具有5,2’‑二羟基‑4’‑甲氧基‑3‑香叶基黄酮骨架的衍生物及其制备方法和用途与流程

文档序号:11546551阅读:155来源:国知局
具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物及其制备方法和用途技术领域本发明涉及具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物,具体涉及6位卤代5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮及其制备方法和用途。

背景技术:
宫颈癌是对女性健康和生活质量危险最大的疾病之一,因此寻求高效、高选择和毒副作用小的抗宫颈癌药物是药物研究的主要方向。黄酮类化合物是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮结构的化合物,其生物活性多种多样,并具有很强的药理活性。有研究表明,黄酮类化合物具有抗肿瘤活性,在肺癌、结肠癌、乳腺癌等治疗和预防中发挥重大作用,其阻止癌细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抗氧化活性、抑制新生血管形成等机制。但是目前获取黄酮类化合物主要是通过中药提取,靠分离提取进行量产比较困难,并且黄酮类化合物结构复杂,作用位点多,造成针对选择性差,其作用机制、物质基础均没有明确的理论解释,故结构式、靶向性均具有不可操控性。因此,通过化学合成对其结构改造修饰,寻找一种活性更好、副作用更小的多靶点、多环节、多效应的改性黄酮类化合物,增强其特定药理活性以治疗宫颈癌是目前亟需解决的技术难题。

技术实现要素:
作为各种广泛且细致的研究和实验的结果,本发明的发明人已经发现,在合成过程工艺中控制柱层析的体积比,所述化合物有助于提高治疗宫颈癌的性能。基于这种发现,完成了本发明。本发明的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷,并提供至少后面将说明的优点。本发明还有一个目的是提供一种具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物,其具有良好的抗宫颈癌活性,多靶点、多环节、多相应,毒性低,不易产生耐药性。本发明还有一个目的是提供一种所述具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物的制备方法,通过甲基化、卤代、成酯、重排、香叶基化,制备方法简单、容易控制,提高化合物的靶点,以便获得更好的选择性和活性。为了实现根据本发明的这些目的和其它优点,提供了一种具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物,该衍生物具有以下化学通式(I)或其药学上可接受的盐;其中,R1表示-OCH3或-OH,R2为-Cl或-Br,R3为-OCH3或-OH,R4为-OCH3或-OH。优选的是,所述的具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物,是结构式如下的化合物之一:一种具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物的制备方法,包括以下步骤:步骤一、以2,6-二羟基苯乙酮为起始原料,进行甲基化反应,采用柱层析,V(石油醚):V(乙酸乙酯)=10:1,得黄色晶体状的第一中间产物;步骤二、将所述第一中间产物溶解于醋酸中,进行卤代反应后,采用柱层析,V(石油醚):V(乙酸乙酯)=8:1,得黄色液体状的第二中间产物;步骤三、取2,4-二甲氧基苯甲酸和二氯亚砜,回流,减压旋蒸后加入溶解有所述第二中间产物的无水吡啶中,进行成酯反应,重排反应后,采用柱层析,V(石油醚):V(乙酸乙酯)=4:1,得到黄色油状的第三中间产物;步骤四、取所述第三中间产物进行香叶基化反应,采用柱层析,V(石油醚):V(乙酸乙酯)=10:1,得黄色油状的第四中间产物;步骤五、将所述第四中间产物溶解在甲醇中,滴加2-4滴浓硫酸,回流2-4h,减压蒸馏出溶剂,加入乙酸乙酯萃取有机相,用饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,采用柱层析,V(石油醚):V(乙酸乙酯)=5:1,得黄色液体状的第五中间产物;步骤六、将所述第五中间产物溶解于六甲基磷酰三胺中,进行脱去甲基反应,柱层析,V(石油醚):V(乙酸乙酯)=6:1,得到黄色液体状的目标产物。优选的是,所述的具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物的制备方法,所述步骤一中的甲基化反应具体包括:将90~110重量份2,6-二羟基苯乙酮溶解于600~700重量份无水丙酮中,于圆底烧瓶中搅拌3~6min,加入98~101重量份无水碳酸钾搅拌8~12min,用恒压滴液漏斗25~35min内滴加88~92重量份硫酸二甲酯,回流反应5~7h,冷却至室温,用盐酸调节PH值到2,用乙酸乙酯萃取有机相,依次用水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析得所述第一中间产物,所述第一中间产物结构经IR,NMR和MS分析确定。优选的是,所述的具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物的制备方法,所述步骤二中的卤代反应具体指:将8~12重量份所述第一中间产物溶解于醋酸中,缓慢加入7~11重量份N-氯代丁二酰亚胺于70~85℃反应5~7h,冷却加入碳酸氢钠直至无气泡产生,加入乙酸乙酯萃取有机相,用饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析得所述第二中间产物,所述第二中间产物结构经IR,NMR和MS分析确定。优选的是,所述的具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物的制备方法,所述N-氯代丁二酰亚胺可以用N-溴代丁二酰亚胺代替。优选的是,所述的具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物的制备方法,所述步骤三中,所述成酯反应,重排反应具体指:称取10~15重量份2,4-二甲氧基苯甲酸于圆底烧瓶中,加入33~37重量份二氯亚砜回流0.8~1.2h,减压旋蒸除去过量二氯亚砜,然后将其加入到溶解8~12重量份所述第二中间产物的无水吡啶中,70~90℃反应1.5~2.5h,冷却到室温加入乙酸乙酯萃取有机相,依次用稀盐酸、水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂,得中间化合物,所述中间化合物不经纯化,将其溶解在吡啶中,加入4~6重量份预热过的氢氧化钾粉末,95~105℃反应20~40min,冷却到室温,加入乙酸乙酯萃取有机相,依次用稀盐酸、水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析得所述第三中间产物,所述第三中间产物结构经IR,NMR和MS分析确定。优选的是,所述的具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物的制备方法,所述步骤四中所述香叶基化反应具体指:将5~8.5重量份所述第三中间产物溶解于无水丙酮中,加入6~7重量份无水碳酸钾回流8~12min,滴加3.5~5重量份香叶基溴,回流2~4h,冷却旋干溶剂,加入乙酸乙酯萃取有机相,分别水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后柱层析得所述第四中间产物,所述第四中间产物结构经IR,NMR和MS分析确定。