一种党参多糖的提取方法与流程

文档序号:13218019阅读:2424来源:国知局
技术领域本发明涉及中药材有效成分的提取方法,具体是党参多糖的提取方法。

背景技术:
党参(RootofPiloseAsiabell)为桔梗科党参属植物,以干燥根入药,可补中益气,健脾益肺,用于脾肺虚弱,气短心悸,食少便溏,虚喘咳嗽,内热消咳。党参主要含多种糖类、酚类、甾醇、挥发油、黄芩素葡萄糖甙、皂甙及微量生物碱和含氮成分,具有增强免疫力、扩张血管、降压、改善微循环、增强造血功能等作用。党参多糖具有多个方面较好的生物活性,现代药理研究表明,党参多糖具有调节机体免疫力、抗衰老、抗缺氧、抗应激、抗氧化等作用,可广泛应用于药品、食品工业。目前,党参多糖提取技术主要有水提离心分离法、水提醇沉法等,但现有提取方法由于技术参数选择不合理,工艺步骤比较复杂,提取得到的党参多糖所含杂质较多,去蛋白效果差,且得到的党参多糖的产率和纯度都较低,不利于实际生产应用。

技术实现要素:
本发明的目的在于避免现有技术缺陷,提供一种工艺简单,去蛋白效果佳,提取得到的党参多糖所含杂质少,产率和纯度高的党参多糖的提取方法。本发明采用以下的技术方案来实现:一种党参多糖的提取方法,其特征在于包括以下步骤:(1)预处理:选取党参根进行洗涤、去除杂质、干燥处理后,粉碎,过40-100目筛,得到党参粉末;(2)脱脂脱色:将上述得到的党参粉末加入到氯仿/甲醇混合溶剂中,升温至回流,进行脱脂脱色处理,过滤、收集滤饼;(3)提取:将步骤(2)中得到的滤饼加入到醇溶剂中,升温至回流,回流反应2-6h,过滤,将得到的固体物再加入到水中,升温至50-70℃,搅拌,提取0.5-2h,过滤,收集滤液,剩余的残渣可再进行提取;(4)浓缩干燥:将步骤(3)中得到的滤液升温至60-80℃,进行减压浓缩,得浓缩液,将所得的浓缩液与乙醇溶液混合,进行醇沉处理,过滤,用有机溶剂进行洗涤,得党参粗多糖;(5)分离纯化:将党参粗多糖加入到正丁醇/三氯乙醇混合溶剂中进行脱蛋白处理后,用水溶剂后加入到层析柱中,再用0.05mol/L-0.15mol/L的氯化钠溶液进行洗脱,收集流出液,减压浓缩、醇沉、过滤、干燥,得到党参多糖。所述的党参多糖的提取方法,步骤(2)中氯仿/甲醇混合溶剂与党参粉末的重量比为5-15:1;氯仿/甲醇混合溶剂的氯仿与甲醇的体积比为3:1。所述的党参多糖的提取方法,步骤(3)中醇溶剂为75%-85%乙醇水溶液。所述的党参多糖的提取方法,步骤(3)中剩余的残渣可再进行提取,将剩余的残渣加入到水中,升温至50-70℃,搅拌,提取0.5-2h,过滤,收集滤液,剩余的残渣可再进行提取;重复提取2-3次,合并收集的滤液。所述的一种党参多糖的提取方法,步骤(4)中所述的醇沉处理的具体步骤为:在所得的浓缩液中加入90%-100%的乙醇溶液,乙醇溶液与浓缩液的体积比为3-8:1;搅拌10-30min,低温(-5-10℃)静置10-15h后,过滤,得到党参粗多糖。所述的一种党参多糖的提取方法,步骤(5)中所述的正丁醇/三滤乙酸溶剂与党参粗多糖的重量比为0.5-1.5:1;其中正丁醇/三氯乙酸混合溶剂中正丁醇与三氯乙酸的体积比为10-30:1。所述的一种党参多糖的提取方法,步骤(5)中的所述的层析柱为葡聚糖凝胶柱。所述的一种党参多糖的提取方法,步骤(5)中所述的洗脱速度为0.5mL/min-1.5mL/min。本发明的有益效果:本发明一种党参多糖的提取方法,去蛋白效果佳,脱脂脱色效果好,得到的党参多糖产率和纯度高;本发明所需的设备均为本领域普通的设备,工艺简单,成本低廉、具有较高的经济收益。具体实施方式以下结合具体实施例对本发明作具体的介绍。