专利名称:4-羟基-4-(取代链烯基)环己烷羧酸的制作方法
本发明涉及到一组化合物，即4-羟基-4-(取代链烯基)环己烷羧酸和它的衍生物。准确地说，本发明涉及到具有下列结构通式的化合物。
式中n是一个从0到2的整数，R是一个含有6到15个碳原子的直链烷基，X是氢原子(当n是1或2时，X也可以是氨基)，Y是-OH、-OR＊(R＊代表低级烷基)、-NH2、-NHR＊、-NR2＊或
(R′是H、1至4个碳原子的烷基或苄基)，Z是OH、-OR＊、-NH2、-NHR＊或-NR2＊。Y和Z可以是相同的，也可是不同的，但它们通常是相同的。上面提到的低级烷基是指含有1到4个碳原子的烷基。
对于所给出的化合物来说，可能有立体异构现象。上面所示的化学结构式被认为包括了各种可能的立体异构体，其中也含(外)消旋混合物这种立体异构体。更准确地说，由于上述结构中的取代基是以单键的形式联接到环己烷环上，这样，在每一个联接点上就可能出现两个异构体，它是由于取代基处于环己烷环平面的上方和下方彼此有所不同而引起的。然而，所给出的在环己烷环的1-和4-位有取代基的化合物，或许存在平面对称性，这样，可能的立体异构体的数目就会减少。考虑到存在双键，可能会出现几何(顺-反)异构现象，这取决于R基团在双键结构中相对于该分子剩余部分的位置。通常，(外)消旋异构体混合物比单一的旋光异构体更容易得到。所以在本申请中所提到的和已得到的，除了特地说明外，应当认为是(外)消旋异构体混合物。在此，对于一个化合物来说，绝对构型是确定的。它通常表明的是含有少量对映体混合物中的主要旋光异构体。
上述的低级烷基是指含有1到4个碳原子的烷基。例如甲基、乙基、丙基和丁基，这个定义同样还适用于后面提到的低级烷基。而字母R表示的烷基基团是辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基和十五烷基。
治疗上适宜的由上述酸(如结构式中Y和Z或二者之一是-OH时)形成的盐，也包括在本发明范围之内。这些碱式盐包括本领域中熟知的钠、钾、钙、镁、三乙胺、三甲胺、二环己基胺等，但并不限于这些化合物。这些碱式盐可以用本发明中的游离酸与适当的碱通过标准的方法得到。然而在本发明中优先选用的化合物是结构式中Y和Z同时是羟基的那些化合物。
下面给出本发明的化合物实例〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔2-羧乙基)硫代〕-2-十六碳烯基-4-羟基环己烷羧酸。
〔4(R)-〔4α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔羧甲基)硫代-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。
〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔(2-羧乙基)硫代〕-2-十八碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。
〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔(2-羧乙基)硫代〕-2-十四碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。
〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔(氨基甲酰甲基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。
〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔3-羧丙基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。
〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕-4-〔1-〔2-氨基-2-羧乙基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。
〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔(N-羧甲基)氨基甲酰甲基〕硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。
〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔N-(1-羧丁基)氨基甲酰甲基〕硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。
〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔N-(1-羧基-2-苯乙基)氨基甲酰甲基〕硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。
〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔(氨基甲酰甲基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧基酰胺。
〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔(N-甲基氨基甲酰甲基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基-N-甲基环己烷羧基酰胺。
〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔N，N-二乙基氨基甲酰甲基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基-N，N-二乙基环己烷羧基酰胺。
〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔(2-羧乙基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。
〔4(S)-〔1α，4α，4(Z)〕〕-4-〔1-〔(2-羧乙基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。
〔1α，4α，4(Z)〕-(±)-4-〔1-〔2-羧乙基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。
〔1α，4β，4(Z)〕-(±)-4-〔1-〔(2-羧甲基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。
〔1α，4β，4(E)〕-(±)-4-〔1-〔(2-羧乙基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。
〔4(S)-〔1α，4β，4(E)〕-4-〔1-〔(羟甲基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。
本发明中的化合物是用下式中的环氧化物。
式中R的定义与前面所述一致，Z′是-OR＊，-NH2，-NHR＊或-NR2＊。
与下式中的巯基链烷酸衍生物
式中n是一个从0到2的整数，X′是氢原子(当n是1或2时，X也可以是Q-NH-，式中Q是氨基保护基团)。Y′是-OR＊，-NH2、-NHR＊、-NR2＊或
。(R′是羟基，1至4个碳原子的烷基、苄基)，Y″是-OR＊。
在适当的溶剂中并有碱存在的条件下进行反应，也可以后续以下步骤当Y′、Y″或Z′是-OR＊时，先用强的无机碱处理，然后再用强酸酸化，便得到上式中Y、Y″或Z是-OH的那些化合物。尽管Y′和Z′在上述的反应试剂中通常是相同的，但它们也可以是不同的。要达到这一点并不难，只要通过适当的选则反应试剂便可在酸宫能团上引起差别。当产物中Y′和Z′基团间有一个是脂基团的话(即-OR＊)。显然，这个基团可以通过标准方法进一步水解，给出相应的游离羧酸基团。
尽管当X是-NH2时，保护基团并非必不可少，但氨基基团常通过某种标准的保护基团，以氨基酸的形式被保护起来，三氟乙酰基是一种较好的保护基团，同它可以在Y或Z脂基团离去的同时发生水解，形成一个游离的氨基，苄氧羰酰也是一个有用的保护基团，尽管它水解需要的条件比三氟乙酰基更强，然而，苄氧羰基也能够通过催化加氢除去，而且它不影响在分子中任何其它位置上的酯基团。
在环氧化物开环过程中使用的碱最好是一个叔胺，如三乙胺，反应所用的溶剂应当是一种能溶反应试剂，但对于反应本身来说具有惰性的溶剂，低链烷醇是较好的溶剂，尤其是在低级链烷醇与用在反应中酯的醇部分相对应时。因此，对甲酯来说应当用甲醇做溶剂而对乙酯来说应当用乙醇来做溶剂。
后面的酯与强碱的皂化和将生成的混合盐酸化给出相应的游离酸，都是有机化学上的标准方法，因此没必要对所用的反应试剂和反应条件做详细说明。
在上述一般方法中，作为起始反应物的环氧化物，可以从可得到的原料通过一系列适当的反应制得。例如4-羟基苯甲酸甲酯通过用含5%铑的三氧化二铝作催化剂，氢化给出4-羟基环己烷苯甲酸甲酯。产物接着用氯铬酸吡啶鎓氧化，得到4-氧代环己烷羧酸甲酯。将4-氧代环己烷羧酸甲酯进行2位碳的Homologation生成4-(氧代乙叉)-环己烷羧酸甲酯是按A.I.Meyers建立的方法进行的。先用二异丙基胺锂将乙醛合叔丁亚胺金属化，再用氯磷酸二乙酯处理，得到胺锂磷酸盐(Lithioeneaminephosphonate)加入4-氧代环己烷羧酸甲酯，接着加酸水解，便得到4-(氧代乙叉)环己烷羧酸甲酯。用硼氢化钠还原这个氧化乙叉化合物，得到4-(2-羟基乙叉)环己烷羧酸甲酯。
这个羟基乙叉化合物转变成所期望的环氧化物中间体，可用下列的一系列反应说明。
更准确地说，此处通过使用已知的Sharpless不对称环氧化技术，在合成过程中在这一处引入了手性。例如用(+)-酒石酸二乙酯、异丙氧化钛(Ⅳ)和叔丁基化过氧氢处理羟基乙叉，得到两种异构体，2-(羟甲基)-〔3(S)-顺或反式〕-1-氧杂螺〔2，5〕辛烷-6-羧酸甲酯。标有顺式的化合物采取已知的Swern氧化技术，用草酰氯、二甲基亚砜和三乙基胺氧化，得到2-甲酰-〔3(S)-顺式〕-1-氧杂螺(2，5〕辛烷-6-羧酸甲酯。该化合物用烷基三苯基溴化鏻和叔丁醇钾进行Witting烯化作用，得到2-(1-烯基)-〔3(S)-〔3α，3(Z)，6α〕〕-1-氧杂螺〔2，5〕辛烷-6-羧酸甲酯。在前面所述的环氧化过程中，使用(-)-酒石酸二乙酯便得到另外两个2-羟甲基异构体，然后，它们再进行上述的反应，得到3(R)-异构体。
在这些例子中，所期望的最终产物是一个酰胺，这些化合物可以通过使用适当的试剂在上述过程中得到。另一方面，如前所述，本发明得到的酯，也可以用氨或一个适当的胺通过反应转变成相应的酰胺。