优选的是,所述步骤五中,所述第四中间产物的用量为1~4重量份,所述第五中间产物结构经IR,NMR和MS分析确定;所述的具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物的制备方法,所述步骤六中所述去甲基反应具体指:氩气保护下将0.5~0.9重量份乙硫醇溶解于18~23重量份六甲基磷酰三胺于0~2℃搅拌8~12min,加入2~4重量份浓度为2~3M的正丁基锂反应25~35min,将溶解有1~2.5重量份所述第五中间产物的六甲基磷酰三胺溶液加入到新制备的乙硫基锂中,60~80℃反应5~7h,加入50~70重量份饱和氯化铵淬灭反应,用乙酸乙酯萃取有机相,饱和氯化锂洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后柱层析得目标产物,目标产物结构经IR,NMR和MS分析确定。一种具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物的用途,用于制备治疗宫颈癌的药物。本发明至少包括以下有益效果:第一、黄酮类化合物干预细胞转到过程中的酶活性,从而抑制宫颈癌细胞增殖,且对正常细胞无毒害作用,能够表现出抗氧化作用和正向免疫调节作用,由于具有多个可被取代的位置,可被改性以获取能够增强其特定药理活性的抗宫颈癌药物;第二、取消A环7位的氧代,引入C环3位香叶基,选择性碳代香叶基化,提高了黄酮类化合物的生物活性,具有好的抗宫颈癌的功效和微弱的细胞毒性;第三、卤素药物对恶性肿瘤细胞尤为敏感,引入6位卤代,避免与香叶基形成较大的斥力,保证化合物的稳定性,并且与骨架协同作用,能够很好地抑制、消除宫颈癌细胞活性;第四、本发明使用的制备方法操作简单、反应时间短,制备的化合物纯度高、形态好。本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现,部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。附图说明图1为本发明所述的具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物(质量浓度)体外抑制宫颈癌细胞株(Hela)抑制率(IC50)图。具体实施方式下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。实施例1:具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物,目标产物III、目标产物IV,结构式如下:制备方法如下:步骤一、将9.123g2,6-二羟基苯乙酮溶解于70mL无水丙酮中,于250mL的圆底烧瓶中搅拌3min,加入9.812g无水碳酸钾搅拌8min,用恒压滴液漏斗25min内滴加8.845g硫酸二甲酯,回流反应5h,冷却至室温,用盐酸调节PH值到2,用乙酸乙酯萃取有机相,依次用水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=10:1,得黄色晶体状的第一中间产物(9.857g,产率90.32%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤二、将0.821g第一中间产物溶解于醋酸中,缓慢加入0.744gN-氯代丁二酰亚胺于70℃反应5h,冷却加入碳酸氢钠直至无气泡产生,加入乙酸乙酯萃取有机相,用饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=8:1得黄色液体状的第二中间产物(0.456g,产率37.86%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤三、称取1.024g2,4-二甲氧基苯甲酸于100mL圆底烧瓶中,加入3.321g二氯亚砜回流0.8h,减压旋蒸除去过量二氯亚砜,然后将其加入到溶解0.8g第二中间产物的无水吡啶中,70℃反应1.5h,冷却到室温加入乙酸乙酯萃取有机相,依次用稀盐酸、水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂,得中间化合物,所述中间化合物不经纯化,将其溶解在吡啶中,加入0.421g预热过的氢氧化钾粉末,95℃反应20min,冷却到室温,加入乙酸乙酯萃取有机相,依次用稀盐酸、水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=4:1,得黄色油状的第三产物(0.926g产率50.35%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤四、将0.532g第三中间产物溶解于无水丙酮中,加入0.645g无水碳酸钾回流8min,滴加0.351g香叶基溴,回流2h,冷却旋干溶剂,加入乙酸乙酯萃取有机相,分别水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=10:1,得黄色油状的第四中间产物(0.321g产率42.23%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤五、将0.253g第四中间产物溶解在8mL甲醇中,滴加2滴浓硫酸,回流2h,减压蒸馏出溶剂,加入乙酸乙酯萃取有机相,用饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,采用柱层析,V(石油醚):V(乙酸乙酯)=5:1,得黄色液体状的第五中间产物(0.106g产率33.13%);结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:第五中间产物:IR(KBr):3102,3010,2957,2925,2843,1641,1506,1472,1410,1309,1272,1025,813cm-1。1HNMR(300MHz,Chloroform-d)δ7.57(d,J=9.0Hz,1H),7.33(d,J=9.0Hz,1H),6.73(d,J=8.7Hz,1H),6.67–6.47(m,2H),5.18(t,J=6.3Hz,1H),5.05(t,J=6.6Hz,1H),3.89(s,3H),3.82(s,3H),3.09(d,J=6.6Hz,2H),2.13–1.82(m,4H),1.66(s,3H),1.58(s,3H),1.41(s,3H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ177.518,162.590,159.308,158.579,158.274,154.485,136.043,135.128,131.665,131.139,124.436,124.342,121.791,115.083,114.849,106.487,104.629,101.968,98.839,56.506,55.651,55.482,39.680,26.703,25.637,24.853,17.647,15.906;(ESI)-MS,m/z:505.1759[M+Na]+(理论值505.1758)。步骤六、氩气保护下将0.070mL乙硫醇溶解于1mL六甲基磷酰三胺于0℃搅拌8min,加入0.405mL浓度为2M的正丁基锂反应25min,将溶解有0.105g第五中间产物的六甲基磷酰三胺溶液加入到新制备的乙硫基锂中,60℃反应5h,加入3.5mL饱和氯化铵淬灭反应,用乙酸乙酯萃取有机相,饱和氯化锂洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=6:1,得黄色液体状的目标产物III(0.254g产率32.61%)和IV(0.016g产率17.35%),目标产物III和IV结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:目标产物III:IR(KBr):3428,2977,2915,2887,1635,1474,1392,1275,1063,958,893,813,614cm-1。