专利名称：植物全蚀病防治用杀真菌剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种新型有取代的噻吩，一种利用该化合物防治植物、尤其谷物的全蚀病(Take-A11 disease)的方法，和用于实施该方法的杀真菌组合物。
背景技术：
全蚀病是谷物、尤其小麦和大麦生产中的一个严重问题。它是由土生真菌(Gaeumannomyces graminis，Gg)引起的。这种真菌感染植株的根，并在根组织中到处生长，造成黑根。这种真菌在根和低位茎部中的生长，使该植株不能从土壤中得到足够的水和/或营养物，表现为植株不茁壮，在疾病严重的情况下形成“白穗”，即不结果实或含有少数干枯皱缩的谷粒。结果造成减产。Gaeumannomyces菌种也感染其它谷类作物，例如水稻和燕麦，以及草皮。
目前，避免因土壤受Gg感染而造成作物减产的基本方法是使所种植的作物与一种抗Gg的作物轮作。然而，在基本作物如谷物的地区，轮作不是一种理想的实践，非常希望有一种有效的防治剂。
国际专利申请PCT/US92/08633公开了一大批能有效防治全蚀病的化合物。本发明是一种经选择的、对该疾病有优异和意外效果的化合物。
本发明的一个目的是提供一种化合物，它能优异和意外地防治土壤中Gg的生长，以减少作物损失。本发明的进一步目的是提供一种能优异和意外地防治植株中全蚀病的有效方法。本发明的又进一步目的是提供一种可用于优异和意外地控制全蚀病的杀真菌组合物。
本发明的这些及其它目的，对于熟悉本门技术的人员来说，从以下对本发明较好实施方案的详细描述，将是显而易见的。
发明概要本发明提供化合物4，5-二甲基-N-2-丙烯基-2-(三甲基甲硅烷基)-3-噻吩羧酰胺，以下称化合物I。
本发明提供一种防治植株中Gaeumannomyces菌种所引起的疾病的方法，包括对种子或土壤施用杀真菌有效量的化合物I杀真菌剂。
本发明也提供杀真菌组合物，其中包含杀真菌有效量的化合物I和一种农药学上可接受的、可用于所述方法的载体。
本发明的较好实施方案是化合物I，以及杀真菌组合物和杀真菌剂使用方法。
本发明的详细说明化合物I可以按照在本门技术上有一般技能的人员已知的方法，例如国际专利申请PCT/US92/08633，制备。化合物I也可以像以下实例1中所示那样制备。
实例1步骤12-氨基-4，5-二甲基-3-噻吩羧酸乙酯的制备化学品 分子量重量体积摩尔2-丁酮72.111800g2236mL 25.0氰基乙酸乙酯 113.122833g2665mL 25.0硫32.06 800g ------ 25.0二乙胺73.141829g2586mL 25.0乙醇 4.3升在N2吹扫下，在一个清洁、干燥的22升圆底烧瓶中，混合2-丁酮、氰基乙酸乙酯和乙醇。添加硫磺粉，充分搅拌。然后，以快速连续流方式向该容器中添加三乙胺。继续搅拌，使温度升至45℃以上～50℃至少2小时。当加热周期结束时，把暗红棕色溶液泵入一种不断搅拌的冰与水混合物(约25升)。在沉淀物充分硬化后，将浆状物过滤，抽出滤液，然后在过滤器上风干。在固体干燥后，滤饼与己烷一起研磨，直至滤液接近于无色。然后，固体在氮气流下干燥。产率是3050g(约60％)砂状红棕色产品，气相色谱法测定的峰面积＞92％，1H NMR与结构一致。
实例1步骤22-溴-4，5-二甲基-3-噻吩羧酸乙酯的制备化学品 分子量重量体积摩尔步骤1产品 199.00300g----1.508亚硝酸叔丁酯103.12251g290mL 2.44溴化铜(II) 223.36336g----1.504乙腈 41.053升，合计称出步骤1产品(300g 2-氨基-4，5-二甲基-3-噻吩羧酸乙酯)放进一个烧杯中。把固体溶解在1.5升微温(25℃)的干燥乙腈中。将任何不溶物(若存在的话)滤出。把溶液放入一个加料漏斗中，装配在配有鼓泡器和N2通入装置的5升烧瓶上。