在上述过程所用到的特殊条件，在后面的诸实施例中做了详细的叙述。
本发明中的化合物可用于治疗变态反应性疾病，特别是治疗支气管、哮喘症方面。例如SRS-A(迟发反应过敏性物质)被认为是一种在变态反应性支气管哮喘病中非常重要的媒介。确切地说，SRS-A是一种在靶组织内部或表层合成和释放出的物质。确切地说，由于人的支气管对SRS-A特别敏感，一旦受到适当的抗体刺激，马上就会在敏感的变态反应靶组织内部或表层合成并释放出SRS-A物质。
因此，能抵抗SRS-A作用的物质，可用于治疗支气管哮喘症。
最新的研究证实迟发反应性物质(SRS-A)实际是一种被描述的肽基-白细胞三烯的混合物。LTD4是这些白细胞三烯的一种，并可把它看作是它们的代表物，一般说来，该物质的拮抗作用与迟发反应性物质的拮抗作用是类似的。特别是本发明所得到的化合物可用作LTD4的拮抗物，所以它们可用于治疗变态反应性疾病，尤其是治疗支气管哮喘症，它们是根据其拮抗作用而筛选出的，在抑制组织胺和氨甲酰胆碱方面，它们不被认为是有竞争性。
本发明所得的化合物活性可以通过以下试验过程阐明。
豚鼠回肠纵行肌哈特利-邓肯(Hartley-Duncan)雄性豚鼠断颈处死，切下回肠末端，冲洗，置于Burn改良的台罗德氏溶液中，然后将纵肌切为1-2Cm长段，将标本置于氧化的Burn改良的台罗德氏溶液的组织浴中，温热至37℃，每块肌肉标本均施以1.0g的张力负荷，持续平衡一个小时后，在每一组织浴中加入1μm的消炎痛，五分钟后组织标本浸入60nm浓度的白细胞三稀-D4溶液中，每一肌肉将要产生的收缩力被认为是最大的初始收缩力值。将标本经一小时几次洗涤后，每个浴缸中再加入1μm消炎痛，五分钟后再将试剂或媒介物加入到浴缸中，十五分钟后，通过不断累加白细胞三烯-D4的浓度，而得到一条收缩曲线，可将这次收缩力值与起始收缩力值做一对比，假如试剂达到100um浓度时，肌肉收缩力值偏移到与LTD4有关的收缩反应曲线的右侧，就可以认为这种化合物是有活性的，拮抗物活性的定量测完可以按照Arunlakshana和Schild所描述的PA2值的计算方法来进行。(此文发表于Brit.J.Pharmae、Chemotherap.14;48，1959)3H-LTD4与豚鼠肺粘膜的特异性受体相结合处死雄性豚鼠，将肺取出，置于冰冷的50MM、PH7.4的Tris-HCl缓冲液，用多变速的匀浆器将肺组织制成匀浆，1，000g、4℃，离心十分钟，取出上清，再以30，000g，4℃，离心十五分钟，得到膜的团粒，将组织颗粒再悬浮到50MM，PH7.6的Tris-HCl缓冲液，37℃孵育20-40分钟来进行结合试验，利用真空滤器通过沃特曼(Whatman)GF/B玻璃纤维滤纸，用冰冷的Tris-HCl缓冲液3次4ml抽滤冲洗，从而使结合的3H-LTD4与未结合的3H-LTD4分离，即去除未结合的3H-LTD4。此过程要在八秒钟内完成，再测完滤纸上的放射强度，未标记的LTD4不存在时的结合3H-LTD4的值减去使用了2×107M未标记LTD4时结合的3H-LTD4的值就得到特异结合的3H-LTD4的值。3H-LTD4的特异性结合的量占总结合量的60-80%，本发明所得到的化合物研究表明，它可以抑制3H-LTD4的特异性结合，在这些试验中，当增加试剂的浓度时，可以封闭3H-LTD4的特异性结合，能降低特异结合的3H-LTD450%时，这个浓度被称为IC5。
由以上试验过程表明，此次发明的几种化合物具有特殊的功能。总结于下表。化合物的活性是发生变化的，看来，亚十四烷基化合物的R-烷基的链缩短时，它的活性也随之改变，这一点也包括在下表中
化合物 豚鼠空肠 豚鼠肺(例号) PA2(LTD4) 特异性结合IC50uM10D 9.8 -10H 9.61 8.710F 9.42 -11 7.87 -10J 8.26 7.110L 8.57 8.0在体内的生物活性本发明所得的化合物对LTD4的拮抗作用，利用改良的Konzett-Rossler方法在麻醉的豚鼠体内进行了试验，特别是当豚鼠用戊巴比妥钠麻醉后，通过手术用固定容量的呼吸机进行人工通气试验，豚鼠肺每次扩张时，要测完由呼吸机所产生的膨胀压力，膨胀压力增长超过基线时，表明支气管狭窄。当确定膨胀压力的基线后，由静脉注射50或100ng/Kg LTD4就可诱导出支气管哮喘，这被称为初次反应。当膨胀基线降到基线时，给豚鼠注射规定的试验化合物或媒介的剂量，可采用静脉给药或十二指肠给药，静脉给药一分钟或十二指肠给药5-12分钟后，再次注入LTD4可将这时的反应与初次反应做对比，该药物能达到的抑制百分数就可被测定，该结果总结如下由十二指肠给药得到的抑制作用值高于已获得的两次结果。
化合物 剂量 途径 抑制%例号10F 0.002mg/Kg i.v. 3810F 0.0002mg/Kg i.v. 5210F 0.02mg/Kg i.v. 9410F 0.1mg/Kg i.d. 7410F 0.2mg/Kg i.d. 9310J 0.5mg/Kg i.d. 4810J 1.0mg/Kg i.d. 5310I 0.05mg/Kg i.v. 1910L 0.5mg/Kg i.v. 7410L 1.0mg/Kg i.d. 25本发明所得到的化合物，即可以单独成分给药，也可以与其它试剂混合物制成混合物给药，它们可以单独应用，但是通常是以多种组成成分形成制剂。它就是说这种混合物是由常规的药物载体或稀释剂与多种有效成分组成，这种组合药物的剂型可以是片剂，锭剂，胶束剂，粉剂，气雾剂，水或油的混悬液，糖浆剂，酏剂和用于注射的水溶液，这种化合物的最适给药途径是口服给药。
