酶法制备手性3-羟基四氢呋喃的工艺及醇脱氢酶突变体的制作方法

技术特征：

1.醇脱氢酶突变体，其特征在于：所述醇脱氢酶突变体为，I86V/W110L/L294Q、A85V/I86L/W110Q/L294Q、I86L/W110Q/L294Q/D307Y、I86L/W110Q/L294Q、A85V/I86L/L294Q 、I86L/W110L/L294Q，I86V/L294H和I86L/W110S/L294Q；A85V/I86N/C295N、A85V/I86N/L294V/C295N、I86N/L294V/C295N、I86N/C295N、C295N、C295D 、I86N、I86Q、L294Q/C295N、I86V/W110L/C295N、A85V/I86L/C295N、I86N/C295Q、I86N/C295I、I86N/C295G、I86N/C295H、I86N/C295P、I86N/C295D、I86N/C295M、I86N/C295E、I86N/C295S、I86N/L294V、I86A/L294N，A85V/I86L/W110S，I86Q/C295Q，I86N/C295A或/和I86Q/C295N；所述醇脱氢酶突变体所采用的醇脱氢酶，其野生基因序列来源于嗜热菌（Thermoethanolicus brockii），碱基序列如SEQ ID No:1；该醇脱氢酶的氨基酸序列如 SEQ ID No:2。

2.利用权利要求1所述醇脱氢酶突变体酶法制备手性3-羟基四氢呋喃的工艺，其特征在于：以3-酮基四氢呋喃为底物，该底物在醇脱氢酶突变体、辅因子和辅因子再生体系在缓冲体系中发生生物催化反应生成手性3-羟基四氢呋喃。

3.如权利要求2所述利用醇脱氢酶突变体酶法制备手性3-羟基四氢呋喃的工艺，其特征在于：所述手性3-羟基四氢呋喃为S-3-羟基四氢呋喃或R-3-羟基四氢呋喃。

4.如权利要求2所述利用醇脱氢酶突变体酶法制备手性3-羟基四氢呋喃的工艺，其特征在于：所述工艺的具体操作方法为：①、配制反应体系：反应体系中包括，磷酸盐缓冲液，5~50 mmol/L的3-酮基四氢呋喃作为底物和10%异丙醇，醇脱氢酶突变体的粗酶液和0.01~0.1 mmol/L的辅因子；②、将反应体系置于25～37℃的条件下进行反应，得到手性3-羟基四氢呋喃。

5.如权利要求4所述利用醇脱氢酶突变体酶法制备手性3-羟基四氢呋喃的工艺，其特征在于：所述磷酸盐缓冲液的pH值为为7.0~8.0，浓度为50~100 mmol/L。

6.如权利要求2-5其中之一所述利用醇脱氢酶突变体酶法制备手性3-羟基四氢呋喃的工艺，其特征在于：所述辅因子为NAD⁺或NADP⁺。

7.如权利要求6所述利用醇脱氢酶突变体酶法制备手性3-羟基四氢呋喃的工艺，其特征在于：所述辅因子以异丙醇为底物通过醇脱氢酶突变体的自催化进行再生。

8.如权利要求1所述的醇脱氢酶突变体，其特征在于： 所述醇脱氢酶突变体在催化杂环醇类化合物中的应用，该类杂环醇类化合物的结构式为 或。