本发明涉及合成五肽的制造方法及其制造中间体。
背景技术：
已知κ阿片受体激动剂作为各种疼痛的治疗药物是有用的。其中，对末梢κ阿片受体具有高选择性的κ阿片受体激动剂作为不产生中枢性副作用的药物受到期待。作为那样的末梢选择性κ阿片受体激动剂，报告了合成五肽(专利文献1和2)。
在合成五肽中，下述式(A)所示的化合物作为疼痛治疗药物也是有用的。作为该化合物的制造方法，在上述专利文献1和2中记载了固相肽合成法。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本特表2010－510966号公报
专利文献2：日本特开2013－241447号公报
技术实现要素：
发明所要解决的课题
然而，在利用固相肽合成法的制造中，合成五肽保护体后，进行从树脂脱除和全脱保护后，利用分取HPLC进行精制。在该精制中需要大型的分取HPLC装置，精制也需要较长时间。另一方面，也可以利用液相法进行肽合成，但是，在对中间工序的五肽保护体进行脱保护后，对化合物(A)进行精制，得到的化合物(A)的纯度小于80％，判明不能获得高纯度的化合物(A)。
因此，本发明的课题在于提供一种工业上有利地制造高纯度的化合物(A)的方法。
用于解决课题的方法
因此，本发明的发明人对制造高纯度的化合物(A)的方法进行了研究时，完全意外地发现，对从化合物(A)的N-和O-保护体中只脱除了N-保护基的下述化合物(1)进行分离后，该化合物(1)能够利用料浆法和再结晶法进行高纯度地精制，如果对其进行水解，则能够在工业上有利地制造90％以上的高纯度的化合物(A)，从而完成了本发明。
即，本发明提供以下的〔1〕～〔4〕。
〔1〕一种下述式(1)所示的化合物或其盐。
(式中，R1表示烷基或芳烷基。)
〔2〕如〔1〕所述的化合物或其盐，其中，R1为烷基。
〔3〕如〔1〕或〔2〕所述的化合物或其盐，其为酸加合盐。
〔4〕一种下述式(A)所示的化合物或其盐的制造方法，其特征在于：对〔1〕～〔3〕中任一项所述的化合物或其盐进行水解。
发明的效果
化合物(1)能够利用简便的操作进行精制，如果对该化合物(1)进行水解，则能够在工业上有利地制造高纯度的化合物(A)。
具体实施方式
本发明的化合物(1)或其盐作为化合物(A)的合成中间体是有用的。
式(1)中，R1表示烷基或芳烷基。作为烷基，可以列举碳原子数1～12的直链或支链的烷基。其中，优选碳原子数1～8的直链或支链的烷基，更优选碳原子数1～4的直链或支链的烷基。作为该烷基的例子，可以列举甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基等，但特别优选甲基。
作为芳烷基，优选总碳原子数7～18的芳烷基，更优选C6-14芳基－C1-4烷基，进一步优选苯基－C1-4烷基，特别优选苄基。
上述的R1中，优选烷基，更优选C1-6烷基，进一步优选C1-4烷基，特别优选甲基。
另外，作为化合物(1)的盐，可以列举酸加合盐，具体而言，可以列举盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐等无机酸盐；乙酸盐、三氟乙酸盐等有机酸盐，作为无机酸盐，优选盐酸盐，作为有机酸盐，优选三氟乙酸盐。其中，更优选盐酸盐。
化合物(1)及其盐中，从容易以结晶的形态分离且容易精制的方面考虑，优选R1为C1-6烷基的化合物(1)的盐，更优选R1为C1-6烷基的化合物(1)的酸加合盐，进一步优选R1为C1-4烷基的化合物(1)的酸加合盐，特别优选R1为甲基的化合物(1)的酸加合盐。
化合物(1)或其盐和化合物(A)能够通过例如像下述反应式所示、使4-氨基哌啶-4-羧酸、D-赖氨酸(D-Lys)、D-亮氨酸(D-Leu)、D-苯丙氨酸(D-Phe)和D-苯丙氨酸(D-Phe)依次缩合的液相肽合成法制造。
(式中，P1和P2分别表示N-保护基，R1的含义与上述相同。)
上述反应式中，P1和P2所示的N-保护基分别优选能够利用不同的脱除方法脱除的保护基。作为这些保护基，可以列举：(1)能够用酸脱除的保护基(例如，叔丁氧基羰基(Boc)、对甲氧基苄氧基羰基(Moz)、甲酰基(CHO)、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基羰基(Teoc)、1-金刚烷氧基羰基(Adoc)、2-(对联苯基)异丙氧基羰基(Bpoc)、三苯甲基(Tr)、甲氧基甲基(MOM))；(2)能够利用还原脱除的保护基(例如，苄氧基羰基(Cbz)、烯丙基(Allyl)、N-苄氧基甲基(BOM))；(3)能够用仲胺脱除的保护基(例如，9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)、2-(4-硝基苯基)乙氧基羰基(Npeoc))；(4)能够用锌末－乙酸等脱除的保护基(例如，2,2,2-三氯乙氧基羰基(Troc)、N-二硫代琥珀酰基(Dts)、苯并噻唑-2-磺酰基(Betsyl)、1,1-二甲基-2,2,2-三氯乙氧基羰基(TcBoc)、N-(二苯基-4-吡啶基)甲基(Dppm))；(5)在钯催化剂存在下能够用胺等脱除的保护基(例如，烯丙氧基羰基(Alloc))等。作为P1和P2，可以选择使用这些保护基中的脱除条件不同的基团。例如，作为P1，优选Boc，作为P2，优选Cbz。