当然，药物的成分与药物载体或稀释剂的比例要取决于所采用的给药途径，即口服或不经肠胃和吸入途径。口服药物常常是片剂、胶束剂，其中含有常用的赋形剂，如粘合剂(如糖浆。阿拉伯胶、明胶、山梨糖醇、西黄蓍胶或聚乙吡咯烷酮)、填充剂(如乳糖、糖、玉米淀粉、磷酸钙、山梨糖醇或甘氨)、润滑剂(如硬脂酸镁、滑石粉、聚乙二醇或硅)、分解剂(如淀粉)或湿润剂(如十二烷基磺酸钠)。口服液常常是水或油的混悬液、溶液、乳剂、糖浆、配剂，或者提供干燥制剂，在使用前用水或其它适宜的试剂制成液体再使用。这种液体制剂可以含有常规使用的填加剂，如悬浮剂、香料、稀释剂或乳化剂，如为非经肠胃给药的药剂或吸入剂，本发明得到的药物也可制成溶液或混悬液，例如可制成吸入的气雾喷射剂，作成水溶液静脉注射，油混悬液供肌肉注射，这种化合物也可经吸入器或其它设备将干燥粉末直接喷入肺部，以上所论及的制备过程在标准教科书中有说明，例如Remington′s Pharmaceutical Science，Mack出版公司，Easton，Peunsylvania。
本发明所得到的化合物或它的药物组合物可用于哮喘病人，剂量可达到约0.1-40mg/kg体重，一次口服剂量可以接近0.1-1000mg活性成分，多次口服剂量可以达到4000mg/天活性成分，吸入给药一般常用较低的剂量，即大约为该化合物的常用剂量的0.1，这些剂量只是一般地说明，对于每位特定的患者，内科医师要根据患者的基本特点，如年龄、体重、诊断、症状的程度最后确定给药的剂量。
下面的例子是用来阐明本发明的，但是它们不能被认为仅限于此。
实施例1在装有150毫升甲醇的帕尔瓶中加入25克4-羟基苯甲酸甲酯，然后，瓶子用氮气吹净。加入2.5克含5%载于三氧化二铝上的铑，并给反应混合物加18个小时3.74个大气压的氢气，同时保持不断地振荡。反应完毕，反应体系用氮气吹净并通过硅藻土将催化剂过滤除去，该硅藻土用甲醇洗清，当心不要将催化剂滤干。将滤液合并，在较缓和的温度(大约40℃)下，通过减压除去甲醇。剩余产物和三氧化二铝加到含有3克无水碳酸钾的200毫升乙醚中，沉淀的三氧化二铝和碳酸钾用硅藻土过滤除去，硅藻土用乙醚洗清，滤液合并在一起减压除去溶剂，便得到粗产品，粗产品经Kugelrohr装置在80～100℃/约1mm条件下进行球对球蒸馏，得到25.0克的4-羟基环己烷羧酸甲酯(98%)。1HNMR(CDCl3、60MHz)δ3.85(S、1H)、3.65(S、3H);2.50-1.20(m，10H)。
实施例2将24克烘干的硅藻土，11.4克的乙酸钠和90.5克的氯铬酸吡啶鎓在搅拌下，加到400毫升的无水二氯甲烷中，再加入350毫升的二氯甲烷，然后，将溶有44.5克4-羟基环己烷羧酸甲酯的40毫升二氯甲烷通过加液漏斗注入。三个小时后，在搅拌下，将800毫升的乙醚加入，然后将反应混合物通过250克的硅胶吸滤，得到的固体用乙醚洗四次。将合并在一起的滤液浓缩成绿油后，加入到150毫升的乙醚中，然后再通过50克的硅胶吸滤。用过的硅胶用乙醚洗清，将合并的滤液浓缩成清油，再在大约65-85℃/1mm经Kugelrohr蒸馏，得到42.6克的4-氧代环己烷羧酸甲酯(97.5%)。1HMR(CDCl3、60MHz)，δ3.70(S、3H)，2.9-1.8(9H)。
实施例3用冰浴将729毫升的无水四氯呋喃和76.4毫升无水二异丙基胺的混合物冷却到3℃，在搅拌下，用45分钟将340。6毫升溶有正丁基锂的正己烷溶液逐滴加入，继续搅拌15分钟，然后将溶液冷却到-75℃。通过加液漏斗，用20分钟将269克乙醛合叔丁亚胺逐滴加入，继续搅拌30分钟，温度保持在-75℃，用时将47.0克的氯膦酸二乙酯通过加液漏斗加入。反应维持在-75℃继续搅拌1小时，然后升温到-11℃。二小时后再降到-75℃，此时，用一小时将溶有28.4克4-氧代环己烷羧酸甲酯的50毫升四氢呋喃溶液通过滴加漏斗加入，然后使反应升温到室温并维持一夜。次日，反应物倒入含有49.0克的草酸、1.8升水和1.8升甲苯的混合物中，剧烈搅拌24小时后，分出水层，用乙醚(2×500毫升)萃取。将合并的甲苯-乙醚萃取液用5%的草酸水溶液(2×500毫升)、500毫升饱和的碳酸氢钠和500毫升饱和的氯化钠溶液洗涤，然后将有机层用无水碳酸钾干燥，过滤后在抽真空下浓缩，得到的油状粗产品用制备液相色谱(25%的乙酸乙酯，300毫升/分，2分钟/Cm，双柱，Rt＝7.5分钟)纯化，得到18.5克的4-(氧代乙叉)-环己烷羧酸甲酯。1HNMR(CDCl3、60MHz)δ10.5(d、1H)5.85(d，1H)，3.70(S、3H)，2.8-1.5(9H)。
实施例4将13.0克的4-(氧代乙叉)环己烷羧酸甲酯溶于77毫升的甲醇中，并用冰浴将液冷却到3℃，在剧烈搅拌下，将3.1克的硼氢化钠用30分钟分批加入，反应物在3℃下搅拌一小时，然后加入冰醋酸(1毫升)，使反应停止。在减压下除去甲醇，剩余物倒入200毫升的二氯甲烷中，并用400毫升的水使其分层;分出有机层，并用200毫升饱和的氯化钠溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥后，过滤并在抽真空下浓缩，得到的油状物用制备液相色谱(30%乙酸乙酯/己烷，250毫升/分，2分钟/Cm，双柱，Rt＝13分钟)提纯，得到11.5克相当纯的产物。经Kugelrohr装置，于150～160℃/0.8mm条件下进行球对球蒸馏，得到9.03克的4-(2-羟基乙叉)环己烷羧酸甲酯(69%)。1HMNR(CDCl3、60MHz)，δ5.40(t、1H)，4.10(d、2H)，3.70(S、3H)，2.9-1.3(10H)。
