本发明涉及4-甲基-1H-二芳基吡唑衍生物及其立体异构体、溶剂合物或可药用盐，其制备方法，含它们的药用组合物，以及所述化合物作为脑内大麻素I型(CB1)受体抑制剂用于制备预防和/或治疗与CBl受体有关疾病或症状如肥胖、改善记忆、戒烟等方面的药物的用途。
背景技术：
：大麻(Marijuana，植物学名Cannabis)公元前已使用，是西方社会使用最多的滥用药，也是人类历史上使用时间最长的滥用药。大麻能够改变感知并使精神激动、自觉欣快；或沉湎抑郁、惊慌失措，这些作用主要由大麻中所含四氢大麻酚所引起的，1964年首次纯化出大麻的主要活性成分-四氢大麻酚(delta9tetrahydrocannabinol，△9-THC)，并阐明了其化学结构(NakamuraP.E，etal.ThepharmacologyofSR141716A:AReview[J].CNSDrugReviews,1999,5(1):43-58)。四氢大麻酚是一种芳香类萜，其还具有止痛、镇静、抗痉挛、抗呕吐、抗青光眼以及抗高血压等多种药理作用。大麻素(cannabinoid,CB)受体是指对大麻类物质如△9-THC有应答的受体，属G蛋白偶联受体。大麻素受体主要有CB1(MechoulamR,etal.Identificationofanendogenous2-monoglyceride,presentincaninegut,thatbindstocannabinoidreceptors[J].BiochemPharmacol,1995,50(1):83-90.)和CB2(MunroS,etal.Molecularcharacterizationofaperipheralreceptorforcannabinoids[J].Nature,1993,365(6441):61-65.)两种亚型，其中CB1受体主要表达于中枢神经系统，又名中枢性大麻素受体，但也表达于肺、肝脏以及肾脏等外周组织中。CB2受体主要存在于外周神经元，又名外周型大麻素受体，在中枢神经系统中仅有少量表 达，功能之一都是阻止神经递质的释放。它们的主要区别在于其氨基酸序列、信号转导机制、器官分布及对某些激动剂和抑制剂敏感度不同。CB1受体主要位于脑、脊髓与外周神经系统中，脑内CB1受体主要分布于基底神经节(黑质、苍白球、外侧纹状体)、海马CA锥体细胞层，小脑和大脑皮层。CB1受体的这种分布可能与大麻素对记忆、认知、运动控制的调节有关。CB1受体被认为是在大脑中表达最广泛的G蛋白偶联受体，由473个氨基酸，7个跨膜结构域构成。CB1受体N端胞外区域包含116个氨基酸残基，这一结构对于CB1受体的生物学特性和血浆中薄膜的表达具有决定性作用，CB1的N端对于调节配体的特异性和细胞表面受体对配体药物的亲和力具有重要作用。研究表明，大麻素受体I型的内源性配体对食物摄取和能量消耗有双重调控作用，从而达到控制体重的目的(A.C.Howlett,etal.Pharmacol.Rev.,2002,54,161-202)。内源性大麻素系统的研究推动了CB1受体拮抗剂研究的发展。第一个大麻素受体拮抗剂利莫那班为二芳基吡唑类，利莫那班(Rimonabant)是法国Sanofi-Aventis公司开发的选择性CB1受体拮抗剂，能够治疗肥胖并可作为戒烟药物，2006年7月在英国批准上市，但是利莫那班具有中枢方面的副作用，可增加精神方面的严重不良反应，即抑郁和焦虑(ChristensenR,etal.Efficacyandsafetyoftheweight-lossdrugrimonabant：ameta-analysisofrandomizedtrials[J].Lancet，2007，370(9600)：1706-1713.)。因此，寻找结构新颖的外周选择性的CB1受体拮抗剂是十分必要的。技术实现要素：本发明的目的在于寻找抑制CB1受体的小分子拮抗剂，特别是寻找不易透过血脑屏障，主要作用于外周CB1受体的二芳基吡唑类小分子拮抗剂。本发明人经过研究发现，具有下面通式Ⅰ的化合物具有抑制CB1受体的作用，因此可以用于治疗与CB1受体有关的疾病或症状，如用 于治疗肥胖、戒烟、改善记忆和认知障碍、治疗精神疾病和肿瘤化疗等各种疾病或症状。本发明第一方面涉及式Ⅰ所示的化合物，或其立体异构体、溶剂合物或药学上可接受的盐，其中，R选自取代或未取代的以下基团，C1-C15烷基(例如C1-C8的直链或支链烷基、C3-C10环烷基)、芳香基、C1-C8烷氧基、苄氧基、芳基氧基、含有N的杂环基、杂环基C1-6烷基，其中所述取代基选自C1-C8烷基、芳基C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、卤素、氰基、硫氢基、甲酰基、羟基、磺酸酯、硝基、亚硝基；M选自O，-NR1；其中R1选自取代或未取代的以下基团，C1-C8的直链或支链烷基、C3-C10环烷基、芳香基、或含有N的杂环基如喹啉、吡啶、哌啶、哌嗪、吗啉、咪唑、吡唑、噻唑或其他杂环基，其中所述取代基选自C1-C8烷基、芳基C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、卤素、氰基、硫氢基、甲酰基、羟基、磺酸酯、硝基、亚硝基。在本发明的实施方案中，其中R选自取代或未取代的以下基团，C1-C8的直链或支链烷基、C3-C10环烷基、芳香基、C1-C8烷氧基、苄氧基、含有N的杂环基、杂环基C1-6烷基，其中所述取代基选自C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、卤素；M选自O，-NR1；其中R1选自取代或未取代的C1-C8的直链或支链烷基。在本发明的实施方案中，其选自以下化合物:1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(吡啶-3-基)脲(化合物1)；1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(吡啶-3-基甲基)脲(化合物2)；1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(6-甲基吡啶-3-基)脲(化合物3)；1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)脲(化合物4)；1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(吡啶-2-基甲基)脲(化合物5)；1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(吡啶基-2-基)脲(化合物6)；1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(哌啶-1-基)脲(化合物7)；1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(吗啉基)脲(化合物8)；1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(4-甲基哌嗪-1-基)脲(化合物9)；1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(2-溴吡啶-5-基)脲(化合物10)；1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(5-甲基吡啶-2-基)脲(化合物11)；1-(4-溴苯基)-3-(5-(4-氯苯基-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)脲(化合物12)；1-苯甲基-3-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)脲(化合物13)；1-苯基-3-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)脲(化合物14)；1-苄氧基-3-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)脲 (化合物15)；1-甲氧基-3-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)脲(化合物16)；1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-异丙基脲(化合物17)；1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-环丙基脲(化合物18)；1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(噻唑-2-基)脲(化合物19)；1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(4-碘-2-甲基苯基)脲(化合物20)；和1-苯甲基-3-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-2-甲基胍(化合物21)。本发明第二方面涉及药物组合物，其包含本发明第一方面任一项所述的化合物、或其立体异构体、溶剂合物或药学上可接受的盐，以及药用载体或赋形剂。本发明第三方面涉及本发明第一方面任一项所述的化合物、或其立体异构体、溶剂合物或药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗CB1受体相关疾病或症状(例如肥胖、记忆和认知障碍、精神疾病、肿瘤化疗不良反应、烟瘾)的药物中的用途。本发明还涉及本发明第一方面任一项所述的化合物、或其立体异构体、溶剂合物或药学上可接受的盐用于制备预防和/或治疗肥胖、改善记忆、戒烟的药物中的用途。本发明还涉及本发明第一方面任一项所述的化合物、或其立体异构体、溶剂合物或药学上可接受的盐在制备作为CB1受体拮抗剂或大麻素受体拮抗剂的药物中的用途。本发明还涉及预防和/或治疗CB1受体相关疾病(例如肥胖、记忆和认知障碍、精神疾病、肿瘤化疗不良反应、烟瘾)的方法，所述方法包括给有需要的受试者有效量的本发明第一方面任一项所述的化合物、 或其立体异构体、溶剂合物或药学上可接受的盐的步骤。本发明还涉及预防和/或治疗肥胖、改善记忆、戒烟的方法，所述方法包括给有需要的受试者有效量的本发明第一方面任一项所述的化合物、或其立体异构体、溶剂合物或药学上可接受的盐的步骤。在本发明中，所用术语“C1-C15”烷基或“C1-C8烷基”是指含1-15个或1-8个(例如1-6个、1-3个)碳原子的直链、支链或环状烷基，包括但并不局限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、戊基、新戊基、己基、庚基、辛基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基等。在本发明中，所用术语"C3-C10环烷基"是指含有3-10个(例如3-7个)碳原子的环烷基，包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基等。在本发明中，所用术语“卤素”是指氟、氯、溴、碘。在本发明中，所用术语“芳香基”或“芳基”是指苯基或萘基。在本发明中，所用术语“C1-C8烷氧基”是指C1-C8烷基-O-，其中的C1-C8烷基如上所述。在本发明中，所用术语“芳基氧基”是指芳基-O-，其中的芳基如上所述。在本发明中，所用术语“含有N的杂环基”或“杂环基”是指含有N原子的具有5-10个成员的杂环基团，例如为单环杂环基或多环杂环基，其包括但不限于喹啉、吡啶、哌啶、哌嗪、吗啉、咪唑、吡唑、噻唑、吡咯、四氢吡咯、噁唑基、异噁唑、吲哚、哒嗪、嘧啶、吡嗪、异喹啉、嘌呤或其他杂环基。在本发明中，所用术语“苄氧基”是指苄基-O-。在本发明中，所用术语“杂环基C1-6烷基”是指杂环基-C1-6烷基，其中的杂环基和C1-6烷基的定义如上所述。在本发明中，所述取代基的个数为1个或多个，例如为1个、2个或3个。根据本发明，本发明涉及如通式Ⅰ所示化合物或其立体异构体的合适的可药用盐或水合物，其中可药用的盐包括但是并不局限于通式Ⅰ化合物与无机酸如盐酸、硫酸、磷酸、亚磷酸、氢溴酸和硝酸所成的盐以及与各种有机酸，如马来酸、苹果酸、延胡索酸、琥珀酸、酒石酸、柠檬酸、乙酸、乳酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、棕榈酸等所成的盐.本发明中的一些化合物可能与水或各种有机溶剂结晶或重结晶，在这种情况下，可能形成各种溶剂化物.本发明包括那些化学计量的溶剂化物，包括水合物，也包括在用低压升华干燥法制备时形成的包含可变量水的化合物。根据本发明，本发明式Ⅰ化合物的立体异构体指本发明中部分化合物可能以光学异构体或互交异构体的形式存在，本发明包括其所有存在形式，特别是纯异构体的形式.不同的异构体形式可以以各种常规的手段与其它形式的异构体分离或拆分开，或者某种异构体可以以各种常规的合成方法或立体专一或不对称合成的方法得到.既然式I化合物是以药用为目的的，可以理解它们最好以纯的形式提供，例如至少60％的纯度，更合适的75％，更好的85％，最好至少98％的纯度(％是指重量百分比)。不纯化合物的制备方法可用来用于药用组合物中更纯的形式.这些不够纯的产物中至少含有1％，更适合的5％，更好的至少10％的如通式Ⅰ所示的化合物或其可药用的衍生物。本发明另一方面涉及制备式Ⅰ化合物的方法。式Ⅰ化合物可以从已知的或可购得的化合物为原料，经过人工合成的方法制备。如果原料不能购得，则这里提供它们的制备方法，或它们可以通过文献报道的方法制备。本发明的式I化合物合成方案如下所示：其中R、R1、M的定义如本发明第一方面任一项所述。关于制备式Ⅰ化合物更详尽的资料见具体实施方式。本发明还涉及药物组合物，其包括至少一种式Ⅰ化合物和至少一种药用载体或赋形剂。通式Ⅰ的化合物或其可药用的盐可以单独使用，或与可药用的载体或赋形剂一起以药物组合物的形式使用，当以药物组合物的形式使用时，通常将有效剂量的本发明通式Ⅰ化合物或其可药用盐或水合物以及一种或多种可药用载体或稀释剂结合制成适当的施用形 式或剂量形式，这一程序包括通过合适的方式将组分混合、粒化、压缩或溶解。本发明药用组合物可以以下方面的任意方式施与:口服、喷雾吸入、直肠给药、鼻腔给药、阴道给药、局部给药、非肠道给药如皮下、静脉、肌内、腹膜内、鞘内、心室内、胸骨内或颅内注射或输入，或借助一种外植的储器用药，其中优选口服、肌注、腹膜内或静脉内用药方式。本发明的药物组合物中含有的药用载体包括但不局限于:离子交换剂，氧化铝，硬脂酸铝，卵磷脂，血清蛋白如人血清蛋白，缓冲物质如磷酸盐，甘油，山梨酸，山梨酸钾，饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物，水，盐或电解质，如硫酸鱼精蛋白，磷酸氢二钠，磷酸氢钾，氯化钠，锌盐，胶态氧化硅，三硅酸镁，聚乙烯吡咯烷酮，纤维素物质，聚乙二醇，羧甲基纤维素钩，聚丙烯酸酯，蜂蜡，羊毛醋等.