在N2吹扫下，在一个清洁干燥的5升圆底烧瓶中，放进1.5升干燥乙腈。在搅拌下向其中添加336g固体溴化铜。搅拌5分钟使溴化铜溶解，然后添加290 ml亚硝酸叔丁酯，然后把这一锅料加热到30℃。当达到温度时，停止氮吹扫，用30分钟时间把噻吩羧酸酯溶液滴加到搅拌的烧瓶中，让放热能使物料温度升至约50℃。该物料将释放出气体，这可通过鼓泡器观察到。滴加完成之后，让物料温度上升到65～70℃，并保持45分钟，或直至气体释放几乎停止。如果气体释放仍在继续，则加热更长时间。
当反应完成时，把5升烧瓶的内容物倾入一个含有3升5％HCl的12升烧瓶中。在猛烈搅拌下向该烧瓶中添加1升乙酸乙酯。将内容物搅拌2～4分钟，然后分离有机层。此内容物用蒸馏水500 ml×2洗涤，然后用饱和食盐水洗涤一次，然后用Na2SO4干燥。把乙酸乙酯溶液从硫酸钠中滗析出来，用少数几ml新鲜溶剂洗涤。将乙酸乙酯溶液一并加入，在可高达约50℃和27″Hg真空旋转蒸发溶剂。产率是约310～330g暗棕色油状液体。然后，该暗棕色油在96～98℃和0.4 Torr进行Kugelrohr蒸馏，给出约200～220g白色到淡黄色折光油。1H NMR显示该产品除含有溴代噻吩产物外，还含有少数几个百分点的5-H噻吩。估计产率是55％。
实例1步骤32-溴-4，5-二甲基-3-噻吩羧酸的制备化学品 分子量重量体积摩尔步骤2产品 263 300g----1.14氢氧化钠40 91g ----2.28乙醇46 1升把步骤2产品(300g 2-溴-4，5-二甲基-3-噻吩羧酸乙酯)倾入一个配备鼓泡器和N2通入装置的5升烧瓶中。在搅拌下向该烧瓶中添加1升乙醇。向搅拌的酯溶液中添加氢氧化钠颗粒(91g)。淡黄色溶液颜色变深，成为橙棕色。将物料加热到65～70℃，约1小时后，对物料采样进行TLC(20％乙酸乙酯/己烷)分析。当证实起始原料消失时，停止加热，把物料转移到旋转蒸发器中，在此脱除溶剂至干。
把1升蒸馏水加回到物料中，使该羧酸盐溶解。橙色溶液用100 ml×2乙醚洗涤。然后将水层分离，用浓HCl酸化。然后将游离羧酸浆状物搅拌1～2小时。最后将固体过滤，在过滤器上用2×250ml 1％HCl洗涤，在过滤器上干燥直至成粉末状。然后将此材料放进一个约60℃和25″Hg真空烘箱中干燥若干小时。
得到的产品是一种浅黄色微细固体，熔点167-73℃。分离出合计225g 2-溴-4，5-二甲基-3-噻吩羧酸，产率～85％。1H NMR与结构一致，也显示该产品带有2-3％5-H-噻吩类似物。
实例1步骤42-三甲基甲硅烷基-4，5-二甲基-3-噻吩羧酸的制备化学品 分子量数量(重量/体积) 摩尔步骤3产品 235100.0g 0.4262.5M n-BuLi己烷溶液62 400mL 1.00(1.065)三甲基甲硅烷基氯 108.64119.5g/140mL 1.10无水四氢呋喃 72.11 1.0升在一个装有一个1升加料漏斗的经氮气吹扫干燥的3升圆底烧瓶中，使步骤3产品(100g 2-溴-4，5-二甲基-3-噻吩羧酸)溶解于1升无水四氢呋喃中。该溶液用干冰/异丙醇混合液冷却到-70℃，并不断用N2吹扫。把400ml 2.5M正丁基锂己烷溶液转移到1升加料漏斗中，并使该溶液加到不断搅拌的物料中，使温度保持在-15℃以下(-25℃～-15℃，平均-20℃)。
加料之后，使物料冷却回到-30℃～-40℃，并在冷却下搅拌45分钟到1小时。然后在-30℃～-40℃添加119.5g(140ml)三甲基甲硅烷基氯，在冷却下继续搅拌45分钟。此后，使物料回升到0℃，并倾入冰水(2升)中。将水层分离，用500ml二氯甲烷萃取。二氯甲烷层与原来的有机层(THE，己烷)合并，用饱和食盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，旋转蒸发，以＞95％产率给出2-三甲基甲硅烷基-4，5-二甲基-3-噻吩羧酸，估计重量为92g以上。1H NMR显示三甲基甲硅烷基(TMS)结合率达97～100％，无5-H噻吩。