实施例5用干冰/丙酮浴将300毫升的无水二氯甲烷冷却到-25℃至-30℃，在搅拌下，将12.9毫升的异丙氧化钛(Ⅳ)和一个由8-9毫升的(+)-酒石酸二乙酯浴在100毫升二氯甲烷所形成的溶液，依次通过加液漏斗加入。十分钟后，将溶有8.0克4-(2-羟基乙叉)环己烷羧酸甲酯的20毫升二氯甲烷溶液加入到反应体系中，用20毫升的二氯甲烷清洗烧杯和加液漏斗，然后将18.4毫升4.7M的叔丁基化过氧氢/甲苯溶液立即加入。此反应烧杯被放置在一个冷藏箱中，在-20℃下，静置24小时，然后反应物通过硅胶吸滤，用过的硅胶用500毫升25%的乙酸乙脂/二氯甲烷洗清，合并的漏液经真空浓缩，得到黄色的油状物。粗产品的薄层色谱(20%乙酸乙酯/乙烷)分析表明，产物中顺、反非对映体可用色谱法将它们分开，顺式非对映体的Rf＝0.14，反式非对映体的Rf＝0.17，经制备液相色谱(10%异丙醇/己烷，250毫升/分，2分钟/Cm，双柱，反式Rt＝16分钟，顺式Rt＝23分钟)分离提纯，得到2.7克油状的反式环氧化物和2.5克油状的顺式环氧化物。顺式的环氧化物用3%的乙醚/戊烷至结晶两次得到0.41克的2-(羟甲基)-〔3(S)-顺式)-1-氧杂螺〔2.5〕-辛烷-6-羧酸甲酯。长扁、白色的晶体，熔点67-68℃;〔α〕20D-13.3°(C 1.15，氯仿)%ee＝＞95%，反式环氧化物用30%的乙醚/戊烷重结晶两次，得到0.57克长、扁、白色的晶体，熔点31-33℃，〔α〕20D-10.6°(C 1.22氯仿)%ee＝80%，顺式环氧化特1HMNR(CDCl3，300MHz)，δ3.80(m，2H)，3.70(S，3H)，3.10(dd，1H)2.00-1.40(9H)。
实施例60.2毫升的草酸氯加到27毫升的无水二氯甲烷中，形成一个混合物，将其冷却到-75℃，然后在搅拌下用5分钟将0.35毫升的二甲基亚矾逐滴加入，过10分钟将溶有381毫克的2-(羟甲基)-〔3(S)-顺式〕-1-氧杂螺〔2、5〕-辛烷-6-羧酸甲酯的3毫升二氯甲烷溶液逐滴加入，搅拌20分钟后，再将1.54毫升的三乙胺用5分钟逐滴加入，然后让反应温度回升到室温继续反应45分钟。通过减压除去溶剂，得到的白色固体剩余物加入到50毫升的乙醚中，并通过烧结玻璃板漏斗过滤，滤液在抽真空条件下浓缩，得到一个黄色油状物，该粗产品用制备液相色谱(20%乙酸乙酯/己烷，250毫升/分，2分钟/Cm，单柱，Rt＝4.75分钟)提纯，得到355.5mg油状的2-甲酰-〔3(S)-顺式〕-1-氧杂螺〔2、5〕-辛烷-6-羧酸甲脂。
〔α〕20D+132.0°(C 0.71，氯仿)1HNMR(CDCl3300MHz)，δ9.50(d、1H)，3.70(S，3H)3.20(d、1H)，2.60-1.30(9H)。
实施例7在搅拌下将1.80克正十四烷基三苯基溴化鏻加到20毫升的无水四氢呋喃中，然后将6.4毫升0.5M的叔丁醇钾/四氢呋喃逐滴加入，溶液变成橙色。五分钟后将溶有342毫克2-甲酰-〔3(S)-顺式〕-1-氧杂螺〔2、5〕辛烷-6-羧酸甲酯的3毫升四氢呋喃溶液逐滴加入，溶液由橙色变成淡黄色，将六等分(每份0.5毫升)的叔丁醇钾溶液，每隔10分钟加入一份，使反应趋于完全。加入5毫升的水，然后将反应混合物倒入200毫升的乙醚中，该混合物用饱和氯化钠溶液(2×100毫升)洗涤，再在抽真空下浓缩到100毫升，然后加入900毫升的己烷，混浊液通过硅胶吸滤。用过的硅胶用500毫升10%乙醚/己烷洗清，合并滤液在抽真空下浓缩成一种黄色的油状物，它经制备液相色谱(5%乙酸乙酯/己烷，250毫升/分，2分钟/Cm，单柱，Rt＝5分钟)分离提纯，得到527毫克油状的2-(1-十五烷基)-〔3(S)-〔32，3(Z)-6α〕〕-1-氧杂螺〔2、5〕辛烷-6-羧酸甲酯，〔α〕20D+25.7%(C 0.92，氯仿)1HNMR(CDCl3，3HMHz)δ5.75(m、1H)，5.25(t、1H)，3.70(S、3H)、3.45(d、1H)，2.45-1.20(34H)。
使用(-)-酒石酸二乙脂，重复实施例5的步骤，得到另外两种螺环化合物，这两种化合物和在实施例5得到的反式螺环化合物，分别按照上面实施例6和实施例7中所述的步骤进行反应。此外，还用辛基三苯基溴化鏻代替十四烷基三苯基溴化鏻，重复上面实施例7的步骤，在此方法中得到的产物如下2-(1-十五烷基)-〔3(S)-〔3β，3(Z)，6α〕〕-1-氧杂螺〔2、5〕辛烷-6-羧酸甲酯。
2-(1-十五烷基)-〔3(R)-〔3α，3(Z)，6α〕〕-1-氧杂螺〔2、5〕辛烷-6-羧酸甲酯。
2-(1-十五烷基)-〔3(R)-〔3β，3(Z)，6α〕〕-1-氧杂螺〔2、5〕辛烷-6-羧酸甲酯。
2-(1-壬烯基)-〔3(S)-〔3α，3(Z)，6α〕〕-1-氧杂螺〔2、5〕辛烷-6-羧酸甲酯。
