专利名称：一种高效精制粗品肝素钠的方法
技术领域：
本发明涉及一种粗品肝素钠精制方法，特别是一种肝素钠生产工艺方法。
背景技术：
肝素钠是一种临床常用的抗凝血药物，主要从猪小肠粘膜中提取的粘多糖物质， 具有显著地抗凝血和防止血栓形成的作用。近年来低分子肝素钠产品的涌现，使肝素钠的应用越来越广泛。传统的生产工艺方法是将粗品肝素钠进行一次或两次氧化脱色及乙醇沉淀精制，其过氧化氢用量大(3-5% )，对肝素钠效价损伤大，收率低。发明内容
本发明的目的提供一种精制粗品肝素钠的高效工艺方法，克服了上述常规方法存在的问题，提高了收率，增加了经济收益。
本发明的目的通过以下技术方案来达到，依次通过以下几个步骤来实现。
1、粗品溶解将粗品肝素钠按5_6Kg/亿单位比例用纯化水充分溶解；
2、第一次氧化调节pH = 9. 0-10. 0，调节料液温度至15_20°C，按照O. 4-0. 6 % (v/v)比例加入浓度为30%过氧化氢，搅拌条件下氧化脱色4-6小时，之后，按照O. 2-0. 4% (v/v)比例加入30%过氧化氢，搅拌条件下氧化脱色8-10小时；
3、第一次沉淀调节pH = 4. 0-5. O,按照20_30g/L比例向料液中加入氯化钠,搅拌条件下加入温度为5-10°C的乙醇(80-95% )，直至乙醇浓度为35-40%，停止搅拌，静置 10-14小时；
4、第二次氧化将3中的沉淀物用纯化水按照5_6Kg/亿单位比例充分溶解，调节 pH = 9. 0-10. 0，调节料液温度至15-20°C，按照O. 4-0. 6% (v/v)比例加入浓度为30%过氧化氢，搅拌条件下氧化脱色4-6小时，之后，按照O. 2-0. 4% (v/v)比例加入30%过氧化氢， 搅拌条件下氧化脱色8-10小时；
5、第二次沉淀 调节pH = 10. 0-11. 0，按照20_30g/L比例向料液中加入氯化钠， 搅拌条件下加入温度为5-10°C的乙醇(80-95% )，直至乙醇浓度为35-40%，停止搅拌，静置10-14小时；
6、第三次氧化将5中的沉淀物用纯化水按照5_6Kg/亿单位比例充分溶解，调节 pH = 9. 0-10. 0，调节料液温度至15-20°C，按照O. 4-0. 6% (v/v)比例加入浓度为30%过氧化氢，搅拌条件下氧化脱色4-6小时，之后，按照O. 2-0. 4% (v/v)比例加入30%过氧化氢， 搅拌条件下氧化脱色8-10小时；
7、第三次沉淀调节pH = 4. 0-5. 0，按照20_30g/L比例向料液中加入氯化钠，用温度为5-10°C乙醇(80-95%)沉淀，边搅拌边加入，直至乙醇浓度为35-40%，停止搅拌，静置10-14小时；
8、第四次氧化将7中的沉淀物用纯化水按照5_6Kg/亿单位比例充分溶解，调节 pH = 9. 0-10. 0，调节料液温度至15-20°C，按照O. 4-0. 6% (v/v)比例加入浓度为30%过氧化氢，搅拌条件下氧化脱色4-6小时，之后，按照O. 2-0. 4% (v/v)比例加入30%过氧化氢， 搅拌条件下氧化脱色8-10小时；
9、第四次沉淀调节pH = 10. 0-11. 0，按照20_30g/L比例向料液中加入氯化钠， 用温度为5-10°C乙醇(80-95%)沉淀，边搅拌边加入，直至乙醇浓度为35-40%，停止搅拌， 静置10-14小时；
将9)中所得沉淀物用纯化水按照2_3Kg比例充分溶解后过滤，用乙醇沉淀后脱水干燥即得高收率高效价肝素钠精品。
本技术方案的有益效果是经过多次梯度氧化脱色和酸碱交替沉淀，提高了收率，增加了收益。经本方法精制粗品肝素钠，精品活性效价收率可达85-90%，单位效价彡180U/mg。传统工艺方法精制粗品肝素钠，精品活性效价收率只有65-80%，若要求其单位效价彡180U/mg，收率将更低。