实例1步骤5酸→酰氯→酰胺化学品 分子量 数量(重量/体积)摩尔步骤4产品228 150g 0.658摩尔草酰氯 129.93 85.5g0.658摩尔二氯甲烷 750mL二甲基甲酰胺 5-10滴(催化用)烯丙基胺 57.1086.5g1.51摩尔在一个氮吹扫的3升圆底烧瓶中，把步骤4产品(150g 2-三甲基甲硅烷基-4，5-二甲基-3-噻吩羧酸)溶解于750ml二氯甲烷中，将物料冷却到约0℃。把草酰氯(85.5g，0.658摩尔)放进一个加料漏斗，滴加到搅拌的物料中，把温度保持在10℃以下，通过鼓泡器监测和控制尾气排出量(滴加开始时停止N2吹扫)。当滴加完成时，物料在常温下搅拌30分钟，同时监测尾气排出量。当再也看不到尾气时，物料再次用氮气吹扫，猛烈搅拌15～30分钟。然后，物料经旋转蒸发脱除溶剂，使酰氯处于氮气保护之下。该酰氯(淡紫色油)用400ml二氯甲烷稀释，转移到有N2吹扫和冰盐浴冷却的圆底烧瓶中。将物料冷却到-10℃，以备滴加。以使物料温度保持在10℃以下的速度滴加或液流添加烯丙基胺(86.5g，1.51mol.，100ml CH2Cl2溶液)。当该胺全部加完之后，该物料撤除冰水浴，在常温下搅拌1小时，然后采样进行1HNMR.分析。NMR显示生成了化合物I。NMR也将揭示任何脱甲硅烷基的副产物(通常10～20％)。用旋转蒸发器脱除物料中的溶剂，给出一种红棕色蜡状半固体。这种材料用等体积己烷处理，给出一种棕色溶液，将其过滤，以除去任何不溶性物质。该己烷溶液冷却到-15～-25℃，使产物结晶。该产物浆状物搅拌，然后冷过滤，最终给出的产品是一种褐色毡状固体，它来自原来分离的蜡状偏红色固体。需要颇大的努力才能使粗产品净化。可以分离出若干茬产品，但难度越来越大。从估计160g蜡状半固体分离出67g化合物I，GC分析的峰面积％是96.4％，产率是38％。
另外，化合物I还可以如以下实例2中所示用以下方法和材料制备。
实例2步骤1化学品 分子量 重量 体积摩尔实例1步骤1产品119 300g ---- 1.508亚硝酸叔丁酯 103.12251.4g 290mL2.44铜(青铜) 63.54 9.5g ---- 0.15四氢呋喃 72.11 3升(合计)称量实例1步骤1产品(300g 2-氨基-4，5-二甲基-3-噻吩羧酸乙酯)放入一个烧杯中。将该固体溶于1.5升无水四氢呋喃中。将此溶液放入一个装在配备鼓泡器和N2通入装置的5升烧瓶上的加料漏斗中。
在N2吹扫下，在一个清洁、干燥的5升圆底烧瓶中，放进1.5升无水四氢呋喃。向其中添加9.5g铜(青铜)，同时搅拌。再添加290ml亚硝酸叔丁酯，然后把该反应器冷却到＞0℃。当达到温度时，停止通氮，开始向搅拌的烧瓶中滴加噻吩羧酸酯溶液，使物料温度保持在～0一5℃。该物料将释放气体，这可通过鼓泡器观察到。滴加完成后，物料保持45分钟，或直至此次气体释放几乎停止。若气体释放仍在继续，则加热更长时间。
当反应完成时，5升烧瓶的内容物倾入一个盛有3升5％HCl的12升烧瓶中。在猛烈搅拌下向该烧瓶中加入1升乙酸乙酯。此反应搅拌2～4分钟，然后分离有机层。此材料用去离子水(500 ml×2)洗涤，然后用饱和食盐水洗涤一次，然后用Na2SO4干燥。把乙酸乙酯溶液从硫酸钠中滗析出来，用少数几ml新鲜溶剂洗涤。将乙酸乙酯溶液合并，在可高达50℃和27″Hg真空使溶剂旋转蒸发。产率是约270g浅棕色液体。然后，这种棕色油在96～98℃和0.4Torr进行Kugelrohr蒸馏，给出约170g白色到浅黄色折光油。1H NMR显示一种含有100％5-H噻吩作为产物的产品。估计产率是60％。此反应的产物，即2-protio-4，5-二甲基-3-噻吩羧酸乙酯，用于以下描述的下一步。
