专利名称：一种丰花草碱的提取方法
技术领域：
本发明涉及ー种植物有效成分的提取方法，具体来说是ー种丰花草碱的提取方法。
背景技术：
丰花草喊(Borrerine),分子式为C16H2tlON2,分子量为240. 35,是从菌草科(Rubiaceae)轮生丰花草iferreria verticillata (L. ) G. F. ff. Meyer 地上部分中提取分离的一种咔啉生物碱类化合物。实验研究表明，丰花草碱具有抗微生物活性，对金黄色葡萄球菌和某些肠杆菌有活性；具有细胞毒活性，在3-6μ g/ml时有高度细胞毒活性。目前，国内尚未见丰花草碱的提取纯化方法方面的报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种丰花草碱的提取方法，エ艺操作简单，易于实现エ业化生产。为了解决上述技术问题，本发明的目的是这样来实现的
(1)将轮生丰花草地上部分粉碎，用5-10倍量70-95%的こ醇溶液，25-55°C下进行连续逆流超声提取20-100min，得到こ醇提取液；
(2)上述提取液加入其体积的O.8-1. 2%的活性炭40-60°C下保温脱色20_50min，过滤得到脱色液，脱色液浓缩干燥得到粗提物；
(3)上述粗提物采用高速逆流色谱对粗提物进行分离纯化，以氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统，紫外在线检测，收集目标流分，浓缩干燥，用丙酮回流溶解，趁热过滤，放冷结晶，滤出结晶干燥即得高纯度丰花草碱产品。所述步骤(I)中超声频率为40-80KHZ。所述步骤(3)中氯仿-甲醇-水的体积比为9-11:3-5:7-9。所述步骤(3)中紫外检测波长为226nm。本发明采用高速逆流色谱法对丰花草碱进行分离纯化，与以往的技术手段相比有明显的优点分离能力强、时间段、样品损失少，以及分离和纯化同步进行，实现了エ业化目的。下面将结合具体实施方式
进ー步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例I :
取轮生丰花草地上部分，粉碎，取5kg，从连续逆流超声提取设备头部进料ロ进料，从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入ロ加入10倍95%こ醇溶液，55 °C下进行连续逆流超声提取20min，超声频率为80KHz，得到提取液，加入其体积的I. 2%的活性炭60°C下保温脱色20min,过滤得到脱色液，脱色液浓缩干燥得到粗提物，以体积比为9:3:8氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统，将其充分混和，静置分相，两相分别超声波脱气25min，上相为固定相，下相为流动相，将粗提物溶于两相(上相与下相体积比为1:1)混合溶液中，注入高速逆流色谱仪，紫外在线检测，检测波长为226nm，收集目标流分，浓缩干燥，用丙酮回流溶解，趁热过滤，放冷结晶，滤出结晶干燥即得产品I. 3g，含量为98. 8%。实施例2:
取轮生丰花草地上部分，粉碎，取5kg，从连续逆流超声提取设备头部进料ロ进料，从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入ロ加入6倍70%こ醇溶液，35°C下进行连续逆流超声提取50min，超声频率为50KHz，得到提取液，加入其体积的1%的活性炭50°C下保温脱色30min，过滤得到脱色液，脱色液浓缩干燥得到粗提物，以体积比为9:3:7氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统，将其充分混和，静置分相，两相分别超声波脱气25min，上相为固定相，下相为流动相，将粗提物溶于两相(上相与下相体积比为1:1)混合溶液中，注入高速逆流色谱仪，紫外在线检测，检测波长为226nm，收集目标流分，浓缩干燥，用丙酮回流溶解，趁热过滤，放冷结晶，滤出结晶干燥即得产品I. 9g，含量为98. 5%。实施例3:
取轮生丰花草地上部分，粉碎，取5kg，从连续逆流超声提取设备头部进料ロ进料，从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入ロ加入10倍80%こ醇溶液，45 °C下进行连续逆流超声提取lOOmin，超声频率为60KHz，得到提取液，加入其体积的1%的活性炭50°C下保温脱色30min,过滤得到脱色液，脱色液浓缩干燥得到粗提物，以体积比为9:4:8氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统，将其充分混和，静置分相，两相分别超声波脱气20min，上相为固定相，下相为流动相，将粗提物溶于两相(上相与下相体积比为1:1)混合溶液中，注入高速逆流色谱仪，紫外在线检测，检测波长为226nm，收集目标流分，浓缩干燥，用丙酮回流溶解，趁热过滤，放冷结晶，滤出结晶干燥即得产品2. 3g，含量为98. 6%。实施例4:
取轮生丰花草地上部分，粉碎，取5kg，从连续逆流超声提取设备头部进料ロ进料，从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入ロ加入5倍80%こ醇溶液，25°C下进行连续逆流超声提取80min，超声频率为40KHz，得到提取液，加入其体积的O. 8%的活性炭55°C下保温脱色40min，过滤得到脱色液，脱色液浓缩干燥得到粗提物，以体积比为10:3:9氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统，将其充分混和，静置分相，两相分别超声波脱气30min，上相为固定相，下相为流动相，将粗提物溶于两相(上相与下相体积比为1:1)混合溶液中，注入高速逆流色谱仪，紫外在线检测，检测波长为226nm，收集目标流分，浓缩干燥，用丙酮回流溶解，趁热过滤，放冷结晶，滤出结晶干燥即得产品2. 5g，含量为98. 3%。实施例5:
取轮生丰花草地上部分，粉碎，取10kg，从连续逆流超声提取设备头部进料ロ进料，从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入ロ加入12倍90%こ醇溶液，55°C下进行连续逆流超声提取20min，超声频率为80KHz，得到提取液，加入其体积的O. 8%的活性炭40°C下保温脱色50min，过滤得到脱色液，脱色液浓缩干燥得到粗提物，以体积比为11:5:9氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统，将其充分混和，静置分相，两相分别超声波脱气20min，上相为固定相，下相为流动相，将粗提物溶于两相(上相与下相体积比为1:1)混合溶液中，注入高速逆流色谱仪，紫外在线检测，检测波长为226nm，收集目标流分，浓缩干燥，用丙酮回流溶解，趁热过滤，放冷结晶， 滤出结晶干燥即得产品6. 2g，含量为98. 0%。
权利要求
1.一种丰花草碱的提取方法，其特征在于包括以下步骤 (1)将轮生丰花草地上部分粉碎，用5-10倍量70-95%的乙醇溶液，25-55°C下进行连续逆流超声提取20-100min，得到乙醇提取液； (2)上述提取液加入其体积的0.8-1. 2%的活性炭40-60°C下保温脱色20_50min，过滤得到脱色液，脱色液浓缩干燥得到粗提物； (3)上述粗提物采用高速逆流色谱对粗提物进行分离纯化，以氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统，紫外在线检测，收集目标流分，浓缩干燥，用丙酮回流溶解，趁热过滤，放冷结晶，滤出结晶干燥即得高纯度丰花草碱产品。
2.根据权利要求I所述一种丰花草碱的提取方法，其特征在于所述步骤(I)中超声频率为 40-80KHz。
3.根据权利要求I所述一种丰花草碱的提取方法，其特征在于所述步骤(3)中氯仿-甲醇-水的体积比为9-11:3-5:7-9。
4.根据权利要求I所述一种丰花草碱的提取方法，其特征在于所述步骤(3)中紫外检测波长为226nm。
全文摘要
本发明涉及一种丰花草碱的提取方法。方法包括以下步骤将轮生丰花草地上部分粉碎，用70-95%的乙醇溶液连续逆流超声提取，得到提取液，加入活性炭脱色，过滤得到脱色液，脱色液浓缩干燥得到粗提物，采用高速逆流色谱对粗提物进行分离纯化，结晶得到丰花草碱产品。本发明工艺简单易操作，污染小，适合工业化生产。
文档编号C07D471/04GK102649791SQ201210122780
公开日2012年8月29日 申请日期2012年4月25日 优先权日2012年4月25日
发明者万冬梅, 刘东锋 申请人:南京泽朗医药科技有限公司