专利名称：一种简化高纯度草乌甲素的制备方法
技术领域：
本发明涉及从中药材中提取有效成份的工艺方法，特别是从一类植物草乌的块根 中提取草乌甲素的方法。
背景技术：
草乌甲素(Bulleyaconitione A)分子式C35H49010N，分子量643. 77，为无色棱状 晶体或白色粉末。可溶于乙醚、三氯甲烷、乙醇、稀酸水，不溶于水，具有较强的镇痛及明显 的抗炎作用。实验证明，本品的镇痛作用是中枢性的，并与脑内5-羟色胺的水平有密切联 系，起效时间比吗啡慢(平均37. 8分钟)，但维持时间长(平均9.3小时)，且无成瘾性。其 抗炎作用不通过肾上腺体系，而与抑制PG水平有关；本品还有解热和局部麻醉作用。用药 后对患者心电、脑电、肝肾功能及尿常规检查与用药前比较无异常改变。临床上本品对风湿 性关节炎、类风湿性关节炎、腰肌劳损、肩周炎、四肢扭伤、挫伤等有较好的疗效，还可用于 癌痛、带状疱疹。治疗剂量下本品对心、肝、肾、肺、脾、胃功能无损害，也无明显毒副作用。中国专利CN101555227A公开了一种高纯度草乌甲素的制备方法，是将原料滇西 草乌，经酸性甲醇或酸性乙醇浸泡，经渗漉或回流提取制得酸水提取液，进一步用碱化剂调 节PH6. 0-6. 8，萃取，上柱洗脱、得草乌甲素收集液，经甲醇或乙醇溶解，过滤，收集结晶得最 终产品。《中国原料植物药》和罗士德等在《化学学报》1985，43(6) 577发表了 “龙头乌头 生物碱成分研究”的文献中公开了有关草乌甲素提取采用氨水碱化，苯提取，氯仿萃取，氧 化铝柱层析，乙醚_苯洗脱的方式分离草乌甲素，该方法所使用药材为龙头乌头，药材难大 量获得，使用苯，为高致癌物质，乙醚为极易燃易爆有机溶剂，实际操作过程烦琐，安全生产 难控制，获得的草乌甲素经高效液相色谱检测含量在90-95%。存在含量偏低，生产成本高， 生产安全风险高等问题，工业化大生产困难。在CN1054976A的专利中公开了从滇乌碱半合 成草乌甲素的方法，实际操作中因反应产生的杂质难分离纯化，分离得到合格的起始原料 滇乌碱困难，导致生产成本高，亦较难工业化大生产。
发明内容
本发明的目的是提供一种从含草乌甲素的一类乌头属植物草乌中，通过采用碱性 低毒性溶剂提取分离，获得高含量草乌甲素的工艺，该工艺生产流程简化，成本低，无三废 排放，操作简单，生产安全性高，草乌甲素提取率高，可以实现工业化大生产。本发明的方法按以下步骤进行—种简化高纯度草乌甲素的制备方法，包括下列操作步骤一 )提取将草乌的块根净选，用1-2%碱溶液浸泡24-26小时，取出，粉碎成粗粉，用溶剂汽 油或石油醚60-90或正己烷热回流提取五次，每次溶剂用重量为药材重量的5-6倍，第一 次、第二次提取回流时间分别为2小时，第三次、第四次、第五次提取回流时间分别为1小时，合并回流提取液，冷却至常温，备用；二)上柱洗脱先将硅胶装柱，将(一)步骤得到的提取液上柱，用体积比溶剂汽油乙酸乙酯 三乙胺或二乙胺是90-95 1-10 1-5 或石油醚(60-90)乙酸乙酯三乙胺或二乙胺 是90-95 1-10 1-5)或正己烷乙酸乙酯三乙胺或二乙胺是90-95 1-10 1-5, 进行洗脱，按常规技术收集洗脱液，待浓缩；三)浓缩、结晶将步骤(二)得到的洗脱液减压浓缩至干，再用溶剂汽油，重量为原料草乌块根重 量的5%进行热溶，常温静置20-24小时，结晶，抽滤，干燥，得草乌甲素粗品；四)精制将步骤(三)草乌甲素粗品用质量体积比(g/ml)为1 15-20的甲醇在 45°C _55°C的水浴上充分溶解，过滤，滤液在45°C _55°C的水浴上保温30分钟，在搅拌的条 件下滴加纯净水或蒸馏水，用水量为原体积的30-50%，加完水，常温静置20-24小时，形成 结晶，抽滤，去除液体部分，再用纯净水或蒸馏水反复洗涤3次结晶物，抽干，干燥，得成品。本发明所述的碱溶液是碳酸氢钠的水溶液或氨水。本发明中草乌甲素的含量测定，采用高效液相检测，检测结果显示，草乌甲素含量 为97%以上。本发明步骤(四)采用了纯净水或蒸馏水作结晶技术手段，其特点带来两个方面 的进步，一是使结晶时间大幅缩短，较现有技术的48小时左右缩短为24小时左右；二是提 高收率。步骤(一)、(二)、(三)所用溶剂均可回收再利用。无污物排放。这是本发明一 大贡献。本发明将提取液直接上柱，极大地缩短了生产周期，降低溶剂的消耗。 