专利名称：一种梫木毒素iv的制备方法
技术领域：
本发明属于中药有效部位的提取分离技术领域，具体地说，涉及一种从木藜芦叶中提取制备稷 木毒素IV的方法。
背景技术：
稷木毒素IV (Grayanotoxin IV)是ー种ニ職类化合物，分子式为C22H34O6,分子量为394. 51，为白色针晶，mp. 167-168°C，CAS号30272-17-4。主要存在于杜鹃花科多种植物中，如卡罗利纳狭叶山月桂fahia angustifolia var. caroliniana的叶、木藜芦Leucothoe grayana Maxim. Rf >Rhododendron capi ta turn Maxim.和大坂山杜匿 $Rhododendron dabanshanense Fang et Wang叶。其中以木藜芦叶的收率最高，达到0· 09%。现代药理研究表明，稷木毒素IV具有降压作用。目前对稷木毒素IV的研究较少，因此提供ー种简便且易于エ业化生产稷木毒素IV的方法具有重要的意义，为稷木毒素IV的开发研究奠定了基础。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种稷木毒素IV的制备方法，该方法快速、简
便、产品含量高。为了解决上述技术问题，本发明的技术方案如下
一种稷木毒素IV的制备方法，其特征在于包括以下步骤
Α.超临界萃取取木藜芦叶，经粉碎处理，加入超临界萃取釜中，用丙酮作为夹带剂，进行萃取，得到萃取液；
B.溶剂萃取将萃取液浓缩，回收丙酮，用こ醚萃取多次，合并こ醚萃取液，浓缩得こ
醚浸膏；
C.氧化镁柱层析将こ醚浸膏与氧化镁混合烘干，上氧化镁短程柱层析，正己烷-ニ氯甲烷梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩至小体积，得粗晶；
D.重结晶用こ酸こ酷-丙酮混合溶剂重结晶，得到纯度达95%以上的稷木毒素IV产
品O步骤A所述超临界CO2萃取条件为萃取釜压カ为18_35MPa，萃取釜温度为33-55°C，萃取时间为2-5h，采用上述參数进行萃取，再经解析得到萃取液。步骤C所述氧化镁短程柱柱径高比为1:3-5，所述梯度洗脱顺序为按正己烷-ニ氯甲烷体积比2:1、1:1、1:3、1:5进行梯度洗脱。本发明的积极效果在于
1、采用超临界CO2萃取，环保无污染，效率高，能耗较低；
2、柱层析前采用溶剂萃取，降低了非目标物质的浓度和含量，从而減少了后续柱层析的分离纯化的负担，降低了生产成本；
3、氧化镁短程柱处理量大，再通过重结晶从而获得95%以上纯度的稷木毒素IV。
下面将结合具体实施方式
进ー步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例I :
取木藜芦叶2kg粉碎处理 ，加入超临界CO2萃取釜中，萃取温度为38°C，萃取压カ为19MPa，CO2流量为4ml/g生药/min，保持釜压、温度不变，通入200ml丙酮作为夹带剂，萃取时间为4h，分离釜温度为35°C，压カ为6MPa，收集解析萃取物，减压回收丙酮，用相当于丙酮浸膏2倍量的こ醚萃取4次，收集合并こ醚萃取液，减压浓缩得こ醚浸膏；将こ醚浸膏与氧化镁按质量比1:1. 5混合烘干，再取新氧化镁装柱，将拌样氧化镁装于其上，用正己烷-ニ氯甲烷混合溶剂依次按体积比2:1、I: I、1: 3、1:5进行洗脱，收集稷木毒素IV洗脱液，回收试剂，浓缩至小体积，静置析晶，滤出粗晶，再用こ酸こ酯-丙酮混合溶剂重结晶5次，得产品I. 32g，含量97. 4%。实施例2:
取木藜芦叶2kg粉碎处理，加入超临界CO2萃取釜中，萃取温度为53°C，萃取压カ为27MPa，CO2流量为3ml/g生药/min，保持釜压、温度不变，通入150ml丙酮作为夹带剂，萃取时间为2h，分离釜温度为42°C，压カ为4MPa，收集解析萃取物，减压回收丙酮，用相当于丙酮浸膏3倍量的こ醚萃取2次，收集合并こ醚萃取液，减压浓缩得こ醚浸膏；将こ醚浸膏与氧化镁按质量比1:2混合烘干，再取新氧化镁装柱，将拌样氧化镁装于其上，用正己烷- ニ氯甲烷混合溶剂依次按体积比2:1、I: I、1: 3、1:5进行洗脱，收集稷木毒素IV洗脱液，回收试剂，浓缩至小体积，静置析晶，滤出粗晶，再用こ酸こ酯-丙酮混合溶剂重结晶3次，得产品 I. 36g，含量 96. 1%。实施例3:
取木藜芦叶2kg粉碎处理，加入超临界CO2萃取釜中，萃取温度为46°C，萃取压カ为32MPa，CO2流量为4ml/g生药/min，保持釜压、温度不变，通入160ml丙酮作为夹带剂，萃取时间为5h，分离釜温度为40°C，压カ为7MPa，收集解析萃取物，减压回收丙酮，用相当于丙酮浸膏4倍量的こ醚萃取3次，收集合并こ醚萃取液，减压浓缩得こ醚浸膏；将こ醚浸膏与氧化镁按质量比1:1. 5混合烘干，再取新氧化镁装柱，将拌样氧化镁装于其上，用正己烷-ニ氯甲烷混合溶剂依次按体积比2:1、I: I、1: 3、1:5进行洗脱，收集稷木毒素IV洗脱液，回收试剂，浓缩至小体积，静置析晶，滤出粗晶，再用こ酸こ酯-丙酮混合溶剂重结晶4次，得产品I. 38g，含量96. 8%。实施例4:
取木藜芦叶2kg粉碎处理，加入超临界CO2萃取釜中，萃取温度为33°C，萃取压カ为24MPa，CO2流量为2ml/g生药/min，保持釜压、温度不变，通入180ml丙酮作为夹带剂，萃取时间为3h，分离釜温度为30°C，压カ为5MPa，收集解析萃取物，减压回收丙酮，用相当于丙酮浸膏3倍量的こ醚萃取4次，收集合并こ醚萃取液，减压浓缩得こ醚浸膏；将こ醚浸膏与氧化镁按质量比1:1混合烘干，再取新氧化镁装柱，将拌样氧化镁装于其上，用正己烷-ニ氯甲烷混合溶剂依次按体积比2:1、I: I、1: 3、1:5进行洗脱，收集稷木毒素IV洗脱液，回收试剂，浓缩至小体积，静置析晶，滤出粗晶，再用こ酸こ酯-丙酮混合溶剂重结晶2次，得产品 1.40g，含量 95. 7% 。
权利要求
1.一种稷木毒素IV的制备方法，其特征在于包括以下步骤 A.超临界萃取取木藜芦叶，经粉碎处理，加入超临界萃取釜中，用丙酮作为夹带剂，进行萃取，得到萃取液； B.溶剂萃取将萃取液浓缩，回收丙酮，用乙醚萃取多次，合并乙醚萃取液，浓缩得乙醚浸膏； C.氧化镁柱层析将乙醚浸膏与氧化镁混合烘干，上氧化镁短程柱层析，正己烷-二氯甲烷梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩至小体积，得粗晶； D.重结晶用乙酸乙酯-丙酮混合溶剂重结晶，得到纯度达95%以上的稷木毒素IV产品。
2.如权利要求I所述的一种稷木毒素IV的制备方法，其特征在于步骤A所述超临界CO2萃取条件为萃取釜压力为18-35MPa，萃取釜温度为33_55°C，萃取时间为2_5h，采用上述参数进行萃取，再经解析得到萃取液。
3.如权利要求I所述的一种稷木毒素IV的制备方法，其特征在于步骤C所述氧化镁短程柱柱径高比为1:3-5，所述梯度洗脱顺序为按正己烷-二氯甲烷体积比2:1、I: I、1: 3、1:5进行梯度洗脱。
全文摘要
本发明公开了一种梫木毒素IV的制备方法，具体是涉及一种采用超临界CO2萃取技术对梫木毒素IV进行提取、纯化的方法，步骤包括取木藜芦叶原料粉碎，采用超临界CO2萃取，丙酮为夹带剂，收集萃取液，回收丙酮后用乙醚萃取，将乙醚萃取液浓缩所得乙醚浸膏进行氧化镁短程柱层析，正己烷-二氯甲烷梯度洗脱，结晶。本发明方法条件温和，避免了传统方法局部高温对产品活性的不利影响，工艺合理，可实现快速提取、分离纯化，易于工业化。
文档编号C07C69/21GK102659582SQ20121011896
公开日2012年9月12日 申请日期2012年4月23日 优先权日2012年4月23日
发明者刘东锋, 郭琴 申请人:南京泽朗医药科技有限公司