实施例8在搅拌下，将0.28毫升的三乙基胺加入到用227毫克2-(1-十五烷基)-〔3(S)-〔3α，3〔Z〕，6α〕〕-1-氧杂螺〔2、5〕辛烷-6-羧酸甲酯与2.7毫升甲醇形成的混合物中，然后再加入0.20毫升的3-巯基丙酸甲脂。24小时后，减压下除去甲醇，将得到的油加入到100毫升乙醚中，先用50毫升0.5N盐酸，再用50毫升饱和氯化钠洗涤，然后经无水硫酸钠干燥过滤，和在真空下浓缩，得到一种黄色的油。它用制备液相色谱(10%乙酸乙酯/乙烷，250毫升/分，2分钟/Cm，单柱，Rt＝22分钟)分离提纯，得到278.4毫克油状的〔4(R)-〔1α，4α，4(Z)〕〕-4-羟基-4-〔1-〔2-甲氧甲酰乙基)硫代〕-2-十六碳烯基〕环己烷羧酸甲酯。〔α〕20D+33.5°(C0.88，氯仿)，1HNMR(CDCl3，300MHz)δ5.60(m，1H);5.4(t，1H);3.70(S，3H);3.65(S，3H);3.60(d，1H);2.75(m，2H);2.60(m，2H);2.20-1.20(34H);0.89(t，3H)。
实施例9将〔4(R)-〔1α，4α，4(Z)〕〕-4-羟基-4-〔1-〔2-甲氧甲酰乙基)硫代〕-2-十六碳烯基〕〕环己烷羧酸甲酯溶液溶解在4.0毫升的无水乙醇中，然后，在搅拌下，将340毫克的氢氧化钾片溶在3.3毫升的水中，所形成的溶液加入到混浊的溶液中。4.5小时后，清澈的溶液用75毫升的水冲稀。该含水混合物用75毫升的乙醚洗涤，用15毫升0.5N的盐酸酸化，再用乙酸乙酯(3×1毫升)萃取。将合并的有机萃取液用无水硫酸钠干燥，经过滤和真空浓缩得到灰白色的固体。该固体用10%乙醚/己烷重结晶，得到157毫克(64%)白色粉末状的〔4(R)-〔1α，4α，4(Z)〕〕-4-〔1〔(2-羧乙基)-硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。熔点为121-123℃;〔α〕20D+32.0°(C0.95，氯仿)，1HNMR(CDCl3，300MHz)，δ5.62(m，1H);5.40(t，1H);3.62(d，1H);2.74(m，2H);2.62(m，2H);2.25-1.20(34H);0.89(t，3H)。
该化合物具有下列的结构式
实施例10A-10M当选用适当的氧杂螺和巯基化合物，按照在实施例8中所叙述的步骤进行反应，生成的酯按实施例9中所述的方法进行皂化，得到如下的化合物A.〔4(S)-〔1α，4α，4(Z)〕〕-4-〔1-〔2-羧乙基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。熔点122-123℃;〔α〕20D-38.1°(C0.89，氯仿)。1H NMR(CDCl3，300MHz)，δ5.61(m，1H);5.39(t，1H);3.62(d，1H);2.68(m，4H);2.23-1.22(33H);0.88(t，3H)。
B.〔4(R)-〔1α，4α，4(Z)〕〕-4-〔1-〔(羧甲基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。
〔α〕20D+23.9°(C0.66，氯仿)。1H NMR(CDCl3，300MHz)，δ5.69(m，1H);5.39(t，1H);3.82(d，1H);3.21(m，2H);2.30-1.20(33H);0.88(t，3H)。
C.〔4(S)-〔1α，4α，4(Z)〕〕-4-〔1-〔(羧甲基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。〔α〕20D-11.5°(C1.42，氯仿)。1H NMR(CDCl3，300MH2)δ5.66(m，1H);5.37(m，1H);3.82(d，1H);3.22(m，2H);2.10-1.12(33H);0.88(t，3H)。
D.〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔(羧甲基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。〔α〕20D+3.3°(C0.73，氯仿)。1H NMR(CDCl3，300MH2)δ5.75(m，1H);5.44(m，1H);4.26(d，1H);3.20(m，2H);2.40-1.18(33H);0.88(t，3H)。
E.〔4(S)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔(羧甲基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸;〔α〕20D-11.8°(C0.97，氯仿)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ5.72(m，1H);5.49(m，1H);4.26(d，1H);3.16(m，2H);2.50-1.17(33H);0.88(t，3H)。
F.〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔(2-羧乙基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸;〔α〕20D+34.8°(C0.81，氯仿)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ5.63(m，1H);5.41(t，1H);3.75(d，1H);2.67(m，5H);2.09-1.26(33H);0.88(t，3H)。
