专利名称：一种溪黄草素a的制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明属于天然药物提取技术领域，涉及ー种溪黄草素A的制备エ艺。
背景技术：
溪黄草素A (Rabdoserrin A),分子式C2tlH3tlO6,分子量366. 45,是一种ニ職类化合物，为棱晶(丙酮)，mp278 280°C。现代药理研究表明，溪黄草素A具有具有抗癌活性，对人宫颈癌(HeLa)细胞有显著的抑制作用。溪黄草素A来源于唇形科(Labiatae)溪黄草Rabdosia serra (Maxim. ) Hara 的全早。溪黄草具有清热解毒、利湿退黄、散瘀消肿的功效，用于湿热黄疸、胆嚢炎、泄泻、疮肿、跌打伤痛等症，为多年生草本，广泛分布于分布于东北及山西、陕西、甘肃、江苏等 地，资源丰富，溪黄草中含ニ職类化合物溪黄草素(rabdoserrin)A,以及尾叶香茶菜素(excisanin) A, 2α-轻基熊果酸(2 a -hydroxyl-ursolic acid)，熊果酸(ursolic acid)，β _ 谷留醇(β -sitosterol)和 β _ 谷留醇式(β -sitosterol glucoside)。溪黄草素 A 具有较好的临床应用价值，可作为ー种有前途的抗肿瘤药物，值得进一歩深入研究与开发。目前，国内尚无溪黄草素A的制备エ艺报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供ー种大量制备高纯度溪黄草素A的エ艺。为了解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案
一种溪黄草素A的制备エ艺，其特征在于以溪黄草为原料，粉碎，以こ醇溶液为提取溶媒进行提取，将合并的提取液冷却后过滤，滤液加活性炭搅拌，保温脱色30min，过滤，脱色液浓缩至相对密度为1.05-1. 12，再通过3000-6000道尔顿的中空纤维超滤膜，操作压カ为0. 1-0. 2MPa，透过液经预处理好的大孔吸附树脂吸附，先用水洗脱，再以50-70%こ醇水溶液洗脱，洗脱用量为3-6BV，洗脱液浓缩干燥得到粗品，以正己烷-こ酸こ酷-甲醇-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离，收集流分减压浓缩，冷冻干燥即得溪黄草素A。所述こ醇溶液的浓度为60-80%，提取方法为回流提取、渗漉提取、微波提取中的一种。所述活性炭为药用活性炭，加入量为药材量的2-5%，脱色温度为40_60°C。所述溶剂系统体积比为(5-7) :(2-4) :(5-7) :(2-4)。本发明方法制备溪黄草素A，具有能耗低，绿色环保，且所用试剂可重复使用，制备量大，产品无损失，纯度高等优点。
具体实施例方式 下面将结合具体实施方式
对本发明作进ー步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例I :
以溪黄草为原料，粉碎，取Ikg置于提取罐中，加入6倍量的70%こ醇进行加热回流提取2小时，提取2次，合并两次提取液放冷，过滤，滤液加2%的药用活性炭加热搅拌，60°C下保温脱色30min，过滤，脱色过滤液浓缩至相对密度为I. 08，再通过截留分子量为6000道尔顿的中空纤维超滤膜系统中，调整操作压カ为O. 2MPa，收集透过液，将透过液上样于预处理好的大孔吸附树脂柱，饱和吸附后，依次用水、5BV60%こ醇洗脱，收集60%こ醇洗脱液，旋转蒸发浓缩，干燥即得溪黄草素A粗品。以体积比7:3:7:3的正己烷-こ酸こ酷-甲醇-水为溶剂系统，取上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，取下相溶解粗品，注入色谱仪，调节转速为850rpm，流速2ml/min，收集溪黄草素A流分，减压浓縮，冷冻干燥得溪黄草素A129mg，经HPLC检测，其含量为98. 8%。实施例2:
以溪黄草为原料，粉碎至60目，取Ikg加入置于提取罐中，加入6倍量的60%こ醇进行微波提取I小时，提取3次，合并三次提取液放冷，过滤，滤液加3. 5%的药用活性炭加热搅拌，60°C下保温脱色30min，过滤，脱色过滤液浓缩至相对密度为I. 12，再通过截留分子量为6000道尔顿的中空纤维超滤膜系统中，调整操作压カ为O. IMPa,收集透过液，将透过液 上样于预处理好的大孔吸附树脂柱，饱和吸附后，依次用水、6BV70%こ醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液，旋转蒸发浓缩，干燥即得溪黄草素A粗品。以体积比6:2:5:3的正己烷-こ酸こ酷-甲醇-水为溶剂系统，取上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，取下相溶解粗品，注入色谱仪，调节转速为850rpm,流速2ml/min,收集溪黄草素A流分,减压浓缩,冷冻干燥得溪黄草素A120mg，经HPLC检测，其含量为98. 6%。实施例3
以溪黄草为原料，粉碎至20目，取3kg置于提取罐中，加入7倍量的80%こ醇进行渗漉提取，至渗漉液色变淡，收集提取液放冷，过滤，滤液加2%的药用活性炭加热搅拌，60°C下保温脱色30min，过滤，脱色过滤液浓缩至相对密度为I. 05，再通过截留分子量为3000道尔顿的中空纤维超滤膜系统中，调整操作压カ为O. 12MPa，收集透过液，将透过液上样于预处理好的大孔吸附树脂柱，饱和吸附后，依次用水、5BV50%こ醇洗脱，收集50%こ醇洗脱液，旋转蒸发浓缩，干燥即得溪黄草素A粗品。以体积比5:3:5:4的正己烷-こ酸こ酷-甲醇-水为溶剂系统，取上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，取下相溶解粗品，注入色谱仪，调节转速为850rpm，流速2ml/min，收集溪黄草素A流分，减压浓缩，冷冻干燥得溪黄草素A125mg，经HPLC检测，其含量为98. 3%。实施例4:
以溪黄草为原料，粉碎至40目，取5kg置于提取罐中，加入8倍量的75%こ醇进行回流提取I小时，提取3次，合并三次提取液放冷，过滤，滤液加5%的药用活性炭加热搅拌，60°C下保温脱色30min，过滤，脱色过滤液浓缩至相对密度为I. 10，再通过截留分子量为4000道尔顿的中空纤维超滤膜系统中，调整操作压カ为O. 2MPa，收集透过液，将透过液上样于预处理好的大孔吸附树脂柱，饱和吸附后，依次用水、4BV65%こ醇洗脱，收集65%こ醇洗脱液，旋转蒸发浓缩，干燥即得溪黄草素A粗品。以体积比5:3:6:2的正己烷-こ酸こ酷-甲醇-水为溶剂系统，取上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，取下相溶解粗品，注入色谱仪，调节转速为850rpm，流速2ml/min，收集溪黄草素A流分，减压浓縮，冷冻干燥得溪黄草素A139mg，经HPLC检测，其含量为98. 3%。实施例5:以溪黄草为原料，粉碎至20目，取IOkg置于提取罐中，加入7倍量的70%こ醇进行渗漉提取，至渗漉液色变淡，收集提取液放冷，过滤，滤液加3%的药用活性炭加热搅拌，60°C下保温脱色30min，过滤，脱色过滤液浓缩至相对密度为I. 05，再通过截留分子量为3000道尔顿的中空纤维超滤膜系统中，调整操作压カ为O. 15MPa，收集透过液，将透过液上样于预处理好的大孔吸附树脂柱，饱和吸附后，依次用水、3BV60%こ醇洗脱，收集60%こ醇洗脱液，旋转蒸发浓缩，干燥即得溪黄草素A粗品。以体积比5:4:7:3的正己烷-こ酸こ酷-甲醇-水为溶剂系统，取上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，取下相溶解粗品，注入 色谱仪，调节转速为850rpm，流速2ml/min，收集溪黄草素A流分，减压浓缩，冷冻干燥得溪黄草素A123mg，经HPLC检测，其含量为98. 2%。
权利要求
1.一种溪黄草素A的制备エ艺，其特征在干以溪黄草为原料，粉碎，以こ醇溶液为提取溶媒进行提取，将合并的提取液冷却后过滤，滤液加活性炭搅拌，保温脱色30min，过滤，脱色液浓缩至相对密度为1.05-1. 12，再通过3000-6000道尔顿的中空纤维超滤膜，操作压カ为O. 1-0. 2MPa，透过液经预处理好的大孔吸附树脂吸附，先用水洗脱，再以50-70%こ醇水溶液洗脱，洗脱用量为3-6BV，洗脱液浓缩干燥得到粗品，以正己烷-こ酸こ酷-甲醇-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离，收集流分减压浓缩，冷冻干燥即得溪黄草素A。
2.如权利要求I所述ー种溪黄草素A的制备エ艺，其特征在于所述こ醇溶液的浓度为60-80%，提取方法为回流提取、渗漉提取、微波提取中的ー种。
3.如权利要求I所述ー种溪黄草素A的制备エ艺，其特征在于所述活性炭为药用活性炭，加入量为药材量的2-5%，脱色温度为40-60°C。
4.如权利要求I所述ー种溪黄草素A的制备エ艺，其特征在于所述溶剂系统体积比为(5-7):(2-4):(5-7) : (2-4)。
全文摘要
本发明公开了一种溪黄草素A的制备工艺，其特征在于采用大孔树脂富集和高速逆流色谱分离技术相结合，从溪黄草中提取分离高纯度溪黄草素A。其制备工艺步骤为将溪黄草粉碎，加入溶媒提取，将合并的提取液冷却后过滤，滤液加活性炭脱色，脱色液通过3000-10000道尔顿的超滤膜，透过液经预处理好的大孔吸附树脂吸附，乙醇水溶液洗脱，得到的洗脱液浓缩得到粗品，采用高速逆流色谱分离得到溪黄草素A。本发明具有操作简单、能耗低、产品质量高等优点，适合工业化生产。
文档编号C07D493/20GK102827182SQ20121034552
公开日2012年12月19日 申请日期2012年9月18日 优先权日2012年9月18日
发明者刘东锋 申请人:南京泽朗医药科技有限公司