实例2步骤2在正压的氮气氛下，在-30℃，向二异丙胺(3.6g，36mmol)的30ml四氢呋喃溶液中添加15ml 2.5N正丁基锂己烷溶液，在-20～-30℃搅拌0.5小时。然后，在-30℃添加2-protio-4，5-二甲基-3-噻吩羧酸(1.9g，12 mmol)的20ml四氢呋喃溶液，反应混合物在-10～-15℃(用冰盐水冷却浴)搅拌3小时。添加氯代三甲基甲硅烷(5 ml，40 mmol)，在-10～0℃继续搅拌3小时。此后，混合物倾入冰水中，用l0ml浓盐酸酸化，用二氯甲烷(2×50 ml)萃取。合并的有机层用食盐水洗涤、干燥(用MgSO4)和真空浓缩，给出浅棕色固体状2-(三甲基甲硅烷基)-4，5-二甲基-3-噻吩羧酸(2.4g，87.6％产率)。此物质与前面所列的实例1步骤4产品相同。
实例2步骤3化学品 分子量 数量(重量/体积) 摩尔实例l步骤4产品 228 32.4g0.1 5摩尔草酰氯 127 21.0g0.165摩尔甲苯500mL二甲基甲酰胺5-10滴(催化用)烯丙基胺57.1019.0g0.33摩尔将实例1步骤4产品(32.4g 2-三甲基甲硅烷基-4，5-二甲基-3-噻吩羧酸)溶于一个有氮气保护的1升圆底烧瓶内的500 ml甲苯中，使物料冷却到约0℃。把草酰氯(21.0g，0.165 mol)放进一个加料漏斗中，滴加到正在搅拌的物料中，使温度保持在10℃以下，并通过鼓泡器监测和控制尾气排出量。保持反应混合物的氮气吹扫，以期脱除HCl。当滴加完成时，物料在常温下搅拌3小时，同时用GC监测。当反应完成时，物料进行旋转蒸发，通过脱除约100 ml甲苯来除去任何残留的草酰氯。把酰氯溶液转移到用N2吹扫并置于盐/冰冷却浴中的圆底烧瓶中。将物料冷却到15℃，以备加料。以能使物料温度在35℃以下的速度滴加或液流方式添加稀丙基胺(19.0g，0.33 mol，50 ml甲苯溶液)。当胺全部添加时，物料撤除冰水浴，在常温下搅拌1小时，然后采样进行GC分析，显示化合物I的生成已完成。此时，甲苯混合物用约500 ml洗涤，除去溶剂，得到38.3g固体状化合物I，此结果是用NMR和GC/MS测定的。
组合物用化学防治剂对包括全蚀病在内的Gg疾病的防治，可以用若干种方式实现。该药剂可以诸如在种植时同种子一起直接施用于感染了Gg的土壤。另外，它也可以在种植和萌芽之后施用于土壤中。供土壤施用的组合物包括可作为撒播颗粒或作为浸渍肥料颗粒施用于犁沟中的粘土颗粒。此外，该药剂还可以作为出苗前或出苗后喷雾剂施用于土壤中。
然而，较好的是，该药剂以种植前的包衣形式施用于种子上。这种技术通常在很多作物中用来提供杀真菌剂，以防治各种植物病理性真菌。
本发明的组合物包含杀真菌有效量的上述化合物I和一种或多种助剂。在此类组合物中，活性组分可以0.01～95％(重量)的水平存在。也可以包含其它杀真菌剂，以提供更广谱的真菌防治。杀真菌剂的选择将取决于作物和已知在有兴趣地点对该作物构成威胁的疾病。
本发明的杀真菌组合物，包括施用前需要稀释的浓制剂，可以含有至少一种活性组分和一种呈液体或固体形式的助剂。这些组合物的制备是使活性组分，有或无助剂，加上稀释剂、增充剂、载体和调节剂掺合、提供微细颗粒状固体、颗粒剂、片剂、溶液剂、悬浊液剂或乳液剂等剂型的组合物。因此，相信这种活性组分可以与一种助剂一起使用，例如一种微细固体、一种有机源液体、水、一种润湿剂、一种分散剂、一种乳化剂或这些的任何一种适当组合。
相信适用润湿剂包括烷基苯和烷基萘磺酸盐，硫酸化脂脂醇、胺或酰胺，异硫代硫酸钠的长链酸酯，磺基琥珀酸钠的酯，硫酸化或磺酸化脂肪酸酯，石油磺酸盐，磺酸化植物油，二叔炔二醇，嵌段共聚物，烷基苯酚(尤其异辛基苯酚和壬基苯酚)的聚氧乙烯衍生物，和己糖醇酐(如缩水山梨糖醇)—高级脂肪酸酯的聚氧乙烯衍生物。较好的分散剂是甲基纤维素，聚乙烯醇，木质素磺酸钠，聚合物烷基萘磺酸盐，萘磺酸钠，聚亚甲基联萘磺酸盐，和中和的聚氧乙基化衍生物或有环取代的烷基苯酚磷酸盐。稳定剂也可以用来生产稳定的乳液剂，例如硅酸铝镁和黄原胶。