1HNMR(300MHz,Chloroform-d)δ12.76(s,1H),7.53(d,J=8.7Hz,1H),7.36(d,J=9.0Hz,1H),6.75(d,J=8.7Hz,1H),6.60(m,2H),5.20(t,J=6.3Hz,1H),5.07(t,J=6.5Hz,1H),3.87(s,3H),3.24(d,J=6.5Hz,2H),2.00(m,4H),1.74–1.51(m,9H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ182.977,163.231,161.195,159.363,155.825,151.165,137.184,135.019,131.627,131.466,124.115,121.700,120.608,111.544,111.387,110.813,110.343,107.431,102.522,55.502,39.574,26.518,25.654,24.509,17.690,16.107;(ESI)-MS,m/z:453.1471[M-H]+(理论值453.1496)。目标产物IV:IR(KBr):3458,2962,2925,2850,1644,1619,1472,1394,1307,1270,1230,1030,958,816,644,622cm-1。1HNMR(300MHz,Chloroform-d)δ12.92(s,1H),7.54(d,J=8.7Hz,1H),7.28(s,1H),6.75(d,J=8.8Hz,1H),6.67–6.40(m,2H),5.80(s,1H),5.08(m,2H),3.82(s,3H),3.12(d,J=6.6Hz,2H),2.13–1.84(m,4H),1.66(s,3H),1.58(s,3H),1.44(s,3H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ183.155,161.865,159.444,159.311,158.792,151.895,136.134,134.853,131.664,131.351,124.201,122.296,120.781,114.222,111.174,110.808,110.549,107.386,99.495,55.701,39.614,26.587,25.633,24.201,17.657,15.937;(ESI)-MS,m/z:453.1476[M+H]+(理论值453.1496)。实施例2:具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物,目标产物III、目标产物IV,结构式如下:制备方法如下:步骤一、将11.00g2,6-二羟基苯乙酮溶解于90mL无水丙酮中,于250mL的圆底烧瓶中搅拌6min,加入10.123g无水碳酸钾搅拌12min,用恒压滴液漏斗35min内滴加9.222g硫酸二甲酯,回流反应7h,冷却至室温,用盐酸调节PH值到2,用乙酸乙酯萃取有机相,依次用水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=10:1,得黄色晶体状的第一中间产物(9.947g,产率90.17%),第一中间产物结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤二、将1.208g第一中间产物溶解于醋酸中,缓慢加入0.921gN-氯代丁二酰亚胺于85℃反应7h,冷却加入碳酸氢钠直至无气泡产生,加入乙酸乙酯萃取有机相,用饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=8:1,得黄色液体状的第二中间产物(0.457g,产率37.56%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤三、称取1.523g2,4-二甲氧基苯甲酸于100mL圆底烧瓶中,加入3.748g二氯亚砜回流1.2h,减压旋蒸除去过量二氯亚砜,然后将其加入到溶解1.221g所述第二中间产物的无水吡啶中,90℃反应2.5h,冷却到室温加入乙酸乙酯萃取有机相,依次用稀盐酸、水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂,得中间化合物,所述中间化合物不经纯化,将其溶解在吡啶中,加入0.634g预热过的氢氧化钾粉末,105℃反应40min,冷却到室温,加入乙酸乙酯萃取有机相,依次用稀盐酸、水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=4:1,得黄色油状的第三中间产物(0.921g产率50.69%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤四、将0.750g第三中间产物溶解于无水丙酮中,加入0.720g无水碳酸钾回流12min,滴加0.531g香叶基溴,回流4h,冷却旋干溶剂,加入乙酸乙酯萃取有机相,分别水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=10:1,得黄色油状的第四中间产物(0.335g产率41.13%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤五、将0.435g第四中间产物溶解在12mL甲醇中,滴加2滴浓硫酸,回流2h,减压蒸馏出溶剂,加入乙酸乙酯萃取有机相,用饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,采用柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=5:1,得黄色液体状的第五中间产物(0.109g产率32.19%);结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:第五中间产物:IR(KBr):3102,3010,2957,2925,2843,1641,1506,1472,1410,1309,1272,1025,813cm-1。1HNMR(300MHz,Chloroform-d)δ7.57(d,J=9.0Hz,1H),7.33(d,J=9.0Hz,1H),6.73(d,J=8.7Hz,1H),6.67–6.47(m,2H),5.18(t,J=6.3Hz,1H),5.05(t,J=6.6Hz,1H),3.89(s,3H),3.82(s,3H),3.09(d,J=6.6Hz,2H),2.13–1.82(m,4H),1.66(s,3H),1.58(s,3H),1.41(s,3H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ177.518,162.590,159.308,158.579,158.274,154.485,136.043,135.128,131.665,131.139,124.436,124.342,121.791,115.083,114.849,106.487,104.629,101.968,98.839,56.506,55.651,55.482,39.680,26.703,25.637,24.853,17.647,15.906;(ESI)-MS,m/z:505.1759[M+Na]+(理论值505.1758)。