化合物的制作方法

本发明涉及苯并二氮杂䓬衍生物的苯磺酸(benzene sulphonic acid (besylate))盐、包含其的药物组合物及其作为用于治疗许多疾病或病况的治疗剂的用途。具体而言，本发明涉及苯磺酸盐的结晶固态形式、其制备方法及其在治疗适用布罗莫结构域抑制剂的疾病或病况中的用途。

发明背景

专利申请WO2011/054553和WO2011/054845(两者均以GlaxoSmithKline LLC的名称)公开了化合物2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺作为BET家族布罗莫结构域抑制剂，并描述了其治疗用途。该化合物的化学结构由式(I)表示：

仍然需要鉴定式(I)化合物的形式，其为其开发作为药物产品提供合适的特性。具体而言，需要提供一种或多种合适的特性诸如吸水性、稳定性、溶解性和加工性的式(I)化合物的形式。

发明概述

在本发明的第一个方面，提供2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐，特别是其晶形。

在本发明的第二个方面，提供用于制备2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐、包括其晶形的方法，以及用于此类方法中的中间体。

在本发明的第三个方面，提供包含2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐和一种或多种药学上可接受的赋形剂的药物组合物。

在本发明的第四个方面，提供2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐，其用于疗法中，具体地用于治疗适用布罗莫结构域抑制剂的疾病或病况。

在本发明的第五个方面，提供治疗有需要的主体中的适用布罗莫结构域抑制剂的疾病或病况的方法，其包括施用治疗有效量的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐。

在本发明的第六个方面，提供2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐在制造用于治疗适用布罗莫结构域抑制剂的疾病或病况的药物中的用途。

附图说明

图1：显示对于2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的结晶固态形式记录的X-射线粉末衍射(XRPD)图谱。

图2：显示对于2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的结晶固态形式记录的¹³C固态NMR (SSNMR)谱。

发明详述

本发明在第一个方面提供2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐。应当理解，苯磺酸盐也可以被称为苯磺酸盐(besylate salt)或苯磺酸盐(benzene sulphonate salt)。

在一个实施方案中，本发明提供2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐，即式(II)化合物

式(II)化合物通常含有每摩尔当量的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺约0.90至约1.10摩尔当量的苯磺酸；包括约0.95至约1.05摩尔当量的苯磺酸。在一个具体实施方案中，本发明的盐含有每摩尔当量的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺约1摩尔当量的苯磺酸。此摩尔比可以容易地通过本领域技术人员可得的各种方法、例如通过¹H NMR或通过元素分析来测定。

应当理解，2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐可以呈其任何合适的无水、溶剂化(例如水合)和/或多晶型形式。

本发明还提供结晶固态形式的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐。

在一个实施方案中，提供结晶无水固态形式的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐。

在一个实施方案中，本发明提供结晶固态形式的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐，其特征在于基本上如图1中所示的X-射线粉末衍射(XRPD)图谱，其中XRPD图谱在度2θ角(degrees 2 theta angles)的方面表示并且用使用铜Kα-辐射的衍射仪使用本文所述的程序获得。

在一个实施方案中，本发明提供结晶固态形式的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐，其特征在于X-射线粉末衍射图谱包含至少三个以度2θ表示的衍射角，其选自约5.5、7.4、9.1、10.0、10.4、13.3、13.6、14.9、18.7、20.4、20.9、22.8和23.1° (± 0.1°)。

在另一个实施方案中，本发明提供结晶固态形式的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐，其特征在于X-射线粉末衍射图谱包含至少十个衍射角或至少九个衍射角或至少八个衍射角或至少七个衍射角或至少六个衍射角或至少五个衍射角或至少四个衍射角(以度2θ表示)，其选自约5.5、7.4、9.1、10.0、10.4、13.3、13.6、14.9、18.7、20.4、20.9、22.8和23.1° (± 0.1°)。

在另一个实施方案中，本发明提供结晶固态形式的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐，其特征在于X-射线粉末衍射图谱包含在约5.5、10.0、18.7、20.4和23.1° (± 0.1°)以度2θ表示的衍射角。

当XRPD图谱包含在指定值的±0.1度2θ内的衍射角时，XRPD图谱将被理解为包含“约”本文指定的值的衍射角(以度2θ表示)。此外，本领域技术人员众所周知和理解，涉及获得X-射线粉末衍射(XRPD)图谱的所用装置、湿度、温度、粉末晶体的方向和其他参数可能引起衍射图的线的外观、强度和位置的一些变异性。本文提供的“基本上如图1中所示”的X-射线粉末衍射图谱是本领域技术人员视为代表与提供图1的XRPD图谱的化合物具有相同晶型的化合物的XRPD图谱。即，XRPD图谱可与图1的XRPD图谱相同，或更可能其可稍微不同。此XRPD图谱可能不必显示本文呈现的任一衍射图谱的各条线，和/或可以显示由涉及获得数据的条件的差异导致的所述线的外观、强度或位移的轻微变化。本领域技术人员能够通过比较其XRPD图谱来确定晶体化合物的样品是否具有与本文公开的形式相同的形式或不同的形式。例如，本领域技术人员可将2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的样品的XRPD图谱与图1重叠，并使用本领域的专业技术和知识容易地确定所述样品的XRPD图谱是否基本上如图1中所示。

在一个实施方案中，本发明提供结晶固态形式的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐，其特征在于基本上如图2中所示的¹³C SSNMR谱。