其它配方包括粉状浓制剂，其中包含载于一种适当增充剂上的0.1～60％(重量)活性组分，任选地包括其它用以改善操作性能的助剂如石墨。这些粉剂可加以稀释，以备以约0.1～10％(重量)范围内的浓度施用。
浓制剂也可以是水乳液剂，其制备是使水不溶性活性组分和乳化剂的一种非水溶液与水一起搅拌直至均匀，然后匀化，给出颗粒非常微细的稳定乳液。它们也可以是水悬浮液，其制备是研磨水不溶性活性组分与润湿剂的一种混合物，给出一种以其粒度极其微小为特征的悬浮液，因此当稀释时，盖度非常均匀。这些配方的适用浓度含有约0.1～60％、较好5～50％(重量)活性组分。
浓制剂还可以是活性组分在适用溶剂以及表面活性剂中的溶液。适合用于种子处理的本发明活性组分的溶剂包括丙二醇、糠醇、其它醇或二醇，及其它对种子萌芽无实质性干扰的溶剂。如果该活性组分要施用于土壤，则N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、N-甲基吡咯烷酮、烃类和水不混溶的醚、酯或酮等溶剂是可用的。
这里的浓制剂组合物一般含有约1.0～95份(较好5～60份)活性组分、约0.25～50份(较好1～25份)表面活性剂和在需要的情况下约4～94份溶剂，所有份额均以重量计，以该浓制剂的总重量为基准。
化合物I的如下125 g/l有效成分悬浮液浓制剂可以按照本发明利用。组分 数量g/L4，5-二甲基-N-2-丙烯基-2-三甲基甲硅烷基-3-噻吩羧酰胺(96％)(化合物I)130.4Pluronic PE 10500 40.0聚丙二醇 80.0PolyCon O 10.0Permanent Rubine LB6 0230.0Rhodorsil 432R 1.0Orchex 796 40.0Vinamul 18160 60.0Rhodopol 23 0.80Phylatol0.32水641.9比重＝1.034此外，化合物I的如下250 g/l有效成分悬浮液浓制剂也可以按照本发明利用。组分 数量g/L4，5-二甲基-N-2-丙烯基-2-三甲基甲硅烷基-3-噻吩羧酰胺(化合物I)275.5Pluronic PE 1050035.2聚丙二醇 71.5PolyCon O10.7Permanent Rubine LB6 02 21.4Rhodorsil 432R0.85Orchex 796 61.9Vinamul 1816064.1Rhodopol230.75Panacide M0.75水 525.4比重＝1.068(估计)
为了在种植时施用于土壤中，可以使用颗粒剂配方。颗粒剂是物理上稳定的颗粒状组合物，其中包含通过一种惰性微细颗粒状增充剂的基本基体粘合或分布的至少一种活性组分。为了有助于该活性组分从该颗粒中溶出，该组合物中可以存在一种表面活性剂，如此前所列举的那些，或例如丙二醇。天然粘土、叶蜡石粉、伊利石和蛭石是可使用的各类颗粒状矿物增充剂的实例。较好的增充剂是多孔吸收性预成形颗粒，例如预成形和过筛的颗粒状硅镁土或热膨胀的颗粒状蛭石，和微细粘土如高岭土、水合硅镁土或膨润土。这些增充剂喷洒或掺合活性组分，形成杀真菌颗粒剂。
本发明的颗粒剂组合物中，每100重量份粘土可含有约0.1～约30重量份活性组分，且每100重量份颗粒状粘土可含有0～约5重量份表面活性剂。
本发明的方法可通过使含有活性组分的组合物在种植前混进种子中来实施，混合率为0.01～50 g/kg种子，较好为0.1～5g/kg，更好地为0.2～2g/kg。如果希望施用于土壤中，则此类化合物的施用率可为1～1000 g/公顷，较好为10～500g/公顷。对于轻质土或降雨量较大或两者兼而有之的情况，将需要更高的施用率。
