专利名称：一种雷酚内酯的制备方法
技术领域：
本发明属于中药有效部位的提取分离技术领域，具体地说，涉及一种从昆明山海棠中提取制备雷酚内酯的方法。
背景技术：
昆明山海棠又名六方藤，根入药，主要含有生物碱类、二萜内酯类等。具有祛风除湿、舒经活络、清热解毒之功效，广泛用于治疗类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮和慢性肾炎等疾病。雷酹内酯(Triptophenolide)是一种二職类化合物，分子式为C2tlH24O3,分子量为312. 41，为无色针晶，mp. 232-233。。，CAS号74285-86_2。主要存在于卫矛科植物中，如昆明山海棠 應 hypoglaucum{LeYl.) Hurch.、電公舊 Tripterygium wilfordii Hook. f.的根皮和心木。现代药理研究表明，雷酚内酯具有抗炎和免疫调节作用。目前对雷酚内酯的研究较少，国内尚无雷酚内酯提取工艺方面的相关报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种雷酚内酯的制备方法，该方法简便、产品含量高。为了解决上述技术问题，本发明的技术方案如下
一种雷酚内酯的制备方法，其特征在于包括以下步骤
1)超临界萃取取昆明山海棠，经粉碎处理，加入超临界萃取釜中，用90%乙醇作为夹带剂，进行萃取，得到萃取液；
2)溶剂萃取将萃取液浓缩，回收乙醇，用乙酸乙酯萃取多次，合并乙酸乙酯萃取液，浓
缩得乙酸乙酯浸膏；
3)氧化镁柱层析将乙酸乙酯浸膏与氧化镁混合烘干，上氧化镁短程柱层析，正己烷-丙酮梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩至小体积，得粗晶；
4)重结晶用二氯甲烷-丙酮混合溶剂重结晶，得到纯度达90%以上的雷酚内酯产品。步骤A所述超临界CO2萃取条件为萃取爸压力为15_40MPa,萃取爸温度为35-60°C，萃取时间为I. 5-3. 0h，采用上述参数进行萃取，再经解析得到萃取液。步骤C所述氧化镁短程柱柱径高比为1:3-5，所述梯度洗脱顺序为按正己烷-丙酮体积比10:1、5:1、3:1、1:1进行梯度洗脱。本发明的积极效果在于I)采用超临界CO2萃取，具有操作温度低，选择性好，操作条件较温和，制取的产品纯度高，萃取无残留，是一种高效环保的萃取方法；2)柱层析前采用溶剂萃取，降低了非目标物质的浓度和含量，降低成本。
具体实施例方式
下面用本发明实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此来限定本发明。实施例I :取昆明山海棠20kg粉碎处理，加入超临界CO2萃取釜中，萃取温度为37°C，萃取压力为16MPa，CO2流量为4ml/g生药/min，保持釜压、温度不变，通入90%乙醇作为夹带剂，萃取时间为2h，分离釜温度为32°C，压力为4MPa，收集解析萃取物，减压回收乙醇，用相当于乙醇浸膏3倍量的乙酸乙酯萃取4次，收集合并乙酸乙酯萃取液，减压浓缩得乙酸乙酯浸膏；将乙酸乙酯浸膏与氧化镁按质量比1:1混合烘干，再取新氧化镁装柱，将拌样氧化镁装于其上，用正己烷-丙酮混合溶剂依次按体积比10:1、5:1、3:1、1:1进行洗脱，收集雷酚内酯洗脱液，回收试剂，浓缩至小体积，静置析晶，滤出粗晶，再用二氯甲烷-丙酮混合溶剂重结晶2次，含量93. 4%ο实施例2:
取昆明山海棠20kg粉碎处理，加入超临界CO2萃取釜中，萃取温度为48°C，萃取压力为23MPa，CO2流量为3ml/g生药/min，保持釜压、温度不变，通入90%乙醇作为夹带剂，萃取时间为1.5h，分离釜温度为40°C，压力为6MPa，收集解析萃取物，减压回收乙醇，用相当于乙醇浸膏2倍量的乙酸乙酯萃取2次，收集合并乙酸乙酯萃取液，减压浓缩得乙酸乙酯浸膏； 将乙酸乙酯浸膏与氧化镁按质量比1:1. 5混合烘干，再取新氧化镁装柱，将拌样氧化镁装于其上，用正己烷-丙酮混合溶剂依次按体积比10:1、5:1、3:1、1:1进行洗脱，收集雷酚内酯洗脱液，回收试剂，浓缩至小体积，静置析晶，滤出粗晶，再用二氯甲烷-丙酮混合溶剂重结晶4次，含量94. 6%。实施例3:
取昆明山海棠20kg粉碎处理，加入超临界CO2萃取釜中，萃取温度为45°C，萃取压力为36MPa，CO2流量为4ml/g生药/min，保持釜压、温度不变，通入90%乙醇作为夹带剂，萃取时间为3h，分离釜温度为33°C，压力为8MPa，收集解析萃取物，减压回收乙醇，用相当于乙醇浸膏4倍量的乙酸乙酯萃取3次，收集合并乙酸乙酯萃取液，减压浓缩得乙酸乙酯浸膏；将乙酸乙酯浸膏与氧化镁按质量比1:2. 5混合烘干，再取新氧化镁装柱，将拌样氧化镁装于其上，用正己烷-丙酮混合溶剂依次按体积比10:1、5:1、3:1、1:1进行洗脱，收集雷酚内酯洗脱液，回收试剂，浓缩至小体积，静置析晶，滤出粗晶，再用二氯甲烷-丙酮混合溶剂重结晶5次，含量95. 2%ο实施例4:
取昆明山海棠50kg粉碎处理，加入超临界CO2萃取釜中，萃取温度为56°C，萃取压力为40MPa，CO2流量为2ml/g生药/min，保持釜压、温度不变，通入90%乙醇作为夹带剂，萃取时间为2. 5h，分离釜温度为32°C，压力为5MPa，收集解析萃取物，减压回收乙醇，用相当于乙醇浸膏3倍量的乙酸乙酯萃取4次，收集合并乙酸乙酯萃取液，减压浓缩得乙酸乙酯浸膏；将乙酸乙酯浸膏与氧化镁按质量比1:2混合烘干，再取新氧化镁装柱，将拌样氧化镁装于其上，用正己烷-丙酮混合溶剂依次按体积比10:1、5:1、3:1、1:1进行洗脱，收集雷酚内酯洗脱液，回收试剂，浓缩至小体积，静置析晶，滤出粗晶，再用二氯甲烷-丙酮混合溶剂重结晶3次，含量92. 7%ο
权利要求
1.一种雷酚内酯的制备方法，其特征在于包括以下步骤 1)超临界萃取取昆明山海棠，经粉碎处理，加入超临界萃取釜中，用90%乙醇作为夹带剂，进行萃取，得到萃取液； 2)溶剂萃取将萃取液浓缩，回收乙醇，用乙酸乙酯萃取多次，合并乙酸乙酯萃取液，浓缩得乙酸乙酯浸膏； 3)氧化镁柱层析将乙酸乙酯浸膏与氧化镁混合烘干，上氧化镁短程柱层析，正己烷-丙酮梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩至小体积，得粗晶； 4)重结晶用二氯甲烷-丙酮混合溶剂重结晶，得到纯度达90%以上的雷酚内酯产品。
2.如权利要求I所述的一种雷酚内酯的制备方法，其特征在于步骤A所述超临界CO2萃取条件为萃取釜压力为15-40MPa，萃取釜温度为35_60°C，萃取时间为1.5-3. 0h，采用上述参数进行萃取，再经解析得到萃取液。
3.如权利要求I所述的一种雷酚内酯的制备方法，其特征在于步骤C所述氧化镁短程柱柱径高比为1:3-5，所述梯度洗脱顺序为按正己烷-丙酮体积比10:1、5:1、3:1、1:1进行梯度洗脱。
全文摘要
本发明涉及一种雷酚内酯的制备方法，具体是一种采用超临界CO2萃取技术对雷酚内酯进行提取、纯化的方法，步骤包括以昆明山海棠为原料，采用超临界CO2萃取，90%乙醇为夹带剂，收集萃取液，回收乙醇后用乙酸乙酯萃取，将乙酸乙酯萃取液浓缩所得乙酸乙酯浸膏进行氧化镁短程柱层析，正己烷-丙酮梯度洗脱，结晶。本发明方法条件温和，工艺合理，可实现快速提取、分离纯化，易于产业化。
文档编号C07D307/77GK102875501SQ20121036900
公开日2013年1月16日 申请日期2012年9月27日 优先权日2012年9月27日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司