第一，本技术方案中，使用过氧化氢进行梯度氧化脱色，O. 4-0.6% (v/v)与 O. 2-0.4% (v/v)梯度加入，前者氧化4-6小时，后者氧化8-10小时。减少了肝素钠在水溶液中接触过氧化氢的浓度，降低了过氧化氢对肝素钠效价的破坏。
第二，本技术方案中，3，5，7，9步骤中，沉淀pH值采用酸碱交替法，3与7步骤中采用pH = 4. 0-5. 0，5与9步骤中采用pH = 10. 0-11. O。此方法可有效去除碱性杂质和酸性杂质。
第三，本技术方案中，3,5,7,9步骤中，乙醇沉淀读数控制在35-40 %，所用乙醇为 5-10°C乙醇(80-95% )，可使酸性杂质和碱性杂质悬浮在乙醇溶液中而有效去除。
具体实施方式
以下实例详细说明了本发明
1、粗品溶解将粗品肝素钠100亿单位加入到沉淀釜中，用600Kg纯化水充分溶解，得料液700L。
2、第一次氧化调节pH = 9. 5，调节温度15-20°C，加入30%过氧化氢3. 5L，搅拌条件下氧化脱色4小时。之后，加入30%过氧化氢2. 1L，搅拌条件下氧化脱色8小时。
3、第一次沉淀调节pH = 4. 5,按照30g/L比例向料液中加入氯化钠，用温度为 6°C乙醇(90% )沉淀，边搅拌边加入，直至乙醇浓度为35%，停止搅拌，静置12小时。
4、第二次氧化将 3中的沉淀物加纯化水至700L充分溶解，调节pH = 9. 5，调节温度至15-20°C，加入30%过氧化氢3. 5L，搅拌条件下氧化脱色4小时。之后，加入30%过氧化氢2. 1L，搅拌条件下氧化脱色8小时。
5、第二次沉淀调节pH = 10. 5，按照30g/L比例向料液中加入氯化钠，用温度为 7°C乙醇(90% )沉淀，边搅拌边加入，直至乙醇浓度为36%，停止搅拌，静置12小时。
6、第三次氧化将5中的沉淀物加纯化水至700L充分溶解，调节pH = 9. 5，调节温度至15-20°C，加入30%过氧化氢3. 5L，搅拌条件下氧化脱色4小时。之后，加入30%过氧化氢2. 1L，搅拌条件下氧化脱色8小时。
7、第三次沉淀调节pH = 4. 5，按照30g/L比例向料液中加入氯化钠，用温度为 7°C乙醇(90% )沉淀，边搅拌边加入，直至乙醇浓度为36%，停止搅拌，静置12小时。
8、第四次氧化将7中的沉淀物加纯化水至700L充分溶解，调节pH = 9. 5，调节温度至15-20°C，加入30%过氧化氢3. 5L，搅拌条件下氧化脱色4小时。之后，加入30%过氧化氢2. 1L，搅拌条件下氧化脱色8小时。
9、第四次沉淀调节pH = 10. 5,按照30g/L比例向料液中加入氯化钠,用温度为 7°C乙醇(90% )沉淀，边搅拌边加入，直至乙醇浓度为36%，停止搅拌，静置12小时。
10、将9中所得沉淀物用纯化水250Kg充分溶解，用温度为5°C乙醇(95% )沉淀， 边搅拌边加入，直至乙醇浓度为80%，停止搅拌，静置12小时。`用无水乙醇脱水后真空干燥即得闻收率闻效价肝素纳精品。
权利要求
1.一种高效精制粗品肝素钠的方法，其特征是 (1)、粗品溶解将粗品肝素钠按5-6Kg/亿单位比例用纯化水充分溶解； (2)、第一次氧化调节pH= 9. 0-10. 0，调节料液温度至15-200C，按照0. 4-0. 6% (v/v)比例加入浓度为30%过氧化氢，搅拌条件下氧化脱色4-6小时，之后，按照0. 2-0.4%(v/v)比例加入30%过氧化氢，搅拌条件下氧化脱色8-10小时； (3)、第一次沉淀调节pH= 4. 0-5. 