生物学试验本发明的化合物I已进行了杀真菌有效性试验，而且如以下试验中所示，已证实了对Gg的防治作用。这些试验一般是以精细度递增的顺序列出的，即每个相继试验都能更好地界定试验化合物对Gg增长的防治效用。先列出的试验是为了识别对Gt有活性的化合物而进行的。后列出的试验是为了表征杀真菌活性即界定在整个小麦植株上的单位活性而进行的。杀真菌数据如下所示。
离体试验把化合物I(0.25 ml适当丙酮储备溶液)加进25 ml最小培养基琼脂中，制备培养板。最小培养基琼脂的制备是对17.5g Czapek Dox肉汤(Difco公司)、7.5 g纯化琼脂或Bacto-琼脂(Difco公司)和500ml蒸馏/去离子水的一种溶液进行高压灭菌，然后添加50μl的1 mg/ml硫胺素盐酸盐和50μl的1 mg/ml生物素5％乙醇溶液。每块培养板的接种是呈三角形放置三个在上述最小培养基琼脂上生长的GaeumannomycesgramTMinis Var.tritici(Ggt)的4mm菌斑。这些培养板在19～20℃于黑暗中培养4～5天。该真菌的生长是以菌丝体生长直径衡量的。结果表达为百分抑制率，其计算式是[1-[(处理板上的增长mm数-4)/(对照板上的增长mm数-4)]]×100。这些试验的结果如下施用率百分抑制率ppm 实验1实验2实验3对照 00 010.0 1001.0 100 980.1 98980.01 98970.00193970.0001 590.00001 3活体试验-4周种子处理试验化合物I用生长于3英寸方盆中的“Bergen”品种小麦进行Ggt防治试验，盆中的土壤等于Metro混合物、砂和淤积壤土大田土壤各三分之一的混合土，全部用蒸汽灭菌。种子用本发明化合物I的丙酮溶液处理。使用每种化合物的10,000 ppm贮备液，配制如下系列的稀释液溶液 当对10g种子施用.溶液号 ppm 1ml时的g/kg种子1 10,000 1.02 5,000 0.53 2,500 0.254 1,250 0.12556250.0625当对10 g种子施用1ml贮备液和稀释液时，所形成的施用率是1.0、0.5、0.25、0.125和0.0625 g/kg种子。溶液5是任选的，并非用于所有试验。
一个处理用广口瓶用3ml丙酮漂洗2次。使1 ml溶液旋转覆盖该广口瓶内侧底部。将10 g种子加入该广口瓶中，加盖，然后使该广口瓶旋转、摇荡，直至这些种子都有一个快速而均匀的覆盖层。约30～50秒后，取下盖子，仍继续摇荡。1分钟后，拿下该广口瓶进行干燥。当干燥时，把种子或者倒回盆栽用口袋中，或贮存直至这样的盆栽。
各化合物也用生长于盛放感染了Ggt的土壤的3英寸方盆中的“Bergen”品种小麦进行Ggt防治试验。感染是通过使该土壤与一种种菌混合实现的，该种菌的制备是让Ggt在受感染的无菌燕麦(400cc整燕麦，350 ml去离子水，高压灭菌)上生长。在室温下一个月培养期之后，使燕麦干燥、与土壤按4％(体积)混合。
4周后将根收集、洗涤、评级。每次处理都利用1、5、10、20、30、40、50、60、80或100％等级指定一个百分率(％)患病根面积值。每盆植株得到一个单一等级。这些试验的结果如下。
施用率 ％疾病控制化合物 g有效成分/kg种子 实验1实验2实验3对照0 00 0I 1.0 97I 0.5 91 100I 0.25 93 9996I 0.12597 8695活体试验-4周化合物I用生长于盛有感染了Ggt的土壤的3英寸方盆中的“Bergen”品种小麦进行Ggt防治试验。感染是通过使该土壤与一种种菌混合实现的，该种菌的制备是让Ggt在培养板中1/4强度马铃薯右旋糖琼脂(4.875 g马铃薯右旋糖琼脂、5.0 g Bacto琼脂、500ml蒸馏/去离子水)上生长，并利用来自这些培养板的菌斑感染无菌燕麦(400 cc整燕麦，350ml去离子水，高压灭菌)。