本发明涉及小分子化合物以及它们在治疗疾病中的用途，所述疾病特别是病毒疾病，特别是丙型肝炎病毒(HCV)。
背景技术：
全世界大约2亿人患有慢性HCV。该病原体是急性肝炎和包括肝硬化和肝癌的慢性肝病的主要原因，并因此HCV是肝移植的主要适应征[1]。HCV是一种包膜的正链RNA病毒，肝炎病毒属中黄病毒科中的一员。HCV与包括影响人类疾病的若干病毒诸如登革病毒和黄热病病毒的黄病毒属密切相关[2]。七种主要HCV基因型和多种亚型已被描述，其核苷酸序列的差异多达～30％[3,4]。单链9.6kb基因型由单一开放阅读框(ORF)组成，该开放阅读框通过对于病毒转译和病毒复制两者很重要的高度结构化的保守非转译区(NTR)而位于5'和3'端两侧。在5'端，约340核苷酸长的NTR序列含有指导与帽结构无关的转译的内部核糖体进入位点(IRES)。病毒多蛋白被共转译和后转译地加工为10种病毒蛋白(核心、E1、E2、p7、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A以及NS5B)。HCV 5'NTR和其IRES的特点是形成与宿主细胞小核糖体亚单位(40S)和真核起始因子(eIF)的络合物，引起对病毒起始密码子的识别，从而开始病毒蛋白合成[6]。
随着研究HCV的各种细胞培养模型的发展，已经取得了很大进展。最近，探究病毒生命周期、进入、病毒RNA复制、感染性病毒粒子形成(包装、组装、释放)以及分别使用拟粒子(HCVpp)[11]、亚基因组复制子细胞[12]、感染细胞培养系统(HCVcc)[13]和转基因小鼠[14]的体内感染的所有步骤已变得可行。其中，亚基因组复制子系统的发展是最重要的进步，因为这是第一次可利用基于细胞的分析来评估可能的抗病毒治疗。HCV亚基因组复制子由HCV RNA组成，其中HCV结构区被新霉素磷酸转移酶基因替换且病毒蛋白NS3-NS5的转译由在5'和3'NTR两侧的脑心肌炎病毒(EMCV)IRES元素指导。已经在各种肝和非肝、人和非人细胞系中建立了稳定的HCV RNA复制，这些细胞系是研究HCV生命周期和验证新型抗病毒剂的优良工具[12,15-17]。
尽管在不断努力研发有效地抗HCV的新药，但患者还是主要用聚乙二醇化干扰素α(PEG-IFN)和利巴韦林(RBV)的病毒非特异性组合疗法来治疗。该治疗较昂贵，与严重的副作用有关，且仅对50-60％的感染有HCV基因型1的患者有效[18]。自2011年初起，FDA批准了两种靶向病毒NS3蛋白酶的直接作用的抗病毒药物(DAA)。不幸的是，两种药物都会诱发严重的副作用，具有较低的电阻屏障，且给药方式对患者不方便[19]。此外，在一定程度上，抗病毒性可能成为一个问题，且由于潜在的HCV基因型特异性，不清楚是否覆盖了所有7种HCV基因型和它们的亚型[20]。因此，主要目的是明确具有显著更高的覆盖所有HCV基因型的抗性的基因屏障的靶标。其他挑战包括逃逸突变体的出现、目前治疗方案成本较高以及它们的副作用。通过组合治疗可以避免通过免疫系统拦截对抗基于IFN的治疗[21]以及通过抗性赋予突变对抗DAA如替拉瑞韦(telaprevir)和伯克匹韦(boceprevir)的机制。虽然靶向病毒的药物在临床试验中，但仍存在对新HCV治疗剂的医疗需要。特别地，需要具有针对大部分HCV基因型和它们的亚型(例如1a/b、2a/b、3a/b、4a/b等)的广泛活性的HCV治疗剂。还特别需要不易有病毒药物抗性的药剂。
技术实现要素：
已发现根据本发明的分子式I化合物和分子式II化合物具有针对所有主要HCV基因型的有用活性。另外，已证明根据本发明的化合物具有针对抗药性病毒(蛋白酶、NS5A和聚合酶)的显著抗病毒活性。
使用根据本发明的化合物和所选择HCV特异性的FDA已批准和FDA尚未批准的DAA的药物组合实验显示出使它们非常适合满足目前对HCV药剂的需要的有利性质。
本发明的目的在于找到具有抗病毒活性的化合物。
本发明的目的还在于找到针对病毒疾病特别是HCV有效的化合物。
具体实施方式
在描述本发明时，根据元素周期表确定化学元素。本文中使用的缩写和符号与化学和生物学领域的技术人员通常使用的这类缩写和符号一致。具体地，在实施例和整个说明书中可能使用以下缩写。
g(克)； mg(毫克)；
kg(千克)； μg(微克)；
L(升)； mL(毫升)；
μL(微升)； psi(磅每平方英寸)；
M(摩尔)； mM(毫摩尔)；
μM(微摩尔)； nM(纳摩尔)；
pM(皮摩尔)； nm(纳米)；
mm(毫米)； wt(重量)；
N(正常)； CFU(菌落形成单位)；
i.v.(静脉内)； Hz(赫兹)；
MHz(兆赫)； mol(摩尔)；
mmol(毫摩尔)； RT(室温)；
min(分钟)； h(小时)；
b.p.(沸点)； TLC(薄层色谱法)；
Tr(保留时间)； RP(反相)；
MeOH(甲醇)； i-PrOH(异丙醇)；
TEA(三乙胺)； TFA(三氟乙酸)；
TFAA(三氟乙酸酐)； THF(四氢呋喃)；
DMSO(二甲亚砜)； EtOAc(乙酸乙酯)；
DME(1,2-二甲氧基乙烷)； DCM(二氯甲烷)；
DCE(二氯乙烷)； DMF(N,N-二甲基甲酰胺)；
DMPU(N,N’-二甲基亚丙基脲)； CDI(1,1-羰二咪唑)；
IBCF(氯甲酸异丁酯)； AcOH(乙酸)；
THP(四氢吡喃)； NMM(N-甲基吗啡啉)；
Pd/C(钯/碳)； MTBE(叔丁基甲基醚)；
HOBT(1-羟基苯并三唑)； mCPBA(间氯过氧苯甲酸)；
EDC(1-[3-二甲氨基]丙基-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)；
DCC(二环己基碳二亚胺)； CBZ(苄氧羰基)；
Ac(乙酰基)； atm(大气压)；
TMSE(2-(三甲基硅烷基)乙基)； TMS(三甲基硅烷基)；
TIPS(三异丙基硅烷基)； TBS(叔丁基二甲基硅基)；
DMAP(4-二甲基氨基吡啶)； BSA(牛血清白蛋白)；
NAD(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)； HPLC(高压液相色谱)；
LC/MS(液相色谱/质谱)；
BOP(双(2-氧代-3-噁唑烷基)次磷酰氯)； TBAF(四正丁基氟化铵)；
HBTU(O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯)；
HEPES(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸)；
DPPA(叠氮基磷酸二苯酯)； LAH(氢化铝锂)；
NaOMe(甲氧基钠)； EDTA(乙二胺四乙酸)；
TMEDA(N,N,N',N'-四甲基-1,2-乙二胺)；
NBS(N-溴代琥珀酰亚胺)； DIPEA(二异丙基乙胺)；
Dppf(1,1'-双(二苯基膦)二茂铁)；以及 NIS(N-碘代丁二酰亚胺)。
所有醚指的是二乙醚，且盐水指的是NaCl的饱和水溶液。
术语和定义
“烷基”指的是具有指定数量的成员碳原子的单价饱和烃链。例如，C1-C7烷基指的是具有1-7个成员碳原子的烷基。烷基可以由如本文限定的一种或多种取代基可选地取代。烷基可以是直链的或支链的。代表性支链烷基具有一个、两个或三个支链。在一种实施方式中，“烷基”指的是C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、C12、C13、C14、C15、C16、C17、C18、C19、C20、C21、C22、C23和/或C24烷基以及前述中任意种的组合，包括范围C1-C4烷基、C2-C4烷基、C2-C12烷基、C3-C6烷基、C3-C12烷基、C4-C6烷基、C4-C8烷基、C4-C10烷基、C4-C12烷基、C5-C8烷基、C5-C10烷基、C5-C12烷基、C5-C14烷基、C6-C8烷基、C6-C10烷基、C6-C12烷基。
“烯基”指的是具有指定数量的成员碳原子并且链内具有一个或多个碳碳双键的不饱和烃链。例如，C2-C6烯基指的是具有2-6个成员碳原子的烯基。在某些实施方式中，烯基在链内具有一个碳碳双键。在其他实施方式中，烯基在链内具有超过一个的碳碳双键。烯基可用如本文中限定的一种或多种取代基可选地取代。烯基可以是直链的或支链的。根据本发明的有用烯基的示例为C2-C10、C2-C9、C2-C8、C2-C7、C2-C6、C2-C5和C2-C4烯基。
“烷氧基”指的是通过氧桥(即，–O-C1-C6烷基，其中C1-C6是本文中所限定的)附接的烷基部分。这种基团的示例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基以及己氧基。
“炔基”指的是具有指定数量的成员碳原子且链内具有一个或多个碳碳三键的不饱和烃链。例如，C2-C6烃基指的是具有2-6个成员原子的炔基。炔基可以由一种或多种取代基可选地取代。根据本发明的有用炔基的示例为C2-C10、C2-C9、C2-C8、C2-C7、C2-C6、C2-C5和C2-C4炔基。
“芳基”指的是芳香烃环系统。芳基是单环系统或双环系统。单环芳基环指的是苯基。双环芳基环指的是萘基和其中苯基稠合至具有5、6或7个成员碳原子的环烷基或环烯基环的环。芳基可以由如本文中限定的一种或多种取代基可选地取代。合适的取代基的示例包括但不限于羟基、卤素、氰基、磺酰基(sulfonyl)、一种或多种其它芳基、C1-C5烷基、C1-C4烷氧基、氧代基(oxo)、C3-C6环烷基、杂芳基、杂环烷基、C1-C3烷硫基(sulfanyl)。
“环烷基”指的是具有指定数量的成员碳原子的饱和烃环。环烷基是单环系统。例如，C3-C7环烷基指的是具有3-6个成员原子的环烷基。环烷基可以由如本文中限定的一种或多种取代基可选地取代。环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。合适的取代基的示例包括但不限于羟基、卤素、氰基、磺酰基、一种或多种其它芳基、C1-C5烷基、C1-C4烷氧基、氧代基、C3-C6环烷基、杂芳基、杂环烷基、C1-C3烷硫基。
“Boc”指的是叔丁氧羰基。
“环烯基”指的是具有指定数量的成员碳原子并且环内具有碳碳双键的不饱和烃环。例如，C3-C6环烯基指的是具有3-6个成员碳原子的环烯基。环烯基环不是芳香族的。环烯基是单环系统。环烯基可以由如本文中限定的一种或多种取代基可选地取代。
“卤素(halo)”指的是卤素基氟(fluoro)、氯(chloro)、溴(bromo)和碘(iodo)。
“卤代烷基”指的是其中与烷基内的成员原子附接的至少一个氢原子被卤素取代的烷基。卤素取代基的数量包括但不限于1、2、3、4、5或6个取代基。卤代烷基包括单氟甲基、二氟乙基和三氟甲基。
“杂芳基”指的是含有1-5、适当地1-4、更适当地1或2个杂原子作为环中的成员原子的芳香环。含有多于一个杂原子的杂芳基可以含有不同杂原子。杂芳基可以由如本文中限定的一种或多种取代基可选地取代。杂芳基是单环系统或稠合双环系统。单环杂芳基环具有5-6个成员原子。双环杂芳基环具有8-10个成员原子。双环杂芳基环包括其中主杂芳环和次级单环环烷基、环烷烯基、杂环烷基、芳基或杂芳基环附接形成稠合双环系统的那些环。其中，杂芳基包括吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、呋喃基、呋咱基、噻吩基、三唑基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、三嗪基、四嗪基、四唑基、吲哚基、异吲哚基、吲哚嗪基、吲哚唑基、嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、蝶啶基、噌啉基、苯并咪唑基、苯并吡喃基、苯并噁唑基、苯并异唑基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并噻吩基、呋喃并吡啶基、萘啶基、吡唑并吡啶基、吡唑并嘧啶基、3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶基和3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶基。
“杂原子”指的是氮、硫或氧原子。
“杂环烷基”指的是环中含有1-4个杂原子作为成员原子的饱和或不饱和环。杂环烷基环不是芳香族的。含有多于一个杂原子的杂环烷基可以含有不同杂原子。杂环烷基可以由如本文中限定的一种或多种取代基可选地取代。杂环烷基是单环系统或是稠合、螺环或桥联双环系统。单环杂芳基环具有4-7个成员原子。双环杂芳环具有7-11个成员原子。其中，杂环烷基包括吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、吡喃基、四氢吡喃基、二氢吡喃基，四氢噻吩基，吡唑烷基，噁唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、高哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫吗啉基、1-吡唑烷基、吖庚因基(azepinyl)、1,3-二氧杂环己基(dioxanyl)、1,4-二氧杂环己基、1,3-氧硫杂环戊基(oxathiolanyl)、1,3-二噻烷基(dithianyl)、氮杂环丁烷(azetidinyl)、异噁唑烷基(isoxazolidinyl)、3-氮杂双环[3.1.0]己基、氮杂双环[3.2.1]辛基、氮杂双环[3.3.1]壬基、氮杂双环[4.3.0]壬基、2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚基、八氢吡咯[1,2-a]吡嗪基、八氢吡嗪[2,1-c][1,4]噁嗪基、氧杂二环[2.2.1]庚基、六氢-1H-吖庚因基-2,3,4,7-四氢-1H-吖庚因基、氧杂二环[2.2.1]庚基、四氢-5H-[1,3]二氧杂环戊并[4,5-c]吡咯基、四氢-1H-呋喃[3,4-c]吡咯-93H)-基、六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-(1H)-基、八氢吡嗪并[1,2-吖庚因-(1H)-基、六氢吡嗪并[2,1-c][1,4]噁嗪-(1H)-基、六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-(1H)-基、10-氧杂-4-氮杂三环[5.2.1.02.6]癸基、八氢-1(2H)-喹喔啉基、八氢-1H-环戊[b]吡嗪基、六氢呋喃[3,4-b]吡嗪-(2H)-基、八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶基、4,7-二氮杂螺[2.5]辛基和5-氮杂螺[2.4]庚基。
“成员原子”指的是形成链或环的一个原子或多个原子。在链中以及环内存在多于一个成员原子的情况下，每个成员原子与该链或环中的相邻成员原子共价结合。组成链或环上的取代基的原子不是该链或环中的成员原子。
“可选地取代的”指诸如烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、环烯基、杂环烷基或杂芳基等基团可以是未取代的，或者基团可以由如本文中所限定的一种或多种取代基取代。
“药学上可接受的”指的是在可靠的医学判断范围内，适合用于与人类或动物的组织接触而没有过度毒性、刺激或其他问题或并发症，与合理的收益/风险比相应的那些化合物、材料、组合物以及剂型。
涉及基团的“取代的”指与基团内的成员原子附接的一个或多个氢原子由选自所限定或适合的取代基中的取代基替代。应理解术语“取代的”包括下述隐含条件：这种取代应与取代的原子和取代基的允许化合价一致并且取代导致稳定的化合物。当陈述基团可以含有一个或多个取代基时，该基团内的一个或多个成员原子可以被取代。另外，只要这种取代与原子的允许化合价一致，该基团内的单个成员原子就可以由多于一种取代基取代。
化合物
在一个方面，本发明涉及根据分子式I的化合物：
