专利名称：一种天然α-生育酚琥珀酸单酯的提纯方法
技术领域：
本发明涉及树脂吸附法提纯技术，具体涉及一种从粗产品中提纯分离得到 天然a-生育酚琥珀酸单酯的方法。
技术背景天然a-生育酚(皿-a-tocopherol)是强抗氧化剂。天然生育酚的生理活性 大大高于合成生育酚，价格也较高，所以天然生育酚的用途主要在医药、食品、 化妆品等与人体有关的方面。(皿J -a-生育酚是细胞内抗氧化剂，能够抑制有 毒的脂类过氧化物的生成，使不饱和酸稳定，提高刺激性辅酶Q的免疫性反应。 对脑垂体-中脑系统有调节作用，促进腺激素的产生，预防细胞生理衰老，防止 致癌物游离基的产生。传统的a-生育酚为粘性油状物，通常用于制作软胶囊，但制作片剂、硬胶 囊工艺上无法达到预期目的。普遍存在的问题为单位重量产品的生物活性低、 片剂和胶囊占用体积大、易吸潮、易染菌、不易压片等。天然a-生育酚琥珀酸单酯(又称天然^a-生育酚琥珀酸单酯)解决了干粉类 产品用于制作片剂和硬胶囊的不足之处，是白色结晶，可以得到很高纯度的产 品，并且包装、运输方便，可以压片，所以是国际市场上常见的天然a-生育酚 衍生物，在保健食品领域具有十分广阔的应用前景。维生素E琥珀酸单酯作为 营养补充剂在欧美日等发达国家广泛应用于健康食品中。相比其它维生素E衍生物，天然a-生育酚琥珀酸单酯还具有一定的抗癌能 力，它可以在不影响正常细胞生长的前提下，诱导癌细胞变异，抑制癌细胞增 殖直至其自然凋亡。其它维生素E产品均没有该生理活性。因此，天然a-生育 酚琥珀酸单酯有巨大的潜在市场前景。天然a-生育酚琥珀酸单酯的提纯技术是生产中的一个关键技术。合成反应 中原料带进的杂质及副反应产生的杂质对于后续结晶工艺会产生很大影响，会 导致收率低、母液中残留量较大、晶形差等现象。天然a-生育酚琥珀酸单酯的 专利通常是关于合成和/或结晶等方面的工艺，有关天然(x-生育酚琥珀酸单酯分 离纯化的专利很少。例如，美国专利3538119以强碱弱酸盐如醋酸钠、醋酸钾、 醋酸钙、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、琥珀酸钾、琥珀酸钠等为催化剂，不用 溶剂，在80-18(TC下由a-生育酚与琥珀酸酐反应得到天然a-生育酚琥珀酸单酯曰本专利特开平5-170757以三乙胺为催化剂、甲乙酮为溶剂，在室温至40 'C下反应得到产品。国内外报导的天然(x-生育酚琥珀酸单酯分离纯化方法以柱 层析方法为主，主要采用硅胶及氧化铝作为层析固定相。英国专利1114150在 合成得到粗品之后，进一步用氧化铝作为固定相进行层析精制，得到了纯度 99.5%的精品。李卫红等(中国公共卫生，2005， 21 (2) :173-175)在合成黄色 油状粗品后采用硅胶柱作为固定相对粗品进行了分离纯化。在实际生产中，硅 胶及氧化铝在重复利用上都有一定局限，造成消耗过大，生产费用较高。 发明内容本发明的目的是提供一种从合成粗产品中提纯天然ct-生育酚琥珀酸单酯的 方法，用大孔吸附树脂吸附法从天然a-生育酚琥珀酸单酯合成粗产品中提取分 离出含量92%以上的天然a-生育酚琥珀酸单酯。本发明采用的技术方案如下以天然a-生育酚琥珀酸单酯粗产品为起始原料，经柱层析分离、浓縮得到 含量92%以上的天然(x-生育酚琥珀酸单酯；整个分离过程如下1) 大孔吸附树脂用湿法装柱，预处理后备用；将粗产品溶液通过层析柱， 吸附于树脂上，流量为0.5~3 BV/h，温度为10 50。