化合物(2)与保护D-Leu的缩合、化合物(4)与保护D-Leu的缩合、化合物(6)与保护D-Phe的缩合和化合物(8)与保护D-Phe的缩合反应例如可以在分子筛、1-羟基苯并三唑(HOBt)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)、N,N-二环己基碳二亚胺(DCC)等缩合剂的存在下进行。具体而言，可以通过在缩合剂的存在下，在卤素系、酯系或者醚系等的溶剂中以0～40℃反应1～48小时而进行。
另外，脱保护反应可以选择与上述的保护基的种类相对应的方法而进行。为了能够使化合物(1)成为盐酸盐等酸加合盐，优选选择能够用酸脱除的保护基(例如Boc)作为P1，优选选择能够利用还原脱除的保护基(例如(Cbz))作为P2。使用Boc作为P1时，如果利用例如使用酸的水解对P1进行脱保护，则可以获得化合物(1)的酸加合盐。利用还原的脱保护例如可以通过在金属催化剂的存在下，在酯系或者醚系等的溶剂中以0～40℃反应1～48小时而进行。利用酸的脱保护例如可以通过在无机酸或三氟乙酸等的存在下，在酯系或者醚系等的溶剂中以0～40℃反应1～48小时而进行。
化合物(1)的盐能够利用再结晶等容易地精制。另外，化合物(1)的盐即使不精制也是充分高的纯度。因此，如果对化合物(1)的盐进行水解，则能够制造高纯度的化合物(A)。其中，水解反应例如优选在碱的存在下进行。具体而言，可以通过在氢氧化钠等的存在下，在水或醇系等的溶剂中以0～40℃反应1～48小时而进行。
根据利用本发明方法(液相法)的化合物(A)的制造方法，与固相合成法相比，不容易生成非对映异构体和缺陷肽这样的难以去除的杂质，另外，即使生成，也能够在中间工序中除去。另外，与固相合成法相比，由于能够对中间体化合物进行分离，因此能够实施料浆法和再结晶法等操作比较容易且不需要高价的设备投资的过滤精制方法，可以容易得到例如以HPLC测定为纯度99％的高纯度的目标物。
在固相合成法中，使用的溶剂限定于二氯甲烷和二甲基甲酰胺等，与此相比，在液相合成法中，可以使用适于工业化的安全且廉价的溶剂。与固相合成法相比，容易大量合成。在固相合成法中最终化合物的精制多数需要“分取HPLC法”(通常需要高额的设备、大量的有机溶剂)，但在液相合成法中能够避免这些问题。
实施例
接着，列举实施例对本发明进行更详细地说明。
实施例1
(1)Cbz-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(3)的合成
向2L的4口烧瓶中装入α-Boc-Pic-OMe·HCl[α-Boc-4-氨基哌啶-4-羧酸甲酯盐酸盐](2)43.7g(148mmol)，悬浮于EtOAc 656mL(15v/w)。向该悬浮液中加入1-羟基苯并三唑(HOBt)27.2g(178mmol)、Cbz-D-Lys(Boc)-OH 59.2g(156mmol)，一边利用冰浴冷却一边添加1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺·HCl(EDC·HCl)34.1g(178mmol)。20分钟后，升温至室温，搅拌12小时。反应结束后，加入1N HCl 218mL(5.0v/w)，将有机层分液。向得到的有机层中加入NaHCO3aq.218mL(5.0v/w)、Et3N 33.0g(326mmol)，搅拌30分钟，进行分液。依次用1N HCl 218mL(5.0v/w)、NaHCO3aq.218mL(5.0v/w)、NaClaq.218mL(5.0v/w)洗涤有机层，加入Na2SO4 8.74g(0.2w/w)进行干燥。进行减压过滤，利用蒸发器对得到的滤液进行减压浓缩后，利用真空泵进行泵取，以白色固体状态得到Cbz-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(3)88.9g(收率96.5％，HPLC纯度96.5％)。
(2)D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(4)的合成