载体在药物组合物中的含量可以是1重量％～98重量％，通常大约占到80重量％，为方便起见，局部麻醉剂，防腐剂，缓冲剂等可直接溶于载体中.口服制剂如口服片剂和胶囊可以含有赋形剂如粘合剂，如糖浆，阿拉伯胶，山梨醇，黄芪胶，或聚乙烯吡咯烷酮，填充剂，如乳糖，蔗糖，玉米淀粉，磷酸钙，山梨醇，氨基乙酸，润滑剂，如硬脂酸镁，滑石，聚乙二醇，硅土，崩解剂，如马铃薯淀粉，或可接受的增润剂，如月桂醇钠硫酸盐.片剂可以用制药学上公知的方法包衣。口服液形式的本发明药物组合物可以制成水和油的悬浮液，溶液，乳浊液，糖浆或酏剂，也可以制成干品，用前补充水或其它合适的媒质。这种液体制剂可以包含常规的添加剂，如悬浮剂，山梨醇，纤维素甲醚，葡萄糖糖浆，凝胶，羟乙基纤维素，羧甲基纤维素，硬脂酸铝凝胶，氢化的食用油脂，乳化剂，如卵磷脂，山梨聚醣单油酸盐，阿拉伯树胶；或非水载体(可能包含可食用油)，如杏仁油，油脂如甘油，乙二醇，或乙醇；防腐剂，如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯，山梨酸.如需要可添加调味剂或着色剂。栓剂可包含常规，的栓剂基质，如可可黄油或其它甘油酯。非肠道给药，液态剂型通常由化合物和至少一种消毒或无茵的载体制成。载体首选水.依照所选载体和药物浓度的 不同，化合物既可溶于载体中也可制成悬浮溶液，在制成注射用溶液时先将化合物溶于水中，过滤消毒后装入封口瓶或安瓿中。当皮肤局部施用时，本发明化合物可以制成适当的软膏，洗剂，或霜剂的形式，其中活性成分悬浮或溶解于一种或多种的载体中。其中软膏制剂可以使用的载体包括但不局限于:矿物油，液体凡士林，白凡士林，丙二醇，聚氧化乙烯，聚氧化丙烯，乳化蜡和水；洗剂和霜剂可使用的载体包括但不限于:矿物油，脱水山梨糖醇单硬脂酸酯，吐温60，十六烷酯蜡，十六碳烯芳醇，2-辛基十二烷醇，苄醇和水。依据给药方式的不同，组合物中可以含有重量比0.1％，或更合适的重量比10-60％的活性组分.但组合物为单位剂型时，每个单位最好包含50～500毫克活性成分.依据给药途径和给药频率的不同，用于成人的适宜治疗剂量，举例讲可为每天100-3000毫克，如每天1500毫克。必须认识到，通式Ⅰ化合物的最佳给药剂量和间隔是由疾病或症状的严重程度、化合物性质和诸如给药的形式、路径和部位以及所治疗的特定哺乳动物等条件决定的，而这一最佳给药剂量可由临床医生来确定。具体实施方式下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。化合物的熔点用RY-1熔点仪采用毛细管法测定，温度未经校正；1H-NMR谱由JNM-ECA-400型核磁共振仪测定；ESI-MS谱由API3000三重四级杆串联质谱仪测定。实施例1：1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(吡啶-3-基)脲(化合物1)步骤1：5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-甲酰氯(2)的制备将1.93g(5.06mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-甲酸溶于10mL甲苯中，然后加入10mL氯化亚砜并加热至120℃，回流4h后，迅速将其改为蒸馏装置，于110℃－130℃之间蒸干溶剂，得白色固体1.39g，收率72.1％。m.p.155-156℃，ESI-MSm/z:401.2[M+H]+。步骤2：5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺(3)的制备将1.39g(3.67mmol)步骤1制备的酰氯溶解于10mL四氢呋喃中，后将其慢慢滴加至10mL氨水中，于10℃－20℃反应1h，TLC检测其原料反应完毕后，减压蒸除溶剂，得白色固体。加入水15mL并用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得产物1.26g，收率：89.7％。m.p.200-202℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:7.79(d,1H),7.75(d,1H),7.63(s,1H),7.59(dd,1H),7.45-7.48(m,2H),7.32(s,1H),7.23-7.26(m,2H),7.24(s,3H),ESI-MSm/z:382.2[M+H]+。步骤3：5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸酯(4)的制备将1.78g(33.00mmol)甲醇钠溶于40mL甲醇中，依次加入1.26g(3.30mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺和0.88g(4.95mmol)N-溴代丁二酰亚胺，加热回流，反应1.5h，反应完毕后减压蒸除溶剂。加入水15mL并用乙酸乙酯(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥，经硅胶柱层析分离得产物1.16g，收率84.2％。m.p.175-177℃,1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm9.47(s,1H),7.75(d,J＝1.6Hz,1H),7.54-7.59(m,2H),7.43-7.45(m,2H),7.19-7.21(m,2H),3.66(s,3H),1.95(s,3H),ESI-MSm/z:412.1[M+H]+。步骤4：5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-3-氨基-4-甲基-1H-吡唑(5)的制备将1.16g(2.83mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸酯溶解于50mL甲醇中,后加入10.00gNaOH的水溶液(15mL)，加热至70℃，回流反应12h，反应完毕后减压蒸除溶剂。加入水15mL并用乙酸乙酯((15mL×3))萃取，有机层依次用水(10mL×3)以及饱和氯化钠溶液20mL洗涤，无水硫酸钠干燥有机层，浓缩，得到黄色固体0.74g，收率92.1％，m.p.140-142℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:7.66(d,J＝2.4Hz,1H),7.37-7.46(m,4H),7.12-7.14(m,2H),4.93(s,2H),1.90(s,3H),ESI-MSm/z:354.2[M+H]+。步骤5：5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑--3-氨基甲酸苯酯(6)的制备将0.74g(2.14mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑--3-氨基甲酸酯溶解于10mL四氢呋喃中，保持温度在-10℃，加入0.54g(6.42mmol)碳酸氢钠，搅拌，后缓慢滴加0.39g(2.52mmol)氯甲酸苯酯至反应体系中，20min后将温度升至室温，搅拌1.5h，TLC检测反应完全，减压蒸除溶剂。