专利名称：抗植物真菌病害的补骨脂查尔酮类化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种抗植物真菌病害的化合物，特别是涉及一种抗植物真菌病害的补骨脂查尔酮类化合物。
背景技术：
补骨脂查尔酮(bavachalcone)、异补骨脂查尔酮(isobavachalcone)以及化学合成的类似物，对苹果腐烂病菌、苹果轮纹病菌、水稻稻瘟病菌、水稻纹枯病菌、黄瓜枯萎病菌、小麦赤霉病菌、黄瓜炭疽病菌、辣椒疫霉病菌等多种常见植物病害具有很好的抑菌活性。上述植物病害对我国的农业生产危害严重，据专家报道我国每年因苹果轮纹病危害造成直接经济损失就达30亿到50亿元人民币；水稻稻瘟病，是全世界稻区危害最严重的水稻病害之一，一般造成水稻减产10％～20％，以我国为例，20世纪90年代以来，该病的年发生面积均在380万hm2以上，年损失稻谷达数亿千克。
目前，化学农药的使用仍是防治上述植物病害行之有效的措施，但因一些常规品种的长期使用使病原菌产生抗药性，致使田间用药量逐年加大，对人类健康和生态环境造成极大危害。因此，高效、低毒、低残留、与环境友善同时具有自主知识产权新农药品种的创制迫在眉睫。
发明内容
本发明的目的在于提供一种天然有效成分-补骨脂查尔酮(bavachalcone)、异补骨脂查尔酮(isobavachalcone)，可以将其作为先导化合物为新药的创制提供理论依据。同时，以补骨脂查尔酮(bavachalcone)、异补骨脂查尔酮(isobavachalcone)作为先导化合物创制新药可以把植物农药和化学农药的优点集于一身，是国内外农药创制的热点之一。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的 抗植物真菌病害的补骨脂查尔酮类化合物，本发明化合物是干燥补骨脂种子5Kg，用70％工业乙醇冷浸提取四次，浸出液减压浓缩得乙醇提取物，加适量水混溶，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取。取乙酸乙酯萃取部位浸膏100g，经反复硅胶柱层析，用氯仿一乙酸乙酯梯度洗脱，分离得到补骨脂查尔酮(bavachalcone)(21mg)和异补骨脂查尔酮(isobavachalcone)(17mg)。
所述的抗植物真菌病害的补骨脂查尔酮类化合物，其补骨脂查尔酮(bavachalcone)，黄色粉末；分子式C21H20O4；ESIMSm/z339.2[M+H]+；HNMR(CDCl3)d1.77(3H，S，H-5″)，1.78(3H，S，H-4″)，3.48(2H，d，J＝7.4Hz，H-1″)，5.29(1H，br t，J＝8.4Hz，H-2″)，6.42(1H，s，H-3)，6.88(2H，d，J＝8.7Hz，H-3′，5′)，7.47(1H，d，J＝15.6Hz)，7.55(2H，d，J＝3Hz，H-2′，6′)，7.59(1H，S，H-6)，7.85(1H，d，J＝15.3Hz)，6.08(OH，br s)，13.88(OH，s)。13CNMR(CDCl3)d17.6(C-4″)，21.5(C-5″)，25.5(C-1″)，53.8(4-OMe)，107.1(C-3)，113.4(C-1)，115.8(C-3′，5′)，115.4(C-b)，117.4(C-5)，121.9(C-2″)，126.5(C-1′)，128.8(C-6)，130.3(C-2′，6′)，132.1(C-3″)，143.9(C-c)，159.5(C-4′)，161.8(C-2)，163.6(C-4)，192.1(C-a)。
补骨脂查尔酮(bavachalcone)结构式
