专利名称：一种高纯度阿扎霉素b的制备方法
技术领域：
本发明属于工业微生物技术领域，涉及药品原料的制备方法，具体涉及到一种从发酵菌丝体中分离纯化阿扎霉素B的制备方法。
背景技术：
阿扎霉素B是一种从链霉菌iStreptomyces培养液中分离出的具有对称性的十六元环大环双内酯抗生素，分子式C54H88O18，相对分子质量1025，结构式如
权利要求
1.种高纯度阿扎霉素B的制备方法，其特征在于该方法包括下述步骤: 1)常温下，在发酵液中加入助滤剂搅拌30分钟-90分钟至助滤剂分散均匀，固液分离，得到阿扎霉素B菌丝体； 2)常温条件下，在阿扎霉素B菌丝体中加入70-95%的乙醇浸泡，固液分离，得到阿扎霉素B浸提液； 3)将阿扎霉素B浸提液通过大孔脱色树脂脱色，得到脱色液； 4)将阿扎霉素B脱色液用水稀释至乙醇浓度30%-40%后导入大孔吸附树脂吸附； 5)吸附完毕，使用极性溶剂与水的混合液进行梯度解吸，HPLC在线监测，收集HPLC含量大于95%的阿扎霉素B解吸液，浓缩，得解吸浓缩液； 6)解吸浓缩液萃取后，浓缩，得阿扎霉素B粗提物； 7)粗提物加入溶剂结晶，固液分离得到阿扎霉素B精粉。
2.据权利要求1所述的方法，其中步骤I)中的助滤剂为珍珠岩或硅藻土，助滤剂的用量为每升发酵液加入助滤剂0.01-0.1千克。
3.据权利要求1所述的方法，其中步骤2)70-95%的乙醇加入量为每千克菌丝中加入2-6升。
4.据权利要求1所述的方法，其中步骤3)中的大孔脱色树脂为S-8、LX-700、D290、XDA-7或D301树脂，树脂的用量为每升阿扎霉素B浸提液使用树脂0.01-0.1升，树脂柱径高比为1:3-1:5，流速为1-3倍柱体积/小时。
5.据权利要求1所述的方法，其中步骤4)中的大孔吸附树脂为XAD-1600、HZ816、AB-8、X-5和D312树脂，树脂的用量为每升阿扎霉素B浸提液使用树脂0.01-0.1升，树脂柱径高比为1:3-1:6，流速为1-2倍柱体积/小时。
6.据权利要求1所述的方法，其中步骤5)所述的极性溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇中的一种。
7.据权利要求1所述的方法，其中步骤5)中梯度解吸，是指吸附完毕后，先用20-50%的溶剂洗饱和树脂，然后用70-90%的溶剂进行解吸，流速为0.5-1倍柱体积/小时。
8.据权利要求1所述的方法，其中步骤6)解吸浓缩液用乙酸乙酯萃取，去离子水洗涤，乙酸乙酯萃取液在20°C -50°C条件下真空浓缩，得到阿扎霉素B粗提物。
9.据权利要求1所述的方法，其中步骤7)的结晶，要求每千克阿扎霉素B粗提物中加入3-10升的乙酸乙酯、异丙醇或乙醇，结晶液过滤后真空干燥，得到白色的阿扎霉素B精粉。
全文摘要
本发明公开了一种利用链霉菌(Streptomycesme lanosporus)发酵菌丝体制备阿扎霉素B的方法。该方法包括将阿扎霉素B浸提液通过大孔脱色树脂脱色后，再用大孔吸附树脂吸附、解吸，浓缩后得到含有阿扎霉素B粗提物，粗提物用溶剂溶解后结晶，得到高纯度的阿扎霉素B产品。本发明的优点在于采用大孔树脂对该产品进行分离，工艺简单易行，适宜于工业化生产，可以制备高纯度的阿扎霉素B产品。
文档编号C07H1/06GK103087117SQ20121011007
公开日2013年5月8日 申请日期2012年4月16日 优先权日2012年4月16日
发明者朱秀良, 李博文, 张雪霞, 可爱兵, 李晓露, 李宁, 任风芝, 陈书红, 成晓迅, 林毅, 王海燕, 李丽红, 张金娟, 林旸, 张丽, 张艳立, 高月麒, 张艳哲, 蒋沁, 董爱华, 段宝玲 申请人:华北制药集团新药研究开发有限责任公司