加入水20mL并用二氯甲烷(20mL×3)萃取,有机层依次用水(10mL×2)以及饱和氯化钠溶液20mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得白色固体0.85g，收率：84.2％。m.p.139-141℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:10.09(s,1H),7.77(d,1H),7.63(d,1H),7.55(dd,1H),7.41-7.44(m,4H),7.21-7.28(m,5H),2.01(s,3H),ESI-MSm/z:474.1[M+H]+。步骤6：1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(吡啶-3-基)脲(Ia)的制备将0.25g(2.70mmol)3-氨基吡啶溶于10mL氯仿中，并加入三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑--3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，TLC检测反应完全，减压蒸除溶剂。加入水15mL并用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层 依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得白色固体0.56g，收率：65.6％。m.p.214-216℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:2.01(s,3H),7.21-7.23(m,2H),7.31-7.35(m,1H),7.46-7.48(m,2H),7.54-7.62(m,2H),7.78-7.79(d,1H),7.96-7.98(m,1H),8.21-8.22(d,1H),8.62-8.63(d,1H),9.02(s,1H),9.43(s,1H),ESI-MSm/z:472.0[M+H]+。实施例2：1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(吡啶-3-基甲基)脲(化合物2)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑--3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.29g(2.70mmol)3-氨甲基吡啶溶于10mL氯仿中，并加入三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑--3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，TLC检测反应完全，减压蒸除溶剂。加入水15mL并用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得白色固体0.56g，收率：65.6％。m.p.200-202℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:1.96(s,3H),4.38-4.40(d,2H),7.17-7.19(m,2H),7.35-7.37(m,1H),7.44-7.56(m,4H),7.68-7.75(m,2H),8.44-8.46(dd,1H),8.51-8.52(d,1H),8.84(s,1H),ESI-MSm/z:488.1[M+H]+。实施例3：1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(6-甲基吡啶-3-基)脲(化合物3)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.29g(2.70mmol)5-氨基-2-甲基吡啶溶于10mL氯仿中，并加入 三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑--3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，TLC检测反应完全，减压蒸除溶剂。加入水15mL并用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得白色固体，收率：53.6％。m.p.231-233℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:2.00(s,3H),2.50(s,3H),7.17-7.22(m,3H),7.46-7.48(m,2H),7.52-7.60(m,2H),7.78-7.79(d,1H),7.82-7.85(dd,1H),8.48-8.49(d,1H),8.96(s,1H),9.34(s,1H),ESI-MSm/z:488.2[M+H]+。实施例4：1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)脲(化合物4)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑--3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.33g(2.70mmol)对甲氧基氨基吡啶溶于10mL氯仿中，并加入三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑--3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，TLC检测反应完全，减压蒸除溶剂。加入水15mL并用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得白色固体，收率：37.6％。m.p.235-237℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:2.00(s,3H),3.71(s,3H),6.86-6.88(m,2H),7.20-7.22(m,2H),7.35-7.37(m,2H),7.45-7.48(m,2H),7.52-7.59(m,2H),7.78-7.79(d,1H),8.84(s,1H),9.26(s,1H),ESI-MSm/z:488.2[M+H]+。实施例5：1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(吡啶-2-基甲基)脲(化合物5)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑--3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.29g(2.70mmol)2-氨甲基吡啶溶于10mL氯仿中，并加入三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑--3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，TLC检测反应完全，减压蒸除溶剂。