本发明属于生物能源技术领域，具体涉及缩短制备生物柴油小球藻生长周期的方法。
背景技术：
生物质能作为一种低碳燃料，是可再生能源中理想的清洁燃料之一。在众多生物质中，藻类具有光合作用效率高、生长周期短、生物产量高的特点，同时藻类在水中生长，不占用农业用地，其养殖过程可以实现自动化控制是制备生物质能源的良好材料。国际上微型藻类已进入商品性生产，东亚和东欧地区以及我国台湾省以生产栅藻和小球藻为主；墨西哥等国则建立多条螺旋藻生产线。在此基础上若能使微藻的生物周期在原有的周期上缩短，更利于工业化生产。
技术实现要素：
针对现有技术的需要，本发明的目的是提供一种缩短制备生物柴油小球藻生长周期的方法，采用本方法可使小球藻的有丝分裂周期及生长速度改变，增加单位时间内单位面积的小球藻生物量。
为达到以上目的，本发明采用的技术方案是：缩短制备生物柴油小球藻生长周期的方法，包括以下步骤：(1)从不同水体中采集小球藻藻种；(2)在小球藻自然生长条件下培养藻种，直至小球藻的OD600值达到最大值，此时的小球藻进入对数生长稳定期，获取培养基；(3)向培养基中加入用量为培养基总重量的5-8ppm的激动素，继续培养4-6小时后，再加入用量为培养基总重量的0.5-0.7ppm的植物生长素A，继续培养4-6小时后，再加入用量为培养基总重量的0.3-0.5ppm的植物生长素B，继续培养，直至小球藻的OD600值再次达到最大值，满足培养要求。
进一步，步骤(3)中，激动素为6-呋喃氨基嘌呤(KT)。
进一步，步骤(3)中，植物生长素A为吲哚酸类物质。
再进一步，所述吲哚酸类物质选自吲哚乙酸、吲哚丙酸、吲哚-3-丁酸等所组成的组。
进一步，步骤(3)中，植物生长素B为赤霉素、赤霉素衍生物或其组合。
再进一步，所述赤霉素选自GA1、GA2、GA3和GA7等赤霉素的一种或多种所组成的组。
本发明通过在小球藻培养基中加入不同配比的激动素和植物生长素，改变了小球藻的有丝分裂周期及生长速度，使单位时间内单位面积的小球藻生物量(以OD600值计)增加，可用于提炼更多的生物柴油。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步描述。
实施例1
从不同的水体中采集小球藻藻种；在小球藻自然生长的条件不变前提下，将分离出的藻种培养，直至小球藻的生物量OD600值达到最大值时，即小球藻进入对数生长期后，获取2ml的培养基；向培养基中先加入约为培养基总含量5ppm的激动素6-呋喃氨基嘌呤(KT)，使小球藻培养时间约4小时后，再加入约为培养基总含量0.5ppm的吲哚乙酸(IAA)，培养约4小时，再加入约为培养基总含量0.3ppm的赤霉素GA1，继续培养，通过电镜观察，当单个小球藻长到直径约为5μm时，通过分光光度计测量小球藻的生物量OD600值，且不再增高，即达到培养要求。
经检测，本实施例在相同的培养时间内最终获得的小球藻的生物量OD600值比最初测定的OD600值增大了4倍左右。收获小球藻的时间比正常培养时缩短了2倍。
实施例2
从不同的水体中采集小球藻藻种；在小球藻自然生长的条件不变前提下，将采集的藻种培养8-10小时左右，至小球藻的生物量OD600值达到最大值，即小球藻进入对数生长期后，获取2ml的培养基进行测量；向培养基中先加入约为培养基总含量6pm的激动素6—呋喃氨基嘌呤(KT)，使小球藻培养时间约5小时后，再加入约为培养基总含量0.6ppm的吲哚丙酸，培养约5小时，再加入约为培养基总含量0.4ppm的赤霉素GA2，继续培养约5小时，通过电镜观察，当单个小球藻长到约大小直径约4-7μm时，通过分光光度计测量小球藻的生物量OD600值，且不再增高，即达到培养要求。
经检测，本实施例最终获得的小球藻的生物量OD600值比最初测定的OD600值增大了4倍。收获小球藻的时间比正常培养时缩短了2倍。产油量增加了3倍左右。
实施例3
从不同的水体中采集小球藻藻种；在小球藻自然生长的条件不变前提下，将分离出的藻种再接着培养4小时左右，至小球藻的生物量OD600值达到最大值，即小球藻进入对数生长期后，获取2ml的培养基进行测量；向培养基中先加入约为培养基总含量8ppm的激动素6—呋喃氨基嘌呤(KT)，使小球藻培养时间约6小时后，再加入约为培养基总含量0.7ppm的吲哚-3-丁酸，培养约6小时，再加入约为培养基总含量0.5ppm的GA3和GA7(摩尔比1:1)等赤霉素及其衍生物中的一种或多种，继续培养约6小时，通过电镜观察，当单个小球藻长至直径约4-7μm时，通过分光光度计测量小球藻的生物量OD600值，且不再增高，即达到培养要求。
经检测，本实施例在相同时间内最终获得的小球藻的生物量OD600值比最初测定的OD600值增大了4倍左右。收获小球藻的时间比正常培养缩短了2倍，产油量增加了3倍左右。
上述实施例只是对本发明的举例说明，本发明也可以以其它的特定方式或其它的特定形式实施，而不偏离本发明的要旨或本质特征。因此，描述的 实施方式从任何方面来看均应视为说明性而非限定性的。本发明的范围应由附加的权利要求说明，任何与权利要求的意图和范围等效的变化也应包含在本发明的范围内。