向2L的茄形烧瓶中装入Cbz-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(3)88.3g(142mmol)，加入441mL(5.0v/w)EtOAc使之溶解。向反应液中加入17.7g(0.2w/w)5％Pd/C，在减压气氛下进行3次氮置换后，进行3次氢置换。将反应溶液在室温下激烈地搅拌18小时，反应结束后进行减压过滤，除去Pd/C。向得到的滤液中加入NaHCO3aq.441mL(5.0v/w)进行分液，向水层中加入EtOAc 200mL(2.3v/w)，提取有机层。向合并的有机层中加入NaHCO3aq.441mL(5.0v/w)进行分液，向水层中加入EtOAc 200mL(2.3v/w)，提取有机层。向合并的有机层中加入NaClaq.441mL(5.0v/w)进行分液，向水层中加入EtOAc 200mL(2.3v/w)，进行提取。向合并的有机层中加入Na2SO4 17.7g(0.2w/w)进行干燥，进行减压过滤，利用蒸发器对得到的滤液进行减压浓缩，利用真空泵进行泵取，得到62.7g D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(4)(收率90.5％，HPLC纯度93.6％)。
(3)Cbz-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(5)的合成
向2L的4口烧瓶中装入D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(4)57.7g(120mmol)，悬浮于EtOAc 576mL(10v/w)中。向该悬浮液中加入HOBt 19.3g(126mmol)、Cbz-D-Leu-OH 33.4g(126mmol)，一边利用冰浴进行冷却一边添加EDC·HCl 24.2g(126mmol)。20分钟后，升温至室温，搅拌5小时后，再添加1.15g(6.00mmol)EDC·HCl，搅拌16小时。反应结束后，加入1N HCl 576mL(10v/w)进行分液。向得到的有机层中加入NaHCO3aq.576mL(10v/w)、Et3N 24.3g(240mmol)，搅拌30分钟，进行分液。依次用1N HCl 576mL(10v/w)、NaHCO3aq.576mL(10v/w)、NaClaq.576mL(10v/w)洗涤有机层，加入Na2SO4 11.5g(0.2w/w)进行干燥。进行减压过滤，利用蒸发器对得到的滤液进行减压浓缩后，利用真空泵进行泵取，以白色固体状态得到Cbz-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(5)85.8g(收率98.7％，HPLC纯度96.9％)。
(4)D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(6)的合成
向1L的茄形烧瓶中装入91.9g(125mmol)Cbz-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(5)，加入459mL(5.0v/w)EtOAc使之溶解。向反应液中加入18.4g(0.2w/w)5％Pd/C，在减压气氛下进行3次氮置换后，进行3次氢置换。将反应溶液在室温下进行8小时激烈地搅拌，反应结束后，进行减压过滤，除去Pd/C。向得到的滤液中加入NaHCO3aq.200mL(2.2v/w)进行分液，向有机层中依次加入NaHCO3aq.200mL(2.2v/w)、NaClaq.200mL(2.2v/w)进行洗涤。向得到的有机层中加入Na2SO4 18.4g(0.2w/w)进行干燥，进行减压过滤，利用蒸发器对得到的滤液进行减压浓缩，利用真空泵进行泵取。向得到的非晶态的固体中加入EtOAc 200mL(2.2v/w)使之溶解，加入庚烷50mL(1.8v/w)进行晶析。进行减压过滤，将析出结晶过滤，利用EtOAc 120mL(1.3v/w)、庚烷50mL(0.3v/w)的混合溶剂洗涤结晶。向得到的结晶46.1g中加入EtOAc 480mL(5.2v/w)使之溶解，加入环己烷660mL(7.2v/w)进行晶析。进行减压过滤，将析出结晶过滤，利用环己烷120mL(1.3v/w)、EtOAc 20mL(0.2v/w)的混合溶剂进行洗涤，30℃下进行减压干燥，以白色固体状态得到36.6g D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(6)(收率48.7％，HPLC纯度99.9％)。
(5)Cbz-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(7)的合成