在室温下的一个月培养期之后，使该燕麦干燥，与该土壤以4％(体积)混合。盆中填入土壤至离盆顶约1 cm。将四粒小麦种子放置在每盆中土壤的顶上。试验化合物配制成1∶9(体积比)丙酮/水溶液，含有0.18％Tween20，以提供每盆用3ml试验溶液处理、每盆有0.5和/或0.1mg活性组分的处理率。每个处理水平使用5盆，对照组是未处理的接种盆和非接种盆。1小时干燥时间后，这些种子再覆盖一些有适当感染的土壤。把这些盆放在一间生长室内，每天浇水。4周后，在解剖显微镜下考察每棵植株的种子根，评估每一盆的疾病证据。使用一种0～5的等级尺度，其含义如下0＝无匍行菌丝或病灶存在1＝在＜10％根系上有匍行菌丝和少数小病灶存在2＝在10～25％根系上有匍行菌丝和小病灶存在3＝在25～50％根系上有匍行菌丝和小病灶存在4＝在＞50％根系上有匍行菌丝和很多大型合生病灶5＝根系和秆布满病灶和匍行菌丝每一组的五个重复试验中可以去掉一个高分或一个低分，以确保利用最佳代表性分数来计算重复试验平均值，即对其余分数求均值。然后，把这个平均分与未处理的对照分进行比较，计算出病害防治百分率。这些活体试验的结果报告于下表中。
施用率 ％病害防治化合物mg/盆实验1实验2对照 0 00I 1.0 97I 0.5 91 100I 0.25 93 99I 0.125 97 86活体试验-8周种子处理试验化合物I用生长于盛有土壤(等于Metro混合物、砂和淤积壤土大田土壤各1/3的混合土，全部用蒸汽灭菌)的6英寸圆盆中的“Bergen”品种小麦进行Ggt防治试验。种子用来本发明化合物I的溶液以丙酮中的100,00 ppm贮备溶液处理。利用每种化合物的10,000 ppm贮备液，配制如下系列稀释液
溶液 当对10g种子施用溶液号 ppm 1ml时的g/kg种子1 10,000 1.025,000 0.532,500 0.2541,250 0.125当对10g种子施用1ml贮备液和稀释液时，所产生的施用率是1，0.5，0.25和0.125 g/kg种子。
处理用广口瓶用3ml丙酮漂洗2次。用1ml溶液旋转覆盖该广口瓶内侧底部。把10 g种子加进该广口瓶中，加盖，然后使该广口瓶旋转、摇荡，直至这些种子得到一个迅速均匀的覆盖层。约30～50秒钟后，当摇荡仍在继续时取下瓶盖。1分钟后取下该广口瓶进行干燥。当干燥时，种子或者倒回盆栽用口袋中，或者贮存直至进行盆栽。
种植方法如下。这些6英寸盆用上述混合土装填到其上沿。处理过的种子放置在(装填到上沿的)土壤表面上，每盆8粒种子，种子间距约2～3英寸。每个处理种植5盆(重复试验)。量取15ml如前面所述那样制备的燕麦种菌(约4g)，均匀喷洒在每盆的土壤表面上。该土壤/种子/种菌覆盖180ml混合土(同上)。一个装到上沿的150ml烧杯是约180ml。用这么多水初步轻轻浇若干次，以使土壤润湿又不会把种子冲出来。
在寒冷的冬季月份，把这些盆放在16～18℃的温室中，只需少量辅助光照。在较温暖的月份，这些盆在设定于17℃的生长室中放置3～4周。以建立疾病，然后在温室中放置到收割。7-10周后将根收集、洗涤和评级，利用1、5、10、20、30、40、50、60、80或100％等级，给每个处理指定一个百分率(％)患病根面积值。每盆植株得到一个单一等级。这些试验的结果如下
施用率 ％病害防治化合物g有效成份/kg种子 试验1试验2对照0 00I1.0 100 99I0.5 98 98I0.25 90 92I0.12580 91大田试验-春小麦试验在两个小麦大田试验中评估了化合物I。田间小区(1.1×8m)种植春小麦(Minaret品种)，播种率为180 kg/公顷。化合物I是在丙酮中以 25和100g有效成分/100kg种子施用的。全蚀病对根的感染是通过洗净这些根上的土壤来评价的。然后，把这些根放在有白色背景的水下，按照如下尺度评级根等级尺度 类别0％根感染(健康根) 01-10％受感染根 111-25％受感染根226-50％受感染根351-75％受感染根476-100％受感染根 5根据如下公式计算0～100的全蚀病指数