所述的抗植物真菌病害的补骨脂查尔酮类化合物，其异补骨脂查尔酮(isobavachalcone)，黄色针晶，mp160～161℃；TLC检查为黄色斑点。1HNMR1.77(3H，s，CH3)，1.81(3H，s，CH3)，3.22(2H，d，J＝6.1Hz)，5.28(1H，br t，J＝6.9Hz)，6.88(2H，d，J＝8.9Hz)，7.55(2H，d，J＝9.1Hz)，7.85(1H，d.J＝15.3Hz)；7.55(1H，d，J＝15.6Hz)，6.44(1H，d，J＝8.7Hz)，7.75(1H，d，J＝8.4Hz)，13.89(1H，s)； 异补骨脂查尔酮(isobavachalcone)结构式
本发明的优点与效果是 补骨脂查尔酮、异补骨脂查尔酮作为农用杀菌剂具有以下优势 1.补骨脂查尔酮(bavachalcone)、异补骨脂查尔酮(isobavachalcone)是天然有效成分，本身作为农用杀菌剂具有高效、低毒、低残留、不易产生抗药性等特点。
2.药效高。补骨脂查尔酮、异补骨脂查尔酮、福美胂、银泰、甲基托布津、多菌灵6种原药对苹果腐烂病菌菌丝生长的抑制作用EC50分别为0.87、0.36、8.93、26.18、9.16、1.47mg/L，EC90分别为6.72、4.25、128.98、93.37、147.85、26.86mg/L。可见，补骨脂查尔酮、异补骨脂查尔酮的抑菌活性高于防治苹果腐烂病菌的其它药剂。
3.杀菌谱广。补骨脂查尔酮、异补骨脂查尔酮对苹果腐烂病菌、苹果轮纹病菌、水稻稻瘟病菌、水稻纹枯病菌、黄瓜枯萎病菌、小麦赤霉病菌、黄瓜炭疽病菌、辣椒疫霉病菌等多种常见植物病害均具有很好的抑制活性。
具体实施例方式 本发明涉及的化合物包括补骨脂查尔酮(bavachalcone)、异补骨脂查尔酮(isobavachalcone)以及化学合成的类似物，对苹果腐烂病菌(Valsa mali)，苹果轮纹病菌(Physalospora piricola)，水稻稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)，水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani Kuhn)，黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)，小麦赤霉病菌(Gibberellazeae)，黄瓜炭疽病菌(Colletotrichum orbiculare)辣椒疫霉病菌(Phytophthora capsici)等多种植物病原菌具有很好的抑制活性。
本发明化合物是干燥补骨脂种子5Kg，用70％工业乙醇冷浸提取四次，浸出液减压浓缩得乙醇提取物，加适量水混溶，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取。取乙酸乙酯萃取部位浸膏100g，经反复硅胶柱层析，用氯仿一乙酸乙酯梯度洗脱，分离得到补骨脂查尔酮(bavachalcone)(21mg)和异补骨脂查尔酮(isobavachalcone)(17mg)。
实例1用丙酮或二甲基亚砜将补骨脂查尔酮溶解配成10g/L的粗提物母液。加入适量粗提物母液于50℃的PDA培养基中，充分混匀，配成粗提物终浓度分别为0.12mg/L、0.6mg/L、3mg/L、15mg/L、75mg/L的含药培养基，以等体积的丙酮或二甲基亚砜加入到PDA培养基中作对照，然后倒入直径90mm培养皿内制成平板，备用。用直径6mm的打孔器从事先在PDA平板上28℃下培养7～12d的各供试病菌菌落边缘处切取菌饼，并移植于上述含不同浓度的粗提物平板和对照平板中央，每次处理重复3次，置28℃下培养7～12d，测量菌落直径。每菌落取相交垂直线方向测其直径，以其均值减去菌饼直径即得菌落净生长直径(CK)，相对抑制率(％)＝(对照净生长量一处理净生长量)/对照净生长量×100。根据病菌抑制率等有关指标，采用相应的数据分析软件，计算出EC50值及EC90值限。
补骨脂查尔酮(bavachalcone)对几种常见植物病原菌菌丝生长的抑制作用。
实例2试验方法同实例1，异补骨脂查尔酮对几种常见植物病原菌菌丝生长的抑制作用如下 异补骨脂查尔酮(isobavachalcone)对几种植物病原菌菌丝生长的抑制作用。