向1L的4口烧瓶中装入35.8g(59.6mmol)D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(6)，悬浮于EtOAc 358mL(10v/w)。向该悬浮液中加入HOBt 9.59g(62.6mmol)、Cbz-D-Phe-OH 18.7g(62.6mmol)，一边利用冰浴进行冷却一边添加EDC·HCl 12.0g(62.6mmol)。20分钟后，升温至室温，搅拌16小时后，再添加3.09g(16.1mmol)EDC·HCl。反应结束后，加入1N HCl 358mL(10v/w)，将有机层分液。向得到的有机层中加入NaHCO3aq.358mL(10v/w)、Et3N 12.1g(119mmol)，搅拌30分钟，进行分液。利用1N HCl 358mL(10v/w)、NaHCO3aq.358mL(10v/w)、NaClaq.358mL(10v/w)依次洗涤有机层，加入Na2SO47.16g(0.2w/w)进行干燥。进行减压过滤，利用蒸发器对得到的滤液进行减压浓缩后，利用真空泵进行泵取，以白色固体状态得到52.5g Cbz-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(7)(收率产量(quant)，HPLC纯度97.6％)。
(6)D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(8)的合成
向2L的茄形烧瓶中装入46.9g(53.3mmol)Cbz-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(7)，加入840mL(18v/w)EtOAc、93.8mL(2.0v/w)H2O使之溶解。向反应液中加入9.38g(0.2w/w)5％Pd/C，在减压气氛下进行3次氮置换后，进行3次氢置换。将反应溶液在室温下进行10小时激烈地搅拌，反应结束后，进行减压过滤，除去Pd/C。向得到的滤液中加入NaHCO3aq.235mL(5.0v/w)进行分液，向有机层中依次加入NaHCO3aq.235mL(5.0v/w)、NaClaq.235mL(5.0v/w)进行洗涤。向得到的有机层中加入Na2SO4 9.38g(0.2w/w)进行干燥，进行减压过滤，利用蒸发器对得到的滤液进行减压浓缩，利用真空泵进行泵取，得到39.7g D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(7)(收率产量(quant)，HPLC纯度97.3％)。
(7)Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(9)的合成
向1L的4口烧瓶中装入35.1g D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(8)，悬浮于EtOAc 351mL(10v/w)。向该悬浮液中加入HOBt 7.92g(51.7mmol)、Boc-D-Phe-OH 13.1g(49.4mmol)，一边利用冰浴进行冷却一边添加EDC·HCl 9.91g(51.7mmol)。20分钟后，升温至室温，搅拌8小时后，再添加2.25g(11.7mmol)EDC·HCl。反应结束后，加入1N HCl 351mL(10v/w)，对有机层分液。向得到的有机层中加入NaHCO3aq.351mL(10v/w)、Et3N 9.51g(94.0mmol)，搅拌30分钟，进行分液。依次用1N HCl 351mL(10v/w)、NaHCO3aq.351mL(10v/w)、NaClaq.351mL(10v/w)洗涤有机层，加入Na2SO47.02g(0.2w/w)进行干燥。进行减压过滤，利用蒸发器对得到的滤液进行减压浓缩后，利用真空泵进行泵取，以白色固体状态得到46.7g Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(9)(收率产量(quant)，HPLC纯度98.6％)。
(8)D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe盐酸盐(1)的合成
向20mL的茄形烧瓶中装入2.00g Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(9)，加入IPA 3.3mL(1.65v/w)、PhMe 10mL(5v/w)使之悬浮。加入6N HCl/IPA 6.7mL(3.35v/w)，室温下搅拌19小时。利用减压过滤对析出的固体进行过滤，进行减压干燥，得到白色固体的D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe盐酸盐(1)1.59g(收率99.0％，HPLC纯度98.2％)。