U是芳基或杂芳基，优选噻吩或苯基；
W是芳基或杂芳基，优选噻吩或苯基。
RO和RP在每次出现时，各自独立地选自以下组成的组：H、C1-C5烷基、C1-C5烯基、C1-C5炔基、C3-C6环烷基、杂环烷基、杂芳基、苯基；附带条件是当RO或RP中的一个是H时，那么RO或RP中的另一个不是甲基，或者附带条件是该化合物不是如表1中所示的化合物1；
或者，RO和RP连接在一起，形成由1至4个RI基团可选地取代的环烷基、环烯基或杂环烷基；其中，RI选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基(优选C1-C3烷基)、C1-C3烷硫基、C1-C4烷氧基(优选C1-C3烷氧基)、C1-C3卤代烷基、羟基、氧代基、-NRaRb、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、磺酰基、亚砜、(CH2)pOH、(CH2)pORa、(CH2)pNRGRH、(CH2)pOC(O)NRaRb、(CH2)pC(O)NRaRb、C3-C6环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、苯基；
Ra和Rb在每次出现时，各自独立地选自以下组成的组：氢、C1-C6烷基、取代的C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基、可选地具有端基–NH2或–NH-Boc的含–O-、-C(O)NH-、-NHC(O)-、-N-或-NHC(O)O-中的一种或若干种的C6-C14烷基链；C1-C6烯基、取代的C1-C6烯基、C1-C6炔基、取代的C1-C6炔基、C3-C7环烷基、取代的C3-C7环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环烷基、取代的杂环烷基；或者
Ra和Rb与它们所键合的氮原子一起形成由一个或多个C1-C3烷基、苄基、苯基、C1-C3烷氧基或卤素可选地取代的4元至10元饱和或不饱和杂环；
Rc选自以下组成的组：氢、C1-C10烷基(优选C1-C6烷基)、C1-C10烯基(优选C1-C6烯基)、C1-C10炔基(优选C1-C6炔基)、C3-C10环烷基(优选C3-C7环烷基)、C1-C3卤代烷基、芳基、杂芳基、杂环烷基，其中，前述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环烷基中的每一种可以由羟基、卤素、烷氧基、氧代基、磺酰基、亚砜、芳基、杂芳基或–NRaRb中的一种或多种取代；
RG选自以下组成的组：H、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C6环烷基、杂环烷基、杂芳基、苯基；
RH选自以下组成的组：H、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C6环烷基、杂环烷基、杂芳基、苯基；或者
RG和RH与它们所键合的氮原子一起形成由一个或多个C1-C3烷基、苄基、苯基、C1-C3烷氧基或卤素可选地取代的4元至10元饱和或不饱和杂环；
X是O、S或N-CN；
Y是NH、O、–C(O)NH-或键；
n是0-3的整数，优选0、1、2或3；
并且p是0-5的整数，优选0、1、2、3、4或5。
应注意本发明还涉及这些化合物以及下文进一步示出和描述的化合物的药学上可接受的盐。
一种实施方式涉及根据分子式(Ia)的化合物：
其中
U选自
RA选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基、C3-C6环烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、C1-C3烷硫基、苯基、杂芳基、-NRGRH；
RB选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基、C3-C6环烷基、C1-C3烷氧基、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、C1-C3卤代烷基、C1-C3烷硫基、苯基、杂芳基、-NRGRH；
或者RA和RB连接在一起，形成由一至四个RI基团可选地取代的环烷基、芳基、杂芳基或杂环烷基；
RC选自以下组成的组：H；卤素；氰基；-C(O)NRaRb；-C(O)Rc；-C(O)ORc；C1-C3烷硫基；磺酰基；亚砜；苯基；芳基；杂芳基；C1-C5烷基；C1-C5烯基；C1-C5炔基；由羟基、烷氧基或-NRaRb取代的C1-C5烷基、烯基或炔基；C3-C6环烷基；C1-C3烷氧基；C1-C3卤代烷基；-NRGRH；
RD选自以下组成的组：卤素、氰基、C1-C5烷基、C3-C6环烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3烷硫基、苯基、芳基、杂芳基、-NRGRH、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、磺酰基、亚砜；
RE选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基、C3-C6环烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3烷硫基、苯基、杂芳基、-NRGRH、-CH2NRMRN；
RF选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基、C3-C6环烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3烷硫基、苯基、杂芳基、-NRGRH；
或者RE和RF连接在一起，形成由一至四个RI基团可选地取代的环烷基、杂芳基或杂环烷基；
RG选自以下组成的组：H、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C6环烷基、杂环烷基、杂芳基、苯基；
RH选自以下组成的组：H、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C6环烷基、杂环烷基、杂芳基、苯基；或者
RG和RH与它们所键合的氮原子一起形成由一个或多个C1-C3烷基、苄基、苯基、C1-C3烷氧基或卤素可选地取代的4元至10元饱和或不饱和杂环；
RI选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基(优选C1-C3烷基)、C1-C3烷硫基、C1-C4烷氧基(优选C1-C3烷氧基)、C1-C3卤代烷基、羟基、氧代基、-NRaRb、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、磺酰基、亚砜、(CH2)pOH、(CH2)pORa、(CH2)pNRGRH、(CH2)pOC(O)NRaRb、(CH2)pC(O)NRaRb、C3-C6环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、苯基；
RO和RP在每次出现时，各自独立地选自以下组成的组：H、C1-C5烷基、C1-C5烯基、C1-C5炔基、C3-C6环烷基、杂环烷基、杂芳基、苯基；附带条件是当RO或RP中的一个是H时，那么RO或RP中的另一个不是甲基；或者附带条件是该化合物不是如表1中所示的化合物1；
或者RO和RP连接在一起，形成由如上所限定的一至四个RI基团可选地取代的环烷基、环烯基或杂环烷基；
RM和RN在每次出现时，各自独立地选自以下组成的组：H；C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C3卤代烷基、苯基、芳基、杂芳基；-NRGRH；-C(O)NRaRb；-C(O)Rc；-C(O)ORc；磺酰基；亚砜；由羟基、烷氧基或–NRaRb取代的C1-C6烷基，苯基；-NRGRH；-C(O)NRaRb；-C(O)Rc；-C(O)ORc；磺酰基；亚砜；
或者RM和RN与它们所附接的N原子连接在一起，形成杂环烷基；
Ra和Rb在每次出现时，各自独立地选自以下组成的组：氢、C1-C6烷基、取代的C1-C6烷基、C1-C6烷氧基C1-C6烷基、可选地具有端基NH2或–NH-Boc的含–O-、-C(O)NH-、-NHC(O)-、-N-或-NHC(O)O-中的一种或若干种的C6-C14烷基链；C1-C6烯基、取代的C1-C6烯基、C1-C6炔基、取代的C1-C6炔基、C3-C7环烷基、取代的C3-C7环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环烷基、取代的杂环烷基；或者
Ra和Rb与它们所键合的氮原子一起形成4元至10元饱和或不饱和杂环，该杂环由一个或多个C1-C3烷基、苄基、苯基、C1-C3烷氧基或卤素可选地取代；
Rc选自以下组成的组：氢、C1-C10烷基(优选C1-C6烷基)、C1-C10烯基(优选C1-C6烯基)、C1-C10炔基(优选C1-C6炔基)、C3-C10环烷基(优选C3-C7环烷基)、C1-C3卤代烷基、芳基、杂芳基、杂环烷基，其中，前述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环烷基中的每一种可以由羟基、卤素、烷氧基、氧代基、磺酰基、亚砜、芳基、杂芳基或–NRaRb中的一种或多种取代；
X是O、S或N-CN；
Y是NH、O、–C(O)NH-或键；
n是0-3的整数，优选0、1、2或3；
p是0-5的整数，优选0、1、2、3、4或5。
在一种实施方式中，Y是NH。
一种实施方式涉及根据分子式(Ib)的化合物：
其中RC、RD、RE、RF、RO、RP和n如上文所限定，且其中
RQ表示取代基，在每次出现时独立地选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基、C3-C6环烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3烷硫基、苯基、芳基、杂芳基、-NRGRH、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、磺酰基、亚砜、(CH2)pOH、(CH2)pORa、(CH2)pNRGRH、(CH2)pOC(O)NRaRb、(CH2)pC(O)NRaRb；
RG、RH、Ra、Rb和Rc具有如上所限定的相同含义；
m是0-2的整数，优选0、1或2；
n是0-3的整数，优选0、1、2或3；
p是0-5的整数，优选0、1、2、3、4或5；
q是1-3的整数，优选1、2或3；
一种实施方式涉及根据分子式(Ic)的化合物：
其中，Rc选自以下组成的组：C1-C10烷基、C1-C10烯基、C1-C10炔基、C3-C10环烷基、C1-C3卤代烷基、芳基、杂芳基、杂环烷基，其中，前述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环烷基中的每一种可以由羟基、卤素、烷氧基、氧代基、磺酰基、亚砜、芳基、杂芳基或–NRaRb中的一种或多种取代；
RM和RN各独立地选自以下组成的组：H；C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C3卤代烷基、苯基；芳基；杂芳基；-NRGRH；-C(O)NRaRb；-C(O)Rc；-C(O)ORc；磺酰基；亚砜；由羟基、烷氧基、–NRaRb、苯基、-NRGRH、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、磺酰基或亚砜取代的C1-C6烷基；
或者RM和RN与它们所附接的N原子连接在一起，形成杂环烷基；
其中，RA、RB、RD、RO、RP、RG、RH、Ra、Rb和Rc具有如上所限定的相同含义。
一种实施方式涉及根据分子式(Id)的化合物：
Rc选自：C1-C10烷基、C1-C10烯基、C1-C10炔基、C3-C10环烷基、C1-C3卤代烷基、-芳基、杂芳基、杂环烷基，其中，前述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环烷基中的每一种可以由羟基、卤素、烷氧基、氧代基、磺酰基、亚砜、芳基、杂芳基或–NRaRb中的一种或多种取代；
RM和RN各自独立地选自以下组成的组：H；C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C3卤代烷基、苯基；芳基；杂芳基；-NRGRH；-C(O)NRaRb；-C(O)Rc；-C(O)ORc；磺酰基；亚砜；由羟基、烷氧基、–NRaRb、苯基、-NRGRH、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、磺酰基或亚砜取代的C1-C6烷基；
或者RM和RN与它们所附接的N原子连接在一起，形成杂环烷基；
RQ表示取代基，在每次出现时独立地选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基、C3-C6环烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3烷硫基、苯基、芳基、杂芳基、-NRGRH、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、磺酰基、亚砜、(CH2)pOH、(CH2)pORa、(CH2)pNRGRH、(CH2)pOC(O)NRaRb、(CH2)pC(O)NRaRb；
其中，RA、RB、RD、RG、RH、RO、RP、Ra、Rb和Rc具有如上所限定的相同含义；
m是0-2的整数，优选0、1或2；
p是0-5的整数，优选0、1、2、3、4或5；
q是1-3的整数，优选1、2或3。
一种实施方式涉及根据分子式(Ie)的化合物：
Rc选自：C1-C10烷基、C1-C10烯基、C1-C10炔基、C3-C10环烷基、C1-C3卤代烷基、芳基、杂芳基、杂环烷基，其中，前述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环烷基中的每一种可以由羟基、卤素、烷氧基、氧代基、磺酰基、亚砜、芳基、杂芳基或–NRaRb中的一种或多种取代；
RM选自以下组成的组：H；C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C3卤代烷基、苯基；芳基；杂芳基；-NRGRH；-C(O)NRaRb；-C(O)Rc；-C(O)ORc；磺酰基；亚砜；由羟基、烷氧基、–NRaRb、苯基、-NRGRH、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、磺酰基或亚砜取代的C1-C6烷基；
RR表示-取代基，在每次出现时独立地选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基、C3-C6环烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3烷硫基、苯基、芳基、杂芳基、-NRGRH、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、磺酰基、亚砜、(CH2)pOH、(CH2)pORa、(CH2)pNRGRH、(CH2)pOC(O)NRaRb、(CH2)pC(O)NRaRb；
其中，RA、RB、RD、RG、RH、RO、RP、Ra、Rb和Rc具有如上所限定的相同含义；
k是0-2的整数，优选0、1或2；
p是0-5的整数，优选0、1、2、3、4或5；
r是1-3的整数，优选1、2或3。
一种实施方式涉及根据分子式(If)的化合物：