加入水15mL并用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得黄白色固体，收率：43.6％。m.p.180-182℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:1.98(s,3H),4.45-4.47(d,2H),7.18-7.20(m,2H),7.25-7.28(m,1H),7.32-7.34(d,1H),7.44-7.46(m,2H),7.52-7.59(m,2H),7.75-7.79(m,2H),7.80(s,1H),8.48-8.49(d,1H),8.87(s,1H),ESI-MSm/z:488.2[M+H]+。实施例6：1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(吡啶基-2-基)脲(化合物6)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑--3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.25g(2.70mmol)2-氨基吡啶溶于10mL氯仿中，并加入三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑--3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，TLC检测反应完全，减压蒸除溶剂。加入水15mL并用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得白色固体，收率：53.3％。m.p.196-198℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:2.01(s,3H),7.02-7.04(m,1H),7.23-7.28(m,2H),7.45-7.58(m,2H),7.54-7.64(m,3H),7.76-7.78(m,2H),8.25-8.26(m,1H),9.86(s,1H),10.22(s,1H), ESI-MSm/z:474.2[M+H]+。实施例7：1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(哌啶-1-基)脲(化合物7)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑--3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.27g(2.70mmol)N-氨基哌啶溶于10mL氯仿中，并加入三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑--3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，TLC检测反应完全，减压蒸除溶剂。加入水15mL并用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得白色固体，收率：40.6％。m.p.193-195℃，1H-NMR(400MHz,CHLOROFORM-D)δppm:1.86-1.25(m,1H),1.66-1.73(m,6H),2.09(s,3H),2.35(m,1H),3.20(m,2H),5.43(s,1H),7.07-7.09(d,2H),7.25-7.29(m,4H),7.40(s,1H),8.09(s,1H),ESI-MSm/z:478.1[M+H]+。实施例8：1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(吗啉基)脲(化合物8)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑--3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.28g(2.70mmol)N-氨基吗啉溶于10mL氯仿中，并加入三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，TLC检测反应完全，减压蒸除溶剂。加入水15mL并用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得白色固体， 收率：52.1％。m.p.202-204℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:1.94(s,3H),2.78-2.80(m,4H),3.68(m,4H),7.17-7.19(m,2H),7.44-7.46(m,2H),7.54-7.55(m,2H),7.75-7.76(m,1H),7.86(s,1H),,8.53(s,1H),ESI-MSm/z:482.0[M+H]+。实施例9：1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(4-甲基哌嗪-1-基)脲(化合物9)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑--3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.31g(2.70mmol)1-氨基-4-甲基哌嗪溶于10mL氯仿中，并加入三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑--3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，TLC检测反应完全，减压蒸除溶剂。加入水15mL并用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得白色固体，收率：43.6％。m.p.203-205℃，1H-NMR(400MHz,CHLOROFORM-D)δppm:2.08(s,3H),2.35(m,5H),2.73-3.14(m,6H),5.58(s,1H),7.08-7.10(d,2H),7.24-7.30(m,4H),7.41(s,1H),8.01(s,1H),ESI-MSm/z:495.3[M+H]+。实施例10：1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(2-溴吡啶-5-基)脲(化合物10)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.47g(2.70mmol)5-氨基-2-溴吡啶溶于15mL氯仿中，并加入三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑--3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，TLC检测反应完全，减压蒸除溶剂。加入水15mL并用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层 依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得白色固体，收率：60.6％。