式中a，b，c，d，e和f代表每个类别中的植株数目，t是所评价的植株总数。高TAI值指出全蚀病感染率高。生长阶段30-31代表第一节阶段，生长阶段＞69代表扬花结束。产率用吨/公顷表示。这些试验的数据如下
春小麦大田试验1TAITAIg有效成分/阶段30-31 阶段＞69 产率处理 100kg种子 第1节 扬花结束吨/公顷对照 0 9.6 25.8 5.59化合物I 25 4.9 15.7 5.96化合物I 100 3.1 12.3 5.48春小麦大田试验2TAI TAIg有效成分/ 阶段30-31 阶段＞69产率处理 100kg种子第1节扬花结束 吨/公顷对照 0 7.3 28.5 6.49化合物I 25 4.5 18.8 6.24化合物I 100 3.9 11.1 6.36干燥天气条件限制了这些春播试验中全蚀病的严重性。疾病水平相当低，没有严重到足以引起白穗发展。此外，对产率影响很小。
大田试验-冬小麦试验在七个冬小麦试验中评估了化合物I。品种因地点而异，或者是Riband、Forby，或者是Rossini。化合物I像以上所述那样配制，以 25g有效成分/100kg种子的单一施用率进行种子处理。所有田间小区的播种率均为160kg/公顷。全蚀病引起的根感染水平是在生长阶段69(扬花结束)按照上述尺度评价的，计算了全蚀病指数(TAI)。在七个试验的四个当中发展了高水平全蚀病，评价了其中三个的白穗发病率(因严重根感染而造成的不育或干枯皱缩麦穗)。也测量了这相同三个试验中的麦粒产量。其余三个试验的全蚀病水平较低。这些较低疾病试验中没有出现白穗，疾病没有严重到足以影响产量。
四个高水平疾病冬小麦试验的平均值仅三个试验g有效成分/ 产率处理100kg种子TAI％白穗 (吨/公顷)对照 0 44.0 33.47.02化合物I 25 30.0 16.18.33三个低水平疾病冬小麦试验的平均值g有效成分/产率处理100kg种子TAI 白穗(吨/公顷)对照026.5 未出现9.51化合物I 2516.2 未出现9.46从以上所述可以看出，本发明是为达到以上提出的所有目的和目标而精心设计的，兼备明显的和本发明固有的优点。
要理解的是，某些特色和亚组合是有效用的，而且无需参照其它特色和亚组合就可以采用。这是权利要求所期待的，而且在其范围之内。
由于很多可能的实施方案可以由本发明构成而不会偏离其范围， 因此，要理解的是，这里论述的全部事项都要解读为说明性，而且不具有限制性意义。
权利要求
1.一种化合物，即4，5-二甲基-N-2-丙烯基-2-(三甲基甲硅烷基)-3-噻吩羧酰胺。
2.一种杀真菌组合物，其中包含杀真菌有效量的权利要求1化合物和一种农艺学上可接受的载体中。
3.权利要求2的组合物，其中该组合物是一种悬浊液浓制剂。
4.一种防治由Gaeumannomyces菌种引起的植株上病害的方法，该方法包括施用有效量的权利要求1化合物。
5.权利要求4的方法，其中施用是对植株所在位置进行的。
6.权利要求5的方法，其中施用是对植物种子进行的。
7.权利要求4的方法，其中施用是对土壤进行的。
全文摘要
本发明涉及4,5－二甲基－N－2－丙烯基－2－(三甲基甲硅烷基)－3－噻吩羧酰胺,用这种化合物防治植物中全蚀病(Gaeumannomyces菌种)的方法,和用于实施该方法的杀真菌组合物。
文档编号C07D333/38GK1176642SQ95197626
公开日1998年3月18日 申请日期1995年11月14日 优先权日1994年12月15日
发明者D·P·菲利安, B·J·肖尔特, S·C·王 申请人:孟山都公司