专利名称：一种提纯藤黄吉酸的方法
技术领域：
本发明属于中药有效部位的提取分离技术领域，具体地说，涉及一种从藤黄中提纯藤黄吉酸的方法。
背景技术：
藤黄系藤黄科植物藤黄hanburyi Hook. f.树脂,始载于《海药本草》，生于热带地区，中国广东和广西有少量栽培，主要分布于印度和泰国。临床上可用于治疗痈疽肿毒、顽癣、跌打损伤等。现代研究表明，藤黄中藤黄酸(gambogic acid)、新藤黄酸(neo-gambogic acid)等化学成分对于多种肿瘤细胞具有明显的抑制作用，且安全、不良反应小。藤黄吉酸(Gambogellic acid)是从藤黄中分离得到的一种咕吨酮类化合物，为黄色粉末，mp. 116-117°C，分子式为C38H44O8，分子量为628. 76，CAS登录号为173867-04-4。药理研究表明，藤黄吉酸具有细胞毒活性，对HeLa细胞和人胚肺成纤维细胞(HEL)的MIC(ii g/mL)依次为I. 56和0.78。目前尚未见大量制备藤黄吉酸的方法报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种提纯藤黄吉酸的方法，
为了解决上述技术问题，本发明的技术方案如下
一种提纯藤黄吉酸的方法，其特征在于包括以下步骤将藤黄药材粉碎，经石油醚脱月旨，脱脂药材用乙醇溶液索氏提取2-3次，过滤，合并滤液，膜浓缩，用无机盐溶液和聚乙二醇双水相体系萃取，静置，取上相加水、乙酸酯类和无机盐混匀，再将乙酸酯类的相经常压硅胶柱，正己烷-丙酮梯度洗脱，回收试剂，重结晶得到藤黄吉酸。所述双水相萃取中，加入的无机盐为硫酸铵，加入的聚乙二醇为8-23%，硫酸铵为10-20%，分相温度为18-35°C，时间为4-8小时。所述加入的聚乙二醇的分子量为4000-6000。所述乙酸酯类为乙酸乙酯或乙酸丁酯，所述无机盐为硫酸铵、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾，反萃取分相温度为室温，时间为2-3小时。本发明的积极效果在于本发明采用双水相萃取，分相时间短，易于连续操作、可放大生产、处理量大、能耗低、生产成本低。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例I :
取藤黄药材，粉碎，取2kg用4倍量的石油醚脱脂2次，将脱脂药材用80%乙醇索氏提取3小时，提取2次，合并提取液，滤液加入3000道尔顿的超滤膜超滤，透过液再加入400道尔顿的纳滤膜浓缩，将浓缩液依次加入聚乙二醇和硫酸铵，使形成的双水相体系中聚乙二醇含13%，硫酸铵含10%，于20°C条件下搅拌萃取，静置5小时形成两相，取上相，加乙酸乙酯和磷酸氢二钾充分混匀，系统在室温下静置分相2小时，分为上下两相，取出乙酸乙酯相进行常压硅胶柱层析，正己烷-丙酮(20:1-1:1)梯度洗脱，TLC跟踪监测，收集藤黄吉酸流分，浓缩干燥，氯仿-甲醇(3:4)重结晶得到藤黄吉酸，含量为96. 4%。实施例2:
取藤黄药材，粉碎，取2kg用5倍量的石油醚脱脂2次，将脱脂药材用70%乙醇索氏提取I小时，提取3次，合并提取液，滤液加入3000道尔顿的超滤膜超滤，透过液再加入400道尔顿的纳滤膜浓缩，将浓缩液依次加入聚乙二醇和硫酸铵，使形成的双水相体系中聚乙二醇含23%，硫酸铵含20%，于35°C条件下搅拌萃取，静置4小时形成两相，取上相，加乙酸乙酯和磷酸氢二钾充分混匀，系统在室温下静置分相2. 5小时，分为上下两相，取出乙酸丁酯相进行常压硅胶柱层析，正己烷-丙酮(20:1-1:1)梯度洗脱，TLC跟踪监测，收集藤黄吉酸流分，浓缩干燥，氯仿-甲醇(2:3)重结晶得到藤黄吉酸，含量为 97. 2%。实施例3:
取藤黄药材，粉碎，取2kg用4倍量的石油醚脱脂3次，将脱脂药材用75%乙醇索氏提取2小时，提取3次，合并提取液，滤液加入3000道尔顿的超滤膜超滤，透过液再加入400道尔顿的纳滤膜浓缩，将浓缩液依次加入聚乙二醇和硫酸铵，使形成的双水相体系中聚乙二醇含8%，硫酸铵含13%，于25°C条件下搅拌萃取，静置8小时形成两相，取上相，加乙酸乙酯和磷酸二氢钾充分混匀，系统在室温下静置分相3小时，分为上下两相，取出乙酸乙酯相进行常压硅胶柱层析，正己烷-丙酮(20:1-1:1)梯度洗脱，TLC跟踪监测，收集藤黄吉酸流分，浓缩干燥，氯仿-甲醇(I: I)重结晶得到藤黄吉酸，含量为95. 8%。实施例4:
取藤黄药材，粉碎，取2kg用6倍量的石油醚脱脂2次，将脱脂药材用90%乙醇索氏提取I. 5小时，提取2次，合并提取液，滤液加入3000道尔顿的超滤膜超滤，透过液再加入400道尔顿的纳滤膜浓缩，将浓缩液依次加入聚乙二醇和硫酸铵，使形成的双水相体系中聚乙二醇含20%，硫酸铵含17%，于18 °C条件下搅拌萃取，静置6小时形成两相，取上相，加乙酸丁酯和硫酸铵充分混匀，系统在室温下静置分相3小时，分为上下两相，取出乙酸乙酯相进行常压硅胶柱层析，正己烷-丙酮(20:1-1:1)梯度洗脱，TLC跟踪监测，收集藤黄吉酸流分，浓缩干燥，氯仿-甲醇(7:3)重结晶得到藤黄吉酸，含量为96. 7%。
权利要求
1.一种提纯藤黄吉酸的方法，其特征在于包括以下步骤将藤黄药材粉碎，经石油醚脱脂，脱脂药材用乙醇溶液索氏提取2-3次，过滤，合并滤液，膜浓缩，用无机盐溶液和聚乙二醇双水相体系萃取，静置，取上相加水、乙酸酯类和无机盐混匀，再将乙酸酯类的相经常压硅胶柱，正己烷-丙酮梯度洗脱，回收试剂，重结晶得到藤黄吉酸。
2.如权利要求I所述的一种提纯藤黄吉酸的方法，其特征在于所述双水相萃取中，力口入的无机盐为硫酸铵，加入的聚乙二醇为8-23%，硫酸铵为10-20%，分相温度为18-35°C，时间为4_8小时。
3.如权利要求I所述的一种提纯藤黄吉酸的方法，其特征在于所述加入的聚乙二醇的分子量为4000-6000。
4.如权利要求I所述的一种提纯藤黄吉酸的方法，其特征在于所述乙酸酯类为乙酸乙酯或乙酸丁酯，所述无机盐为硫酸铵、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾，反萃取分相温度为室温，时间为2-3小时。
全文摘要
本发明公开了一种提纯藤黄吉酸的方法，藤黄药材经石油醚脱脂、乙醇索氏提取2-3次，过滤、膜浓缩，用无机盐溶液和聚乙二醇双水相体系萃取富集黄酮类化合物，所得萃取物经常压硅胶柱，正己烷-丙酮梯度洗脱，回收试剂，重结晶得到藤黄吉酸。本发明方法简便易操作，适合工业化制备、能耗低。
文档编号C07D493/20GK102643288SQ20121011889
公开日2012年8月22日 申请日期2012年4月23日 优先权日2012年4月23日
发明者刘东锋, 郭琴 申请人:南京泽朗医药科技有限公司