(9)D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe盐酸盐(1)的精制
向20mL的茄形烧瓶中装入D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe盐酸盐粗晶体(1)200mg，加入EtOH﹕MeCN＝1﹕5的混合溶剂4.0mL(20v/w)，加热至40℃，搅拌1小时后，再在室温下搅拌2小时形成浆料。进行减压过滤而分离，对得到的固体进行减压干燥，得到白色固体((1)精制晶体)161mg(收率80％，HPLC纯度99.2％)。
(10)D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic(A)的合成(使用精制的(1))
向10mL的茄形烧瓶中装入D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe盐酸盐(1)精制晶体38.5mg(0.0488mmol)，加入H2O 0.2mL(5.2v/w)使之溶解。室温下滴加1N NaOH 197μL(0.197mmol)，搅拌1.5h。反应结束后，加入1N HCl 48.8μL(0.0488mmol)，利用蒸发器进行减压浓缩，得到D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic(A)(收率产量(quant)，HPLC纯度99.7％)。
D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe(1)的物性
1H NMR(400MHz,1M DCl)δppm:0.85-1.02(m,6H),1.34-1.63(m,5H),1.65-2.12(m,5H),2.23-2.45(m,2H),2.96-3.12(m,4H),3.19(ddt,J＝5.0&5.0&10.0Hz),3.33-3.62(m,1H),3.68-3.82(m,1H),3.82-3.95(m,4H),3.95-4.18(m,1H),4.25-4.37(m,2H),4.61-4.77(m,2H),7.21-7.44(m,10H)
13C NMR(400MHz,1M DCl)δppm:21.8,22.5,24.8,27.0,30.5,30.8,31.0,31.2,31.7,37.2,37.8,38.4,39.0,39.8,40.4,40.6,41.8,42.3,49.8,50.2,52.2,52.6,54.6,55.2,57.7,57.9,127.6,128.4,129.2,129.6,129.7,129.8
d.p 209.5℃
实施例2
(使用三氟乙酸(TFA))
(1)D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe TFA盐(1)的合成
向50mL的茄形烧瓶中依次加入TFA 18mL(18v/w)、1-十二硫醇1.6mL(1.6v/w)、三异丙基硅烷0.2mL(0.2v/w)、H2O 0.2mL(0.2v/w)并搅拌。将Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(9)1.00g(1.01mmol)利用刮勺向其溶液中逐次添加少量。反应结束后，利用蒸发器进行减压浓缩，将得到的残渣滴加到IPE 20mL(20v/w)中。将析出的固体进行过滤，对得到的固体进行减压干燥，以白色固体状态得到D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe·TFA盐(1)(收率93.0％，HPLC纯度95.2％)。
(2)D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic(A)的合成
向10mL的茄形烧瓶中装入D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe TFA盐(1)83mg(0.0843mmol)，加入H2O 431μL(5.2v/w)使之溶解。室温下滴加1N NaOH 345μL(0.345mmol)，搅拌12h。反应结束后，加入1N HCl 84.3μL(0.0843mmol)，利用蒸发器进行减压浓缩，得到D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic(A)(收率产量(quant)，HPLC纯度95.4％)。
实施例3
(使用HCl/EtOAc)
