专利名称：一种具有高效抗癌活性的黄姜盾叶新苷的制备方法及其用途的制作方法
一种具有高效抗癌活性的黄姜盾叶新苷的制备方法及其用途技术领域
本发明以药用植物-盾叶薯蓣(Dioscorea zingiberensis C. H. Wright.)即黄姜 为原料，采用溶剂提取总皂苷，柱色谱等方法分离疏水性皂苷组分。黄姜盾叶新苷进行了 体内外抗肿瘤活性研究，对结肠癌、肺癌、乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌等肿瘤具有明显地抑制活 性。
背景技术：
肿瘤是危害人类健康和生命的主要疾病。全世界每年约有500万人死于恶性肿 瘤。近年来，由于环境的恶化，以及现代人的工作压力，疾病的传播，恶性肿瘤的发病率呈上 升趋势，并成为继心血管疾病之后的第二大致死病因。因此，全球每年投入大量的人力物力 用于研究开发防治癌症的新药物。近年来，药物学专家除了研究西药以外，也对中药进行了 很多研究，对恶性肿瘤形成的机理也进行探讨，组合化学、基因工程等先进技术的发明和应 用加速了对恶性肿瘤药物开发进程。特别是目前以天然活性成分为先导化合物寻找新药有 广阔的发展前景。迄今为止已评估了 4万余种高等植物的抗肿瘤活性。据国外资料介绍， 全世界已经开发了几百种抗癌新药，其中有很多属于天然植物提取物，近年来，研究人员从 传统中药进行的广泛的筛选，发现了大量的抗肿瘤植物，如红豆杉、银杏、喜树、灵芝等。但 上述植物中，人们对红豆杉、喜树碱的研究较多，很多植物由于生长缓慢，资源贫乏，很难满 足市场需求。
近年来人们发现留体皂苷具有广泛的抗肿瘤活性，是一种高效，低毒的较理想的 抗癌药物。留体皂苷(Steroidal saponins)是一类螺留烷(spirosanes)化合物衍生物的 寡糖苷。主要分布在薯蓣科、百合科、玄参科、菝葜科、龙舌兰科等植物中，其他科如石蒜科、 豆科以及鼠李科的一些植物中也含有留体皂苷。常用中药知母、天门冬、麦门冬、七叶一枝 花等都均有大量留体皂苷。留体皂苷经水解脱糖而得的苷元，除因作为天然人工半合成甾 体激素类药物和避孕用药的基础而著名外，其皂苷本身的药用价值近十几年来也得到较快 发展。研究发现，某些皂苷具有降血脂、降血糖、抗癌、抗病毒、抗菌抗感染、治疗冠心病及调 节生理机能等活性。菝葜(parillin)具有显著的抗霉菌作用。蒺藜(Tribulus terresris) 总皂苷不但用于治疗冠心病，还可以防止肺心病、降血压、增强性功能与抗衰老等作用。以 黄山药(Dioscorea panthaiapraia etBurkill)为原料提取而得的甾体总皂苷制成的地奥 心血康，用于治疗冠心病、心绞痛、气短、心悸、胸闷、胸痛等症状，总有效率达90%以上。可 见，随着现代分离技术的进步，研究手段的发展，使得极性较大，糖链复杂的皂苷也有突破 性发展，这将促进留体皂苷自身药用价值的发展和利用。
薯蓣皂苷(dioscin)是留体皂苷中的重要成分，薯蓣皂苷具有较好的生物活 性。前苏联的科研人员发现高加索薯蓣中的皂苷提取物有降胆固醇的作用，临床实验也 有证明。80年代Ravikumer等发现云南白药中的薯蓣皂苷有抗癌活性。另外薯蓣皂苷 元(diosgenin)及其苷还有抗关节炎作用。从重楼、穿龙薯蓣(D. nipponica)中分离得到的薯蓣皂苷具有明显的心血管、抗肿瘤和抗真菌的活性。最近几年的研究发现薯蓣皂苷 (dioscin)对肺癌、乳癌、胃癌、白血病、结肠癌、宫颈癌、黑色素等肿瘤细胞都有很好的细胞 毒性。目前，国内以不同种的薯蓣属植物为原料，提取其总甾体皂苷作为临床上的降血脂药 已有数家工厂生产，其中用盾叶薯蓣(D. zingibernsis)为原料研制成功的新药“盾叶冠心 宁”，临床治疗冠心病、心绞痛有一定疗效。