步骤六、氩气保护下将0.090mL乙硫醇溶解于3mL六甲基磷酰三胺于2℃搅拌12min,加入0.500mL浓度为3M的正丁基锂反应35min,将溶解有0.152g第五中间产物的六甲基磷酰三胺溶液加入到新制备的乙硫基锂中,80℃反应7h,加入5mL饱和氯化铵淬灭反应,用乙酸乙酯萃取有机相,饱和氯化锂洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=6:1,得黄色液体状的目标产物III(0.249g产率32.71%)和IV(0.021g产率18.35%),目标产物III和IV结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:目标产物III:IR(KBr):3428,2977,2915,2887,1635,1474,1392,1275,1063,958,893,813,614cm-1。1HNMR(300MHz,Chloroform-d)δ12.76(s,1H),7.53(d,J=8.7Hz,1H),7.36(d,J=9.0Hz,1H),6.75(d,J=8.7Hz,1H),6.60(m,2H),5.20(t,J=6.3Hz,1H),5.07(t,J=6.5Hz,1H),3.87(s,3H),3.24(d,J=6.5Hz,2H),2.00(m,4H),1.74–1.51(m,9H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ182.977,163.231,161.195,159.363,155.825,151.165,137.184,135.019,131.627,131.466,124.115,121.700,120.608,111.544,111.387,110.813,110.343,107.431,102.522,55.502,39.574,26.518,25.654,24.509,17.690,16.107;(ESI)-MS,m/z:453.1471[M-H]+(理论值453.1496)。目标产物IV:IR(KBr):3458,2962,2925,2850,1644,1619,1472,1394,1307,1270,1230,1030,958,816,644,622cm-1。1HNMR(300MHz,Chloroform-d)δ12.92(s,1H),7.54(d,J=8.7Hz,1H),7.28(s,1H),6.75(d,J=8.8Hz,1H),6.67–6.40(m,2H),5.80(s,1H),5.08(m,2H),3.82(s,3H),3.12(d,J=6.6Hz,2H),2.13–1.84(m,4H),1.66(s,3H),1.58(s,3H),1.44(s,3H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ183.155,161.865,159.444,159.311,158.792,151.895,136.134,134.853,131.664,131.351,124.201,122.296,120.781,114.222,111.174,110.808,110.549,107.386,99.495,55.701,39.614,26.587,25.633,24.201,17.657,15.937;(ESI)-MS,m/z:453.1476[M+H]+(理论值453.1496)。实施例3:具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物,目标产物III、目标产物IV,结构式如下:制备方法如下:步骤一、将10.00g2,6-二羟基苯乙酮溶解于80mL无水丙酮中,于250mL的圆底烧瓶中搅拌5min,加入9.991g无水碳酸钾搅拌10min,用恒压滴液漏斗30min内滴加9.120g硫酸二甲酯,回流反应6h,冷却至室温,用盐酸调节PH值到2,用乙酸乙酯萃取有机相,依次用水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=10:1,得黄色晶体状的第一中间产物(9.968g,产率91.27%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤二、将1.000g第一中间产物溶解于醋酸中,缓慢加入0.816gN-氯代丁二酰亚胺于80℃反应6h,冷却加入碳酸氢钠直至无气泡产生,加入乙酸乙酯萃取有机相,用饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=8:1得黄色液体状的第二中间产物(0.471g,产率38.80%),第二中间产物结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤三、称取1.354g2,4-二甲氧基苯甲酸于100mL圆底烧瓶中,加入3.543g二氯亚砜回流1h,减压旋蒸除去过量二氯亚砜,然后将其加入到溶解1.000g第二中间产物的无水吡啶中,80℃反应2h,冷却到室温加入乙酸乙酯萃取有机相,依次用稀盐酸、水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂,得中间化合物,所述中间化合物不经纯化,将其溶解在吡啶中,加入0.556g预热过的氢氧化钾粉末100℃反应3min,冷却到室温,加入乙酸乙酯萃取有机相,依次用稀盐酸、水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=4:1,得黄色油状的第三产物(0.939g产率51.75%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤四、将0.591g第三中间产物溶解于无水丙酮中,加入0.669g无水碳酸钾回流10min,滴加0.437g香叶基溴,回流3h,冷却旋干溶剂,加入乙酸乙酯萃取有机相,分别水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=10:1,得黄色油状的第四中间产物(0.351g产率43.33%),所述第四中间产物结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤五、将0.330g所述第四中间产物溶解在10mL甲醇中,滴加2滴浓硫酸,回流2h,减压蒸馏出溶剂,加入乙酸乙酯萃取有机相,用饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,采用柱层析,V(石油醚):V(乙酸乙酯)=5:1,得黄色液体状的第五中间产物(0.112g产率35.28%);结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:第五中间产物:IR(KBr):3102,3010,2957,2925,2843,1641,1506,1472,1410,1309,1272,1025,813cm-1。1HNMR(300MHz,Chloroform-d)δ7.57(d,J=9.0Hz,1H),7.33(d,J=9.0Hz,1H),6.73(d,J=8.7Hz,1H),6.67–6.47(m,2H),5.18(t,J=6.3Hz,1H),5.05(t,J=6.6Hz,1H),3.89(s,3H),3.82(s,3H),3.09(d,J=6.6Hz,2H),2.13–1.82(m,4H),1.66(s,3H),1.58(s,3H),1.41(s,3H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ177.518,162.590,159.308,158.579,158.274,154.485,136.043,135.128,131.665,131.139,124.436,124.342,121.791,115.083,114.849,106.487,104.629,101.968,98.839,56.506,55.651,55.482,39.680,26.703,25.637,24.853,17.647,15.906;(ESI)-MS,m/z:505.1759[M+Na]+(理论值505.1758)。