专利名称：一种叉蕊皂甙Ⅲ的提取分离方法
技术领域：
本发明属于天然产物分离领域，尤其涉及一种叉蕊皂甙III的提取分离方法。
背景技术：
叉蕊阜式III(Agapanthussaponin A)属甾体阜苷类，分子式为C45H72O16,分子量869. 06，溶于正丁醇、甲醇、乙醇，不溶于丙酮。叉蕊皂甙III具有抗炎作用和降血糖活性。叉蕊阜式III主要来源于百合科(Liliaceae)阔叶土麦冬Ziriope p IatyphyI la Wang et Tang的地下部分。目前，国内尚未见叉蕊皂甙III的工业提取纯化方法的相关文献和专利的报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种叉蕊皂甙III的提取分离方法，该方法操作简
单，广品含量闻。本发明是采用以下技术方案来实现的
(1)取阔叶土麦冬的地下部分粉碎，加入超临界萃取釜中进行超临界CO2萃取，脱除油脂类物质，放出原料残渣；
(2)原料残渣中加入50-80%乙醇溶液微波提取1-3次，过滤得到提取液；
(3 )提取液浓缩至浸膏，加适量水分散后，加入1-3倍量的水饱和正丁醇萃取2-3次，合并萃取液加O. 5-1倍量丙酮沉淀，过滤，滤液浓缩干燥得到粗品；
(4)以石油醚-乙酸乙酯-乙醇-水(6-8:2-4:5-7:4-6)作为两相溶剂系统，混匀后置分液漏斗中静置分层，取上相为固定相，下相为流动相，将粗品用下相溶解，注入高速逆流色谱仪，收集高含量叉蕊皂甙III流分，浓缩干燥即得叉蕊皂甙III产品。所述步骤(I)中超临界CO2萃取温度为40_60°C，萃取压力为15_25MPa，解析温度为30-50°C，解析压力为5-9MPa，CO2流量为18_20L/h。所述步骤(2)中微波提取功率为600-800W。所述步骤(4)中高速逆流色谱仪转速750-900r/min,流动相流速I. 5-2. 5ml/min。本发明的积极效果是
1)采用超临界CO2萃取杂质，因为叉蕊皂甙III不易被萃取出，而小分子和低极性的物质，很容易被萃取出，这种除杂方式操作简便，而且周期较短；
2)高速逆流色谱法分离无需使用载体，减少了操作过程中样品的损失，分离效果好，制备量大。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施例。
具体实施例方式实施例I :阔叶土麦冬的地下部分粉碎，称取3kg，加入超临界萃取釜中进行超临界CO2萃取，萃取温度为60°C，萃取压力为25MPa，解析温度为50°C，解析压力为9MPa，CO2流量为20L/h，脱除油脂类物质，放出原料残渣，加入80%乙醇溶液微波提取3次，微波提取功率为800w，过滤得到提取液，浓 缩至浸膏，加适量水分散后，加入3倍量的水饱和正丁醇萃取2次，合并萃取液加O. 5倍量丙酮沉淀，过滤，滤液浓缩干燥得到粗品；以石油醚-乙酸乙酯-乙醇-水(8:4:7:6)作为两相溶剂系统,混匀后置分液漏斗中静置分层，取上相为固定相，下相为流动相，将粗品用下相溶解，通过进样阀进样，每次进样量为150mg，设定色谱仪转速为850r/min，流动相流速为2. 5ml/min，收集高含量叉蕊皂甙III流分，浓缩干燥即得叉蕊皂甙III产品
0.8g，含量 99. 0%。实施例2:
阔叶土麦冬的地下部分粉碎，称取3kg，加入超临界萃取釜中进行超临界CO2萃取，萃取温度为40°C，萃取压力为15MPa，解析温度为30°C，解析压力为5MPa，CO2流量为18L/h，脱除油脂类物质，放出原料残渣，加入70%乙醇溶液微波提取3次，微波提取功率为600w，过滤得到提取液，浓缩至浸膏，加适量水分散后，加入I倍量的水饱和正丁醇萃取3次，合并萃取液加I倍量丙酮沉淀，过滤，滤液浓缩干燥得到粗品；以石油醚-乙酸乙酯-乙醇-水(6:4:7:6)作为两相溶剂系统,混匀后置分液漏斗中静置分层,取上相为固定相，下相为流动相，将粗品用下相溶解，通过进样阀进样，每次进样量为200mg，设定色谱仪转速为SOOr/min，流动相流速为2. Oml/min，收集高含量叉蕊皂甙III流分，浓缩干燥即得叉蕊皂甙III产品
1.lg，含量 98. 7%。实施例3:
阔叶土麦冬的地下部分粉碎，称取3kg，加入超临界萃取釜中进行超临界CO2萃取，萃取温度为50°C，萃取压力为20MPa，解析温度为40°C，解析压力为7MPa，CO2流量为20L/h，脱除油脂类物质，放出原料残渣，加入70%乙醇溶液微波提取2次，微波提取功率为800w，过滤得到提取液，浓缩至浸膏，加适量水分散后，加入2倍量的水饱和正丁醇萃取2次，合并萃取液加O. 8倍量丙酮沉淀，过滤，滤液浓缩干燥得到粗品；以石油醚-乙酸乙酯-乙醇-水(7:3:6:5)作为两相溶剂系统,混匀后置分液漏斗中静置分层，取上相为固定相，下相为流动相，将粗品用下相溶解，通过进样阀进样，每次进样量为250mg，设定色谱仪转速为SOOr/min，流动相流速为2. Oml/min，收集高含量叉蕊皂甙III流分，浓缩干燥即得叉蕊皂甙III产品
1.3g，含量 98. 1%。实施例4:
阔叶土麦冬的地下部分粉碎，称取10kg，加入超临界萃取釜中进行超临界CO2萃取，萃取温度为55°C，萃取压力为22MPa，解析温度为45°C，解析压力为7MPa，CO2流量为20L/h，脱除油脂类物质，放出原料残渣，加入60%乙醇溶液微波提取2次，微波提取功率为600w，过滤得到提取液，浓缩至浸膏，加适量水分散后，加入2倍量的水饱和正丁醇萃取2次，合并萃取液加O. 6倍量丙酮沉淀，过滤，滤液浓缩干燥得到粗品；以石油醚-乙酸乙酯-乙醇-水(7:4:7:6)作为两相溶剂系统,混匀后置分液漏斗中静置分层，取上相为固定相，下相为流动相，将粗品用下相溶解，通过进样阀进样，每次进样量为250mg，设定色谱仪转速为750r/min，流动相流速为2. 5ml/min，收集高含量叉蕊皂甙III流分，浓缩干燥即得叉蕊皂甙III产品
2.6g，含量 99. 3%ο
实施例5:
阔叶土麦冬的地下部分粉碎，称取20kg，加入超临界萃取釜中进行超临界CO2萃取，萃取温度为50°C，萃取压力为18MPa，解析温度为40°C，解析压力为6MPa，CO2流量为18L/h，脱除油脂类物质，放出原料残渣，加入70%乙醇溶液微波提取2次，微波提取功率为800w，过滤得到提取液，浓缩至浸膏，加适量水分散后，加入3倍量的水饱和正丁醇萃取3次，合并萃取液加I倍量丙酮沉淀，过滤，滤液浓缩干燥得到粗品；以石油醚-乙酸乙酯-乙醇-水(8:3:5:5)作为两相溶剂系统,混匀后置分液漏斗中静置分层,取上相为固定相，下相为流动相，将粗品用下相溶解，通过进样阀进样，每次进样量为150mg，设定色谱仪转速为900r/
min，流动相流速为I. 5ml/min，收集高含量叉蕊皂甙III流分，浓缩干燥即得叉蕊皂甙III产品7. 6g，含量 98. 7%。
权利要求
1.ー种叉蕊皂甙III的提取分离方法，其特征在于包含以下步骤 (1)取阔叶土麦冬的地下部分粉碎，加入超临界萃取釜中进行超临界CO2萃取，脱除油脂类物质，放出原料残渣； (2)原料残渣中加入50-80%こ醇溶液微波提取1-3次，过滤得到提取液； (3)提取液浓缩至浸膏，加适量水分散后，加入1-3倍量的水饱和正丁醇萃取2-3次，合并萃取液加O. 5-1倍量丙酮沉淀，过滤，滤液浓缩干燥得到粗品； (4)以石油醚-こ酸こ酷-こ醇-水(6-8:2-4:5-7:4-6)作为两相溶剂系统，混匀后置分液漏斗中静置分层，取上相为固定相，下相为流动相，将粗品用下相溶解，注入高速逆流色谱仪，收集高含量叉蕊皂甙III流分，浓缩干燥即得叉蕊皂甙III产品。
2.如权利要求I所述的叉蕊皂甙III的提取分离方法，其特征在于所述步骤(I)中超临界CO2萃取温度为40-60°C，萃取压カ为15-25MPa，解析温度为30_50°C，解析压カ为5-9MPa, CO2 流量为 18_20L/h。
3.如权利要求2所述的叉蕊皂甙III的提取分离方法，其特征在于所述步骤(2)中微波提取功率为600-800w。
4.如权利要求2所述的叉蕊皂甙III的提取分离方法，其特征在于所述步骤(4)中高速逆流色谱仪转速750-900r/min,流动相流速I. 5-2. 5ml/min。
全文摘要
本发明涉及一种叉蕊皂甙Ⅲ的提取分离方法，方法是将阔叶土麦冬的地下部分粉碎，加入超临界萃取釜中进行超临界CO2萃取，脱除油脂类物质，放出原料残渣，加入50-80%乙醇溶液微波提取，提取液浓缩至浸膏，加适量水分散后，加入水饱和正丁醇萃取2-3次，合并萃取液加丙酮沉淀，过滤，滤液浓缩干燥得到粗品，再采用高速逆流色谱法对粗品进行分离纯化，得到叉蕊皂甙Ⅲ。本方法制备量大，样品损失少，生产周期短，效率高，污染小，适合工业化生产。
文档编号C07J71/00GK102659908SQ201210122810
公开日2012年9月12日 申请日期2012年4月25日 优先权日2012年4月25日
发明者万冬梅, 刘东锋 申请人:南京泽朗医药科技有限公司