专利名称：三(2-羰基乙基)磷盐酸盐的制备方法
技术领域：
本发明涉及化合物制备领域，更特别涉及一种三(2-羰基乙基)磷盐酸盐的制备方法。
背景技术：
三(2-羰基乙基)磷盐酸盐(TCEP盐酸盐)是一种新型的巯基化DNA的还原剂和去保护剂。巯基化DNA末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体，特别是在存在氧气的情况下。这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验(如DNA在生物感应器中的固定)的效率；而在DNA溶液中加入三(2-羰基乙基)磷盐酸盐(TCEP盐酸盐)，反应一段时间后除去，就可以降低DNA的二聚化。三(2-羰基乙基)磷盐酸盐(TCEP盐酸盐)也常常被用于蛋白质中二硫键的还原，可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。与巯基化DNA的传统还原剂和去保护剂巯基乙醇或二硫苏糖醇(DTT)相比，三(2-羰基乙基)磷盐酸盐(TCEP盐酸盐)的稳定性更高，不易被空气氧化，没有任何刺激性气味。目前，三(2-羰基乙基)磷盐酸盐(TCEP盐酸盐)合成路线主要有以下几种方法: (I)以磷化氢PH3为原料在高压釜中与丙烯氰反应，然后水解得到三(2-羰基乙基)
憐盐酸盐(TCEP 盐酸盐)(Podlaha, J.; Podlahova, J; Collection of CzechoslovakChemical Communications; Vol.38; (1973) ; p.1730-1736)。该方法虽然收率较高，但反应过程中需要使用高压釜以及剧毒气体磷化氢，危险系数高，不利于工业化生产。
权利要求
1.一种三(2-羰基乙基)磷盐酸盐的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: (a)使四羟甲基氯化磷与式(I)化合物在有机溶剂中在碱存在的条件下发生烷基化反应，得到式(II)化合物，所述烷基化反应的温度为3(T60°C ； (b)使步骤(a)所得的式(II)化合物在浓盐酸中发生水解反应，得到化合物三(2-羰基乙基)磷盐酸盐；
2.根据权利要求1所述的三(2-羰基乙基)磷盐酸盐的制备方法，其特征在于:在步骤(a)中，所述有机溶剂选自乙醇、四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺或1，4-二氧六环中的一种或几种。
3.根据权利要求1所述的三(2-羰基乙基)磷盐酸盐的制备方法，其特征在于:在步骤(a)中，所述碱选自氢氧化钠或氢氧化钾。
4.根据权利要求1所述的三(2-羰基乙基)磷盐酸盐的制备方法，其特征在于:在步骤(a)中，式(I)化合物与四羟甲基氯化磷及碱的摩尔比为3:1: Γ4.2:1:1。
5.根据权利要求1所述的三(2-羰基乙基)磷盐酸盐的制备方法，其特征在于:在步骤(a)中，所述烷基化反应的时间为Γ7小时。
6.根据权利要求1所述的三(2-羰基乙基)磷盐酸盐的制备方法，其特征在于:在步骤(b)中，所述水解反应中所使用的浓盐酸的摩尔浓度为12mol/L。
7.根据权利要求1所述的三(2-羰基乙基)磷盐酸盐的制备方法，其特征在于:在步骤(b)中，所述水解反应的温度为8(T90°C。
8.根据权利要求1所述的三(2-羰基乙基)磷盐酸盐的制备方法，其特征在于:在步骤(b)中，所述水解反应的时间为3飞小时。
9.根据权利要求1所述的三(2-羰基乙基)磷盐酸盐的制备方法，其特征在于:所述步骤(a)具体包括将碱配制成水溶液，并加入到四羟甲基氯化磷的水溶液中形成混合溶液，再向该混合溶液中滴加式(I)化合物发生烷基化反应的步骤。
全文摘要
本发明提供了一种三(2-羰基乙基)磷盐酸盐的制备方法，包括以下步骤(a)使四羟甲基氯化磷与式(I)化合物在有机溶剂中在碱存在的条件下发生烷基化反应，得到式(II)化合物，所述烷基化反应的温度为30~60℃；(b)使步骤(a)所得的式(II)化合物在浓盐酸中发生水解反应，得到化合物三(2-羰基乙基)磷盐酸盐；本发明所提供的方法操作简便，成本低，产率高，适宜于工业化生产。。
文档编号C07F9/50GK103232487SQ20131017396
公开日2013年8月7日 申请日期2013年5月13日 优先权日2013年5月13日
发明者蒋兆芹, 吕敏杰, 孙豪义 申请人:苏州亿迪生物科技有限公司