步骤六、氩气保护下将0.085mL乙硫醇溶解于2mL六甲基磷酰三胺于0℃搅拌10min,加入0.447mL浓度为2.5M的正丁基锂反应30min,将溶解有0.120g第五中间产物的六甲基磷酰三胺溶液加入到新制备的乙硫基锂中,70℃反应6h,加入4mL饱和氯化铵淬灭反应,用乙酸乙酯萃取有机相,饱和氯化锂洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=6:1,得黄色液体状的目标产物III(0.259g产率32.73%)和IV(0.022g产率19.46%),目标产物III和IV结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:目标产物III:IR(KBr):3428,2977,2915,2887,1635,1474,1392,1275,1063,958,893,813,614cm-1。1HNMR(300MHz,Chloroform-d)δ12.76(s,1H),7.53(d,J=8.7Hz,1H),7.36(d,J=9.0Hz,1H),6.75(d,J=8.7Hz,1H),6.60(m,2H),5.20(t,J=6.3Hz,1H),5.07(t,J=6.5Hz,1H),3.87(s,3H),3.24(d,J=6.5Hz,2H),2.00(m,4H),1.74–1.51(m,9H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ182.977,163.231,161.195,159.363,155.825,151.165,137.184,135.019,131.627,131.466,124.115,121.700,120.608,111.544,111.387,110.813,110.343,107.431,102.522,55.502,39.574,26.518,25.654,24.509,17.690,16.107;(ESI)-MS,m/z:453.1471[M-H]+(理论值453.1496)。目标产物IV:IR(KBr):3458,2962,2925,2850,1644,1619,1472,1394,1307,1270,1230,1030,958,816,644,622cm-1。1HNMR(300MHz,Chloroform-d)δ12.92(s,1H),7.54(d,J=8.7Hz,1H),7.28(s,1H),6.75(d,J=8.8Hz,1H),6.67–6.40(m,2H),5.80(s,1H),5.08(m,2H),3.82(s,3H),3.12(d,J=6.6Hz,2H),2.13–1.84(m,4H),1.66(s,3H),1.58(s,3H),1.44(s,3H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ183.155,161.865,159.444,159.311,158.792,151.895,136.134,134.853,131.664,131.351,124.201,122.296,120.781,114.222,111.174,110.808,110.549,107.386,99.495,55.701,39.614,26.587,25.633,24.201,17.657,15.937;(ESI)-MS,m/z:453.1476[M+H]+(理论值453.1496)。实施例4:具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物,目标产物II、目标产物V、目标产物VI,结构式如下:制备方法如下:步骤一、将9.123g2,6-二羟基苯乙酮溶解于70mL无水丙酮中,于250mL的圆底烧瓶中搅拌3min,加入9.812g无水碳酸钾搅拌8min,用恒压滴液漏斗25min内滴加8.845g硫酸二甲酯,回流反应5h,冷却至室温,用盐酸调节PH值到2,用乙酸乙酯萃取有机相,依次用水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=10:1,得黄色晶体状第一中间产物(9.857g,产率90.32%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤二、将0.8g第一中间产物溶解于醋酸中,缓慢加入0.912gN-溴代丁二酰亚胺70℃反应5h,冷却加入碳酸氢钠直至无气泡产生,加入乙酸乙酯萃取有机相,用饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=8:1得黄色液体状的第二中间产物(0.783g,产率50.21%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤三、称取1.012g2,4-二甲氧基苯甲酸于100mL圆底烧瓶中,加入3.321g二氯亚砜回流0.8h,减压旋蒸除去过量二氯亚砜,然后将其加入到溶解0.821g所述第二中间产物的无水吡啶中,70℃反应1.5h,冷却到室温加入乙酸乙酯萃取有机相,依次用稀盐酸、水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂,得中间化合物,所述中间化合物不经纯化,将其溶解在吡啶中,加入0.421g预热过的氢氧化钾粉末,95℃反应20min,冷却到室温,加入乙酸乙酯萃取有机相,依次用稀盐酸、水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=4:1,得黄色油状的第三产物(1.143g产率50.52%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤四、将0.612g第三中间产物溶解于无水丙酮中,加入0.655g无水碳酸钾回流8min,滴加0.355g香叶基溴,回流2h,冷却旋干溶剂,加入乙酸乙酯萃取有机相,分别水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=10:1,得黄色油状的第四中间产物(0.405g产率41.59%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤五、将0.105g第四中间产物溶解在8mL甲醇中,滴加2滴浓硫酸,回流2h,减压蒸馏出溶剂,加入乙酸乙酯萃取有机相,用饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,采用柱层析,V(石油醚):V(乙酸乙酯)=5:1,得黄色油状液体状的目标产物II(0.036g产率35.61%);目标产物II结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:目标产物II:IR(KBr):3114,2970,2930,2838,1651,1506,1479,1404,1312,1210,1033,831,803cm-1。