Rc选自以下组成的组：C1-C10烷基、C1-C10烯基、C1-C10炔基、C3-C10环烷基、C1-C3卤代烷基、-芳基、杂芳基、杂环烷基，其中，前述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环烷基中的每一种可以由羟基、卤素、烷氧基、氧代基、磺酰基、亚砜、芳基、杂芳基或–NRaRb中的一种或多种取代；
RM选自以下组成的组：H；C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C3卤代烷基、苯基；芳基；杂芳基；-NRGRH；-C(O)NRaRb；-C(O)Rc；-C(O)ORc；磺酰基；亚砜；由羟基、烷氧基、–NRaRb、苯基、-NRGRH、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、磺酰基或亚砜取代的C1-C6烷基；
RQ和RR表示取代基，在每次出现时独立地选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基、C3-C6环烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3烷硫基、苯基、芳基、杂芳基、-NRGRH、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、磺酰基、亚砜、(CH2)pOH、(CH2)pORa、(CH2)pNRGRH、(CH2)pOC(O)NRaRb、(CH2)pC(O)NRaRb；
其中，RD、RG、RH、RO、RP、Ra、Rb和Rc具有如上所限定的相同含义；
m是0-2的整数，优选0、1或2；
k是0-2的整数，优选0、1或2；
p是0-5的整数，优选0、1、2、3、4或5；
q是1-3的整数，优选1、2或3；以及
r是1-3的整数，优选1、2或3。
一种实施方式涉及根据分子式(Ig)的化合物：
其中
RA选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基、C3-C6环烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、C1-C3烷硫基、苯基、杂芳基、-NRGRH；
RB选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基、C3-C6环烷基、C1-C3烷氧基、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、C1-C3卤代烷基、C1-C3烷硫基、苯基、杂芳基、-NRGRH；
或者RA和RB连接在一起，形成由一至四个RI基团可选地取代的环烷基、芳基、杂芳基或杂环烷基；
RD为取代基，在每次出现时独立地选自以下组成的组：卤素、氰基、C1-C5烷基、C3-C6环烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3烷硫基、苯基、芳基、杂芳基、NRGRH、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、磺酰基、亚砜；
RG选自以下组成的组：H、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C6环烷基、杂环烷基、杂芳基、苯基；
RH选自以下组成的组：H、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C6环烷基、杂环烷基、杂芳基、苯基；或者
RG和RH与它们所键合的氮原子一起形成由一个或多个C1-C3烷基、苄基、苯基、C1-C3烷氧基或卤素可选地取代的4元至10元饱和或不饱和杂环；
RI选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基(优选C1-C3烷基)、C1-C3烷硫基、C1-C4烷氧基(优选C1-C3烷氧基)、C1-C3卤代烷基、羟基、氧代基、-NRaRb、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、磺酰基、亚砜、(CH2)pOH、(CH2)pORa、(CH2)pNRGRH、(CH2)pOC(O)NRaRb、(CH2)pC(O)NRaRb、C3-C6环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、苯基；
RO和RP在每次出现时，各自独立地选自以下组成的组：H、C1-C5烷基、C1-C5烯基、C1-C5炔基、C3-C6环烷基、杂环烷基、杂芳基、苯基，附带条件是当RO或RP中的一个是H时，那么RO或RP中的另一个不是甲基；
或者RO和RP连接在一起，形成由如上所限定的一至四个RI基团可选地取代的环烷基、环烯基或杂环烷基；
RM和RN在每次出现时，各自独立地选自以下组成的组：H；C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C3卤代烷基、苯基、芳基、杂芳基；-NRGRH；-C(O)NRaRb；-C(O)Rc；-C(O)ORc；磺酰基；亚砜；由羟基、烷氧基或–NRaRb取代的C1-C6烷基，苯基；-NRGRH；-C(O)NRaRb；-C(O)Rc；-C(O)ORc；磺酰基；亚砜；
或者RM和RN与它们所附接的N原子连接在一起，形成杂环烷基；
Ra和Rb在每次出现时，各自独立地选自以下组成的组：氢、C1-C6烷基、取代的C1-C6烷基、C1-C6烷氧基C1-C6烷基、可选地具有端基NH2或–NH-Boc的含–O-、-C(O)NH-、-NHC(O)-、-N-或-NHC(O)O-中的一种或若干种的C6-C14烷基链；C1-C6烯基、取代的C1-C6烯基、C1-C6炔基、取代的C1-C6炔基、C3-C7环烷基、取代的C3-C7环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环烷基、取代的杂环烷基；或者
Ra和Rb与它们所键合的氮原子一起形成4元至10元饱和或不饱和杂环，该杂环由一个或多个C1-C3烷基、苄基、苯基、C1-C3烷氧基或卤素可选地取代；
Rc选自以下组成的组：氢、C1-C10烷基(优选C1-C6烷基)、C1-C10烯基(优选C1-C6烯基)、C1-C10炔基(优选C1-C6炔基)、C3-C10环烷基(优选C3-C7环烷基)、C1-C3卤代烷基、芳基、杂芳基、杂环烷基，其中，前述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环烷基中的每一种可以由羟基、卤素、烷氧基、氧代基、磺酰基、亚砜、芳基、杂芳基或–NRaRb中的一种或多种取代。
i是0-3的整数，优选0、1、2或3；
j是0-2的整数，优选0、1或2；以及
p是0-5的整数，优选0、1、2、3、4或5。
一种实施方式涉及根据分子式(Ih)的化合物：
RA选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基、C3-C6环烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、C1-C3烷硫基、苯基、杂芳基、-NRGRH；
RB选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基、C3-C6环烷基、C1-C3烷氧基、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、C1-C3卤代烷基、C1-C3烷硫基、苯基、杂芳基、-NRGRH；
或者RA和RB连接在一起，形成由一至四个RI基团可选地取代的环烷基、芳基、杂芳基或杂环烷基；
RC选自以下组成的组：H；卤素；氰基；-C(O)NRaRb；-C(O)Rc；-C(O)ORc；C1-C3烷硫基；磺酰基；亚砜；苯基；芳基；杂芳基；C1-C5烷基；C1-C5烯基；C1-C5炔基；由羟基、烷氧基或-NRaRb取代的C1-C5烷基、烯基或炔基；C3-C6环烷基；C1-C3烷氧基；C1-C3卤代烷基；-NRGRH；
RD选自以下组成的组：卤素、氰基、C1-C5烷基、C3-C6环烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3烷硫基、苯基、芳基、杂芳基、-NRGRH、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、磺酰基、亚砜；
RE选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基、C3-C6环烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3烷硫基、苯基、杂芳基、-NRGRH、-CH2NRMRN；
RF选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基、C3-C6环烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3烷硫基、苯基、杂芳基、-NRGRH；
或者RE和RF连接在一起，形成由一至四个RI基团可选地取代的环烷基、杂芳基或杂环烷基；
RG选自以下组成的组：H、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C6环烷基、杂环烷基、杂芳基、苯基；
RH选自以下组成的组：H、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C6环烷基、杂环烷基、杂芳基、苯基；或者
RG和RH与它们所键合的氮原子一起形成由一个或多个C1-C3烷基、苄基、苯基、C1-C3烷氧基或卤素可选地取代的4元至10元饱和或不饱和杂环；RI选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基(优选C1-C3烷基)、C1-C3烷硫基、C1-C4烷氧基(优选C1-C3烷氧基)、C1-C3卤代烷基、羟基、氧代基、-NRaRb、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、磺酰基、亚砜、(CH2)pOH、(CH2)pORa、(CH2)pNRGRH、(CH2)pOC(O)NRaRb、(CH2)pC(O)NRaRb、C3-C6环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、苯基；
RO和RP在每次出现时，各自独立地选自以下组成的组：H、C1-C5烷基、C1-C5烯基、C1-C5炔基、C3-C6环烷基、杂环烷基、杂芳基、苯基，附带条件是当RO或RP中的一个是H时，那么RO或RP中的另一个不是甲基；
或者RO和RP连接在一起，形成由一至四个RI基团可选地取代的环烷基、环烯基或杂环烷基；
RM和RN各自独立地选自以下组成的组：H；C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C3卤代烷基、苯基；芳基；杂芳基；-NRGRH；-C(O)NRaRb；-C(O)Rc；-C(O)ORc；磺酰基；亚砜；由羟基、烷氧基或–NRaRb取代的C1-C6烷基，苯基；-NRGRH；-C(O)NRaRb；-C(O)Rc；-C(O)ORc；磺酰基；亚砜；
或者RM和RN与它们所附接的N原子连接在一起，形成杂环烷基；
RI选自以下组成的组：H、卤素、氰基、C1-C5烷基(优选C1-C3烷基)、C1-C3烷硫基、C1-C4烷氧基(优选C1-C3烷氧基)、C1-C3卤代烷基、羟基、氧代基、-NRaRb、-C(O)NRaRb、-C(O)Rc、-C(O)ORc、磺酰基、亚砜、(CH2)pOH、(CH2)pORa、(CH2)pNRGRH、(CH2)pOC(O)NRaRb、(CH2)pC(O)NRaRb、C3-C6环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、苯基；
Ra和Rb在每次出现时，各自独立地选自以下组成的组：氢、C1-C6烷基、取代的C1-C6烷基、C1-C6烷氧基C1-C6烷基、可选地具有端基NH2或–NH-Boc的含–O-、-C(O)NH-、-NHC(O)-、-N-或-NHC(O)O-中的一种或若干种的C6-C14烷基链；C1-C6烯基、取代的C1-C6烯基、C1-C6炔基、取代的C1-C6炔基、C3-C7环烷基、取代的C3-C7环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环烷基、取代的杂环烷基；或者
Ra和Rb与它们所键合的氮原子一起形成由一个或多个C1-C3烷基、苄基、苯基、C1-C3烷氧基或卤素可选地取代的4元至10元饱和或不饱和杂环；
Rc选自以下组成的组：氢、C1-C10烷基(优选C1-C6烷基)、C1-C10烯基(优选C1-C6烯基)、C1-C10炔基(优选C1-C6炔基)、C3-C10环烷基(优选C3-C7环烷基)、C1-C3卤代烷基、芳基、杂芳基、杂环烷基，其中，前述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环烷基中的每一种可以由羟基、卤素、烷氧基、氧代基、磺酰基、亚砜、芳基、杂芳基或–NRaRb中的一种或多种取代；
X是O、S或N-CN；
Y是NH、O、–C(O)NH-或键；
n是0-3的整数，优选0、1、2或3；
p是0-5的整数，优选0、1、2、3、4或5。
在一种实施方式中，Y是NH。
本发明还涉及分子式为I、Ia-Ih的前述化合物的药学上可接受的盐。在一个方面，本发明还针对根据分子式II的化合物：
V是选自以下组成的组中的芳基或杂芳基
Ra在每次出现时独立地选自以下组成的组：H、C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素(诸如Cl或F)、氰基、-C(O)NRR、CF3、OCF3、羟基、N(CH3)2、NO2、吗啉基、-NHC(O)C1-C3烷基、C(O)(O)C1-C4烷基、NH2C(O)-、NH2S(O)2-、CH2OH、CH2-吗啉基，其中，R在每次出现时独立地选自以下组成的组：H、C1-C4烷基、C3-C7环烷基和CF3；
Rb选自以下组成的组：H、C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、CF3、OCF3、氰基；
X选自以下组成的组：-C(O)NR-、-NR-C(O)-、-NRC(O)NR-、-C(O)NCH3-、NCH3-C(O)-、-NR-、-RNHR-、-RNHC(O)NR-、-S(O)2NH-、-C(O)-；其中，R在每次出现时独立地选自以下组成的组：H、C1-C4烷基、C3-C7环烷基和CF3；
Y选自以下组成的组：
m在每次出现时独立地是0-4的整数，优选0、1、2、3或4；
k是1-3的整数，优选0、1、2或3；
n是0-3的整数，优选0、1、2或3；
Z选自以下组成的组：CH2，
本发明还涉及根据分子式II的这些化合物的药学上可接受的盐。应注意，就产品保护而言，本发明不包括下文进一步示出的表2中指定为“1001”的化合物。
一种实施方式涉及根据分子式II的化合物，其中
X是–C(O)NR-，其中，R选自以下组成的组：H、C1-C4烷基、C3-C7环烷基和CF3；且Y是–(CH2)m-，m为0至4，优选0、1、2、3或4。
一种实施方式涉及根据分子式II的化合物，其中，X是–NR-C(O)-，其中，R选自以下组成的组：H、C1-C4烷基、C3-C7环烷基和CF3；且Y是–(CH2)m-，m为0至4，优选0、1、2、3或4。
一种实施方式涉及根据分子式II的化合物，
其中，X是–C(O)NR-，其中，R选自以下组成的组：H、C1-C4烷基、C3-C7环烷基和CF3；且Y是–(CH2)m-，m为0至4，n为1，以及Z是
一种实施方式涉及根据分子式II的化合物，
其中，X是–NR-C(O)-，其中，R选自以下组成的组：H、C1-C4烷基、C3-C7环烷基和CF3；Y是–(CH2)m-，其中m为0至4，n为1，Z是
