)、吡啶15ml,搅拌加热回流2小时，得浅橙色悬浊液体。趁热滤除副产物乙 酸钠，滤液冷却到室温，析出片状晶体，过滤，用冷甲醇洗涤至近无色，再用50ml乙醚洗涤， 所得固体于50~60'(:千燥至恒重，得纯品双乙酰荧光素92.8g。(产率74.3%)mp:203~205lC。 薄层显示为单一点。将纯品双乙酰荧光素91.6g (0.22mol)加入到1000ml三口烧瓶中，加入200ml水，搅拌 均匀，慢慢加入200g20。/。氢氧化钠溶液(l.OOmol),充分搅拌反应至固体物质完全溶解，得 红色溶液，继续搅拌反应30分钟，然后慢慢加入300ml36。/。乙酸，搅拌反应5小时，过滤， 用水洗涤至浅黄色。所得固体于100'C、 30mmHg真空干燥至恒重，得纯品荧光素69.8g,产 率95.5%。薄层分析显示为单一物质，HPLC纯度99.50/0。精确称取纯品荧光素49.83 g(0.15mo1)、分析纯无水碳酸钠16.05g(0.15mo1),共混于瓷蒸 发皿中，加入150ml水溶解，于蒸汽浴上加热蒸发至干。转移至真空干燥相中，于10(M15r /30mmHg千燥至恒重，研碎，得橙色粉末状物质荧光素二钠盐56.40g ，产率100%, HPLC 纯度99.5%。 实施例四称取荧光素粗品100g于1000ml三口烧瓶中，加入冰乙酸430ml，乙酰氯113g(1.44mo1)、 吡啶34ml，搅拌加热回流至荧光素全部溶解，继续搅拌反应30分钟，得浅橙色溶液。冷却 到室温，析出片状晶体，过滤，用冷甲醇洗涤至近无色，再用50ml乙醚洗涤，所得固体于 5"0"C干燥至恒重，得到纯品双乙酰荧光素106.3g。(产率85.1%) mp:203 205"。薄层 显示为单一点。后续操作同实施例一，所得荧光素及荧光素钠纯度99.6%。 实施例五称取荧光素粗品100g于1000ml三口烧瓶中，加入丙酮550ml,乙酰氯113g (1.44mol)、 吡啶34ml,搅拌加热回流至荧光素全部溶解，继续搅拌反应30分钟，得浅橙色溶液。冷却 到室温，析出片状晶体，过滤，用冷甲醇洗涤至近无色，真空干燥。所得固体于乙酸乙酯中 加热回流溶解，加活性炭回流15分钟，趁热过滤。所得滤液减压浓縮至300ml，冷却结晶， 过滤，冷甲醇洗涤，所得固体于50~60*0干燥至恒重，得纯品双乙酰荧光素94.4g。(产率 75.6°/。) mp:203 205'C。薄层显示为单一点。后续操作同实施例二，所得荧光素及荧光素钠纯度99.2%。 实施例六称取粗品荧光素二钠盐112.9g于1000ml三口烧瓶中，加入二甲基甲酰胺350ml，乙酰氯113g U.44mo1)、吡啶15ml，搅拌加热回流2小时，得浅橙色悬浊液体。趁热滤除副产物氯化钠， 滤液冷却到室温，析出片状晶体，过滤，用冷甲醇洗涤至近无色，再用50ml乙醚洗漆，所得 固体于5(K60'C干燥至恒重，得纯品双乙酰荧光素97.4g。(产率77.9%) mp:203 205'C。薄 层显示为单一点。后续操作同实施例三，所得荧光素及荧光素钠纯度99.5%。
权利要求
1. 一种提纯制备高纯度荧光素及荧光素盐的新方法，该方法的特征在于该方法利用在一定反应介质中加入催化剂使提纯原料与乙酰化试剂发生反应，形成双乙酰荧光素，从而利用杂质和双乙酰荧光素的不同化学极性，使杂质分离，再经过皂化、酸化、成盐可以得到高纯度的荧光素、荧光素盐，化学反应式如下id="icf0001" file="S2008100160081C00011.gif" wi="32" he="22" top= "53" left = "36" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="no"/>或id="icf0002" file="S2008100160081C00012.gif" wi="108" he="22" top= "51" left = "75" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="no"/>
2、 如权利要求1所述一种提纯高纯度荧光素及荧光素盐的新方法，其特征在于乙酰化试剂 可以是乙酸酐，也可以是乙酰氯。
3、 如权利要求1所述一种提纯高纯度荧光素及荧光素盐的新方法，其特征在于反应介质为 极性溶剂，如冰乙酸、丙酮或二甲基甲酰胺等。
4、 如权利要求1所述一种提纯高纯度荧光素及荧光素盐的新方法，其特征在于所得双乙酰 荧光素化合物与杂质分离时，可以用重结晶或硅胶吸附的方法；因为双乙酰荧光素化合物极 性弱，而杂质及杂质的衍生物具有较强的极性，容易溶于极性溶剂，或在非极性溶剂中被活 性炭或硅胶吸附。
5、 如权利要求1所述一种提纯高纯度荧光素及荧光素盐的新方法，其特征在于提纯原料可 以是荧光素，也可以是荧光素的盐，如钠盐。
6、 如权利要求1所述一种提纯高纯度荧光素及荧光素盐的新方法，其特征在于反应催化剂 为吡啶类化合物。
全文摘要
本发明公开了一种提纯制备高纯度荧光素及荧光素盐的新方法，该方法利用在一定反应介质中加入催化剂使提纯原料与乙酰化试剂反应，形成双乙酰荧光素，从而利用杂质和双乙酰荧光素的不同特性，使杂质分离，再经过皂化、酸化、成盐可以得到高纯度的荧光素或荧光素盐。该方法工艺简单，实际操作容易，环境友好，方便大规模生产。
文档编号C07D493/00GK101270124SQ200810016008
公开日2008年9月24日 申请日期2008年5月8日 优先权日2008年5月8日
发明者高乾善 申请人:山东省分析测试中心