1HNMR(300MHz,Chloroform-d)δ7.56(d,J=8.7Hz,1H),7.33(d,J=9.1Hz,1H),6.73(d,J=8.8Hz,1H),6.58(m,2H),5.41–5.14(m,1H),5.12–4.82(m,1H),3.99(s,3H),3.88(s,3H),3.82(s,3H),3.09(d,J=6.1Hz,2H),2.13–1.81(m,4H),1.65(s,3H),1.58(s,3H),1.41(s,3H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ177.469,162.591,158.570,158.225,153.615,135.133,132.925,131.622,131.139,124.439,121.746,114.992,114.872,114.083,105.709,104.663,98.878,56.490,55.671,55.487,39.682,26.701,25.632,24.816,17.644,15.908;(ESI)-MS,m/z:527.1405[M+H]+(理论值527.1433)。步骤六、氩气保护下将0.074mL乙硫醇溶解于1mL六甲基磷酰三胺于0℃搅拌8min,加入0.400mL浓度为2M的正丁基锂反应25min,将溶解有0.155g所述目标产物II的六甲基磷酰三胺溶液加入到新制备的乙硫基锂中,60℃反应5h,加入3.5mL饱和氯化铵淬灭反应,用乙酸乙酯萃取有机相,饱和氯化锂洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=6:1,得黄色液体状的目标产物V(0.063g产率20.09%)和VI(0.069g产率15.79%),目标产物V和VI结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:目标产物V:IR(KBr):3448,3027,2925,2848,1703,1641,1394,1384,1305,1162,821,734cm-1。1HNMR(300MHz,Chloroform-d)δ12.84(s,1H),7.67(d,J=8.8Hz,1H),7.36(d,J=9.3Hz,1H),6.71(d,J=8.8Hz,1H),6.66–6.57(m,2H),6.49(s,1H),5.20(t,J=6.0Hz,1H),5.07(t,J=6.6Hz,1H),3.87(s,3H),3.24(d,J=6.6Hz,2H),2.09–1.95(m,4H),1.66(s,3H),1.60(s,3H),1.54(s,3H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ183.060,163.257,161.287,160.113,155.871,152.155,137.949,137.175,131.679,131.461,124.120,121.590,120.642,112.138,111.518,110.957,107.456,102.577,97.749,55.499,39.575,26.521,25.658,24.565,17.693,16.119;(ESI)-MS,m/z:499.1170[M+H]+(理论值:499.1120)。目标产物VI:IR(KBr):3463,3177,2962,2917,2843,1701,1641,1589,1472,1399,1310,1227,1035,956,818,641,619cm-1。1HNMR(300MHz,Chloroform-d)δ13.00(s,1H),7.70(d,J=8.8Hz,1H),7.28(d,J=8.0Hz,1H),6.73(d,J=8.8Hz,1H),6.62–6.43(m,2H),5.93(s,1H),5.09(m,2H),3.82(s,3H),3.13(d,J=6.1Hz,2H),2.19–1.84(m,4H),1.66(s,3H),1.58(s,3H),1.45(s,3H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ183.245,161.964,160.210,159.367,158.817,152.907,137.829,136.157,131.718,131.351,124.207,122.188,120.808,114.188,111.564,111.317,107.400,99.491,97.936,55.688,39.610,26.587,25.635,24.243,17.659,15.951;(ESI)-MS,m/z:499.1090[M+H]+(理论值499.1120)。实施例5:具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物,目标产物II、目标产物V、目标产物VI,结构式如下:制备方法如下:步骤一、将11.00g2,6-二羟基苯乙酮溶解于90mL无水丙酮中,于250mL的圆底烧瓶中搅拌6min,加入10.123g无水碳酸钾搅拌12min,用恒压滴液漏斗35min内滴加9.222g硫酸二甲酯,回流反应7h,冷却至室温,用盐酸调节PH值到2,用乙酸乙酯萃取有机相,依次用水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=10:1,得所述第一中间产物(9.947g,产率90.17%),所述第一中间产物结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤二、将1.221g第一中间产物溶解于醋酸中,缓慢加入1.123gN-溴代丁二酰亚胺于85℃反应7h,冷却加入碳酸氢钠直至无气泡产生,加入乙酸乙酯萃取有机相,用饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=8:1,,得黄色液体状的第二中间产物(0.765g产率52.12%),所述第二中间产物结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤三、称取1.522g2,4-二甲氧基苯甲酸于100mL圆底烧瓶中,加入3.721g二氯亚砜回流1.2h,减压旋蒸除去过量二氯亚砜,然后将其加入到溶解1.2g所述第二中间产物的无水吡啶中,90℃反应2.5h,冷却到室温加入乙酸乙酯萃取有机相,依次用稀盐酸、水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂,得中间化合物,所述中间化合物不经纯化,将其溶解在吡啶中,加入0.621g预热过的氢氧化钾粉末,105℃反应40min,冷却到室温,加入乙酸乙酯萃取有机相,依次用稀盐酸、水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=4:1,得黄色油状的第三中间产物(1.134g产率50.52%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤四、将0.857g第三中间产物溶解于无水丙酮中,加入0.732g无水碳酸钾回流12min,滴加0.545g香叶基溴,回流4h,冷却旋干溶剂,加入乙酸乙酯萃取有机相,分别水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=10:1,得黄色油状的第四中间产物(0.431g产率44.23%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤五、将0.211g第四中间产物溶解在12mL甲醇中,滴加2滴浓硫酸,回流2h,减压蒸馏出溶剂,加入乙酸乙酯萃取有机相,用饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,采用柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=5:1,得黄色液体状的目标产物II(0.034g产率38.61%);目标产物II结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:目标产物II:IR(KBr):3114,2970,2930,2838,1651,1506,1479,1404,1312,1210,1033,831,803cm-1。