经文献检索发现，在临床上，留体皂苷主要运用于降血脂，治疗心血管疾病等。工 业上，盾叶薯蓣作为原料主要用于生产皂素，作为合成留体激素类药物和避孕药的原料。同 时，在临床上主要应用于治疗心血管疾病，但其留体皂苷的成分并不十分清楚，且目前的研 究并未涉及抗肿瘤活性研究。目前，在留体皂苷抗肿瘤活性研究中，薯蓣皂苷(dioscin)，甾 体皂苷元(diosgenin)等报道较多，盾叶新苷(zingiberensis saponin)并没有文献报道。发明内容
本发明的目的在于提供一种制备黄姜盾叶新苷的方法。
本发明的另一个目的在于提供黄姜盾叶新苷在制备用于治疗或预防癌症的药物 中的用途。
黄姜盾叶新苷(zingiberensis saponin)，其结构特征为
权利要求
1.一种制备下式结构的黄姜盾叶新苷的方法
2.根据权利要求1的方法，包括以下步骤(1)将药用植物黄姜块茎烘干，粉碎，按药用植物粉末重量的2-3倍加入70-100%(体 积比)乙醇浸提IO-M小时，固液分离；(2)过滤分离的固相按药用植物重量的3-5倍加入70-100%(体积比)乙醇回流2-5 小时，趁热过滤，重复回流3-5次；(3)将浸泡的液相与热回流提取的液相合并后，减压蒸馏回收乙醇，得褐色浸膏；(4)将褐色浸膏按重量的6-10倍加水超声波溶解；(5)将⑷得到的混合物离心，分离水相与固相；(6)将( 得到的固相得到的固相冷冻干燥得到黄姜留体总皂苷组分；(7)采用正相硅胶柱色谱、凝胶色谱、重结晶分离纯化，得到黄姜盾叶新苷。
3.根据权利要求1的方法，其中溶剂提取在室温至78°C的温度下浸润提取，或回流提取。
4.根据权利要求1的方法，其中所述正相硅胶柱色谱为常压或加压硅胶柱色谱，采用 选自苯/丙酮、二氯甲烷/丙酮、三氯甲烷/丙酮、苯/甲醇、二氯甲烷/甲醇、三氯甲烷/ 甲醇、乙酸乙酯/甲醇、苯/丙酮/水、三氯甲烷/甲醇/水、二氯甲烷/甲醇/水或乙酸乙 酯/甲醇/水中的一种或多种洗脱剂等度洗脱或梯度洗脱。
5.根据权利要求1的方法，其中所述凝胶色谱的洗脱剂选自甲醇/水，乙醇/水的一种 或多种洗脱剂等度洗脱或梯度洗脱。
6.根据权利要求1的方法，其中所述重结晶步骤是将产物溶解在甲醇中重结晶。
7.具有下式结构的黄姜盾叶新苷在制备用于治疗或预防癌症的药物中的用途
8.根据权利要求7的用途，其中癌症选自结肠癌、肺癌、乳癌、宫颈癌和卵巢癌。
全文摘要
本发明提供了一种制备具有下式结构的黄姜盾叶新苷的方法，包括以下步骤以黄姜的块茎为原料，采用一种或多种选自水和C1-4-脂肪醇的溶剂提取，减压浓缩、冷冻干燥得到黄姜甾体总皂苷组分，采用正相硅胶柱色谱、凝胶色谱、重结晶分离纯化，得到黄姜盾叶新苷。本发明还涉及具有下式结构的黄姜盾叶新苷在制备用于治疗或预防癌症的药物中的用途，其中所述癌症选自结肠癌、肺癌、乳腺癌、宫颈癌和卵巢癌。
文档编号C07J71/00GK102030813SQ20101054106
公开日2011年4月27日 申请日期2010年11月10日 优先权日2010年11月10日
发明者倪晋仁, 吴晓华, 黄文 申请人:北京大学