m.p.212-214℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:2.01(s,3H),7.21-7.23(m,2H),7.44-7.48(m,2H),7.54-7.57(dd,1H),7.61-7.63(d,1H),7.74-7.79(m,2H),7.97-8.00(dd,1H),8.37-8.38(d,1H),9.70(s,1H),9.97(s,1H),ESI-MSm/z:552.0[M+H]+。实施例11：1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(5-甲基吡啶-2-基)脲(化合物11)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.29g(2.70mmol)2-氨基-5-甲基吡啶溶于10mL氯仿中，并加入三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，TLC检测反应完全，减压蒸除溶剂。加入水15mL并用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得白色固体，收率：33.6％。m.p.204-206℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:2.01(s,3H),2.27(s,3H),7.20-7.23(m,2H),7.45-7.48(m,2H),7.54-7.56(dd,1H),7.59-7.63(m,2H),7.77-7.78(m,1H),8.08-8.09(m,1H),9.78(s,1H),10.15(s,1H),ESI-MSm/z:486.1[M+H]+。实施例12：1-(4-溴苯基)-3-(5-(4-氯苯基-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)脲(化合物12)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.46g(2.70mmol)对溴苯胺溶于10mL氯仿中，并加入三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯 基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，析出固体，TLC检测反应完全，过滤出固体并用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。产物为白色固体，收率：65.0％。m.p.248-250℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:2.01(s,3H),7.20-7.22(m,2H),7.46-7.48(m,6H),7.53-7.61(m,2H),7.78-7.79(d,1H),8.95(s,1H),9.45(s,1H),ESI-MSm/z:551.3[M+H]+。实施例13：1-苯甲基-3-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)脲(化合物13)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.29g(2.70mmol)苄胺滴入10mL氯仿中，并加入三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，析出固体，TLC检测反应完全，过滤出固体产物并加入水15mL，用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。得白色固体，收率：70.1％。m.p.218-220℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:1.98(s,3H),4.37-4.38(d,2H),7.18-7.23(m,3H),7.28-7.32(m,4H),7.44-7.54(m,4H),7.73-7.74(m,2H),8.79(s,1H),ESI-MSm/z:487.0[M+H]+。实施例14：1-苯基-3-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)脲(化合物14)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.25g(2.70mmol)苯胺滴入10mL氯仿中，并加入三乙胺 0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，析出固体，TLC检测反应完毕。过滤出固体并加入水15mL，用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。产物为白色固体，收率：65.7％。m.p.239-241℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:2.01(s,3H),6.97-7.01(m,1H),7.20-7.22(m,2H),7.27-7.30(m,2H),7.45-7.48(m,4H),7.52-7.55(dd,1H),7.58-7.60(d,1H),7.79-7.80(d,1H),8.89(s,1H),9.38(s,1H),ESI-MSm/z:473.1[M+H]+。实施例15：1-苄氧基-3-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)脲(化合物15)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.43g(2.70mmol)苄氧胺盐酸盐溶于10mL氯仿中，并加入三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，TLC检测反应完全，减压蒸除溶剂。加入水15mL并用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得黄白色固体，收率：44.1％。m.p.198-200℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:1.90(s,3H),4.84(d,2H),7.17-7.20(m,2H),7.33-7.40(m,3H),7.44-7.48(m,4H),7.57-7.55(m,2H),7.75-7.76(m,1H),8.93(s,1H),9.65(s,1H),ESI-MSm/z:503.1[M+H]+。实施例16：1-甲氧基-3-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)脲(化合物16)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.23g(2.70mmol)甲氧胺盐酸盐溶于10mL氯仿中，并加入三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，TLC检测反应完全，减压蒸除溶剂。