在一种实施方式中，根据本发明的化合物用于病毒疾病优选HCV的治疗。在一种实施方式中，所述HCV是包括亚型的HCV基因型1、2、3、4、5、6、7，优选基因型和亚型1a、1b、2a、2b、3a、4a、5a、6a和/或7a，更优选1a、1b、2a、2b和/或3a。
在一种实施方式中，根据本发明的化合物具有表1和/或实施例1中所示分子式2-374中的一种，如下文进一步所示，或者其药学上可接受的盐，优选地具有表1中所示分子式2-4、7、12、14、18-22、24-44、46-48、51-54、56-57、59-63、65-76、78-82、87、91、93-94、96-99、101-103、106-108、110-119、121-200、203-222、224-229、231-245、247-256、258-320、322-351、354-361、363-373中的一种，更优选地具有表1、3、4或5中所示分子式14、19、21、27、110-119、121、167、316中的一种；或者其药学上可接受的盐。
在一种实施方式中，根据本发明的化合物具有表2和/或实施例1中所示分子式1002-1159中的一种，如下文进一步所示，或者其药学上可接受的盐，优选地具有表2中所示分子式1003、1005、1012-1013、1015-1016、1018-1023、1027-1028、1032、1045-1046、1049、1052、1060、1065、1067-1069、1073、1075-1076、1078-1083、1085-1088、1090-1102、1104-1108、1110-1119、1121-1126、1130-1137、1139、1141、1145-1147、1149-1150、1152-1159中的一种，更优选地具有表2-3中所示分子式1013、1019、1022、1152中的一种；或其药学上可接受的盐。
在一个方面，本发明涉及包括如上所限定的化合物和药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂的组合物。
在一种实施方式中，根据本发明的组合物用于病毒疾病优选HCV的治疗。在一种实施方式中，所述HCV是包括亚型的HCV基因型1、2、3、4、5、6或7，优选基因型和亚型1a、1b、2a、2b、3a、4a、5a、6a和/或7a，更优选1a、1b、2a、2b和/或3a。
在一种实施方式中，所述治疗包括对需要其的患有病毒疾病优选HCV的患者给药适合量的如上所限定的化合物或如上所限定的组合物。
在另一方面，本发明涉及治疗病毒疾病的方法，所述疾病优选HCV。所述方法包括对需要其的患有病毒疾病的患者给药适合量的如上所限定的化合物或如上所限定的组合物，所述病毒疾病优选HCV。
在一种实施方式中，所述HCV是包括亚型的HCV基因型1、2、3、4、5、6或7，优选基因型1a、1b、2a、2b、3a、4a、5a、6a和/或7a，更优选1a、1b、2a、2b和/或3a。
在一种实施方式中，所述适合量是在0.01mg/kg所述患者体重至1g/kg所述患者体重的范围中的量。
在一种实施方式中，所述患者是患有病毒疾病优选HCV的患者。
在一种实施方式中，本发明还涉及根据本发明的的化合物的药学上可接受的盐，用于病毒疾病优选HCV的治疗。
在一种实施方式中，在所述化合物的浓度在0.0001-50μM之间，所述化合物具有对病毒感染优选HCV的抑制活性，特别优选EC50小于1μM。
在一个方面，本发明涉及用于病毒疾病例如HCV的治疗的化合物，根据本发明，所述化合物优选地具有如表1和表2以及实施例1中所示分子式1-374和/或1001-1159中的一种，优选地具有如表1中所示分子式1-4、7、12、14、18-22、24-44、46-48、51-54、56-57、59-63、65-76、78-82、87、91、93-94、96-99、101-103、106-108、110-119、121-200、203-222、224-229、231-245、247-256、258-320、322-351、354-361、363-373、1001、1003、1005、1012-1013、1015-1016、1018-1023、1027-1028、1032、1045-1046、1049、1052、1060、1065、1067-1069、1073、1075-1076、1078-1083、1085-1088、1090-1102、1104-1108、1110-1119、1121-1126、1130-1137、1139、1141、1145-1147、1149-1150、1152-1159中的一种，更优选地具有如表1-5中所示分子式14、19、21、27、110-119、113-119、121、167、316、1013、1019、1022、1152中的一种；或其药学上可接受的盐。
优选地，在如上所限定的所述化合物的浓度在0.0001-50μM之间，所述化合物具有对病毒感染优选HCV感染的抑制活性，特别优选EC50小于1μM。
在一个方面，本发明涉及包括根据本发明的化合物和药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂的组合物，用于病毒疾病优选HCV的治疗，HCV为如上所限定的。
在一种实施方式中，所述治疗包括对需要其的患有病毒疾病优选HCV的患者给药适合量的如上所限定的化合物或组合物，HCV为如上所限定的。
在另一方面，本发明涉及竞争性地抑制如上所限定的根据本发明的化合物的特异性结合的化合物。
在又一方面，本发明涉及治疗病毒疾病例如HCV的方法，所述方法包括对需要其的患者给药适合量的正如所限定的化合物，即，竞争性地抑制根据本发明的化合物的特异性结合的化合物。
竞争性地抑制根据本发明的化合物的特异性结合的这种化合物在本文中有时也称为“竞争性抑制化合物”。
在一种实施方式中，这种患者是患有病毒疾病优选HCV的患者。
在一个方面，本发明还涉及一种组合物，优选药物组合物，包括如上所限定的根据本发明的化合物，还包括至少一种抗病毒化合物以及可选地药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。该组合物在本文中有时也称为“联合组合物(combination composition)”。在一种实施方式中，所述至少一种抗病毒化合物选自：干扰素-α、利巴韦林、直接作用的抗病毒药物诸如特拉匹韦(telaprevir)、博赛泼维(boceprevir)、索菲布韦(sofosbuvir)、达卡他韦(daclatasvir)、NS5A-抑制剂、HCV-RNA依赖性RNA聚合酶(RdRp)的非核苷类抑制剂。
在一种实施方式中，这种联合组合物用于病毒疾病的治疗，该病毒疾病优选HCV，更优选包括亚型的HCV基因型1、2、3、4、5、6或7，优选基因型1a、1b、2a、2b、3a、4a、5a、6a和/或7a，更优选1a、1b、2a、2b和/或3a。
在这种组合物的一种实施方式中，根据本发明的化合物具有表1和/或实施例1中所示分子式1-374中的一种，如下文进一步所示，或其药学上可接受的盐，优选地具有表1中所示分子式1-4、7、12、14、18-22、24-44、46-48、51-54、56-57、59-63、65-76、78-82、87、91、93-94、96-99、101-103、106-108、110-119、121-200、203-222、224-229、231-245、247-256、258-320、322-351、354-361、363-373中的一种，更优选地具有表1、3、4或5中所示分子式14、19、21、27、110-119、121、167、316中的一种；或其药学上可接受的盐。
在这种组合物的一种实施方式中，根据本发明的化合物具有表2和/或实施例1中所示分子式1001-1163中的一种，如下文进一步所示，或者其药学上可接受的盐，优选地具有表2中所示分子式1001、1003、1005、1012-1013、1015-1016、1018-1023、1027-1028、1032、1045-1046、1049、1052、1060、1065、1067-1069、1073、1075-1076、1078-1083、1085-1088、1090-1102、1104-1108、1110-1119、1121-1126、1130-1137、1139、1141、1145-1147、1149-1150、1152-1159中的一种，更优选地具有表2-3中所示分子式1013、1019、1022、1152中的一种；或者其药学上可接受的盐。
在一个方面，本发明涉及治疗病毒疾病优选HCV的方法，所述方法优选包括对需要其的患有病毒疾病的患者给药适合量的如上所限定的包括根据本发明的化合物和至少一种抗病毒化合物的组合物(＝“联合组合物”)，病毒疾病优选HCV，更优选包括亚型的HCV基因型1、2、3、4、5、6或7，优选基因型1a、1b、2a、2b、3a、4a、5a、6a和/或7a，更优选1a、1b、2a、2b和/或3a。
术语“EC50”指的是化合物相对于给定活性例如对病原体例如病毒感染细胞的抑制的半最大效应浓度(half-maximal effective concentration)。因此分级剂量反应曲线(graded dose response curve)的EC50表示观察到其最大效应的50％时的化合物浓度。EC50的一个示例是用于HCV感染细胞的化合物的半最大抑制浓度。
药物组合物
药学上可接受的盐
药学上可接受的加成盐的示例包括但不限于非毒性无机和有机酸加成盐，诸如衍生自乙酸的乙酸盐、衍生自乌头酸的乌头酸盐、衍生自抗坏血酸的抗坏血酸盐、衍生自苯磺酸的苯磺酸盐、衍生自苯甲酸的苯甲酸盐、衍生自肉桂酸的肉桂酸盐、衍生自柠檬酸的柠檬酸盐、衍生自帕莫酸(embonic acid)的帕莫酸盐、衍生自庚酸的庚酸盐、衍生自甲酸的甲酸盐、衍生自富马酸的富马酸盐、衍生自谷氨酸的谷氨酸盐、衍生自乙醇酸的乙醇酸盐、衍生自盐酸的盐酸盐、衍生自氢溴酸的氢溴酸盐、衍生自乳酸的乳酸盐、衍生自马来酸的马来酸盐、衍生自丙二酸的丙二酸盐、衍生自扁桃酸(mandelic acid)的扁桃酸盐、衍生自甲磺酸的甲磺酸盐、衍生自萘-2-磺酸的萘-2-磺酸盐、衍生自硝酸的硝酸盐、衍生自高氯酸的高氯酸盐、衍生自磷酸的磷酸盐、衍生自邻苯二甲酸的邻苯二甲酸盐、衍生自水杨酸的水杨酸盐、衍生自己二烯酸的己二烯酸盐、衍生自硬酯酸的硬酯酸盐、衍生自琥珀酸的琥珀酸盐、衍生自硫酸的硫酸盐、衍生自酒石酸的酒石酸盐、衍生自对甲苯磺酸的对甲苯磺酸盐等。这些盐可以通过本领域中熟知和已描述的过程来形成。
可能不被认为是药学上可接受的其他酸诸如草酸可以在获得用于治疗炎性疾病的本发明的化学化合物和其药学上可接受的酸加成盐时用于制备用作中间产物的盐。
在另一实施方式中，根据本发明，本发明的化合物以它们各自的游离碱的形式使用，用于炎性疾病的治疗。
本发明的化学化合物的金属盐包括碱金属盐，诸如含有羧基的本发明的化学化合物的钠盐。
本发明的化学化合物可以以未溶剂化提供或以溶剂化的形式与一种或多种药学上可接受的溶剂诸如水、乙醇等一起提供。溶剂化的形式还可以包括水合形式，诸如一水合物、二水合物、半水合物、三水合物、四水合物等。一般而言，为了本发明的目的，认为溶剂化的形式相当于未溶剂化的形式。
给药和配制品
含有本发明的化合物、其活性代谢产物或同分异构体以及根据本发明的盐的药物的生产及其应用可以根据熟知的制药方法进行。
虽然根据本发明可用于治疗的本发明的化合物可以以原始化学化合物的形式给药，但是优选地是与一种或多种助剂、赋形剂、载体、缓冲剂、稀释剂和/或其他常规药物辅料一起将活性成分可选地是生理学上可接受的盐在药物组合物中引入。本发明的化合物的这类盐可以是无水的或溶剂化的。
在优选实施方式中，本发明提供药物，其包括根据本发明可用的化合物或其药学上可接受的盐或衍生物以及用于其的一种或多种药学上可接受的载体和可选地其他治疗性和/或预防性成分。该一种或多种载体必须是在与配制品的其他成分相容的且对其受体无害的意义上是“可接受的”。
本发明的药物可以是适用于口服、直肠、支气管、鼻腔、局部、口腔、舌下、经皮、阴道或肠胃外(包括皮肤、皮下、肌内、腹膜内、静脉内、动脉内、脑内、眼内注射或输注)给药的那些药物，或者为适用于通过吸入或吹气给药(包括粉末和液体气雾剂给药)或通过缓释体系给药的形式的那些药物。缓释体系的适合示例包括含有本发明的化合物的固体疏水聚合物的半渗透基质，该基质可以是成形物品的形式，例如膜或微胶囊。
根据本发明可用的化合物与常规助剂、载体或稀释剂一起可以因此被放置成药物及其单位剂量的形式。这样的形式包括：固体，特别地为片剂、填充胶囊、粉剂和药丸(pellet)形式；以及液体，特别地为含水或非水溶液剂、悬浮剂、乳剂、万能药(elixir)和用其装填的胶囊，用于口服的所有形式，用于直肠给药的栓剂以及用于肠胃外使用的无菌注射溶液。这些药物和其单位剂量形式可以在有或没有其他活性化合物或组成部分的情况下包括常规比例的常规成分，且这种单位剂量形式可以含有与待使用的预期日常剂量范围相应的任何适合有效量的活性成分。
根据本发明可用的化合物可以以各种各样的口服和肠胃外剂量形式给药。对本领域技术人员而言明显的是，以下剂量形式可以包括一种或多种根据本发明可用的化合物或一种或多种根据本发明可用的化合物的药学上可接受的盐作为活性成分。
对于由根据本发明可用的化合物制备药物，药学上可接受的载体可以是固体的或液体的。固体形式制剂包括粉剂、片剂、丸剂、胶囊、扁囊剂(cachet)、栓剂和可分散颗粒剂。固体载体可以是还可以用作稀释剂、调味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、防腐剂、片剂崩解剂或包膜材料(encapsulating material)的一种或多种物质。
在粉剂中，载体是与粉碎的活性组分混合的粉碎固体。在片剂中，活性组分与具有必要的结合能力的载体以适合的比例混合，并压缩成所需形状和大小。适合的载体是碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、糖、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点蜡、可可脂等。术语“制剂”意在包括具有包膜材料作为载体的活性化合物配制品，提供其中活性组分在有或没有载体的情况下被载体包围并因此与其结合的胶囊。类似地，包括扁囊剂和锭剂(lozenge)。片剂、粉剂、胶囊、丸剂、扁囊剂和锭剂可以用作适用于口服给药的固体形式。
为了制备栓剂，首先熔化低熔点蜡，诸如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物，并使活性组分均匀地分散在其中，如通过搅拌。然后将熔化的均匀混合物倒入大小适中的模具中，允许其冷却并从而凝固。适用于阴道给药的组合物可以表现为除活性成分之外还含有本领域中已知的适当载体的阴道栓(pessary)、止血塞(tampon)、霜剂、凝胶剂、糊剂、泡沫剂或喷剂。液体制剂包括溶液剂、悬浮剂和乳剂，例如水或水-丙二醇溶液。例如，肠胃外注射液体制剂可以配制为含水聚乙二醇溶液。
因此，根据本发明的化学化合物可以配制用于肠胃外给药(例如，通过注射，例如推注(bolus injection)或持续输注)，且可以以单位剂量形式存在于具有添加防腐剂的安瓿、预填装注射器、小体积输注或在多剂量容器中。组合物可以采取下述形式，诸如悬浮剂、溶液剂或者含油或含水载体(vehicle)中的乳剂，且可以含有配制剂(formulation agent)，诸如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。可替选地，活性成分可以是通过无菌固体的无菌分离或通过溶液冻干获得的粉末形式，用于在使用前与适合的载体例如无菌无热原水复配(constitution)。
可以通过将活性组分溶解在水中并根据需要加入适合的着色剂、调味剂、稳定剂和增稠剂来制备适用于口服使用的含水溶液。可以通过用粘性材料诸如天然或合成胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或其他熟知的悬浮剂将粉碎的活性组分分散在水中来制备适用于口服使用的含水悬浮剂。