实施例1选取党参根先进行洗涤、剔除杂质后,在60℃的条件下烘干,然后采用粉碎机进行粉碎至50目,得到党参粉末,称取100g党参粉末加入500g氯仿/甲醇混合溶剂,升温至60℃的条件下,回流2h,进行脱脂脱色处理,回流结束后,过滤,除去滤液,收集滤饼,将收集的滤饼加入到80%的乙醇水溶液中,升温至80℃的条件下回流2h,回流结束后,过滤,除去滤液,将得到的固体物加入到100ml蒸馏水中,升温至60℃,搅拌提取1h,过滤,收集滤液,剩余的残渣可再进行提取;将收集的滤液升温至60-70℃的条件下,进行减压蒸馏浓缩,浓缩至约30ml浓缩液,在浓缩液中加入180ml95%的乙醇水溶液,搅拌,降温至0℃,再搅拌30min,然后低温(-5-10℃)静置12h后,静置结束后,采用离心机进行离心,转速为2000r/min,离心后依次用无水乙醇、丙酮进行洗涤,离心甩干后,放入真空干燥机中,控制温度在50-55℃,干燥5h,得到党参粗多糖。将上述的党参粗多糖加入正丁醇/三氯乙酸混合溶剂中,重量比为1:1,其中正丁醇/三氯乙酸混合溶剂中两者的体积比为20:1,然后升温至60℃条件下,回流2h,进行脱蛋白处理后,再通过透析法去除一些小分子杂质,然后将得到的党参粗多糖加入到蒸馏水中使完全溶解后,再加入到葡聚糖凝胶柱中,用0.1mol/L的氯化钠溶液进行洗脱,洗脱速度为1mL/min,收集流出液,然后将得到的流出液加入到另外的反应容器中,加热,升温至50-55℃,减压浓缩,浓缩至原流出液体积的1/5,得浓缩液,再往浓缩液中加入其体积5倍量的95%的乙醇水溶液,搅拌下,降温至0℃,继续搅拌30min,然后静置12h,静置结束后,采用离心机进行离心,转速为2000r/min,离心后再依次用无水乙醇、丙酮进行洗涤,离心甩干后,将得到的党参多糖放入真空干燥机中,控制温度在50-55℃,干燥8h后得到党参多糖成品。实施例2选取党参根先进行洗涤、剔除杂质后,在60℃的条件下烘干,然后采用粉碎机进行粉碎至70目,得到党参粉末,称取100g党参粉末加入1000g氯仿/甲醇混合溶剂,升温至60℃的条件下,回流2h,进行脱脂脱色处理,回流结束后,过滤,除去滤液,收集滤饼,将收集的滤饼加入到85%的乙醇水溶液中,升温至80℃的条件下回流2h,回流结束后,过滤,除去滤液,将得到的固体物加入到100ml蒸馏水中,升温至60℃,搅拌提取1h,过滤,收集滤液,剩余的残渣可再进行提取;将收集的滤液升温至60-70℃的条件下,进行减压蒸馏浓缩,浓缩至约30ml浓缩液,在浓缩液中加入200ml95%的乙醇水溶液,搅拌,降温至0℃,再搅拌30min,然后低温(-5-10℃)静置12h后,静置结束后,采用离心机进行离心,转速为2000r/min,离心后依次用无水乙醇、丙酮进行洗涤,离心甩干后,放入真空干燥机中,控制温度在50-55℃,干燥5h,得到党参粗多糖。将上述的党参粗多糖加入正丁醇/三氯乙酸混合溶剂中,重量比为1:1.2,其中正丁醇/三氯乙酸混合溶剂中两者的体积比为20:1,然后升温至60℃条件下,回流2h,进行脱蛋白处理后,再通过透析法去除一些小分子杂质,然后将得到的党参粗多糖加入到蒸馏水中使完全溶解后,再加入到葡聚糖凝胶柱中,用0.1mol/L的氯化钠溶液进行洗脱,洗脱速度为1ml/min,收集流出液,然后将得到的流出液加入到另外的反应容器中,加热,升温至50-55℃,减压浓缩,浓缩至原流出液体积的1/5,得浓缩液,再往浓缩液中加入其体积5倍量的95%的乙醇水溶液,搅拌下,降温至0℃,继续搅拌30min,然后静置12h,静置结束后,采用离心机进行离心,转速为2000r/min,离心后再依次用无水乙醇、丙酮进行洗涤,离心甩干后,将得到的党参多糖放入真空干燥机中,控制温度在50-55℃,干燥8h后得到党参多糖成品。本发明中所描述的具体实施例仅是对本发明作举例说明,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所做的任何修改、等同替换等,均落在本发明的保护范围内。
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