加入水15mL并用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得白色固体，收率：54.6％。m.p.181-183℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:1.95(s,3H),3.62(s,3H),7.18-7.21(m,2H),7.44-7.47(m,2H),7.53-7.58(m,2H),7.75-7.76(m,1H),8.96(s,1H),9.63(s,1H),ESI-MSm/z:427.0[M+H]+。实施例17：1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-异丙基脲(化合物17)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.16g(2.70mmol)异丙胺加入10mL氯仿中，并加入三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，TLC检测反应完全，减压蒸除溶剂。加入水15mL并用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得白色固体，收率：49,2％。m.p.232-234℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:1.09-1.11(m,6H),1.96(s,3H),3.77-3.80(m,1H),7.17-7.19(m,3H),7.44-7.48(m,4H),7.77-7.78(d,1H),8.58(s,1H),ESI-MSm/z:439.4[M+H]+。实施例18：1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-环丙基脲(化合物18)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.27g(2.70mmol)环丙胺加入10mL氯仿中，并加入三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，TLC检测反应完全，减压蒸除溶剂。加入水15mL并用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得白色固体，收率：63.6％。m.p.250-252℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:1.12-1.32(m,5H),1.49-1.63(m,3H),1.79-1.81(m,2H),1.96(s,3H),3.53-3.55(m,1H),7.17-7.19(m,2H),7.44-7.47(m,5H),7.78-7.79(d,1H),8.63(s,1H),ESI-MSm/z:479.1[M+H]+。实施例19：1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(噻唑-2-基)脲(化合物19)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.29g(2.70mmol)2-氨基噻唑溶于10mL氯仿中，并加入三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，TLC检测反应完全，减压蒸除溶剂。加入水15mL并用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得白色固体，收率：39.6％。m.p.220-222℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:2.01(s,3H),7.14-7.15(d,1H),7.21-7.24(m,2H),.37-7.38(d,1H),7.46-7.48 (m,2H),7.54-7.56(dd,1H),7.60-7.62(d,1H),7.79-7.80(d,1H),9.28(s,1H),10.95(s,1H),ESI-MSm/z:477.9[M+H]+。实施例20：1-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-(4-碘-2-甲基苯基)脲(化合物20)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的制备见实施例1。将0.63g(2.70mmol)4-碘-2-甲基苯胺溶于15mL氯仿中，并加入三乙胺0.55g(5.40mmol)，室温下搅拌，后将0.85g(1.80mmol)5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-氨基甲酸苯酯的氯仿(15mL)溶液缓慢加至反应体系中，加热回流，反应1.5h，析出白色固体，TLC检测反应完全，过滤出固体产物并加入水15mL，用二氯甲烷(15mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)、饱和碳酸氢钠溶液15mL以及饱和氯化钠溶液15mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。产物为白色固体，收率：52.4％。m.p.275-277℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:2.03(s,3H),2.07(s,3H),7.22-7.24(m,2H),7.46-7.56(m,5H),7.64-7.66(m,1H),7.81-7.82(d,1H),7.90-7.92(d,1H),9.37(s,1H),9.60(s,1H),ESI-MSm/z:613.3[M+H]+。实施例21：1-苯甲基-3-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-2-甲基胍(化合物21)1-苯甲基-3-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)脲的制备见实施例13。将0.24g(0.5mmol)化合物1-苯甲基-3-(5-(4-氯苯基)-1-(2,4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基)脲溶于10ml无水甲苯中，氮气保护下加入三氯氧磷5ml，加热至回流反应48h，减压蒸除溶剂。后滴加甲胺(醇溶液)10ml，回流反应8h，蒸除溶剂，加入水5ml用二氯甲烷(10mL×3)萃取，有机层依次用水(10mL×2)以及饱和氯化钠溶液10mL洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥。经硅胶柱层析分离得黄色固体，收率31.3％。 m.p.174-176℃，1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:1.89(s,3H),2.93(s,3H),4.60-4.61(d,2H),7.18-7.20(m,2H),7.29-7.32(m,1H),7.37-7.38(m,4H),7.46-7.48(m,2H),7.58-7.63(m,2H),7.77(m,1H),9.88(s,1H),ESI-MSm/z:498.4[M+H]+。