C;2) 用甲醇冲洗层析柱，将吸附在树脂上的天然a-生育酚琥珀酸单酯洗脱下 来，流量为0.5 3 BV/h，温度为10 5(TC;分部收集洗脱液，合并含天然a-生 育酚琥珀酸单酯的流分；经浓縮即得含量92%以上的天然a-生育酚琥珀酸单酯；3) 多次使用后的失效树脂用酸、碱再生后重复利用。 所述的大孔吸附树脂型号为Z809， Z810， D301。 所述的大孔吸附树脂采用甲醇进行预处理。 所述的粗产品中天然a-生育酚琥珀酸单酯含量为60 90%。 所述的树脂再生所用酸为硫酸或醋酸，所述的碱为氢氧化钠或氢氧化钾。 本发明具有的有益效果是从天然a-生育酚琥珀酸单酯合成粗产品中提纯天然a-生育酚琥珀酸单酯。 在分离过程中采用大孔吸附树脂固定床吸附的方法，具有工艺流程简单、生产 成本低、易于产业化的优点。最终产品纯度达到92%以上，整个工艺过程的总 收率高达95%以上。该方法具有工艺流程简单，生产成本低，易于产业化的优 点。
具体实施方式
实施例l:1) 含量为82.3%的天然&生育酚琥珀酸单酯粗品，溶于一定量甲醇中，浓 度为0.3 g/ml，作为层析分离的起始液。2) 层析柱尺寸为020x500 mm，内部装填Z809大孔吸附树脂，床层高度为 32cm。 10ml上述溶液以2ml/min的流量通入层析柱中，温度控制在30'C。进 料完成后用600 ml甲醇冲洗层析柱，流量为2 ml/min，洗脱吸附在树脂上的天 然a-生育酚琥珀酸单酯，分部收集洗脱液，直到流出溶液TLC检测没有天然a-生育酚琥珀酸单酯为止。3) 用HPLC检测各个流分的组成及其含量，合并含有天然a-生育酚琥珀酸 单酯的流分，浓縮后即得高含量天然a-生育酚琥珀酸单酯。HPLC检测纯度为 93.22%，天然a-生育酚琥珀酸单酯的总收率为95.48%。实施例2:1) 含量为80.72%的天然01-生育酚琥珀酸单酯粗品，溶于一定量甲醇中，浓 度为0.3g/ml，作为层析分离的起始料液。2) 层析柱尺寸为020x500 mm，内部装填Z809大孔吸附树脂，床层高度为 32cm。 10ml上述溶液以2ml/min的流速通入层析柱中，温度控制在30。C。进 料完成后用600 ml甲醇冲洗层析柱，流速为2 ml/min，洗脱吸附在树脂上的天 然ct-生育酚琥珀酸单酯，分部收集洗脱液，直到流出溶液TLC检测没有天然a-生育酚琥珀酸单酯为止。3) 用HPLC检测各个流分的组成及其含量，合并含有天然a-生育酚琥珀酸 单酯的流分，浓縮后即得高含量天然a-生育酚琥珀酸单酯。HPLC检测纯度为 92.57%，天然a-生育酚琥珀酸单酯的总收率为95.22%。实施例3:实施例1中，大孔吸附树脂改用D301，上样量为10 ml (溶液组成及含量 与例1相同)。采用与实施例1相同的工艺步骤。得到的天然a-生育酚琥珀酸单 酯经HPLC检测纯度为92.06%，天然01-生育酚琥珀酸单酯的总收率为95.23%。实施例4:实施例1中，层析柱温由3(TC改为10'C。采用与实施例1相同的工艺步骤。 流量为0.8ml/min。得到的天然a-生育酚琥珀酸单酯用HPLC检测纯度为93.72 %，天然a-生育酚琥珀酸单酯的总收率为95.33%。实施例5:实施例1中，层析柱温由3(TC改为50。C。采用与实施例1相同的工艺步骤。 流量为5ml/min。得到的天然a-生育酚琥珀酸单酯用HPLC检测纯度为92.04%，天然a-生育酚琥珀酸单酯的总收率为97.13。％。 实施例6:实施例1中，原料含量改为90.1%，采用与实施例1相同的工艺步骤。得 到的天然a-生育酚琥珀酸单酯用HPLC检测纯度为94.23%，天然a-生育酚琥 珀酸单酯的总收率为95.21%。