实例3试验方法同实例1，补骨脂查尔酮、异补骨脂查尔酮、福美胂、银泰、甲基托布津、多菌灵6种原药对苹果腐烂病菌菌丝生长的抑制作用如下 6种药剂对苹果腐烂病菌菌丝生长的抑制作用
权利要求
1.抗植物真菌病害的补骨脂查尔酮类化合物，其特征在于该化合物是干燥补骨脂种子5Kg，用70％工业乙醇冷浸提取四次，浸出液减压浓缩得乙醇提取物，加适量水混溶，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取；取乙酸乙酯萃取部位浸膏100g，经反复硅胶柱层析，用氯仿一乙酸乙酯梯度洗脱，分离得到补骨脂查尔酮(bavachalcone)21mg和异补骨脂查尔酮(isobavachalcone)17mg。
2.根据权利要求1所述的抗植物真菌病害的补骨脂查尔酮类化合物，其特征在于所述补骨脂查尔酮(bavachalcone)，黄色粉末；分子式C21H20O4；ESIMSm/z 339.2[M+H]+；HNMR(CDCl3)d1.77(3H，S，H-5″)，1.78(3H，S，H-4″)，3.48(2H，d，J＝7.4Hz，H-1″)，5.29(1H，br t，J＝8.4Hz，H-2″)，6.42(1H，s，H-3)，6.88(2H，d，J＝8.7Hz，H-3′，5′)，7.47(1H，d，J＝15.6Hz)，7.55(2H，d，J＝3Hz，H-2′，6′)，7.59(1H，S，H-6)，7.85(1H，d，J＝15.3Hz)，6.08(OH，br s)，13.88(OH，s)。13CNMR(CDCl3)d17.6(C-4″)，21.5(C-5″)，25.5(C-1″)，53.8(4-OMe)，107.1(C-3)，113.4(C-1)，115.8(C-3′，5′)，115.4(C-b)，117.4(C-5)，121.9(C-2″)，126.5(C-1′)，128.8(C-6)，130.3(C-2′，6′)，132.1(C-3″)，143.9(C-c)，159.5(C-4′)，161.8(C-2)，163.6(C-4)，192.1(C-a)；
补骨脂查尔酮(bavachalcone)结构式
3.根据权利要求1所述的抗植物真菌病害的补骨脂查尔酮类化合物，其特征在于所述异补骨脂查尔酮(isobavachalcone)VIII黄色针晶，mp160～161℃；TLC检查为黄色斑点；1HNMR1.77(3H，s，CH3)，1.81(3H，s，CH3)，3.22(2H，d，J＝6.1Hz)，5.28(1H，br t，J＝6.9Hz)，6.88(2H，d，J＝8.9Hz)，7.55(2H，d，J＝9.1Hz)，7.85(1H，d.J＝15.3Hz)；7.55(1H，d，J＝15.6Hz)，6.44(1H，d，J＝8.7Hz)，7.75(1H，d，J＝8.4Hz)，13.89(1H，s)；
异补骨脂查尔酮(isobavachalcone)结构式
全文摘要
抗植物真菌病害的补骨脂查尔酮类化合物，涉及一种化合物，特别是涉及一种抗植物真菌病害的补骨脂查尔酮类化合物。本发明化合物是干燥补骨脂种子5Kg，用70％工业乙醇冷浸提取四次，浸出液减压浓缩得乙醇提取物，加适量水混溶，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取。取乙酸乙酯萃取部位浸膏100g，经反复硅胶柱层析，用氯仿一乙酸乙酯梯度洗脱，分离得到补骨脂查尔酮(bavachalcone)(21mg)和异补骨脂查尔酮(isobavachalcone)(17mg)。可以将其作为先导化合物为新药的创制提供理论依据。同时，作为先导化合物创制新药可以把植物农药和化学农药的优点集于一身，是国内外农药创制的热点之一。
文档编号C07C49/84GK101215229SQ20081001001
公开日2008年7月9日 申请日期2008年1月2日 优先权日2008年1月2日
发明者关丽杰, 红 邵, 蔡丽丽, 双 邵, 李海燕 申请人:沈阳化工学院