实施例22：活性测试在特异性表达CB1受体和EGFP报告系统的EGFP-CB1_U2OS细胞模型上筛选CB1受体抑制剂。实验方法：将稳定表达EGFP-CB1融合蛋白的U2OS细胞(购自美国Thermo公司BioImage分公司)，37℃5％CO2培养于含0.5mg/mlG418和10％FBS的DMEM(高糖)培养液中，按照细胞0.7×104个/100μl/孔种于可进行荧光检测的96孔培养板，37℃5％CO2培养46-48h。细胞用100μl/孔分析培养液(含10mMHEPES、1％FBS)洗两次，加入100μl/孔分析培养液，加入50μl/孔4×化合物(4×指的是终浓度4倍浓度。化合物的终浓度是0.01、0.03、0.1、0.3、1、3、10、30、100、300、1000、3000nM中的五到七个浓度)37℃5％CO2孵育1h后，加入50μl/孔4×激动剂即4μMWIN55,212-2(购自Sigma公司，用DMSO配成10mM母液)(终浓度1μM)37℃5％CO2孵育1h，在INCellAnalyzer1000活细胞成像系统上进行测定。实验设单培养基和单激动剂对照，每个浓度平行重复3孔。在INCellAnalyzer1000活细胞成像系统上的测定条件为：20倍物镜，激发波长Ex＝460nm，发射波长Em＝535nm，曝光300ms检测细胞核通道蓝色荧光；激发波长Ex＝475nm，发射波长Em＝535nm，曝光500ms检测细胞质通道绿色荧光EGFP，每孔5个视野连续拍照。使用GE公司INCellAnalyzer1000GranularityAnalysisModule分析颗粒形成，以化合物抑制颗粒形成率表示化合物对CB1受体的抑制作用。每个浓度平行重复3孔，每孔5个视野，所照细胞数量平均在700个左右。抑制率(％)＝(激动剂处理组每细胞颗粒数-化合物处理组每细胞 颗粒数)/(激动剂处理组每细胞颗粒数-溶剂对照处理组每细胞颗粒数)×100％根据得到的抑制率计算IC50值。实验结果：活性评价结果如下表1所示:表1.系列化合物体外抑制CB1活性化合物代号*IC50(nM)利莫那班6.71±1.10181.99±35.51231.60±18.23325.55±5.3948.56±4.835137.47±11.09654.79±17.3975.19±3.9588.90±5.349403.44±242.331055.61±23.24117.86±3.621212.40±4.81137.37±2.141419.03±4.83153.61±1.191617.72±7.871715.45±7.421829.28±9.071913.33±6.082033.48±16.702111.29±11.56*化合物代号为其化学合成的实施例号实验结果表明，在EGFP-CB1_U2OS细胞模型上，CB1受体选择性 拮抗剂利莫那班(SR)抑制CB1受体激动剂WIN55,212-2(1μM)产生效应的活性为：0.1μM和1μM有约100％的抑制活性，利莫那班(SR)的IC50值为6.71nM。筛选化合物中除化合物9在1μM抑制活性小于50％外，其余均大于50％。将1μM浓度下抑制活性大于50％的化合物进行了量效关系研究，化合物4、化合物7、化合物8、化合物11、化合物13、化合物15的IC50值在5nM至10nM间，其中化合物7的IC50值在6nM，化合物15的IC50值在4nM，表明这些化合物对CB1受体具有拮抗活性，其中实施例15活性较强。实施例23：化合物稳态脑血分布应用大鼠稳态脑血分布模型评价对抑制CB1活性较高的化合物进行血脑屏障通透性测试。该模型以尾静脉持续恒量输注给药的方式，使药物达到稳态血浆，取稳态时的血浆和脑组织样品测定，得到脑组织药物浓度和血浆浓度，由公式1计算得到Kp值，以表示药物穿透血脑屏障的、以及在脑组织中的分布能力，Kp值大于0.5为易透化合物。Kp＝稳态脑组织浓度/稳态血浆浓度(公式1)实验方案:SD雄性大鼠，实验前自由饮水和进食。实验时，采用静脉输液泵尾静脉持续衡量输注药物，输注方式为：起始以75ml/h的速度快速推注0.3ml，然后按2.5ml/h速度匀速推注40min。其中化合物10、化合物12、化合物15、化合物16、化合物21、化合物19、化合物20的药物浓度为：0.25mg/ml；化合物7、化合物8药物浓度为：0.3mg/ml；化合物9的药物浓度为：0.1mg/ml。于给药前及给药后10、15、20、25、30、35、40min各从大鼠眼角静脉丛采血250μL置于含肝素钠的抗凝管中，5000rpm离心10min，取血浆100μL置于-20℃冰箱中冻存待测。在输注40min后，立即股动脉放血处死大鼠并取脑组织，按0.2g组织/1mL生理盐水稀释脑组织并匀浆，取100μL匀浆液与血浆同法处理。以脑组织中药物浓度与血浆中药物浓度之比值(Kp值)表示药物在脑组织中的分布能力。实验结果:在本研究的实验条件下，高活性化合物在输注20-30min时血浆浓度达到稳态，40min时取血和脑组织，测定稳态浓度。本发明化合物的稳态血浆和脑组织浓度分别见表2和表3，由此得到的Kp值见表4。表2.化合物的稳态血浆药物浓度血浆浓度(ng/mL)化合物代号*Rat1Rat2Rat37898.591010.881035.0483675.473271.084214.17101002.47812.07964.761223851.0823136.6322981.42148857.517159.5211149.92151300.451090.931480.32161201.081245.091011.28211232.101412.511247.53191086.831018.271092.622010200.1611096.214045.40*化合物代号为其化学合成的实施例号；表中Rat1、2、3表示大鼠编号。表3.化合物的稳态脑组织药物浓度脑组织浓度(ng/g)化合物代号*Rat1Rat2Rat374083.524623.414728.0983032.352792.193530.9610291.87211.08265.6812532.18527.46527.1714375.04323.90500.96151780.101530.202050.35163126.843212.592625.5621663.37784.41701.2819985.83972.08986.02202478.192675.99958.49*化合物代号为其化学合成的实施例号；表中Rat1、2、3表示大鼠编号。表4.化合物的血脑屏障通透性(n＝3)化合物代号*Kp值(mean±SD)透脑性74.56±0.02易透82.59±0.01易透101.38±0.01易透120.92±0.03易透140.84±0.01易透150.55±0.01易透160.28±0.02不易透210.24±0.00不易透190.04±0.00不易透200.02±0.00不易透*化合物代号为其化学合成的实施例号尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述，本领域技术人员将会理解。根据已经公开的所有教导，可以对那些细节进行各种修改和替换，这些改变均在本发明的保护范围之内。本发明的全部范围由所附权利要求及其任何等同物给出。当前第1页1 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