0,按照20-30g/L比例向料液中加入氯化钠,搅拌条件下加入温度为5-10°C的乙醇(80-95% )，直至乙醇浓度为35-40%，停止搅拌，静置10-14小时； (4)、第二次氧化将(3)中的沉淀物用纯化水按照5-6Kg/亿单位比例充分溶解，调节pH = 9. 0-10. 0，调节料液温度至15-20°C，按照0. 4-0. 6% (v/v)比例加入浓度为30%过氧化氢，搅拌条件下氧化脱色4-6小时，之后，按照0. 2-0. 4% (v/v)比例加入30%过氧化氢，搅拌条件下氧化脱色8-10小时； (5)、第二次沉淀:调节pH= 10. 0-11. 0，按照20-30g/L比例向料液中加入氯化钠，搅拌条件下加入温度为5-10°C的乙醇(80-95% )，直至乙醇浓度为35-40%，停止搅拌，静置10-14小时； (6)、第三次氧化将(5)中的沉淀物用纯化水按照5-6Kg/亿单位比例充分溶解，调节pH = 9. 0-10. 0，调节料液温度至15-20°C，按照0. 4-0. 6% (v/v)比例加入浓度为30%过氧化氢，搅拌条件下氧化脱色4-6小时，之后，按照0. 2-0. 4% (v/v)比例加入30%过氧化氢，搅拌条件下氧化脱色8-10小时； (7)、第三次沉淀调节pH= 4. 0-5. 0，按照20-30g/L比例向料液中加入氯化钠，用温度为5-10°C乙醇(80-95%)沉淀，边搅拌边加入，直至乙醇浓度为35-40%，停止搅拌，静置10-14小时； (8)、第四次氧化将(7)中的沉淀物用纯化水按照5-6Kg/亿单位比例充分溶解，调节pH = 9. 0-10. 0，调节料液温度至15-20°C，按照0. 4-0. 6% (v/v)比例加入浓度为30%过氧化氢，搅拌条件下氧化脱色4-6小时，之后，按照0. 2-0. 4% (v/v)比例加入30%过氧化氢，搅拌条件下氧化脱色8-10小时； (9)、第四次沉淀调节pH= 10. 0-11. 0，按照20-30g/L比例向料液中加入氯化钠，用温度为5-10°C乙醇(80-95%)沉淀，边搅拌边加入，直至乙醇浓度为35-40%，停止搅拌，静置10-14小时； (10)、将(9)中所得沉淀物用纯化水按照2-3Kg比例充分溶解后过滤，用乙醇沉淀后脱水干燥即得高收率高效价肝素钠精品。
2.按照权利要求书I所述的方法，其特征为(2)，(4)，(6)，(8)步骤中过氧化氢加入方法采用0. 4-0.6% (v/v)与0. 2-0. 4% (v/v)梯度加入法，前者氧化4_6小时，后者氧化8-10小时。
3.按照权利要求书I所述的方法，其特征为(3)，(5)，(7)，(9)步骤中，沉淀pH值采用酸碱交替法，3)与7)步骤中采用pH = 4. 0-5. 0,5)与9)步骤中采用pH = 10. 0-11. O。
4.按照权利要求书I所述的方法，其特征为(3)，(5)，(7)，(9)步骤中，所用乙醇温度为 5-10°C，浓度为 80-95% o
5.按照权利要求书I所述的方法，其特征为(2)，(4)，(6)，(8)步骤中，料液氧化pH=9. 0-10. 0， 氧化温度为 15-20°C ο
全文摘要
本发明涉及一种提高肝素钠精品收率的方法。猪肠粘膜经盐解、酶解、树脂吸附等方法提取的肝素钠粗品中含有大量的蛋白质和核酸杂质，需经进一步的氧化沉淀操作进行精制。传统工艺采用一次或两次氧化沉淀法进行精制，很难避免效价不高收率低等缺点。本发明采用多次梯度氧化和pH交替沉淀方法，克服了传统方法的缺点，提高了肝素钠精品收率和单位效价，显著增加经济效益，具有很高的实用价值。
文档编号C08B37/10GK103044578SQ20121055143
公开日2013年4月17日 申请日期2012年12月7日 优先权日2012年12月7日
发明者刘乃山, 夏衬来, 迟培升, 陆玉梅 申请人:青岛九龙生物医药有限公司