实施例7:实施例1中，原料含量改为60.2%，采用与实施例1相同的工艺步骤。得 到的天然a-生育酚琥珀酸单酯用HPLC检测纯度为92.07%，天然a-生育酚琥 珀酸单酯的总收率为95.02%。实施例8:实施例1中，大孔吸附树脂改用Z810。采用与实施例l相同的工艺步骤。 得到的天然a-生育酚琥珀酸单酯经HPLC检测纯度为93.11%，天然a-生育酚 琥珀酸单酯的总收率为95.32%。实施例9:1) 天然a-生育酚琥珀酸单酯结晶母液浓縮后a-生育酚琥珀酸单酯含量为 67.56%，溶于一定量甲醇中，浓度为0.2g/ml，作为层析分离的起始料液。2) 层析柱尺寸为。20x500 mm，内部装填Z809大孔吸附树脂，床层高度为 32cm。 10ml上述溶液以2ml/min的流速通入层析柱中，温度控制在30。C。进 料完成后用600 ml甲醇冲洗层析柱，流速为2 ml/min，洗脱吸附在树脂上的天 然a-生育酚琥珀酸单酯。分部收集洗脱液，直到流出溶液TLC检测没有天然a-生育酚琥珀酸单酯为止。3) 用HPLC检测各个流分的组成及其含量，合并含有天然a-生育酚琥珀酸 单酯的流分，浓縮后即得高含量天然a-生育酚琥珀酸单酯。HPLC检测纯度为 92.09%，天然a-生育酚琥珀酸单酯的总收率为96.34%。实施例10:实施例1重复10次后树脂性能开始下降。用300 ml 5%硫酸水溶液和300 ml 5%氢氧化钠水溶液依此再生。用纯净水冲洗到中性，并用甲醇置换床层中的水。 采用与实施例l相同的工艺步骤。得到的天然a-生育酚琥珀酸单酯经HPLC检 测纯度为93.31%，天然a-生育酚琥珀酸单酯的总收率为95.48%。实施例ll:实施例IO再生后的树脂再次重复使用15次后树脂性能开始下降。用300 ml 5%醋酸水溶液和300 ml 5%氢氧化钾水溶液依此再生。用纯净水冲洗到中性，并用甲醇置换床层中的水。采用与实施例l相同的工艺步骤。得到的天然(X-生育酚琥珀酸单酯经HPLC检测纯度为92.15%，天然a-生育酚琥珀酸单酯的总 收率为95.12%。
权利要求
1.一种天然α-生育酚琥珀酸单酯的提纯方法，其特征在于以天然α-生育酚琥珀酸单酯粗产品为起始原料，经柱层析分离、浓缩得到含量92％以上的天然α-生育酚琥珀酸单酯；整个分离过程如下1)大孔吸附树脂用湿法装柱，预处理后备用；将粗产品溶液通过层析柱，吸附于树脂上，流量为0.5～3BV/h，温度为10～50℃；2)用甲醇冲洗层析柱，将吸附在树脂上的天然α-生育酚琥珀酸单酯洗脱下来，流量为0.5～3BV/h，温度为10～50℃；分部收集洗脱液，合并含天然α-生育酚琥珀酸单酯的流分；经浓缩即得含量92％以上的天然α-生育酚琥珀酸单酯；3)多次使用后的失效树脂用酸和碱再生后重复利用。
全文摘要
本发明公开了一种天然α-生育酚琥珀酸单酯的提纯方法。以天然α-生育酚琥珀酸单酯粗产品为起始原料，经柱层析分离、浓缩得到含量92％以上的天然α-生育酚琥珀酸单酯。本发明在分离过程中采用大孔吸附树脂固定床吸附的方法，具有工艺流程简单、生产成本低、易于产业化的优点。最终产品纯度达到92％以上，整个工艺过程的总收率高达95％以上。该方法具有工艺流程简单，生产成本低，易于产业化的优点。
文档编号C07D311/72GK101220017SQ20081005948
公开日2008年7月16日 申请日期2008年1月24日 优先权日2008年1月24日
发明者任其龙, 吴彩娟, 倩 孙, 杨亦文, 苏宝根, 邢华斌 申请人:浙江大学