(1)向30mL的茄形烧瓶中装入Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(9)1.00g(1.01mmol)，加入EtOAc 7.0mL(7.0v/w)使之溶解。加入4N HCl/EtOAc 5.0mL(5.0v/w)，室温下搅拌24h后，对析出的固体进行减压过滤而分离，用EtOAc 2mL(2.0v/w)进行洗涤。对得到的固体进行减压干燥，以白色固体状态得到D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe盐酸盐(1)781mg(收率96.7％，HPLC纯度95.4％)。
(2)D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic(A)的合成
向10mL的茄形烧瓶中装入D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe盐酸盐(1)90mg(0.112mmol)，加入H2O 0.47mL(5.2v/w)使之溶解。室温下滴加1N NaOH 459μL(0.459mmol)，搅拌12h。反应结束后，加入1N HCl 0.112μL(0.112mmol)，利用蒸发器进行减压浓缩，得到D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic(A)(收率产量(quant)，HPLC纯度93.1％)。
实施例4
通过化合物(1)的水解而合成化合物(A)(化合物(1)没有精制)
向10mL的茄形烧瓶中装入D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe(1)盐酸盐(前工序没有精制)114.5mg(0.142mmol)，加入H2O 595μL(5.2v/w)使之溶解。室温下滴加1N NaOH 586μL(0.586mmol)，搅拌14h。反应结束后，加入1N HCl 0.15μL(0.150mmol)，利用蒸发器进行减压浓缩，得到D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic(A)(收率产量(quant)，HPLC纯度95.2％)。
比较例1
不经过化合物(1)的路径(使用全保护体Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(a))
(1)Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OH的合成
向30mL的茄形烧瓶中装入Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(9)1.00g(1.00mmol)，加入MeOH 5.0mL(5.0v/w)使之溶解。室温下加入1N NaOH 1.1mL(1.10mmol)，搅拌4天后，再加入MeOH 5.0mL(5.0v/w)、1N NaOH 2.0mL(2.0mmol)，以35℃搅拌3h。反应结束后加入1N HCl 6.1mL，进行减压浓缩，蒸馏除去溶剂后，加入EtOAc 5.0mL(5.0mL)，将有机层分液。加入NaClaq.5.0mL(5.0v/w)洗涤有机层，对有机层进行减压浓缩，以白色固体状态得到Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OH 975.1mg(收率99.3％，HPLC纯度80.8％)
(2)D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic(A)的合成
向20mL的茄形烧瓶中装入Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OH(10)959mg(0.978mmol)，加入EtOAc 4.9mL(5.0v/w)使之溶解。室温下滴加4N HCl/EtOAc 4.9mL(5.0mL)，室温下搅拌4h。反应结束后，进行减压过滤，以白色固体状态得到D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic(A)(收率96.4％，HPLC纯度79.2％)。
不经过本发明的化合物(1)时，得到的化合物(A)的纯度小于80％。
实施例5
(D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe盐酸盐(1)的合成)
在上述实施例1的(8)中，将反应溶剂IPA(1.65v/w)代替为表1的溶剂和量，同样进行反应。将结果表示在表1中。
[表1]
实施例6
(D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe盐酸盐(1)的精制)
在上述实施例1的(9)中，将精制溶剂EtOH/MeCN(16.7﹕83.5、20v/w)代替为表2的溶剂和量，同样进行反应。将结果表示在表2中。
[表2]