本发明生产周期短，操作简单，生产成本低。有效成份含杂质少，环保无污染，生产 安全，产品质量稳定，纯度高。下面结合实施例对本发明作进一步说明，本发明不受实施例的限制。实施例1、一 )提取取草乌的块根10KG，净选，用1-2%碱溶液5L浸泡24_26小时，取出，粉碎成粗粉， 直径1-5毫米，用溶剂汽油或石油醚60-90或正己烷热回流提取五次，每次溶剂用重量为药 材重量的5-6倍，第一次、第二次提取回流时间分别为2小时，第三次、第四次、第五次提取 回流时间分别为1小时，合并回流提取液250-300L，冷却至常温，备用。二 )上柱洗脱先将硅胶装柱，将(一)步骤得到的提取液250-300L上柱，用体积比溶剂汽 油乙酸乙酯三乙胺或二乙胺是90-95 1-10 1-5:或石油醚(60-90)乙酸乙 酯三乙胺或二乙胺是90-95 1-10 1-5)或正己烷乙酸乙酯三乙胺或二乙胺是 90-95 1-10 1-5，进行洗脱，按常规技术收集洗脱液，得到150L洗脱液，待浓缩；三)浓缩、结晶将步骤(二)得到的150L洗脱液减压浓缩至干，再用溶剂汽油，重量为原料草乌
4块根重量的5%进行热溶，常温静置20-24小时结晶，抽滤，干燥，得草乌甲素粗品10-30 克；四)精制将步骤(三)草乌甲素粗品用质量体积比(g/ml)为1 15-20的甲醇在 45°C _55°C的水浴上充分溶解，过滤，滤液在45°C _55°C的水浴上保温30分钟，在搅拌的条 件下滴加纯净水或蒸馏水，用水量为原体积的30-50%，加完水，常温静置20-24小时，形成 结晶，抽滤，去除液体部分，再用纯净水或蒸馏水反复洗涤3次结晶物，抽干，干燥，得成品， 成品量是粗品量的90-95%。草乌甲素的含量测定，采用高效液相检测，检测结果显示，草乌甲素含量为 98. 2%。
权利要求
一种简化高纯度草乌甲素的制备方法，其特征在于，包括下列操作步骤一)提取将草乌的块根净选，用1-2％碱溶液液泡24-26小时，取出，粉碎成粗粉，用溶剂汽油或石油醚60-90或正己烷热回流提取五次，每次溶剂用重量为药材重量的5-6倍，第一次、第二次提取回流时间分别为2小时，第三次、第四次、第五次提取回流时间分别为1小时，合并回流提取液，冷却至常温，备用；二)上柱洗脱先将硅胶装柱，将(一)步骤得到的提取液上柱，用体积比溶剂汽油∶乙酸乙酯∶三乙胺或二乙胺是90-95∶1-10∶1-5或石油醚(60-90)∶乙酸乙酯∶三乙胺或二乙胺是90-95∶1-10∶1-5)或正己烷∶乙酸乙酯∶三乙胺或二乙胺是90-95∶1-10∶1-5，进行洗脱，按常规技术收集洗脱液，待浓缩；三)浓缩、结晶将步骤(二)得到的洗脱液减压浓缩至干，再用溶剂汽油，重量为原料草乌块根重量的5％进行热溶，常温静置20-24小时，结晶，抽滤，干燥，得草乌甲素粗品；四)精制将步骤(三)草乌甲素粗品用质量体积比为1∶15-20的甲醇在45℃-55℃的水浴上充分溶解，过滤，滤液在45℃-55℃的水浴上保温30分钟，在搅拌的条件下滴加纯净水或蒸馏水，用水量为原体积的30-50％，加完水，常温静置20-24小时，形成结晶，抽滤，去除液体部分，再用纯净水或蒸馏水反复洗涤3次结晶物，抽干，干燥，得成品。
2.根据权利要求1所述的一种简化高纯度草乌甲素的制备方法，其特征在于，所述的 碱溶液是碳酸氢钠的水溶液或氨水。
全文摘要
本发明涉及一种简化高纯度草乌甲素的制备方法，按以下步骤进行草乌的块根用1-2％碱溶液浸泡，粉碎，汽油或石油醚6等热回流提取，提取液上柱，用体积比溶剂汽油∶乙酸乙酯∶三乙胺或二乙胺是90-95∶1-10∶1-5等进行洗脱，洗脱液减压浓缩至干，再用溶剂汽油热溶，常温静置20-24小时，结晶，抽滤，干燥，得的草乌甲素粗品用甲醇在45℃-55℃的水浴上充分溶解，滤液在45℃-55℃的水浴上保温30分钟，滴加纯净水或蒸馏水助结晶，常温静置20-24小时，形成结晶，抽滤，去除液体部分，洗涤3次结晶物，抽干，干燥，得成品。该工艺生产流程简化，成本低，无三废排放，操作简单，生产安全性高，草乌甲素提取率高。
文档编号C07D221/22GK101830849SQ201010166539
公开日2010年9月15日 申请日期2010年5月10日 优先权日2010年5月10日
发明者张红彬 申请人:张红彬