1HNMR(300MHz,Chloroform-d)δ7.56(d,J=8.7Hz,1H),7.33(d,J=9.1Hz,1H),6.73(d,J=8.8Hz,1H),6.58(m,2H),5.41–5.14(m,1H),5.12–4.82(m,1H),3.99(s,3H),3.88(s,3H),3.82(s,3H),3.09(d,J=6.1Hz,2H),2.13–1.81(m,4H),1.65(s,3H),1.58(s,3H),1.41(s,3H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ177.469,162.591,158.570,158.225,153.615,135.133,132.925,131.622,131.139,124.439,121.746,114.992,114.872,114.083,105.709,104.663,98.878,56.490,55.671,55.487,39.682,26.701,25.632,24.816,17.644,15.908;(ESI)-MS,m/z:527.1405[M+H]+(理论值527.1433)。步骤六、氩气保护下将0.090mL乙硫醇溶解于3mL六甲基磷酰三胺于2℃搅拌12min,加入0.522mL浓度为3M的正丁基锂反应35min,将溶解有0.250g所述目标产物II的六甲基磷酰三胺溶液加入到新制备的乙硫基锂中,80℃反应7h,加入5mL饱和氯化铵淬灭反应,用乙酸乙酯萃取有机相,饱和氯化锂洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=6:1,得黄色液体状的目标产物V(0.065g产率20.11%)和VI(0.056g产率16.85%),目标产物V和VI结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:目标产物V:IR(KBr):3448,3027,2925,2848,1703,1641,1394,1384,1305,1162,821,734cm-1。1HNMR(300MHz,Chloroform-d)δ12.84(s,1H),7.67(d,J=8.8Hz,1H),7.36(d,J=9.3Hz,1H),6.71(d,J=8.8Hz,1H),6.66–6.57(m,2H),6.49(s,1H),5.20(t,J=6.0Hz,1H),5.07(t,J=6.6Hz,1H),3.87(s,3H),3.24(d,J=6.6Hz,2H),2.09–1.95(m,4H),1.66(s,3H),1.60(s,3H),1.54(s,3H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ183.060,163.257,161.287,160.113,155.871,152.155,137.949,137.175,131.679,131.461,124.120,121.590,120.642,112.138,111.518,110.957,107.456,102.577,97.749,55.499,39.575,26.521,25.658,24.565,17.693,16.119;(ESI)-MS,m/z:499.1170[M+H]+(理论值:499.1120)。目标产物VI:IR(KBr):3463,3177,2962,2917,2843,1701,1641,1589,1472,1399,1310,1227,1035,956,818,641,619cm-1。1HNMR(300MHz,Chloroform-d)δ13.00(s,1H),7.70(d,J=8.8Hz,1H),7.28(d,J=8.0Hz,1H),6.73(d,J=8.8Hz,1H),6.62–6.43(m,2H),5.93(s,1H),5.09(m,2H),3.82(s,3H),3.13(d,J=6.1Hz,2H),2.19–1.84(m,4H),1.66(s,3H),1.58(s,3H),1.45(s,3H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ183.245,161.964,160.210,159.367,158.817,152.907,137.829,136.157,131.718,131.351,124.207,122.188,120.808,114.188,111.564,111.317,107.400,99.491,97.936,55.688,39.610,26.587,25.635,24.243,17.659,15.951;(ESI)-MS,m/z:499.1090[M+H]+(理论值499.1120)。实施例6:具有5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮骨架的衍生物,目标产物II、目标产物V、目标产物VI,结构式如下:制备方法如下:步骤一、将10.00g2,6-二羟基苯乙酮溶解于80mL无水丙酮中,于250mL的圆底烧瓶中搅拌5min,加入9.991g无水碳酸钾搅拌10min,用恒压滴液漏斗30min内滴加9.120g硫酸二甲酯,回流反应6h,冷却至室温,用盐酸调节PH值到2,用乙酸乙酯萃取有机相,依次用水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=10:1,得黄色晶体状第一中间产物(9.968g,产率91.27%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤二、将1.000g第一中间产物溶解于醋酸中,缓慢加入1.088gN-溴代丁二酰亚胺N-溴代丁二酰亚胺于80℃反应6h,冷却加入碳酸氢钠直至无气泡产生,加入乙酸乙酯萃取有机相,用饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=8:1得黄色晶体状的第二中间产物(0.804g产率54.25%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤三、称取1.354g2,4-二甲氧基苯甲酸于100mL圆底烧瓶中,加入3.543g二氯亚砜回流1h,减压旋蒸除去过量二氯亚砜,然后将其加入到溶解1.000g第二中间产物的无水吡啶中,80℃反应2h,冷却到室温加入乙酸乙酯萃取有机相,依次用稀盐酸、水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,减压除去溶剂,得中间化合物,所述中间化合物不经纯化,将其溶解在吡啶中,加入0.556g预热过的氢氧化钾粉末100℃反应3min,冷却到室温,加入乙酸乙酯萃取有机相,依次用稀盐酸、水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后进行柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=4:1,得黄色油状的第三产物(1.164g产率52.54%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤四、将0.722g所述第三中间产物溶解于无水丙酮中,加入0.669g无水碳酸钾回流10min,滴加0.437g香叶基溴,回流3h,冷却旋干溶剂,加入乙酸乙酯萃取有机相,分别水、饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=10:1,得黄色油状的第四中间产物(0.411g产率42.79%),结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:步骤五、将0.130g第四中间产物溶解在10mL甲醇中,滴加2滴浓硫酸,回流2h,减压蒸馏出溶剂,加入乙酸乙酯萃取有机相,用饱和食盐水洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,采用柱层析,V(石油醚):V(乙酸乙酯)=5:1,得黄色液体状的目标产物II(0.051g产率40.69%);目标产物II结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:目标产物II:IR(KBr):3114,2970,2930,2838,1651,1506,1479,1404,1312,1210,1033,831,803cm-1。