G.〔4(S)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔(2-羧乙基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸;〔α〕20D-41.4°(C1.26，氯仿)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ5.63(m，1H);5.42(t，3H);3.76(d，1H);2.67(m，5H);2.09-1.22(33H);0.88(t，3H)。
H.〔1α，4β，4(Z)-4-〔1-〔(2-羧乙基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸;熔点71-78℃。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ5.63(m，1H);5.41(t，1H);3.76(d，1H);2.68(m，5H);2.11-1.26(33H);0.88(t，3H)。
I.〔1α，4α，4(Z)〕-4-〔1-〔(3-羧丙基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸;熔点71-72℃。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ5.61(m，1H);5.36(t，1H);3.59(d，1H);2.49(m，4H);2.25-1.20(35H);0.88(t，3H)。
J.〔1α，4β，4(Z)〕-4-〔1-〔(3-羧丙基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸;1H NMR(CDCl3，300MHz)δ5.61(m，1H);5.41(t，1H);3.69(d，1H);2.49(m，4H);2.10-1.22(35H);0.88(t，3H)。
K.〔1α，4α，4(Z)〕-4-〔1-〔〔3-〔(羧甲基)氨基〕-3-氧代丙基〕硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸;1H NMR(CDCl3，300MHz)δ6.85(m，1H);5.57(m，1H);5.39(t，1H);4.27(m，1H);4.00(m，1H);3.60(d，1H);2.90-1.20(37H);0.89(t，3H)。
L.〔1α，4β，4(Z)-4-〔1-〔〔3-〔(羧甲基)氨基〕-3-氧代丙基〕硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸;熔点81.5-82.5℃。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ6.80(S，1H);5.63(m，1H);5.42(t，1H);4.08(d，2H);3.70(d，1H);2.85-2.40(m，4H);2.10-1.20(33H);0.89(t，3H)。
M.〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔(3-氨基-3-氧代丙基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸;熔点108-109℃;〔α〕20D+48.3°(C0.86，氯仿)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ6.02(S，1H);5.72(S，1H);5.60(m，1H);5.45(t，1H);3.72(d，1H);2.77(m，2H);2.58(m，3H);2.15-1.20(33H);0.89(t，3H)。
N.〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔(2-羧乙基〕硫代〕-2-癸烯基〕-4-十六羟基环己烷羧酸。
实施例11在烧瓶中装入315毫升的环己烷，并用氮气吹净。在搅拌下，加入397毫克的2-(1-十五烷基)-〔3(S)-〔3α，3(Z)，8α〕〕-1-氧杂螺〔2.5〕辛烷-6-羧酸甲酯和241毫克的二苯二硫，用冰浴使搅拌液冷却。将紫外灯光距焦在反应混合物上，照射3.6小时。减压下除去溶剂，剩余物通过硅胶(己烷做洗脱剂)过滤除去二苯二硫，再用乙醚洗涤，得到粗烯烃混合物。减压下除去乙醚得到一种黄色的油(顺/反＝0.14)，它经制备液相色谱(15%乙醚/己烷，双柱，Rt＝8分钟)分离，得到油状的120毫克的2-〔(1-十五烷基)-〔3α，(E)，6β〕〕-1-氧杂螺〔2.5〕辛烷-6-羧酸甲酯。1H NMR(CDCl3，300MH2)δ5.90(m，1H);5.33(m，1H);Ja、b＝15.1Hz);3.68(S，3H);3.18(d，1H);2.43(m，1H);2.10-1.20(32H);0.89(t，3H)。
上述得到的产物加入到一个装有一毫升甲醇的五毫升圆底烧瓶中，在搅拌下，加入0.08毫升的三乙基胺，然后再加入0.04毫升的3-巯基丙酸甲酯。两天后，除去溶剂，粗油经快速色层分离(5%乙酸乙酯/己烷)。得到58.3毫克(84%)油状的〔1α，4β，4(E)〕-4-羟基-4-〔1-〔(3-甲氧基-3-氧代丙基)硫代-2-十六碳烯基〕-环己烷羧酸甲酯。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ5.45(m，2H);3.69(S，3H);3.67(S，3H);3.30(d，2H);2.80-2.20(m，5H);2.05-1.20(33H);0.89(t，3H)。
