真空脉动式制备二氢杨梅素的方法
【专利摘要】本发明公开了一种真空脉动式制备二氢杨梅素的方法，该方法包括（1）将原料药材显齿蛇葡萄干燥并粉碎至20-80目；（2）以5%-95%的乙醇为溶剂对物料进行真空脉动式回流提取，合并提取液进行浓缩、干燥和粉碎后得显齿蛇葡萄粗提物；（3）将显齿蛇葡萄粗提物用超临界二氧化碳去除极性小和脂溶性强的杂质，将萃余物用热水结晶两次即得显齿蛇葡萄精提物。本发明在不使用树脂和柱层析的条件下，使二氢杨梅素的纯度达到了92-98%，产品收率提高10%-15%，应用前景广阔。
【专利说明】真空脉动式制备二氢杨梅素的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种二氢杨梅素的制备方法，具体指采用真空脉动式提取、超临界二氧化碳萃取从显齿蛇葡萄中提取和纯化二氢杨梅素的方法。
【背景技术】
[0002]显齿蛇葡萄为葡萄科蛇葡萄属植物，味甘、淡，性凉，具有清热解毒、祛风湿、强筋骨之功效，主治皮肤癣癫、黄疸型肝炎、感冒风热、咽喉肿痛等。我国瑶族民间常采集其嫩茎叶，经加工揉制、干燥，制成保健茶饮用，至今已有数百年的历史。
[0003]二氢杨梅素是一种多酚基双氢黄酮醇，又称蛇葡萄素，属黄羟酮类化合物，是显齿蛇葡萄中最主要、最有价值的活性物质，近年来，随着黄酮类化合物日益成为天然植物活性成分研究的热点，二氢杨梅素作为其中重要的一员，也越来越受到人们的重视。
[0004]从显齿蛇葡萄中提取二氢杨梅素大多采用溶剂法，但常规的溶剂提取方法很难保证有较高的提取效率，因此发展了超声波辅助、微波辅助、仿生提取、动态逆流提取等多种提取方法，这些方法虽然使提取效率提高了，但由于设备投入较大，因而生产成本并未明显下降，现有技术不能满足二氢杨梅素提取的要求。
[0005]常规的溶剂法提取效率较低的原因是:显齿蛇葡萄的主要成分为纤维素、果胶和木质素等物质，溶剂对这类物质的穿透性往往较差，二氢杨梅素又被以纤维素、果胶和木质素为主要成分的植物细胞组织所包裹，因而在提取过程中存在很大的传质阻力，溶剂很难穿过植物细胞组织去溶解二氢杨梅素，溶解了二氢杨梅素的溶液也很难释放出来，提取时间长且效率低，二氢杨梅素的残留率往往也较高。
[0006]另一方面，二氢杨梅素的纯化大多采用树脂吸附、柱层析等较为复杂的方法，成本高、操作麻烦、收率低，因而，现有技术不能满足从显齿蛇葡萄中提取和纯化二氢杨梅素的要求。
【发明内容】
[0007]为解决上述从显齿蛇葡萄中提取二氢杨梅素的现有技术存在的问题，本发明人经过大量的科学实践，终于发明出一种提取效率高、残留率低，纯化过程操作简单，产品品质好，高效、绿色的二氢杨梅素制备方法。
[0008]本发明包括以下几个步骤:
Cl)原料药材的处理:将原料药材显齿蛇葡萄干燥并粉碎至20-80目。
[0009](2) 二氢杨梅素的提取:将物料置于提取罐后，进行抽真空处理，抽出罐体和植物细胞内的空气，再吸入质量分数为5%-95%的乙醇为溶剂对物料进行回流提取，吸入的溶剂与物料的体积质量比为5:1-15:1，提取时间1-4小时，重复操作两次，合并提取液进行浓缩、干燥和粉碎后得显齿蛇葡萄粗提物，粗提物中二氢杨梅素的质量分数为50-75%。体积质量比中体积的单位为毫升，质量的单位为克。
[0010]上述提取过程中对提取罐进行间歇式的抽真空和破真空，利用真空脉动强化传质。真空脉动强化传质的机制是:当抽真空时，显齿蛇葡萄组织细胞内压力大于显齿蛇葡萄组织细胞外，溶解了二氢杨梅素的溶剂在压差作用下能强制穿过显齿蛇葡萄细胞组织；当破真空时，显齿蛇葡萄组织细胞外压大于显齿蛇葡萄组织细胞内压，显齿蛇葡萄组织细胞外的溶剂因为压差作用而迅速进入显齿蛇葡萄组织细胞内部去溶解二氢杨梅素，这种显齿蛇葡萄组织细胞内外压力的交替变化强化了溶剂和溶解在溶剂中的二氢杨梅素传质，使提取效率提闻、残留率降低。
[0011](3) 二氢杨梅素的纯化:将显齿蛇葡萄粗提物装入超临界二氧化碳萃取釜进行超临界二氧化碳萃取，控制萃取压力15-35Mpa、萃取温度30_60°C、萃取时间1_3小时，萃取完成后，将萃余物用热水结晶两次即得显齿蛇葡萄精提物，精提物中二氢杨梅素的质量分数可达 92%-98%。
[0012]与现有技术相比，本发明的有益效果是:对提取罐进行间歇式的抽真空和破真空，采用真空脉动强化传质，有效缩短了提取时间，提高了二氢杨梅素的提取效率，提取率也达90%以上；采用真空脉动式提取在缩短提取时间和保证提取率的同时也降低了对设备的要求，普通的回流提取罐经简单改造即可实现，降低了成本；二氢杨梅素纯化过程中采用超临界二氧化碳萃取，有效去除了极性较小和脂溶性较强的杂质，提高了产品纯度，同时，超临界二氧化碳萃取去除杂质的方法操作简单，从提取到分离一步完成，二氧化碳无毒无害，为环境友好型物质，是一种绿色工艺。