1HNMR(300MHz,Chloroform-d)δ7.56(d,J=8.7Hz,1H),7.33(d,J=9.1Hz,1H),6.73(d,J=8.8Hz,1H),6.58(m,2H),5.41–5.14(m,1H),5.12–4.82(m,1H),3.99(s,3H),3.88(s,3H),3.82(s,3H),3.09(d,J=6.1Hz,2H),2.13–1.81(m,4H),1.65(s,3H),1.58(s,3H),1.41(s,3H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ177.469,162.591,158.570,158.225,153.615,135.133,132.925,131.622,131.139,124.439,121.746,114.992,114.872,114.083,105.709,104.663,98.878,56.490,55.671,55.487,39.682,26.701,25.632,24.816,17.644,15.908;(ESI)-MS,m/z:527.1405[M+H]+(理论值527.1433)。步骤六、氩气保护下将0.085mL乙硫醇溶解于2mL六甲基磷酰三胺于0℃搅拌10min,加入0.447mL浓度为2.5M的正丁基锂反应30min,将溶解有0.197g目标产物II的六甲基磷酰三胺溶液加入到新制备的乙硫基锂中,70℃反应6h,加入4mL饱和氯化铵淬灭反应,用乙酸乙酯萃取有机相,饱和氯化锂洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,之后柱层析V(石油醚):V(乙酸乙酯)=6:1,得黄色液体状的目标产物V(0.075g产率21.18%)和VI(0.063g产率17.80%),目标产物V和VI结构经IR,NMR和MS分析确定,结构式如下:目标产物V:IR(KBr):3448,3027,2925,2848,1703,1641,1394,1384,1305,1162,821,734cm-1。1HNMR(300MHz,Chloroform-d)δ12.84(s,1H),7.67(d,J=8.8Hz,1H),7.36(d,J=9.3Hz,1H),6.71(d,J=8.8Hz,1H),6.66–6.57(m,2H),6.49(s,1H),5.20(t,J=6.0Hz,1H),5.07(t,J=6.6Hz,1H),3.87(s,3H),3.24(d,J=6.6Hz,2H),2.09–1.95(m,4H),1.66(s,3H),1.60(s,3H),1.54(s,3H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ183.060,163.257,161.287,160.113,155.871,152.155,137.949,137.175,131.679,131.461,124.120,121.590,120.642,112.138,111.518,110.957,107.456,102.577,97.749,55.499,39.575,26.521,25.658,24.565,17.693,16.119;(ESI)-MS,m/z:499.1170[M+H]+(理论值:499.1120)。目标产物VI:IR(KBr):3463,3177,2962,2917,2843,1701,1641,1589,1472,1399,1310,1227,1035,956,818,641,619cm-1。1HNMR(300MHz,Chloroform-d)δ13.00(s,1H),7.70(d,J=8.8Hz,1H),7.28(d,J=8.0Hz,1H),6.73(d,J=8.8Hz,1H),6.62–6.43(m,2H),5.93(s,1H),5.09(m,2H),3.82(s,3H),3.13(d,J=6.1Hz,2H),2.19–1.84(m,4H),1.66(s,3H),1.58(s,3H),1.45(s,3H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ183.245,161.964,160.210,159.367,158.817,152.907,137.829,136.157,131.718,131.351,124.207,122.188,120.808,114.188,111.564,111.317,107.400,99.491,97.936,55.688,39.610,26.587,25.635,24.243,17.659,15.951;(ESI)-MS,m/z:499.1090[M+H]+(理论值499.1120)。比较例:选择过往研制出的用于制备治疗宫颈癌的黄酮类化合物A、B,结构式分别如下:下面通过药效学实验来进一步说明其药物活性及其应用。实验一:体外细胞毒性测试:采用实施例3的目标产物(III、IV)和实施例6的目标产物(II、V、VI)作为实验组,采用黄酮类化合物A、B作为对照组,对宫颈癌细胞进行细胞毒性测试。选用宫颈癌细胞株(Hela),采用MTT法,进行体外细胞毒性测试。取对数生长期的Hela细胞以104个/mL的密度接种于96孔板,每孔接种200μL,置于CO2培养箱中培养24小时,然后按预设的浓度梯度加入待测样品(II、III、IV、V、VI、A、B),每一梯度设三个平行孔,同时设立空白(前三孔加不含药的RPMI1640液基200μL,后三孔加不含细胞不含药的RPMI1640液基200μL),培养72小时后,每孔加入20μL的MTT(5mg/mL),然后置于37℃培养箱中温育4小时,抽取上清液后加入200μL的DMSO,震荡10min溶解沉淀,随后用酶标仪检查OD值,波长570nm。用下式求出样品一定浓度下样品对细胞的抑制率:抑制率=[(对照OD-空白OD)-(给药OD-空白OD)]/(对照OD-空白OD)*100%以抑制率对药物浓度作图1,求出每个样品的IC50值,化合物II、III、IV、V、VI的IC50分别为9.51μg/mL、4.90μg/mL、3.74μg/mL、4.11μg/mL、3.49μg/mL,单位转化后结果如表1所示。表1化合物Hela(μmol/L)II21.05III10.85IV8.28V8.25VI7.01A38.8B42.9由表1可示,本发明的目标产物II、III、IV、V、VI的半抑制浓度低于25且均小于A、B,其中目标产物IV、V、VI均低于10,取代活性远好于甲氧基取代黄酮化合物。说明本发明的6位卤代5,2’-二羟基-4’-甲氧基-3-香叶基黄酮衍生物对宫颈癌Hela细胞有明显的生长抑制作用,可用于筛选治疗宫颈癌的药物。尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。
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