还包括预期在使用前不久转化为液体形式制剂用于口服给药的固体形式制剂。这样的液体形式包括溶液剂、悬浮剂和乳剂。除活性组分外，这些制剂还可以含有着色剂、调味剂、稳定剂、缓冲剂、人工和天然甜味剂、分散剂、增稠剂、增溶剂等。
在本发明的一种实施方式中，局部地或全身地或通过两种途径组合地施用药物。
对于给药，在一种实施方式中，可以在含有按重量0.001％至70％的化合物，优选地按重量0.01％至70％的化合物，甚至更优选地按重量0.1％至70％的化合物的配制品中给药本发明的化合物。在一种实施方式中，所给药的化合物的适合量在0.01mg/kg体重至1g/kg体重的范围内。
适用于给药的组合物还包括：在调味基质(通常为蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍胶)中包括活性剂的锭剂、在惰性基质(如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯胶)中包括活性成分的软锭剂(pastille)以及在适合的液体载体中包括活性成分的漱口剂(mouthwash)。
溶液剂或悬浮剂通过常规手段例如用滴管、移液管或喷雾器直接给药至鼻腔。组合物可以提供为单或多剂量形式。在滴管或移液管的后一种情况中，可以由给药适合的预定体积的溶液或悬浮液的患者来实现。在喷雾器的情况下，可以例如通过计量雾化喷雾泵来实现。
对呼吸道的给药也可以通过气雾剂的方式实现，其中用合适的推进剂诸如含氯氟烃(CFC)(例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷)、二氧化碳或其它合适的气体在加压包装中提供活性组分。该气雾剂还可以方便地含有表面活性剂，如卵磷脂。药物的剂量可以通过设置计量阀来控制。
可替选地，该活性成分可以提供为干粉形式，例如化合物在合适的粉末基质诸如乳糖、淀粉、诸如羟丙基甲基纤维素的淀粉衍生物以及聚乙烯吡咯烷酮(PVP)中的粉末混合物。方便地，粉末载体会在鼻腔内形成凝胶。粉末组合物可以以单位剂量形式存在，例如，如明胶的胶囊或药筒(cartridges)，或者是粉末可以通过吸入器从其给药的泡罩包装(blister pack)。
在包括鼻内组合物的预期向呼吸道给药的组合物中，化合物一般具有小粒径，例如大约5微米或以下。这样的粒径可以通过本领域中已知的手段例如通过微粉化获得。
在需要时，可以使用适于使活性成分缓释的组合物。
药物制剂优选为单位剂量形式。在这种形式中，制剂被细分为含有合适量的活性组分的单位剂量。单位剂量形式可以是包装的制剂，该包装含有分立的制剂量，诸如小瓶或安瓿中的包装片剂、胶囊和粉剂。而且，单位剂量形式可以是胶囊、片剂、扁囊剂或锭剂本身，或者其可以是合适数量的这些剂量形式中任意一种的包装形式。用于口服给药的片剂或胶囊和用于静脉内给药和持续输注的液体是优选的组合物。
关于配制和给药的技术的其他详细信息可见于最新版的“Remington's Pharmaceutical Sciences(雷明顿药物科学)(Maack Publishing Co.Easton,Pa.)和Remington:The science and practice of pharmacy“,Lippincott Williams and Wilkins。
适合配制品和制造它们的方式也在例如Lachman等人著写的“Arzneiformenlehre,Paul Heinz List,EinLehrbuchfürPharmazeuten,WissenschaftlicheVerlagsgesellschaft Stuttgart,4.Auflage,1985”或”The theory and practice of industrial pharmacy”,Varghese Publishing House,1987”或“Modern Pharmaceutics”,James Swarbrick编辑，第2版”中公开。
附图和表
表1汇总了分子式I系列的抗HCVcc基因型1/2活性。
表2汇总了分子式II系列的抗HCVcc基因型1/2活性。
表3汇总了分子式I和II系列的代表物的抗HCV跨基因型活性。
表4汇总了分子式I系列的代表物在HCV基因型2感染系统中的联合用药评估。
表5汇总了分子式I系列的代表物在HCV基因型1/2嵌合感染系统中的联合用药评估。
实施例
下文参照以下实施例进一步描述本发明，实施例意在说明而并不限制本发明的范围。
实施例1：化合物制备
使用常规有机合成制备根据分子式I的化合物。下文在以下一般反应方案中描绘了适合的合成路径。下文中，根据本发明的化合物有时称为“TU-”，后接字母，诸如“A”、“B”等。“TU”指衍生这些化合物的“噻吩脲”的缩写。“A”、“B”等仅是编号。然而，应注意当与根据本发明的化合物的名称联用时，名称“TU”或“噻吩脲”不应以限制的方式解释。根据本发明的化合物意在仅由所附的各项权利要求特别地由本文所示的结构和分子式限制。
分子式(I)发明化合物的合成
<一般过程1>
<步骤-1>
于70℃下将1-乙基哌啶-4-酮(2.0ml，15.73mmol)、硫(606mg，18.88mmol)、马来腈(1.3g，18.88mmol)和二乙胺(2.0ml，18.88mmol)的EtOH溶液加热18h。在真空中浓缩该混合物，用乙酸乙酯稀释，并用水清洗。用MgSO4干燥有机层，并在真空中浓缩以获得棕色固体I-1(60％)。
<步骤-2>
于120℃下将I-1(605mg，3.39mmol)、2,5-二甲氧基四氢呋喃(0.5ml，3.73mmol)的AcOH(7mL)溶液回流4h。反应完成后，减压浓缩该混合物，用EA稀释，接着用NaHCO3和盐水清洗。用MgSO4干燥有机层，并在真空中浓缩以获得白色固体I-2(80％)。
<步骤-3>
于0℃下向I-2(560mg，2.18mmol)的无水THF(6.0mL)溶液中小心加入LAH(165mg，4.35mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌过夜。通过加入冰水淬灭反应，用EA萃取，用盐水清洗，并用MgSO4干燥。在真空中浓缩有机层并通过柱层析纯化以获得棕色固体I-3(76％)。
<步骤-4>
于0℃下向I-4(500mg，2.22mmol)和吡啶(0.36ml，4.44mmol)的DCM(15mL)溶液中滴加在DCM(3mL)中的对硝基苯氯甲酸盐(490mg，2.44mmol)。于0℃下将该混合物搅拌1h，并用DCM稀释。用水清洗有机层，并减压浓缩。用乙醚清洗固体产物以获得淡黄色固体纯化合物I-5(70％)。
<步骤-5>
将I-5(50mg，0.13mmol)、I-3(33mg，0.13mmol)和TEA(0.020ml，0.14mmol)的DCM溶液在室温下搅拌过夜。用水清洗该混合物，用MgSO4干燥，在真空中浓缩，并通过柱层析纯化，以获得白色固体TU-A(74％)。
<一般过程1-a>
于0℃下向2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-腈(500mg，2.81mmol)和吡啶(0.453ml，5.62mmol)的DCE(15mL)溶液中滴加在DCE(3mL)中的对硝基苯氯甲酸盐(623mg，3.09mmol)。于0℃下将该混合物搅拌1h。在真空中浓缩该混合物。用乙醚清洗固体产物以获得白色固体粗混合物I-6。于室温下将I-6(50mg，0.25mmol)和I-3(64mg，0.25mmol)的DCE溶液搅拌0.5h。浓缩该混合物，并通过柱层析纯化，以获得黄色凝胶TU-B(25mg)(22％)。
<一般过程2>
于室温下将I-7的4N HCl二氧己环溶液搅拌2h。浓缩该混合物并用乙醚清洗，以获得白色固体TU-C。
<一般过程3>
向TU-C(25mg，0.05mmol)和乙酰氯(3.75μL，0.05mmol)的DCM溶液中加入TEA(14.7μL，0.11mmol)。于室温下将该混合物搅拌2h，并用水清洗。用MgSO4干燥有机层，在真空中浓缩，并通过柱层析纯化，以获得TU–D(产率＝71％)。
<一般过程4>
向TU-C(25mg，0.05mmol)和甲磺酰氯(4.2μL，0.05mmol)的DCM溶液中加入TEA(14.7μL，0.11mmol)。于室温下将该混合物搅拌2h，并用水清洗。用MgSO4干燥有机层，在真空中浓缩，并通过柱层析纯化，以获得TU–E(78％)。
<一般过程5>
向TU-C(25mg，0.05mmol)、异丁醛(0.0053μL，0.06mmol)的DCM溶液中加入NaBH(OAc)3(8mg，0.07mmol)。于室温下将该混合物搅拌过夜，并用DCM稀释。随后用水和饱和NaHCO3清洗该混合物，用MgSO4干燥，在真空中浓缩，并通过柱层析纯化，以获得乳白色固体TU–F(15mg，58％)。
<一般过程6>
向2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯(50mg，0.22mmol)的DCM(10mL)溶液中加入硫羰基二咪唑(40mg，0.22mmol)，并于室温下搅拌过夜。向反应混合物中加入I-8(70mg，0.29mmol)，并于室温下搅拌2h。用DCM稀释该混合物，用水清洗，并减压浓缩。通过柱层析纯化残留物，以获得棕色凝胶TU-G。
<一般过程7>
于0℃下向I-9(0.03mg，0.13mmol)的丙酮(2mL)溶液中加入三光气(triphosgene)(0.023mL，0.19mmol)。于室温下将该混合物搅拌1h。向反应混合物中加入胺(33mg，0.13mmol)和TEA(26.2μL，0.13mmol)的DCM(2mL)溶液，并于室温下搅拌2h。用DCM稀释该混合物，用水清洗，用MgSO4干燥，并在真空中浓缩。通过柱层析纯化残留物，以获得棕色凝胶TU-H(28mg，42％)。
<一般过程8>
向已搅拌的I-3(40mg，0.15mmol)的DCM(1.0mL)溶液中加入异氰酸盐(0.033mL，0.31mmol)。在室温下将反应混合物搅拌1h。反应完成后，用DCM稀释反应混合物，并用盐水清洗。用无水MgSO4干燥有机层，并在真空中浓缩。通过快速柱层析纯化粗产物，以获得TU-I(8.2mg，产率＝14％)。
<一般过程9>
向已搅拌的TU-A(45mg，0.09mmol)的THF(0.5mL)以及MeOH(0.1mL)和H2O(0.2mL)的溶液中加入氢氧化锂(11mg，0.44mmol)。在室温下将反应混合物搅拌过夜。反应完成后，蒸发该混合物，并加入1N HCl(10.0mL)直至pH为6。通过过滤收集残留的浅色固体，并用H2O清洗，以获得TU-J(28mg，68％)。
<一般过程10>
<步骤-1>
向已搅拌的2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸叔丁酯(20mg，0.08mmol)的丙酮(0.3mL)溶液中加入双光气(0.014mL，0.12mmol)，然后于室温下搅拌12h。反应完成后，用DCM稀释反应混合物，并用盐水清洗。用无水MgSO4干燥有机层，并浓缩获得I-10。
<步骤-2>
向已搅拌的I-10的DCM(0.5mL)溶液中加入TEA(0.012mL，0.09mmol)、I-3(20mg，0.08mmol)，并于室温下搅拌1h。反应完成后，用DCM稀释反应混合物，并用盐水清洗。用无水MgSO4干燥有机层，并在真空中浓缩。通过快速柱层析纯化粗产物，以获得TU-K(13mg，两步产率＝30％)。
<步骤-3>
向已搅拌的TU-K(10mg，0.02mmol)的DCM(1.0mL)溶液中加入TFA(0.5mL)。于室温下将反应混合物搅拌3h。反应完成后，蒸发该反应混合物，并加入1N NaOH(1.0mL)直至pH 6。用DCM稀释该混合物，并用盐水清洗。用无水MgSO4干燥有机层，并浓缩获得TU-L(2.8mg，31％)。
<一般过程11>
向已搅拌的4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-2-羧酸(50mg，0.27mmol)的DMF(2.0mL)溶液中加入I-3(86mg，0.33mmol)、EDC(79mg，0.41mmol)、HoBt(44mg，0.33mmol)和TEA(0.076mL，0.55mmol)。于室温下将反应混合物搅拌12h。反应完成后，用EtOAc稀释反应混合物，并用盐水清洗。用无水MgSO4干燥有机层，并在真空中浓缩。通过快速柱层析纯化粗产物，以获得TU-M(53mg，45％)。
<一般过程12>
<步骤-1>
向已搅拌的2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯(300mg，1.33mmol)的H2O(4.0mL)和EtOH(1.0mL)的溶液中加入KOH(746mg，10.0mmol)。于90℃下将反应混合物搅拌12h，并再次用KOH(10.0mmol)处理。于90℃下将该反应混合物进一步搅拌过夜，并需要另加KOH(10.0mmol)。反应完成后，减压除去溶剂。不另外进行纯化。
<步骤-2>
将粗中间产物I-11溶解在H2O(4.0mL)中，并使用冰冷浴缓慢地用双光气(0.24mL，2.00mmol))处理。于室温下使混合物静置过夜，用过量水稀释，并进行超声处理。滤出固体，并用足够的水清洗。通过柱层析纯化已干燥的固体，以获得I-12(144mg，两步产率＝48％)。
<步骤-3>
向I-12(16.0mg，0.07mmol)的DCM(1.0mL)溶液中加入3-(氨甲基)-2-(1H-吡咯-1-基)-4,7-二氢噻吩并[2,3-c]吡啶-6(5H)-羧酸叔丁酯(24mg，0.07mmol)。于室温下将反应混合物搅拌3h。反应完成后，用DCM稀释反应混合物，并用盐水清洗。用无水MgSO4干燥有机层，并在真空中浓缩。通过快速柱层析纯化粗产物，以获得I-13(10.4mg，产率＝26％)。
<步骤-4>
向已搅拌的I-13(10.4mg，0.02mmol)的DMF(2.0mL)溶液中加入吗啉(0.004mL，0.04mmol)、EDC(5.5mg，0.03mmol)、HoBt(3.1mg，0.024mmol)和TEA(0.005mL，0.04mmol)。于室温下将反应混合物搅拌12h。反应完成后，用EtOAc稀释反应混合物，并用盐水清洗。用无水MgSO4干燥有机层，并在真空中浓缩。通过快速柱层析纯化粗产物，以获得I-14(5.0mg，产率＝44.6％)。
<步骤5>
向已搅拌的I-14(5.0mg，0.008mmol)的二氧己环(0.05mL)溶液中加入在二氧己环(0.1mL)中的4N HCl，然后于室温下搅拌2h。反应完成后，在真空中浓缩反应混合物，以获得TU-N(3.8mg，84％)。
<一般过程3-a>
于0℃下向已搅拌的TU-O(38mg，0.07mmol)、TEA(0.07mL，0.10mmol)的DCM(0.5mL)溶液中加入乙酰氯(0.05mg，0.33mmol)。于室温下将反应混合物搅拌3h。反应完成后，用DCM稀释反应混合物，并用盐水清洗。用无水MgSO4干燥有机层，并在真空中浓缩。通过快速柱层析纯化粗产物，以获得TU-P(15.6mg，产率＝43.3％)。
<一般过程13>
<步骤-1>
用二苯基磷酰叠氮化物(0.13ml，0.60mmol)和三乙胺(0.09mL，0.65mmol)处理噻吩-2-羧酸(64mg，0.50mmol)和甲苯(2.5mL)的混合物。于室温下将反应混合物搅拌30min，并加热至80℃，保持5h。
<步骤-2>
用I-3(30mg，0.11mmol)、三乙胺(0.02mL，0.11mmol)的THF(1.5mL)溶液处理在甲苯中的四分之一等分的I-15(0.13mmol)。将混合物加热至80℃，保持1h，并允许于室温下静置过夜。将浓缩残留物溶解在DCM中，并相继用1N HCl和饱和NaHCO3溶液清洗。用MgSO4干燥有机层，减压浓缩，并通过柱层析(DCM:MeOH＝20:1)纯化以获得TU-Q。
<一般过程14>
<步骤-1>
向叔丁基乙酰乙酸酯(1.5mL，9.20mmol)的EtOH(18.5mL)溶液中加入丙二腈(608mg，9.20mmol)、硫(295mg，9.20mmol)和三乙胺(1.28mL，9.20mmol)。于80℃下将反应混合物加热过夜，浓缩并通过柱层析(正己烷:EtOAc:DCM＝7:1:2)纯化，以获得棕色固体I-16(65％)。
<步骤-2>
向I-16(715mg，3.00mmol)的丙酸(6mL)溶液中加入2,5-二甲氧基四氢呋喃(0.43mL，3.30mmol)，并在100℃下搅拌1h。减压除去乙酸，用饱和NaHCO3将残留物碱化，并溶解于乙酸乙酯中。分离相，并用MgSO4干燥有机相，浓缩，并通过柱层析(正己烷:EtOAc:DCM＝10:1:2)纯化，以获得淡黄色固体I-17(92％)。
<步骤3>
于0℃下向I-17(395mg，1.37mmol)的干二氯甲烷(7mL)溶液中加入TFA(10mL)。30min后，将反应混合物缓慢加热至室温，并搅拌过夜。减压除去TFA，用DCM稀释残留物，并用水清洗。用MgSO4干燥有机相，浓缩以获得淡黄色固体纯化合物I–18(93％)。
<步骤4>
用二甲胺(在THF中2M，0.7mL，1.78mmol)和TEA(0.25mL，1.80mmol)处理I-18(209mg，0.90mmol)、EDC(207mg，1.08mmol)、HOBt(146mg，1.08mmol)的DCM(4.5mL)溶液。6天后，相继用水和盐水清洗混合物。用MgSO4干燥有机相，减压浓缩，并通过柱层析(正己烷:EtOAc:DCM＝3:1:2)纯化，以获得白色固体I-19(62％)。
<步骤-5>
于0℃下向I-19(143mg，0.55mmol)的干THF(3mL)溶液中按若干份加入LAH(104mg，2.76mmol)。于环境温度下将混合物搅拌过夜，并于80℃下加热过夜。通过在0℃下小心地加入水来淬灭过度LAH，并用MgSO4干燥混合物。通过硅藻土垫过渡浆液，并浓缩。通过柱层析(DCM:MeOH＝20:1)纯化粗残留物，以获得黄色油I-20。
<步骤-6>
用I-5(41mg，0.10mmol)和三乙胺(0.02mL，0.16mmol)处理I-20(26mg，0.10mmol)的DCM(1.0mL)溶液。当反应完成时，在过量DCM中稀释混合物，并用过量水和盐水清洗，然后用MgSO4干燥。通过柱层析(正己烷:EtOAc:DCM＝3:1:2)纯化浓缩的残留物，以获得TU-R。
<一般过程15>
<步骤-1>
将I-1(518mg，2.5mmol)和琥珀酸酐(318mg，3.13mmol)溶解在甲苯/乙酸溶液(3:1，5mL)中，并通过微波辐射加热至150℃，保持50min。用饱和NaHCO3碱化所得混合物，并用乙酸乙酯萃取两次。用盐水清洗组合溶液，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过柱层析(正己烷:EtOAc:DCM＝1:1:2，对EtOAc)纯化粗产物，以获得白色固体I-21(50％)。
<步骤-2>
于0℃下向I-21(180mg，0.62mmol)的干THF(3mL)溶液中分部分地加入LAH(24mg，0.62mmol)。在冰水浴中将混合物搅拌过夜，并在0℃下通过水来淬灭。将过量二氯甲烷倒入反应混合物中，从水相萃取5次产物。用MgSO4干燥有机相，过滤，浓缩，并通过柱层析(DCM:MeOH＝30:1至5:1)纯化为黄色固体I-22(8％)。
<步骤-3>
过程TU-S后是一般过程1(步骤-5)的过程(36％)。
<一般过程16>
<步骤-1>
于0℃在氮气下向溴化铜(II)(1.92g，8.59mmol)的无水乙腈(36mL)溶液中加入亚硝酸叔丁酯(90％，0.95mL，7.16mmol)。10min后，于室温下在10min内分部分地向搅拌的反应混合物中加入2-氨基-3-氰基-4,7-二氢噻吩并[2,3-c]吡啶-6(5H)-羧酸叔丁酯(1.993g，7.16mmol)。当转化完成时，减压浓缩反应混合物，在乙酸乙酯中溶解，并相继用水和盐水清洗。用乙酸乙酯再萃取含水层一次，用MgSO4干燥组合有机层，过滤，并在真空中浓缩。通过柱层析(正己烷:EtOAc:DCM＝20:1:2)纯化粗产物，以获得白色固体I-23(50％)。
<步骤-2>
于0℃下向I-23(100mg，0.36mmol)的无水二乙基醚(2mL)溶液中加入LAH(14mg，0.36mmol)。于室温下将混合物搅拌过夜，在0℃下通过小心地加入水淬灭，用MgSO4干燥，并经硅藻土垫过滤。减压浓缩滤液，并通过柱层析(DCM:MeOH＝30:1至5:1)纯化，以获得无色油I-24(22％)。
<步骤-3>
过程I-25后是一般过程1(步骤-5)的过程(36％，黄色油)。
<步骤-4>
于0℃在氮气下用4N HCl二氧己环溶液(1.8mL)处理I-25(10mg，0.02mmol)。于环境温度下将溶液搅拌过夜，并浓缩以获得所需产物TU-T。
<一般过程17>
<步骤-1>
过程I-26后是一般过程14(步骤-2)的过程(61％，乳白色固体)。
<步骤-2>
于0℃用LAH(11mg，0.30mmol)处理I-26(87mg，0.30mmol)的干THF(2mL)溶液，并在冰水浴中搅拌2.5h，并缓慢加热至室温。2h后，于0℃下再次添加LAH(11mg，0.30mmol)，并于室温下搅拌过夜。于0℃下向反应混合物中加入LAH(11mg，0.30mmol)，并通过加水淬灭反应，并用MgSO4干燥。通过硅藻土垫过滤浆液，用二氯甲烷清洗，并浓缩滤液。通过柱层析(DCM:MeOH＝30:1)纯化粗残留物，以获得I-27(12％，黄色油)。
<步骤-3>
过程TU-U后是一般过程1(步骤-5)的过程(9％)。
<一般过程18>
<步骤-1>
于0℃在氮气气氛下向I-17(115mg，0.40mmol)的干THF(4mL)溶液中加入硼烷二甲硫醚络合物(94％，0.09ml，0.80mmol)，并于50℃下加热过夜。将反应混合物加热至80℃，保持7.5h，并冷却至室温。缓慢加入甲醇，并将溶液搅拌一会儿。减压浓缩粗残留物，并通过柱层析(二氯甲烷:MeOH＝20:1)纯化，以获得I-28(17％，黄色油)。
<步骤-2>
过程I-29后是一般过程1(步骤-5)的过程(46％)。
<步骤-3>
将I-29(15mg，0.03mmol)溶解在干二氧己环(0.5mL)中，并用4N HCl(1mL)处理。反应完成后，通过柱层析(DCM:MeOH＝20:1)纯化浓缩的粗残留物，以获得白色固体I-30(59％)。
<步骤4>
将I-30(5mg，0.01mmol)、二甲胺氯化氢(1mg，0.012mmol)、EDC(2mg，0.012mmol)、TEA(0.01ml，0.25mol)、HOBt(1mg，0.012mmol)和干DMF(0.5mL)/二氮氯甲烷(1mL)的混合物搅拌过夜。用过量乙酸乙酯和水稀释混合物。将两相分离，并用MgSO4干燥有机相，过滤并浓缩。通过柱层析(DCM:MeOH＝30:1)纯化粗残留物，以获得TU-V(28％)。
<一般过程19>
<步骤-1>
将I-18(130mg，0.56mmol)、吗啉(0.06ml，0.67mmol)、EDC(128mg，0.67mmol)、TEA(0.09ml，0.67mol)、HOBt(91mg，0.67mmol)和干DMF(2.8mL)的混合物搅拌过夜。用过量乙酸乙酯和水稀释反应混合物。将两相分离，并用MgSO4干燥有机相，过滤并减压浓缩。通过柱层析(正己烷:EtOAc:DCM＝3:1:2)纯化粗产物，以获得乳白色固体I-31(50％)。
<步骤-2>
于0℃下向I-31(66mg，0.22mmol)的干THF(4.4mL)溶液中按若干份加入LAH(25mg，0.66mmol)，将将混合物加热至80℃，保持2h。用乙酸乙酯稀释该混合物，在0℃下通过小心地加入水来淬灭过度LAH，并用MgSO4干燥。通过硅藻土垫过滤浆液，用二氯甲烷清洗，并减压浓缩滤液。通过柱层析(DCM:MeOH＝10:1至6:1)纯化粗残留物，以获得黄色油I-32(11％)。
<步骤-3>
过程TU-W后是一般过程1(步骤-5)的过程(18％)。
<一般过程20>
<步骤-1>
将I-23(210mg，0.75mmol)置于密封管中，将其溶解于干DMSO(1.5mL)中。用吗啉(1.1mL，6.8mmol)处理溶液，并加热至120℃。当起始材料转化完成时，用过量乙酸乙酯和水稀释混合物。两相分离，并用MgSO4干燥有机层，过滤并减压浓缩。通过柱层析(正己烷:EtOAc:DCM＝8:1:2)纯化粗产物，以获得白色固体I-33(72％)。
<步骤-2>
于0℃在氮气气氛下向I-33(42mg，0.12mmol)的无水THF(1.2mL)溶液中加入硼烷二甲硫醚络合物(94％，0.03ml，0.24mmol)。将混合物搅拌过夜，用MeOH淬灭，并减压浓缩。将残留物溶解在乙酸乙酯中，并用水清洗。用MgSO4干燥有机层。浓缩粗产物无需进一步纯化即可使用。
<步骤-3>
过程I-35后是一般过程1(步骤-5)的过程(两步产率＝59％，无色油)。
<步骤-4>
用4N HCl(1.5mL)处理I-35(25mg，0.04mmol)，并搅拌2h。当起始材料转化完成时，在真空中浓缩混合物，以获得TU-X(86％)。
<一般过程21>
<步骤-1>
通过微波辐射将I-23(54mg，0.20mmol)、苯基硼酸(37mg，0.30mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(12mg，5mol％)和碳酸钠溶液(2M，0.20mL)在甲苯/乙醇(2/1，1mL)中的混合物加热至120℃。反应完成后，倒入过量乙酸乙酯，并用水清洗两次。用MgSO4干燥有机相，过滤并减压浓缩。通过柱层析(正己烷:EtOAc:DCM＝10:1:2)纯化粗产物，以获得无色油I-36(82％)。
<步骤-2>
于0℃在氮气气氛下向I-36(56mg，0.16mmol)的干THF(1mL)溶液中加入硼烷二甲硫醚络合物(94％，0.08ml，0.80mmol)，并搅拌过夜。缓慢加入甲醇，减压浓缩粗产物，并在乙酸乙酯中溶解。用水清洗有机相，用MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。通过柱层析(DCM:MeOH＝10:1)纯化提取物，以获得无色油I-37(60％)。
<步骤-3>
过程I-38后是一般过程1(步骤-5)的过程(47％，无色油)。
<步骤-4>
用4N HCl(1mL)处理I-38(18mg，0.03mmol)的无水二氧己环(1mL)溶液，并于室温下搅拌。反应完成后，将浓缩残留物溶解在二乙醚中，并过滤形成的固体，用足够的二乙醚清洗(44％)。
<一般过程22>
<步骤-1>
过程I-39后是一般过程21(步骤-2)的过程(55％，无色油)。
<步骤-2>
过程I-40后是一般过程1(步骤-5)的过程(41％)。
<步骤-3>
过程TU-Z后是一般过程2的过程(86％)。
<一般过程23>
<步骤-1>
用羟化酶(在水中50wt％，1.76mL，28.73mmol)处理在密封管中的乙腈(1.0mL，19.15mmol)和EtOH(5.0mL)的混合物，并允许于60℃下静置过夜。将反应混合物加热至90℃，保持2h，冷却至室温，并减压浓缩。加入最少的EtOH，用EtOH清洗浆液，然后用正己烷清洗，以获得白色固体I–41(63％)。
<步骤-2>
向I-41(893mg，12.05mmol)的THF(24.0mL)溶液中加入三乙胺(2.2mL，15.67mmol)。于室温下搅拌混合物，直至溶液变得清澈。于0℃下分部分地加入对甲基苯磺酰氯(2.53g，13.26mmol)，并立即除去冰水浴。将反应混合物搅拌2.5h，滤除白色沉淀，并用THF清洗。减压浓缩滤液，在乙酸乙酯中溶解，用水和盐水清洗。用MgSO4干燥有机层，过滤，并减压浓缩以获得淡黄色固体I-42。
<步骤-3>
向胺(279mg，1.0mmol)的THF(5.0mL)溶液中加入I-42(228mg，1.2mmol)。相继加入原甲酸三乙酯(0.33mL，2.0mmol)和乙磺酸(0.82mmol)，并于60℃下将反应混合物加热3.5h。浓缩后，通过加入饱和NaHCO3溶液碱化粗残留物，并用乙酸乙酯萃取两次。用MgSO4干燥有机层，过滤，减压浓缩，并通过柱层析(正己烷:EtOAc:DCM＝3:1:2)，以获得目标化合物和甲苯磺酰基氨肟(tosylamidoxime)的混合物。
<步骤-4>
过程I-44后是一般过程21(步骤-2)的过程(两步产率＝6％，黄色油)。
<步骤-5>
过程I-45后是一般过程1(步骤-5)的过程(25％，无色油)。
<步骤-6>
过程TU-AA后是一般过程2的过程(26％)。
<一般过程24>
<步骤-1>
向2-溴-4-(溴甲基)苄腈(330mg，1.24mmol)的EtOH(2.5mL)溶液中加入二甲胺(在THF中2.0M，3.1mL，6.18mmol)。搅拌反应混合物，并减压除去挥发物。用EtOAc稀释粗残留物，并用饱和NaHCO3和盐水清洗。用MgSO4干燥有机层，过滤，减压浓缩，并通过柱层析(DCM:MeOH＝40:1)纯化，以获得乳白色油I-46(85％)。
<步骤-2>
过程I-47后是一般过程21(步骤-2)的过程(38％，黄色油)。
<步骤-3>
过程TU-BB后是一般过程1(步骤-5)的过程(33％)。
<一般过程25>
<步骤-1>
将无水氯化铈(0.9g，3.67mmol)悬浮在四氢呋喃(8mL)中并于室温下搅拌过夜。用干冰和丙酮冷却，同时向悬浮液中缓慢滴加甲基锂(二乙醚中1.2M，1.17mL)，接着搅拌30分钟。在相同温度下向该反应体系中滴加I-2(0.3g)的四氢呋喃(0.2mL)溶液。在5小时内逐渐缓慢加热至室温，同时进一步搅拌反应混合物。在冰冷却下搅拌反应混合物，同时滴加25％氨水(12.5mL)。通过硅藻土过滤悬浮液，并用二乙醚(25mL)萃取所得滤液。用饱和氯化钠水溶液(20mL)清洗所萃取的溶液，用无水硫酸镁干燥，过滤除去干燥剂，然后减压浓缩，以获得黑色液体I-48(0.13g，39％)。
<一般过程26>
<步骤–1>
在氮气气氛下向I-23(343mg，1.0mmol)和CuI(38mg，50mol％)的无水DMF(4mL)溶液中加入氟磺酰基二氟乙酸甲酯(0.38mL，3.0mmol)。于120℃下将反应混合物加热3h。冷却后，用饱和NaHCO3碱化所得混合物，并用EtOAc萃取两次。用MgSO4干燥有机相，过滤，减压浓缩，并通过柱层析(正己烷:EtOAc＝95:5)纯化，以获得淡黄色固体I-49(70％)。
<步骤-2>
过程I-50后是一般过程21(步骤-2)的过程(38％，黄色油)。
<步骤-3>
过程I-51后是一般过程1(步骤-5)的过程(91％，黄色固体)。
<步骤-4>
过程TU-CC后是一般过程2的过程(93％)。
<一般过程27>
<步骤-1>
于-78℃下向I-23(206mg，0.6mmol)的无水THF(3mL)溶液中缓慢加入正丁基锂(n-BuLi)(己烷(Hex)中2.5M，0.29mL，0.72mmol)。溶液的颜色立即由红色变为无色。10min后，用六氯乙烷溶液(170mg，0.72mmol，3mL THF)处理混合物。颜色变为紫色。20min后，将反应混合物缓慢加热至室温，并搅拌4h。通过在78℃下加入饱和NH4Cl溶液淬灭反应，用EtOAc萃取，用MgSO4干燥，过滤，减压浓缩。通过柱层析(正己烷:EtOAc:DCM＝20:1:2)纯化残留物，以获得白色固体(100％)。
<步骤-2>
过程I-53后是一般过程21(步骤-2)的过程(51％，无色油)。
<步骤-3>
过程I-54后是一般过程1(步骤-5)的过程(68％，乳白色固体)。
<步骤-4>
过程TU-DD后是一般过程2的过程(51％)。
<一般过程1-b>
<步骤–1>