当上述的酯根据在实施例9的步骤用碱水解时，得到产物〔1α，4β，4(E)〕-4-〔1-〔(2-羧乙基)硫代-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸。1H NMR(CDCl3，300MHz，δ5.53(m，2H);Ja，b，3.37(d，1H);2.65(m，4H);2.15-1.20(33H);0.88(t，3H)。
权利要求
1.一种制备下式化合物的方法
式中n是一个从0到2的整数，R是含有6到15个碳原子的直链烷基，X是氢原子(当n是1或2时，X也可是氨基)，Y是羟基、-OR＊(R＊代表低级烷基)、-NH2、-NHR＊、-NR2＊或
(R′是氢原子、1到4个碳原子的烷基或苄基)，Z是羟基、-OR＊、-NH2、-NHR＊或-NR2＊。该制备方法是用下式中的环氧化物
式中R的定义与前面相同，Z′是-OR＊(R＊代表代级烷基)、-NH2、-NHR＊、或-NR2＊。与下式的巯基链烷酸衍生物
式中n是一个从0到2的整数，X′是氢原子(当n是1或2时，X也可是Q-NH-，Q是氨基保护基团)，Y′是-OR＊、-NH2、-NHR＊、-NR2＊或
(式中R′是氢原子、1到4个碳原子的烷基或苄基)，Y′″是-OR＊，在适当的溶剂中并有碱存在的条件下进行反应，也可以再继续下述步骤当Y′、Y′″或Z′是-OR＊时，先用强的无机碱处理，然后再用强酸酸化便得到式中Y、Y′″或Z是-OH的那些化合物。
2.根据权利要求
1制备下式化合物的方法。
式中n是一个从0到2的整数，R是含有6到15个碳原子的直链烷基，X是氢原子(当n是1或2时，X也可是-NH2)，Y是羟基、-OR＊、-NH2、-NHR＊、-NR＊2或
-COOH(R′是氢原子、1到4个碳原子的烷基或苄基)，Z是羟基、-OR＊、-NH2、-NHR＊或-NR2＊。该制备方法是用下式中的环氧化物
式中R的定义与前面相同，Z′是-OR＊、-NH2、-NHR＊或-NR2＊。与下式的巯基链烷酸衍生物
式中n是一个从0到2的整数，X′是氢原子(当n是1或2时，X′也可是Q-NH-，Q是氨基保护基团)，Y′是-OR＊、-NH2、-NHR＊、-NR2＊或
是氢原子、1到4个碳原子的烷基或苄基，Y′′′是-OR＊)在适当的溶液中并有碱存在的条件下进行反应，也可再续下述步骤当Y′Y′′′或Z′是-OR＊时，先用强无机碱处理，再用强酸酸化，得到式中Y、Y′′′或Z是-OH的那些化合物。
3.根据权利要求
1制备下式化合物的方法。
式中n是一个从0到2的整数，R是含有6到15个碳原子的直链烷基，Y是羟基、-NH2、-NHR＊、-NR2＊或
(R′是氢原子、1至4个碳原子的烷基或苄基)。该制备方法是用下式中的环氧化物
式中R的定义与前面相同与下式的巯基链烷酸衍生物
式中n是一个从0到2的整数，Y′是-OR＊、-NH2、-NHR＊、-NR2＊或
(Y′′′是-OR＊)。在适当的溶剂中并有碱存在的条件下进行反应，也可以再续下述步骤当Y′或Y′′′是-OR＊时，先用强无机碱处理，再用强酸酸化，得到式中Y′或Y′′′是-OH的那些化合物。
4.根据权利要求
1制备〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔羧甲基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸的方法是用2-(1-十五碳烯基)-〔3(S)-〔3β，3(Z)，6α〕-1-氧杂螺〔2.5〕辛烷-6-羧酸甲酯与2-巯基醋酸甲酯反应，反应完后用氢氧化钾处理，再用盐酸酸化。
5.根据权利要求
1制备〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔(2-羧乙基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸的方法是用2-(1-十五碳烯基)-〔3β，3(Z)，6α〕-1-氧杂螺〔2.5〕辛烷-6-羧酸甲酯与3-巯基丙酸甲酯反应，反应完后用氢氧化钾处理，再用盐酸酸化。
6.根据权利要求
1制备〔4(R)-〔1α，4β，4(Z)〕〕-4-〔1-〔(2-羧乙基)硫代〕-2-十六碳烯基〕-4-羟基环己烷羧酸的方法是用2-(1-十五碳烯基)-〔3(S)-〔3β，3(Z)，6α〕〕-1-氧杂螺〔2.5〕辛烷-6-羧酸甲酯与3-巯基丙酸甲酯反应，反应完后用氢氧化钾处理，再用盐酸酸化。
7.根据权利要求
1制备〔1α，4β，4(Z)〕-4-〔1-〔(3-羧丙基)硫代〕-2-十六碳烯〕-4-羟基环己烷羧酸的方法是用2-(1-十五碳烯基)-〔3(S)-〔3β，3(Z)，6α〕-1-氧杂螺〔2.5〕辛烷-6-羧酸甲酯与4-巯基丁酸甲酯反应，反应完后用氢氧化钾处理，再用盐酸酸化。
专利摘要
本发明涉及到具有拮抗白细胞三烯活性的化合物，它们是4-羟基-4-烷烯基环已烷羧酸衍生物。这些化合物可用于治疗变态反应性疾病，特别是在治疗患者的哮喘病方面。它们是通过适当的氧杂螺环化合物与巯基链烷酸衍生物反应制备得到的。
文档编号C07D303/38GK87107599SQ87107599
公开日1988年8月3日 申请日期1987年11月6日
发明者罗伯特·J·克里格, 尼尔森·L·兰茨 申请人:默里尔多药物公司导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan