专利名称：一种小百部苷b的制备方法
技术领域：
本发明属于中药技术领域，涉及一种小百部苷B的制备方法。
背景技术：
小百部又名滇百部，为百合科(Liliaceae)天门冬属植物羊齿天门冬的块根，主产于云南和四川，为民间常用药物，用于治疗气管炎、肺炎和咳嗽。现代药理学研究表明，小百部具有抑瘤、抑菌、镇咳等多种药理活性。已从小百部中分离得小百部苷A、小百部苷B、小百部苷C、Asp IV -22-甲氧基化物等4种留体皂苷，其中小百部苷B的抗肿瘤活性较强。小百部苷B (Aspafilioside B)为白色针晶(甲醇)，mp. 180-182 °C，分子式为C H7(l016,分子量为843. 02,分子结构式为CHj
'.....................................
Om I
kJ .
Ju-....................-fl V I ,
OH
OH—目前对小百部皂苷和单体成分小百部苷B的研究尚处于起步阶段，相关研究报道较少，提取方法仅限于实验室少量制备用于化学成分鉴别，因此提供一种简单、产品含量高的提取制备小百部苷B的方法具有重要意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种小百部苷B的制备方法。本发明是通过以下技术方案实现的
一种小百部苷B的制备方法，其特征在于包括以下步骤
a.将干燥小百部粉碎，采用连续逆流提取，小百部与溶剂重量比为1:10-14，提取温度45-65°C，提取时间为I. 5-2. 5h，过滤得到提取液；
b.提取液浓缩至无醇，提取液浓缩至无醇，加水分散，过滤，滤液通过大分子量的超滤膜得到超滤液，再通过小分子量的超滤膜，得到超滤液；
c.超滤液减压浓缩，真空干燥即得小百部苷B粗品，采用制备高效液相色谱分离得到小百部苷B纯品。所述溶剂为60-90%的乙醇溶液。所述大分子量的超滤膜为截留分子量8000-10000的中空复合膜，压力O. 3-0. 7Mpa，小分 子量的超滤膜为截留分子量为2000-3000的中空复合膜，压力为O. 5-1. 2Mpa。本发明的有益效果是1、采用连续逆流提取实现连续操作，提高了生产能力，同时提高了对原料的利用率、节省成本；2、两次超滤能有效除去多种杂质，产品质量好，并能实现工业化生产。
具体实施例方式 下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例I :
将干燥小百部粉碎，取lkg，采用连续逆流提取，加入10kg78%的乙醇溶液，于50°C温度下提取2h，过滤得到提取液，提取液浓缩至无醇，加3L水分散，过滤，滤液通过截留分子量8000-10000的中空复合膜，压力O. 6Mpa，超滤液再通过截留分子量为2000的中空复合膜，压力为O. 7Mpa，得到二次超滤液，减压浓缩，真空干燥即得小百部苷B粗品，用80%甲醇溶解，配制成30mg/ml的溶液，经O. 45 μ m微滤膜过滤，制备型高液相色谱制备柱以C18键合相为填料，进样体积为40ml，以72%乙腈水溶液为流动相，控制流动相流速为40ml/min，紫外在线监测，收集小百部苷B的高纯度流分，浓缩、低温干燥，得到含量98. 4%的小百部苷B纯品I. 84g。实施例2:
将干燥小百部粉碎，取lkg，采用连续逆流提取，加入12kg60%的乙醇溶液，于65°C温度下提取2. 5h，过滤得到提取液，提取液浓缩至无醇，加4L水分散，过滤，滤液通过截留分子量8000-10000的中空复合膜，压力O. 3Mpa，超滤液再通过截留分子量为3000的中空复合膜，压力为O. 8Mpa，得到二次超滤液，减压浓缩，真空干燥即得小百部苷B粗品，用80%甲醇溶解，配制成45mg/ml的溶液，经O. 45 μ m微滤膜过滤，制备型高液相色谱制备柱以C18键合相为填料，进样体积为40ml，以72%乙腈水溶液为流动相，控制流动相流速为20ml/min，紫外在线监测，收集小百部苷B的高纯度流分，浓缩、低温干燥，得到含量98. 6%的小百部苷B 纯品 I. 76g。实施例3:
将干燥小百部粉碎，取lkg，采用连续逆流提取，加入13kg65%的乙醇溶液，于45°C温度下提取I. 5h，过滤得到提取液，提取液浓缩至无醇，加6L水分散，过滤，滤液通过截留分子量8000-10000的中空复合膜，压力O. 5Mpa，超滤液再通过截留分子量为3000的中空复合膜，压力为I. OMpa，得到二次超滤液，减压浓缩，真空干燥即得小百部苷B粗品，用80%甲醇溶解，配制成35mg/ml的溶液，经O. 45 μ m微滤膜过滤，制备型高液相色谱制备柱以C18键合相为填料，进样体积为40ml，以72%乙腈水溶液为流动相，控制流动相流速为50ml/min，紫外在线监测，收集小百部苷B的高纯度流分，浓缩、低温干燥，得到含量98. 3%的小百部苷B 纯品 1.89g。实施例4:将干燥小百部粉碎，取2kg，采用连续逆流提取，加入20kg80%的乙醇溶液，于60°C温度下提取2. 5h，过滤得到提取液，提取液浓缩至无醇，加8L水分散，过滤，滤液通过截留分子量8000-10000的中空复合膜，压力O. 4Mpa，超滤液再通过截留分子量为2000的中空复合膜，压力为O. 6Mpa，得到二次超滤液，减压浓缩，真空干燥即得小百部苷B粗品，用80%甲醇溶解，配制成40mg/ml的溶液，经O. 45 μ m微滤膜过滤，制备型高液相色谱制备柱以C18键合相为填料，进样体积为50ml，以72%乙腈水溶液为流动相，控制流动相流速为30ml/min，紫外在线监测，收集小百部苷B的高纯度流分，浓缩、低温干燥，得到含量99. 2%的小百部苷B 纯品 3. 56g。实施例5:
将干燥小百部粉碎，取2kg，采用连续逆流提取，加入28kg90%的乙醇溶液，于55°C温度下提取2h，过滤得到提取液，提取液浓缩至无醇，加IOL水分散，过滤，滤液通过截留分子量8000-10000的中空复合膜，压力O. 7Mpa，超滤液再通过截留分子量为3000的中空复合膜，压力为I. 2Mpa，得到二次超滤液，减压浓缩，真空干燥即得小百部苷B粗品，用80%甲醇溶 解，配制成50mg/ml的溶液,经O. 45 μ m微滤膜过滤,制备型高液相色谱制备柱以C18键合相为填料，进样体积为50ml，以72%乙腈水溶液为流动相，控制流动相流速为25ml/min，紫外在线监测，收集小百部苷B的高纯度流分，浓缩、低温干燥，得到含量98. 8%的小百部苷B纯品3. 68g。
权利要求
1.一种小百部苷B的制备方法，其特征在于包括以下步骤 a.将干燥小百部粉碎，采用连续逆流提取，小百部与溶剂重量比为1:10-14，提取温度45-65°C，提取时间为I. 5-2. 5h，过滤得到提取液； b.提取液浓缩至无醇，提取液浓缩至无醇，加水分散，过滤，滤液通过大分子量的超滤膜得到超滤液，再通过小分子量的超滤膜，得到超滤液； c.超滤液减压浓缩，真空干燥即得小百部苷B粗品，采用制备高效液相色谱分离得到小百部苷B纯品。
2.根据权利要求I所述的一种小百部苷B的制备方法，其特征在于所述溶剂为60-90%的乙醇溶液。
3.根据权利要求I所述的一种小百部苷B的制备方法，其特征在于所述大分子量的超滤膜为截留分子量8000-10000的中空复合膜，压力O. 3-0. 7Mpa，小分子量的超滤膜为截留分子量为2000-3000的中空复合膜，压力为O. 5-1. 2Mpa。
全文摘要
本发明涉及一种小百部苷B的制备方法，该提取物是由下列步骤制得的以小百部为原料，采用连续逆流提取，小百部与溶剂重量比为110-14，提取液浓缩至无醇，加水分散，过滤，滤液通过两次超滤膜滤过，得到超滤液，减压浓缩，干燥得小百部苷B粗品，采用制备高效液相色谱分离得到小百部苷B纯品。本发明的小百部苷B的制备方法工艺合理，提取效率高，产品质量好。
文档编号C07J71/00GK102875638SQ20121036902
公开日2013年1月16日 申请日期2012年9月27日 优先权日2012年9月27日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司