过程I-55后是一般过程1(步骤-1)的过程(167mg，21％)。
<步骤-2>
过程I-56后是一般过程1(步骤-2)的过程(131mg，63％)。
<步骤-3>
过程I-57后是一般过程1(步骤-3)的过程(90mg，68％)。
<步骤-4>
过程TU-EE后是一般过程1(步骤-5)的过程(8mg，34％)。
<一般过程1-c>
<步骤–1>
过程I-58后是一般过程1(步骤-1)的过程(233mg，30％)。
<步骤-2>
过程I-59后是一般过程1(步骤-2)的过程(220mg，77％)。
<步骤-3>
过程I-60后是一般过程1(步骤-3)的过程(151mg，68％)。
<步骤-4>
过程TU-FF后是一般过程1(步骤-5)的过程(8mg，34％)。
<一般过程28>
<步骤-1>
过程I-62后是一般过程1(步骤-2)的过程(1g，85％)。
<步骤-2>
过程I-63后是一般过程2的过程(383mg，100％)。
<步骤-3>
于0℃下向已搅拌的I-63(330mg，1.44mmol)、三乙胺(160mg，1.58mmol)的CH2Cl2(14mL)溶液中加入2-硝基苯磺酰氯(25mg，0.12mmol)。于室温下将反应混合物搅拌2h。反应完成后，用CH2Cl2稀释反应混合物，并用盐水清洗。用无水MgSO4干燥有机层，并在真空中浓缩。通过快速柱层析纯化粗产物，以获得I-64(380mg，67％)。
<步骤-4>
过程I-65后是一般过程21(步骤-2)的过程(260mg，67％)。
<步骤-5>
过程I-66后是一般过程1(步骤-5)的过程(115mg，94％)。
<步骤-6>
向已搅拌的I-66(40mg，0.03mmol)、K2CO3(14mg，0.1mmol)的DMF(1mL)溶液中加入苯硫酚(4mg，0.04mmol)。于室温下将反应混合物搅拌3h。反应完成后，用CH2Cl2稀释反应混合物，并用盐水清洗。用无水MgSO4干燥有机层，并在真空中浓缩。通过快速柱层析纯化粗产物，以获得TU-GG(14mg，80％)。
<一般过程29>
<步骤–1>
于室温下将吡啶(0.70g，8.877mmol)和2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯(1.00g，4.438mmol)在50mL干CH2Cl2中的混合物搅拌30min。在15min的时间段内向反应混合物中滴加对硝基苯氯甲酸盐(1.34g，6.657mmol)在5mL干CH2Cl2中的溶液。在室温下将反应搅拌12h，然后在真空中蒸发，以生成粗产物，通过柱层析(硅胶，梯度为己烷中0-15％乙酸乙酯)将该粗产物纯化获得淡黄色固体I-5(1.25g，产率＝72％)。
<步骤-2>
继而用I-5(0.1g，0.256mmol)和碳酸钾(0.11g，0.768mmol)处理2-溴乙-1-胺氢溴酸盐(0.06g，0.282mmol)的干DMF(3mL)溶液。将混合物回流过夜，并在真空中蒸发，以生成粗产物，通过柱层析(硅胶，梯度为己烷中0-50％乙酸乙酯)将该粗产物纯化获得淡黄色油I-67(0.05g，59％)。
<步骤-3>
于0℃在氮气气氛下向已搅拌的I-67(0.04g，0.136mmol)和1,4-双(溴甲基)苯(0.05g，0.204mmol)的DMF(3mL)溶液中加入叔丁醇钾(0.02g，0.163mmol)。于室温下搅拌12h后，用饱和NH4Cl水溶液淬灭反应。用EtOAc(50mL×3)萃取反应混合物。用H2O(25mL×2)、盐水清洗组合有机层，用MgSO4干燥，并蒸发。通过柱层析(硅胶，梯度为己烷中0-30％乙酸乙酯)纯化所得残留物，以获得淡黄色油TU-HH(0.02g，23％)。
<步骤-4>
向步骤TU-HH中获得的化合物(0.02g，0.031mmol)和三乙胺(0.02mL，0.157mmol)的干CH2Cl2(2mL)溶液中加入盐酸二甲胺(0.015g，0.188mmol)，并于室温下将所得混合物搅拌过夜。用H2O(25mL×2)、盐水清洗混合物，用MgSO4干燥，并过滤，然后浓缩。通过柱层析(硅胶，梯度为亚甲基氯中0-7％甲醇)纯化所得残留物，以获得淡黄色油TU-II(0.01g，43％)。
<一般过程30>
段-1
段-2
段-1
<步骤-1>
将环己酮(2.0g，20.379mmol)和2-氰乙酸乙酯(1.31g，20.379mmol)、三乙胺(2.84mL，20.379mmol)以及硫(0.65g，20.379mmol)在EtOH(20mL)中的混合物回流12h。反应完成后，将混合物冷却至室温，在真空下除去溶剂。用水稀释反应混合物，并通过过滤收集沉淀物，由乙醇重结晶，以获得黄色固体I-68(2.10g，45％)。
<步骤-2>
将I-68(1.7g，6.684mmol)和2,5-二甲氧基四氢呋喃(1.06g，8.021mmol)的乙酸(15mL)溶液加热回流4h。反应完成后，将混合物冷却至室温，并加入冰水(30mL)。并用CH2Cl2(50mL×3)萃取粗混合物，用H2O(25mL×2)、盐水清洗组合的有机层，用MgSO4干燥，并在真空中干燥，以获得棕色油I-69(1.80g，88％)。
<步骤-3>
于0℃下向氢化铝锂(0.25g，6.568mmol)的THF(10mL)悬浮液中滴加I-69(0.5g，1.643mmol)的THF(5mL)溶液。于相同温度下将反应混合物搅拌1h，使温度逐步升至室温，并将混合物进一步搅拌12h。加入水和15％氢氧化钠水溶液，并向混合物中加入无水MgSO4。过滤混合物，并减压浓缩滤液。对残留物进行柱层析(硅胶，梯度为亚甲基氯中0-7％甲醇)纯化，以获得淡黄色油I-70(0.29g，68％)。
<步骤-4>
向乙醇溶液、溶解在CH2Cl2(6mL)中的I–70(0.30g，1.12mmol)中加入固体戴斯－马丁氧化剂(Dess-Martin periodinane)(0.63g，1.482mmol)。搅拌20min后，用20mL饱和NaHCO3水溶液淬灭混合物，然后将该混合物搅拌大约15min。用EtOAc(2×50mL)萃取混合物，且有机层用Na2SO4干燥，并浓缩以获得淡黄色油I-71(0.27g，92％)。
段-2
<步骤-1>
在冰冷却下，向CuBr2(1.19g，5.326mmol)的MeCN(40mL)溶液中加入硝酸叔丁酯(0.69g，6.657mmol)。并且，分部分地向其中加入2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯(1.0g，4.438mmol)，接着在冰冷却下搅拌2h，然后于室温下搅拌3h。向反应混合物中倒入50mL 10％HCl水溶液，并用EtOAc(2×50mL)萃取含水层。按顺序用水和盐水清洗有机层，用MgSO4干燥，并减压浓缩。通过柱层析(硅胶，梯度为己烷中0-25％乙酸乙酯)纯化残留物，以获得棕色油I-72(1.05g，81％)。
<步骤-2>
向I-72(0.2g，1.074mmol)、哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.34g，1.181mmol)、Cs2CO3(0.53g，1.611mmol)和9,9-二甲基-4,5-双(二苯基膦)氧杂蒽(XANTPHOS；0.05g，0.086mmol)在1,4-二氧己环(2mL)中的混合物中加入三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(Pd2(dba)3；0.04g，0.043mmol)，并于90℃加热过夜。将反应混合物冷却至室温，用1M HCl(20mL)处理，并用EtOAc(3×30mL)萃取。通过柱层析(硅胶，梯度为己烷中0-10％乙酸乙酯)纯化粗产物，以获得黄色油I-73(0.13g，30％)。
<步骤-3>
向I-73(0.13g，0.322mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中加入三氟乙酸(0.5mL)。在室温下将混合物搅拌过夜。真空下蒸发溶剂，并将残留物溶解在氯仿中。用NaHCO3饱和溶液清洗有机相，用Na2SO4干燥，并蒸发以获得棕色油I-74(0.09g，97％)。
<步骤-4>
向I-74(0.09g，0.312mmol)的DCM(3mL)溶液中加入I-71(0.08g，0.312mmol)。45min后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.09g，0.468mmol)，并于室温下将反应混合物搅拌18h。加入更多三乙酰氧基氢化钠(0.09g，0.468mmol)，并将混合物另外搅拌2h。用NaHCO3饱和水溶液淬灭反应混合物，并分离相。收集有机相，并用CH2Cl2(3×50mL)萃取含水层。浓缩组合的有机层，并通过柱层析(硅胶，梯度为亚甲基氯中0-10％甲醇)纯化残留物，以获得黄色油TU-JJ(0.07g，41％)。
<一般过程31>
<步骤–1>
在N2下向吡啶甲醛(500mg，4.67mmol)与二氯甲烷(10mL)的混合物中加入1-叔丁氧羰基哌嗪(1-Boc-piperazine)(1.00g，5.60mmol)。于室温下将混合物搅拌1h。加入三乙酰氧基氢化钠(2.00g，9.34mmol)。于室温在N2下将反应混合物搅拌20h。用水淬灭反应，然后在二氯甲烷和水之间分配。用盐水清洗有机提取物，用硫酸镁干燥，并蒸发。通过硅胶柱层析纯化残留物，以己烷中50％EtOAc的梯度洗提，以获得淡黄色固体I-75(800mg，61％)。
<步骤-2>
将4-(吡啶-3-基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯I-75(200mg，0.72mmol)溶解于在二氧己环(3mL)中的4N HCl溶液中。于室温下将所得溶液搅拌4小时。减压除去二氧己环，以获得白色固体I-76的盐(110mg，85％)。
<步骤-3>
用氨基甲酸酯(44mg，0.11mmol)和三乙胺(0.03mL，0.23mmol)处理I-76(20mg，0.11mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液。当反应完成时，在过量二氯甲烷中稀释混合物，并用过量水和盐水清洗，然后用MgSO4干燥。通过柱层析(正己烷:EtOAc＝3:1)纯化浓缩的残留物，以获得TU-KK。
<一般过程32>
<步骤–1>
与0℃下向已搅拌的2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯(100mg，0.444mmol)、TEA(0.12ml，0.888mmol)的DCM(3mL)溶液中加入氯乙酰氯(0.04ml，0.488mmol)。在室温下将反应混合物搅拌4h。反应完成后，用DCM稀释反应混合物，并用盐水清洗。用无水MgSO4干燥有机层，并在真空中浓缩。通过快速柱层析纯化粗产物，以获得I-77(120mg，89％)。
<步骤-2>
向已搅拌的I-77(50mg，0.166mmol)、TEA(0.02ml，0.166mmol)的THF(3mL)溶液中加入胺(65mg，0.249mmol)。在室温下将反应混合物搅拌4h。反应完成后，用DCM稀释反应混合物，并用盐水清洗。用无水MgSO4干燥有机层，并在真空中浓缩。通过快速柱层析纯化粗产物，以获得TU-LL。
<一般过程33>
<步骤-1>
向草酰氯(37μl，0.443mmol)的THF溶液中加入2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸乙酯(100mg，0.443mmol)，继而加入I-3(116mg，0.443mmol)。在室温下将反应搅拌1h。减压除去溶剂，并加入MC。用盐水清洗MC萃取物，并用硫酸钠干燥。过滤混合物，并通过硅胶柱层析(正己烷:EtOAc＝1:1)纯化，以获得固体TU-MM(65mg，0.120mmol，27％)。
<一般过程34>
<步骤-1>
在冰浴中冷却磷酰氯(1.53mL，16.410mmol)，并在20min的时间段内加入DMF(1.33mL，17.204mmol)(形成粘性白色固体)。用15min加入环己酮(1.06mL，10.190mmol)(粘性固体变为亮黄色溶液)。于50℃下加热混合物，分5部分每隔5分钟加入盐酸羟胺(3.97g，57.170mmol)，若需要，通过冷却将温度保持在45℃至55℃之间。将反应混合物倒入冰水(100mL)中，并将混合物水溶液搅拌1h。过滤棕色固体，用水清洗，并减压干燥，以获得棕色固体I-78(0.77g，53％)。
<步骤-2>
相继用2-巯基乙酸乙酯(0.98g，8.286mmol)和碳酸钾(0.80g，5.770mmol)处理I-78(0.77g，5.438mmol)的EtOH/THF(6mL/1mL)溶液。于90℃下将混合物加热24h，并在真空中蒸发以生成粗产物，通过柱层析(硅胶，梯度为己烷中0-15％乙酸乙酯)纯化粗产物，以获得淡黄色油I-79(0.53g，43％)。
<步骤-3>
搅拌I-79(0.1g，0.432mmol)的丙酮溶液(20mL)，滴加氯甲酸三氯甲基酯(0.05mL，0.432mmol)的5mL丙酮溶液，然后于室温下将混合物搅拌过夜。反应一完成，就减压浓缩混合物，并立即在下一反应中使用产物，而无需进一步纯化(0.09g，53％，淡黄色油)。
<步骤-4>
于室温下将I–3(0.04g，0.155mmol)和三乙胺(0.03mL，0.194mmol)在5mL干CH2Cl2中的混合物搅拌30min。在15min的时间段内向反应混合物中滴加I-80(0.05g，0.129mmol)的5mL干CH2Cl2溶液。在室温下将混合物搅拌12h，然后在真空中蒸发，以生成粗产物，通过柱层析(硅胶，梯度为己烷中0-10％乙酸乙酯)纯化该粗产物，以获得淡黄色固体TU-NN(0.05g，72％)。
<一般过程35>
<步骤-1>
于0℃下向I-23(343mg，1.0mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入三氟乙酸(3mL)。于室温下将该反应混合物搅拌3h。
<步骤-2>
于0℃下向I-81(240mg，1.0mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入三乙胺(0.15ml，1.1mmol)和邻硝基苯磺酰氯(222mg，1.0mmol)。反应完成后，用饱和NaHCO3溶液清洗混合物，用MgSO4干燥，并减压浓缩。将所得黄色固体溶解于二氯甲烷中，过滤，并用过量己烷清洗，以获得乳白色固体I-82(86％)。
<步骤-3>
于氮气气氛下将I-82(120mg，0.28mmol)溶液溶解在无水THF(2.8ml)中，并于0℃加入硼烷二甲硫醚络合物(0.14ml，1.4mmol)。将反应混合物搅拌过夜，并通过相继加入MeOH和2N HCl溶液(2ml)淬灭。10min后，用2N NaOH(2ml)中和酸性介质，并在二氯甲烷中稀释。有机相用饱和NaHCO3溶液清洗两次，然后用盐水清洗。用MgSO4干燥组合的有机层，减压浓缩，并通过柱层析(DCM:MeOH＝50:1至20:1)纯化，以获得乳白色固体I-83(37％)。
<步骤-4>
过程I-84后是一般过程1(步骤-5)的过程(乳白色固体，61％)。
<步骤-5>
在氮气气氛下将I-84(43mg，0.06mmol)溶解于无水DMF(1.2ml)中，并相继用碳酸钾(25mg，0.18mmol)和硫酚(7.4μl，0.07mmol)处理。将反应混合物搅拌3h，并减压除去DMF。将粗残留物溶解于二氯甲烷中，过滤并用丙酮清洗，以获得TU-OO(31％)。
<一般过程36>
<步骤-1>