[0013]本发明还在不使用树脂和柱层析的条件下，使二氢杨梅素的纯度达到了 92-98%，降低了成本，经试验证明，运用此项工艺对显齿蛇葡萄中二氢杨梅素进行提取分离，产品收率提高10%-15%，应用前景广阔。
【具体实施方式】
[0014]以下对真空脉动式制备二氢杨梅素的方法进行详细说明。
[0015]实施例1:
(O原料药材的处理:将原料药材显齿蛇葡萄干燥并粉碎至50目。
[0016](2) 二氢杨梅素的提取:将物料置于提取罐后，进行抽真空处理，抽出罐体和植物细胞内的空气，再吸入质量分数为6%的乙醇为溶剂对物料进行回流提取，吸入的溶剂与物料的体积质量比为5.5:1，提取时间3.7小时，重复操作两次，合并提取液进行浓缩、干燥和粉碎后得显齿蛇葡萄粗提物，粗提物中二氢杨梅素的质量分数为61%。体积质量比中体积的单位为毫升，质量的单位为克。提取过程中对提取罐进行间歇式的抽真空和破真空，利用真空脉动强化传质。
[0017](3) 二氢杨梅素的纯化:将显齿蛇葡萄粗提物装入超临界二氧化碳萃取釜进行超临界二氧化碳萃取，控制萃取压力16Mpa、萃取温度35°C、萃取时间2.7小时，萃取完成后，将萃余物用热水结晶两次即得显齿蛇葡萄精提物，精提物中二氢杨梅素的质量分数可达93%。
[0018]实施例2:
(O原料药材的处理:将原料药材显齿蛇葡萄干燥并粉碎至30目。
[0019](2) 二氢杨梅素的提取:将物料置于提取罐后，进行抽真空处理，抽出罐体和植物细胞内的空气，再吸入质量分数为60%的乙醇为溶剂对物料进行回流提取，吸入的溶剂与物料的体积质量比为8:1，提取时间2.5小时，重复操作两次，合并提取液进行浓缩、干燥和粉碎后得显齿蛇葡萄粗提物，粗提物中二氢杨梅素的质量分数为53%。体积质量比中体积的单位为毫升，质量的单位为克。提取过程中对提取罐进行间歇式的抽真空和破真空，利用真空脉动强化传质。
[0020](3) 二氢杨梅素的纯化:将显齿蛇葡萄粗提物装入超临界二氧化碳萃取釜进行超临界二氧化碳萃取，控制萃取压力22Mpa、萃取温度57°C、萃取时间2小时，萃取完成后，将萃余物用热水结晶两次即得显齿蛇葡萄精提物，精提物中二氢杨梅素的质量分数可达95%。
[0021]实施例3:
(1)原料药材的处理:将原料药材显齿蛇葡萄干燥并粉碎至70目。
[0022](2) 二氢杨梅素的提取:将物料置于提取罐后，进行抽真空处理，抽出罐体和植物细胞内的空气，再吸入质量分数为90%的乙醇为溶剂对物料进行回流提取，吸入的溶剂与物料的体积质量比为14:1，提取时间1.3小时，重复操作两次，合并提取液进行浓缩、干燥和粉碎后得显齿蛇葡萄粗提物，粗提物中二氢杨梅素的质量分数为74%。体积质量比中体积的单位为毫升，质量的单位为克。提取过程中对提取罐进行间歇式的抽真空和破真空，利用真空脉动强化传质。
[0023](3) 二氢杨梅素的纯化:将显齿蛇葡萄粗提物装入超临界二氧化碳萃取釜进行超临界二氧化碳萃取,控制萃取压力29Mpa、萃取温度45°C、萃取时间1.1小时，萃取完成后，将萃余物用热水结晶两次即得显齿蛇葡萄精提物，精提物中二氢杨梅素的质量分数可达97.6%。
【权利要求】
1.一种真空脉动式制备二氢杨梅素的方法，其特征在于包含以下几个步骤: (1)原料药材的处理:将原料药材显齿蛇葡萄干燥并粉碎至20-80目； (2)二氢杨梅素的提取:将物料置于提取罐后，进行抽真空处理，抽出罐体和植物细胞内的空气，再吸入质量分数为5%-95%的乙醇为溶剂对物料进行回流提取，吸入的溶剂与物料的体积质量比为5:1-15:1，提取时间1-4小时，提取过程中对提取罐进行间歇式的抽真空和破真空，利用真空脉动强化传质，重复操作两次，合并提取液进行浓缩、干燥和粉碎后得显齿蛇葡萄粗提物； (3)二氢杨梅素的纯化:将显齿蛇葡萄粗提物装入超临界二氧化碳萃取釜进行超临界二氧化碳萃取，控制萃取压力15-35Mpa、萃取温度30_60°C、萃取时间1_3小时，萃取完成后，将萃余物用热水结晶两次即得显齿蛇葡萄精提物。
2.根据权利要求1所述方法得到的显齿蛇葡萄粗提物，其特征在于:粗提物中二氢杨梅素的质量分数为50%-75%。
3.根据权利要求1所述方法得到的显齿蛇葡萄精提物，其特征在于:，精提物中二氢杨梅素的质量分数为92%-98%`。
【文档编号】C07D311/40GK103772338SQ201410011537
【公开日】2014年5月7日 申请日期:2014年1月10日 优先权日:2014年1月10日
【发明者】姚茂君 申请人:吉首大学