专利名称：防治植物真菌病害的短短芽孢杆菌及生物农药的制备方法
技术领域：
本发明属于生物农药技术领域，具体涉及防治植物真菌病害的短短芽孢杆菌及其生物农药的制备方法。
背景技术：
化学农药的长期使用已经造成了严重的后果农产品和土壤中的农药残留量越来越高，使农产品质量严重下降；有益生物的密度下降，自然群落遭到了严重破坏；病原菌和害虫的抗药性普遍提高，导致化学农药的超量使用，提高了农产品的生产成本，并加剧了对环境的破坏，形成了恶性循环。随着人们环保意识的增强，生物农药因其不污染环境、对人和动植物安全、选择性强、病原菌和害虫难以产生耐药性等诸多优点受到各国的高度重视， 是今后农药发展的主要方向。目前，在我国的农药施用中，生物农药仅占1%的比例，且价格低、品种少。植物病害是威胁农作物生产的自然灾害之一，生产上超过80%的植物病害是由真菌侵染引起的，这种病害严重发生时，可造成农作物大幅度减产和品质的严重下降，甚至引起人畜中毒，严重影响国民经济和人民的生活。因此，在考虑环境和食品安全的背景下寻求新一代抗真菌植物病害的生物农药显得十分必要和紧迫。枯萎病是瓜类、棉花上一种常见的重要病害。枯萎病的病原菌为半知菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum. f. sp)，该病菌寄主范围极广，一般导致作物根部变褐腐烂，茎基部缢缩纵裂，可引西瓜、番茄、棉花等多种作物发生毁灭性的病害，给农作物生产造成重大损失。该病菌主要以菌丝、厚垣孢子或菌核存在于土壤中，可存活6 10年，并可通过种子、 肥料、土壤、浇水传播，难治难防，被称为“瓜类癌症”、“棉花癌症”等。在农作物枯萎病的防治方面，由于病原菌的顽固性、多样性和变异性，目前尚缺乏有效的化学药剂和有效的抗病品种，成为瓜类等作物生产上急需解决的关键问题。各国学者希望在“以菌治菌”的生物防治上寻找突破口，利用生物农药防治枯萎病，并为此进行着积极的实验研究。
发明内容
本发明的目的是提供一种能够在植物根际定值，并且对多种病原菌具有拮抗作用的生防菌短短芽孢杆菌。本发明的另一目的是提供一种防治植物真菌病害的短短芽孢杆菌生物农药的制备方法。防治植物真菌病害的短短芽孢杆菌菌株的16S rDNA基因序列如下 CTAGCGGCGGACGGGTGAGTAACACGTAGGCAACCTGCCTCTCAGACTGGGATAACATAGGGAAACTTATGC
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权利要求
1.防治植物真菌病害的短短芽孢杆菌，其特征在于所述短短芽孢杆菌菌株的16S rDNA基因序列如下CTAGCGGCGGACGGGTGAGTAACACGTAGGCAACCTGCCTCTCAGACTGGGATAACATAGGGAAACTTATGC TAATACCGGATAGGTTTTTGGATCGCATGATCCGAAAAGAAAAGATGGCTTCGGCTATCACTGGGAGATGGGCCTGC GGCGCATTAGCTAGTTGGTGGGGTAACGGCCTACCAAGGCGACGATGCGTAGCCGACCTGAGAGGGTGACCGGCCAC ACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATTTTCCACAATGGACGAAAGTCTGATG GAGCAACGCCGCGTGAACGATGAAGGTCTTCGGATTGTAAAGTTCTGTTGTTAGGGACGAATAAGTACCGTTCGAAT AGGGCGGTACCTTGACGGTACCTGACGAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGG CAAGCGTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGCGCGCAGGCGGCTATGTAAGTCTGGTGTTAAAGCCCGGGGCTCA ACTCCGGTTCGCATCGGAAACTGTGTAGCTTGAGTGCAGAAGAGGAAAGCGGTATTCCACGTGTAGCGGTGAAATGC GTAGAGATGTGGAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTTTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCGCGAAAGCGTGGGG AGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAGTGCTAGGTGTTGGGGGTTTCAATACCCTCA GTGCCGCAGCTAACGCAATAAGCACTCCGCCTGGGGAGTACGCTCGCAAGAGTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGG CCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCCGCTGAC CGCTCTGGAGACAGAGCTTCCCTTCGGGGCAGCGGTGACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGAT GTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATCTTTAGTTGCCAGCATTCAGTTGGGCACTCTAGAGAGACTGC CGTCGACAAGACGGAGGAAGGCGGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACA ATGGTTGGTACAACGGGATGCTACCTCGCGAGAGGACGCCAATCTCTTAAAACCAATCTCAGTTCGGATTGTAGGCT GCAACTCGCCTACATGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTG TACACACCGCCCGTCACACCACGGGAGTTTGCAACACCCGAAGTCGGTGAGGTAACCGCAAGG,测序结果为1367bp ；在GeneBank的登录号为HQ58M18。
2.防治植物真菌病害的短短芽孢杆菌生物农药的制备方法，其特征在于包括以下操作步骤(1)将短短芽孢杆菌接种于每瓶装50ml牛肉膏蛋白胨(NA)培养液的250ml三角瓶中，29°C振荡培养Mh，摇床转速170. OOr/min，制得种子液；牛肉膏蛋白胨(NA)培养基配方为蛋白胨1. 0%、氯化钠0. 5%、牛肉膏0. 5%，初始pH值为 7. 2-7. 4，121°C 灭菌 20min ；(2)在5升自动发酵罐中，发酵培养基装罐75%，按10%的接种量接种种子液，通气3NL/ min,于下培养36h，放罐，发酵液经镜检计数后，调节浓度为IO8-IOiciceIVml,无菌分装，得到的短短芽孢杆菌发酵液即为含短短芽孢杆菌的生物农药；所述发酵培养基配方为葡萄糖1. 00%、蛋白胨2. 23%、磷酸氢二钾0. 01%、七水硫酸镁 0. 05%，初始pH值为7. 50，实罐灭菌。
全文摘要
本发明涉及防治植物真菌病害的短短芽孢杆菌及其用途。短短芽孢杆菌的基因测序结果为1367bp，在基因库(GeneBank)上的登录号HQ585418；保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会专利微生物中心，保藏编号为CGMCCNO.4361。防治植物真菌病害的短短芽孢杆菌生物农药的制备方法包括以下操作步骤一是种子液的制备，二是发酵制备短短芽孢杆菌生物农药。田间实验证明短短芽孢杆菌能明显降低瓜枯萎病的发病率，因此，本发明的菌株可以有效地应用于瓜枯萎病的防治，并可以用于制备一种安全、高效的生物农药。
文档编号C12N15/31GK102154155SQ201010607988
公开日2011年8月17日 申请日期2010年12月28日 优先权日2010年12月28日
发明者张洪斌, 胡雪芹, 芮广虎, 苏晓飞 申请人:合肥工业大学