向搅拌的4-(3-((3-(3-(叔丁基羰基)-4,7-二氢-5H-噻吩并[2,3-c]吡喃-2-基)脲基)甲基)-2-(三氟甲基)-4,7-二氢噻吩并[2,3-c]吡啶-6(5H)-基)-3-硝基苯磺酸(100mg，0.140mmol)的二氧己环溶液中加入SeO2(31mg，0.280mmol)。于80℃下将反应混合物搅拌16h。反应完成时，将反应混合物冷却至室温。过滤SeO2，然后减压蒸发二氧己环。用DCM稀释该混合物，然后用H2O和盐水清洗。用MgSO4干燥有机层。在真空中浓缩有机层并通过柱层析纯化以获得白色固体I-86(51％)。
<步骤-2>
向搅拌的4-(3-((3-(3-(叔丁基羰基)-7-氢-4,7-二氢-5H-噻吩并[2,3-c]吡喃-2-基)脲基)甲基)-2-(三氟甲基)-4,7-二氢噻吩并[2,3-c]吡啶-6(5H)-基)-3-硝基苯磺酸(60mg，0.083mmol)的DMF溶液中加入K2CO3(35mg，0.250mmol)和苯硫酚(17μl，0.167mmol)。于室温下将反应混合物搅拌3h。反应完成后，用DCM稀释反应混合物，并用H2O和盐水清洗。用MgSO4干燥有机层。在真空中浓缩有机层，然后并通过柱层析纯化以获得白色固体TU–PP(34％)。
<一般过程37>
<步骤-1>
向搅拌的4-(3-((3-(3-(叔丁基羰基)-7-氢-4,7-二氢-5H-噻吩并[2,3-c]吡喃-2-基)脲基)甲基)-2-(三氟甲基)-4,7-二氢噻吩并[2,3-c]吡啶-6(5H)-基)-3-硝基苯磺酸(100mg，0.139mmol)的DCM溶液中缓慢加入Deoxo-fluor(28μl mg，0.153mmol)。于室温下将反应混合物搅拌1h。反应完成后，用DCM稀释反应混合物，然后用H2O和盐水清洗。用MgSO4干燥有机层。在真空中浓缩有机层，然后通过柱层析纯化以获得白色固体I-87(89％)。
<步骤-2>
向已搅拌的I–87(88mg，0.122mmol)的DMF溶液中加入K2CO3(51mg，0.366mmol)和苯硫酚(25μl，0.244mmol)。于室温下将反应混合物搅拌3h。反应完成后，用DCM稀释反应混合物，并用H2O和盐水清洗。用MgSO4干燥有机层。在真空中浓缩有机层，然后通过柱层析纯化以获得白色固体TU–QQ(43％)。
<一般过程38>
<步骤-1>
在50ml圆底烧瓶中混合2-(3-((2-溴-6-((2-硝基苯基)磺酰基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[2,3-c]吡啶-3-基)甲基)脲基)-4,5,6,7-四氢苯并[b噻吩-3-羧酸叔丁酯I-84(0.07g，0.1mmol)、苯基硼酸(0.023g，0.2mmol)、Pd(dppf)Cl2(0.0043g，0.006mmol)、Na2CO3(0.02g，0.2mmol)、DME/H2O(3mL)，并于80℃下将混合物加热12h。反应完成后，倒入过量CH2Cl2，并用水清洗两次。用MgSO4干燥有机相，过滤并减压浓缩。通过柱层析(正己烷:EtOAc＝4:1)纯化粗残留物，以获得黄色固体I-88(0.056g，80％)。
<一般过程39>
<步骤-1>
在50ml圆底烧瓶中混合I-89(0.4g，0.58mmol)、苯并呋喃-2-三氟硼酸钾(0.26g，1.17mmol)、Pd(OAC)2(0.0079g，0.035mmol)、RuPhos(0.033g，0.12mmol)、Na2CO3(0.123g，1.17mmol)、EtOH(6mL)，并于85℃下将混合物加热12h。反应完成后，倒入过量CH2Cl2，并用水清洗两次。用MgSO4干燥有机相，过滤并减压浓缩。通过柱层析(正己烷:EtOAc＝4:1)纯化粗残留物，以获得黄色固体I-90(0.147g，34％)。
<一般过程40>
<步骤–1>
向已搅拌的I-69(0.6g，1.97mmol)的THF(9mL)以及MeOH(4mL)和H2O(2mL)的溶液中加入氢氧化锂(236mg，9.86mmol)。在室温下将反应混合物搅拌过夜。反应完成后，蒸发该混合物，并加入1N HCl(10.0mL)直至pH为7。通过过滤收集残留的浅色固体，并用H2O清洗，以获得I-91(460mg，产率＝84％)。
<步骤-2>
向I-91(340mg，1.23mmol)的叔丁醇(10ml)溶液中加入三乙胺(136mg，1.35mmol)和叠氮磷酸二苯酯(406mg，1.48mmol)。反应保持回流12h，冷却，并减压除去溶剂。将残留物溶解在100ml乙酸乙酯中，并用水、盐水清洗，干燥(MgSO4)并浓缩。通过快速柱层析纯化粗产物，以获得I-92(62mg，产率＝14％)。
使用常规有机合成制备根据分子式II的化合物。下文在以下一般反应流程中描绘适合的合成路径。
分子式(II)发明化合物的合成
一般过程D-1
步骤1)DI-1的合成
于室温下将哌啶基哌啶(2.5g，14.92mmol)、N-(3-溴丙基)邻苯二甲酰亚胺(2.0g，7.46mmol)和K2CO3(1.2g，8.95mmol)在丙酮(20mL)中的混合物搅拌过夜。过滤固体，并浓缩滤液以获得无需纯化可使用的DI-1。
步骤2)DI-2的合成
将DI-1(粗品2g，5.63mmol)和N2H4·H2O(0.6g，11.26mmol)的EtOH(50mL)溶液回流搅拌过夜。将溶液冷却至5℃，保持2h，过滤沉淀物并用EtOH(5mL)清洗，且滤液蒸发至一半体积。将溶液冷却至5℃，进一步保持2h，过滤沉淀，用EtOH(5mL)清洗，且滤液蒸发。将残留物溶解在1M HCl(50mL)中，用Et2O(2×50mL)清洗，并用稀释的NH3水溶液将含水部分的pH调节至10。用CH2Cl2(3×50mL)萃取混合物，干燥组合的有机部分，并蒸发溶剂，以获得黄色油DI-2(1.1g，87％)。
步骤3)DI-3的合成
向4-溴苯甲酸(1.0g，4.97mmol)的CH2Cl2(20mL)溶液中加入DI-2(1.1g，4.97mmol)、EDC(1.1g，5.96mmol)、Et3N(1.4mL，9.94mmol)和HOBt(0.8g，5.96mmol)。于室温下搅拌5h后，混合物分配在CH2Cl2(10mL)和水(10mL)之间。收集有机层，并在真空中浓缩。通过柱层析(CH2Cl2中30％MeOH)纯化，获得乳白色固体DI-3(1.1g，55％)。
步骤4)DP-A的合成
在10m微波管中混合DI-3(0.03g，0.073mmol)、硼酸(0.088mmol)、Pd(PPh3)4(0.002g，0.002mmol)、Na2CO3(0.015g，0.146mmol)、DME/H2O(2mL)，并且在120℃下对混合物进行微波辐射30min。然后过滤反应混合物，并浓缩。通过柱层析(CH2Cl2中50％MeOH)纯化残留物，以获得白色固体DP-A(33-50％)。
一般过程D-2
步骤1)DI-4的合成
将环胺(1.19mmol)加入0.1g(0.59mmol)4-氟-苯甲酸乙酯的2mL DMSO悬浮液中。于80℃下将反应混合物搅拌过夜30h。加水后，用CH2Cl2(10mL×3)萃取混合物，分离有机相，并使用旋转蒸发器除去溶剂。通过柱层析(己烷中10％EtOAc)纯化，获得乳白色固体DI-4(35-65％)。
步骤2)DI-5的合成
将DI-4和NaOH(10当量)加入EtOH/H2O(10:1)溶液中。将混合物加热回流3h。将混合物冷却至室温，并蒸发。将混合物溶解在水中，用10％HCl水溶液缓慢酸化，并用CH2Cl2萃取。用MgSO4干燥提取物，过滤，并浓缩获得乳白色固体DI-5(90-92％)。
步骤3)DP-B的合成
向3-([1,4'-二派啶]-1'-基)丙烷-1-胺(0.02g，0.09mmol)的CH2Cl2(2mL)溶液中加入DI-5(0.11mmol)、EDC(0.02g，0.11mmol)、Et3N(0.02mL，0.18mmol)和HOBt(0.014g，0.11mmol)。于室温下搅拌过夜后，混合物分配在CH2Cl2(10mL)和水(10mL)之间。收集有机层，并在真空中浓缩。通过柱层析(CH2Cl2中30％MeOH)纯化，获得DP-B(15-22％)。
一般过程D-3
步骤1)DI-6的合成
用N2气对密封管中在甲苯中的4-溴苯甲酸乙酯(0.10g，0.44mmol)、4-甲氧基苯酚(0.27g，2.18mmol)、Pd(OAc)2(0.006g，0.03mmol)、X-phos(0.02g，0.04mmol)和K3PO4(0.23g，1.09mmol)进行吹扫，并于90℃下将反应混合物加热16h。将反应混合物冷却至室温，并通过过滤除去无机层。用水稀释滤液，并用EtOAc萃取。用饱和盐水溶液清洗有机层，用Na2SO4干燥，并浓缩。使用在己烷中用作洗脱剂的0-20％EtOAc通过柱层析纯化粗产物。
步骤2)DI-7的合成
将DI-6(0.09g，0.33mmol)加入NaOH(0.13g，3.30mmol)的EtOH/H2O(10:1)溶液中。将混合物加热回流3h。将混合物冷却至室温，并蒸发。将混合物溶解在水中，用10％HCl水溶液缓慢酸化，并用CH2Cl2萃取。用MgSO4干燥提取物，过滤，并浓缩获得白色固体DI-7(0.08g，94％)。
步骤3)DP-C的合成
DI-7(0.05g，0.21mmol)、EDC(0.05g，0.25mmol)、Et3N(0.06mL，0.41mmol)和HOBt(0.03g，0.25mmol)溶液。于室温下搅拌5h后，混合物分配在CH2Cl2(10mL)和水(10mL)之间。收集有机层，并在真空中浓缩。通过柱层析(CH2Cl2中30％MeOH)纯化，获得DP-C(12-35％)。
一般过程D-4
步骤1)DI-8的合成
向已搅拌的4-溴丁酸(2g，11.98mmol)的CH2Cl2(60.0mL)溶液中加入4-苯氧基苯胺(2.2g，11.98mmol)、EDC(3.44g，17.96mmol)、HoBt(0.81g，5.99mmol)和TEA(2.5ml，17.96mmol)。在室温下将反应混合物搅拌12h。反应完成后，用CH2Cl2稀释反应混合物，并用盐水清洗。用无水MgSO4干燥有机层，并在真空中浓缩。通过快速柱层析纯化粗产物，以获得DI-8(500mg，产率＝12％)。
步骤2)DP-D的合成
向已搅拌的DI-8(97mg，0.29mmol)的丙酮(1.0ml)溶液中加入1,4'-联哌啶(97mg，0.58mmol)、K2CO3(3.44g，17.96mmol)。通过快速柱层析纯化粗产物，以获得DP-D(8mg，产率＝6％)。
一般过程D-5
步骤1)DI-9的合成
于0℃下向4-溴苯磺酰氯(50mg，0.20mmol)的溶液中加入3-([1,4'-联哌啶]-1'-基)丙烷-1-胺(53mg，0.24mmol)和三乙胺(0.06ml，0.40mmol)的CH2Cl2(4mL)溶液。将混合物搅拌2h。反应完成后，用CH2Cl2稀释反应混合物，并用盐水清洗。用无水MgSO4干燥有机层，并在真空中浓缩。通过快速柱层析纯化粗产物，以获得DI-9(21mg，产率＝24％)。
步骤2)DP-E的合成
向DI-9(40mg，0.09mmol)的1,2-二甲氧基乙烷(1ml)和H2O(0.5ml)的溶液中加入硼酸(16mg，0.12mmol)、Pd(dppf)Cl2(1.98mg，0.003mmol)和Na2CO3(19mg，0.18mmol)。在微波辐射下于100℃将反应混合物加热10min。反应完成后，用CH2Cl2稀释反应混合物，并用盐水清洗。用无水MgSO4干燥有机层，并在真空中浓缩。通过快速柱层析纯化粗产物，以获得DP-E(8mg，产率＝19％)。
实施例2：生物活性
基因型1/2嵌合HCVcc检测
按25μL培养基2400个细胞/孔将Huh-7.5目标细胞铺于384孔板(Greiner bio-one(葛莱娜第一生化有限公司)，μ透明黑色)中。过夜培养后，加入在10μL细胞培养基中逐级稀释的化合物。2h化合物处理后，用40μL基因型1/2嵌合细胞培养衍生的HCV(HCVcc)培养细胞，该HCVcc表达HCV基因型1a分离物(TN保藏号EF621489)的结构蛋白和具有纳米荧光素酶报告子的HCV基因型2a(JFH-1)的非结构蛋白。感染后72h时，纳米荧光素酶活性(Nano-GloTM，Promega公司)和细胞ATP(Cell titer-GloTM，Promega公司)分别被测定作为HCV复制和细胞毒性的指标。通过使用GraphPad Prism(绘制医学图表)(GraphPad软件)的非线性回归分析计算EC50和CC50。
利用嵌合HCVcc检测的泛基因型活性试验
为了评估对各种HCV基因型的跨基因型抗病毒活性，使用如上所述的嵌合HCVcc测试分子式I和II。使用表达HCV基因型1b(J4)、2a(J6)、2b(J8)、3a(S52)、4a(ED43)、5a(SA13)、6a(HK6a)或7a(QC69)的结构蛋白并接着表达负责病毒RNA复制和海肾荧光素酶报告基因(Renilla luciferase reporter gene)的HCV基因型2a(JFH-1)衍生的非结构蛋白的HCV嵌合体来监测病毒复制。分子式I和II有效地抑制了所有测试的HCV亚型和基因型(表3)。
药物组合分析
药物组合研究对临床前药物研究越来越有价值。在诊所中，可以用病毒抑制剂组合来治疗慢性HCV感染患者，以缩短治疗期，提高持续病毒反应率，预防病毒药物抗性等。如果组合是协同的或添加的，则可以使用较低的药物剂量来实现相同或者甚至更好的功效，同时可以通过组合各种浓度的多种抑制剂在体外评估到较低的毒性。此外，药物组合研究还被工具化，用于排除新型临床化合物不会降低标准治疗的有效性，从而避免了对患者潜在有害的结果。周廷潮(Ting-Chao Chou)公布了开创性的著作(Theoretical Basis,Experimental Design,and Computerized Simulation of Synergism and Antagonism in Drug Combination Studies(药物组合研究中协同作用和措抗作用的理论基础、实验设计与计算机化模拟))，且他的著作可以用于评价体外药物组合(周，2006年)[22]。该著作得到了对药物的组合指数(CI)的定义，CI<1、＝1或>1分别指协同作用、相加作用或拮抗作用。
根据周的著作，我们将分子式I与所选择的抗病毒剂(特拉匹韦、索菲布韦、达卡他韦或IFN-α)以每种化合物7种不同的浓度组合(每种组合总共49个数据点)，并确定了CI。实验重复3次，且我们通过计算权重CI值，可重现地观察到对于基因型2(表4)和基因型1/2嵌合HCV(表5)，与特拉匹韦、达卡他韦和IFN-α有强协同作用并与索非布韦有协同作用。我们计算的权重CI值说明分子式I非常适合组合疗法，并因此对患者有益。
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表1分子式I系列的抗HCVcc基因型1/2活性
活性范围：>10μM:+,1-10μM:++,0.1-1μM:+++,<0.1μM:++++
表2分子式II系列的抗HCVcc基因型1/2活性
活性范围：>10μM:+,1-10μM:++,0.1-1μM:+++,<0.1μM:++++
表3与分子式I和II的代表物的跨基因型活性
活性范围：>10μM:+,1-10μM:++,0.1-1μM:+++,<0.1μM:++++；gt指的是基因型，数字和字母的组合“1b”、“2a”、“2b”等指特定基因型和亚型。
表4分子式I的代表物在HCV基因型2感染系统中的药物组合评价
a CI值基于组合指数等幅射图方程式(isobologram equation)：CI＝[(D)1/(Dx)1]+[(D)2/(Dx)2]，其中Dx＝Dm[fa/(1-fa)]1/m
b由于高作用程度比低作用程度更重要，权重CI值设计为CIwt＝[CI50+2CI75+3CI90+4CI95]/10
表5分子式I的代表物在HCV基因型1/2嵌合感染系统中的药物组合评价
a CI值基于组合指数等幅射图方程式：CI＝[(D)1/(Dx)1]+[(D)2/(Dx)2]，其中Dx＝Dm[fa/(1-fa)]1/m
b由于高作用程度比低作用程度更重要，权重CI值设计为CIwt＝[CI50+2CI75+3CI90+4CI95]/10。