在一个实施方案中，本发明提供结晶固态的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐，其特征在于包含至少十个峰(表示为以ppm计的化学位移)的¹³C SSNMR谱，所述峰选自在约169.6、167.5、165.6、160.1、159.4、157.1、155.9、154.3、152.4、146.9、145.8、140.0、137.9、135.9、133.4、132.0、130.6、129.9、128.3、127.1、125.6、123.5、120.6、119.1、114.1、113.7、58.0、53.6、53.1、40.7、37.0、34.9、15.8、14.7和12.0 (±0.2 ppm)的峰。

在一个实施方案中，本发明提供结晶固态的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐，其特征在于包含至少二十个峰或至少十八个峰或至少十六个峰或至少十四个峰或至少十二个峰(表示为以ppm计的化学位移)的¹³C SSNMR谱，所述峰选自在约169.6、167.5、165.6、160.1、159.4、157.1、155.9、154.3、152.4、146.9、145.8、140.0、137.9、135.9、133.4、132.0、130.6、129.9、128.3、127.1、125.6、123.5、120.6、119.1、114.1、113.7、58.0、53.6、53.1、40.7、37.0、34.9、15.8、14.7和12.0 (±0.2 ppm)的峰。

当¹³C SSNMR谱包含指定值的± 0.2 ppm内的峰时，¹³C SSNMR谱将被理解为包含“约”本文指定值的峰(以ppm表示)。此外，本领域技术人员还众所周知和理解，涉及获得¹³C SSNMR谱的所用装置、湿度、温度、粉末晶体的方向和其他参数可能引起所述谱的峰的外观、强度和位置的一些变异性。本文提供的“基本上如图2中所示”的¹³C SSNMR谱是本领域技术人员视为代表与提供图2的¹³C SSNMR谱的化合物具有相同晶型的化合物的¹³C SSNMR谱。即，¹³C SSNMR谱可与图2的¹³C SSNMR谱相同，或更可能其可稍微不同。此¹³C SSNMR谱可能不必显示本文呈现的任一谱的各峰，和/或可以显示由涉及获得数据的条件的差异导致的所述峰的外观、强度或位移的轻微变化。本领域技术人员能够通过比较其¹³C SSNMR谱来确定晶体化合物的样品是否具有与本文公开的形式相同的形式或不同的形式。例如，本领域技术人员可将2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的样品的¹³C SSNMR谱与图2重叠，并使用本领域的专业技术和知识容易地确定所述样品的¹³C SSNMR谱是否基本上如图2中所示。

在又进一步实施方案中，如本领域普通技术人员将理解，2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐可以特征在于表征前述实施方案中的每个和全部的分析数据的组合。例如，在一个实施方案中，结晶固态形式的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的特征在于基本上如图1中所示的X-射线粉末衍射(XRPD)图谱和基本上如图2中所示的¹³C SSNMR谱。在另一个说明性实施方案中，结晶固态形式的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的特征在于包含在约5.5、10.0、18.7、20.4和23.1° (± 0.1°)的衍射角(以度2θ表示)的X-射线粉末衍射(XRPD)图谱和基本上如图2中所示的¹³C SSNMR谱。

本发明进一步提供用于制备2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的方法，其包括使2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺或其溶剂合物与苯磺酸接触。

已经发现，具有改善的杂质概况的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐可以通过使苯磺酸与2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺苯的乙腈溶剂合物反应而获得。在一个实施方案中，提供用于制备2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的方法，其包括使2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的乙腈溶剂合物与苯磺酸接触。通常，反应在合适的有机溶剂诸如2-甲基四氢呋喃或溶剂诸如乙腈和2-甲基四氢呋喃的混合物中进行。

中间体，2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的乙腈溶剂合物，即式(Ia)化合物

形成本发明的又一个进一步方面。该中间体化合物可以通过本文所述的程序制备。

2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐也可以根据本文概述的程序和方案1中概述的程序制备。

方案1

2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐是布罗莫结构域抑制剂，更具体地BET家族布罗莫结构域抑制剂，因此据信在治疗适用布罗莫结构域抑制剂的疾病或病况中具有潜在实用性。

本发明因此提供2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐，其用于疗法中。

本发明还提供2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐，其用于治疗适用布罗莫结构域抑制剂的疾病或病况。在一个具体实施方案中，提供2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐，其用于治疗急性或慢性自身免疫和/或炎性病况。在一个进一步实施方案中，提供2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐，其用于治疗癌症。

本发明进一步提供2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐在制造用于治疗适用布罗莫结构域抑制剂的疾病或病况的药物中的用途。

本发明进一步提供治疗有需要的主体中的适用布罗莫结构域抑制剂的疾病或病况的方法，其包括施用治疗有效量的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐。

合适地，有需要的主体是哺乳动物，特别是人。

如本文所使用，术语“有效量”意指将引发例如研究人员或临床医师寻求的组织、系统或主体(例如，人)的生物学或医学反应的药物或药剂的量。此外，术语“治疗有效量”是指与没有接受此类量的相应主体相比导致疾病、病症或副作用的改善的治疗、治愈、预防或减轻或疾病或病症的进展速率降低的任何量。该术语在其范围内还包括有效增强正常生理功能的量。

布罗莫结构域抑制剂可用于治疗多种急性或慢性自身免疫和/或炎性病况，诸如类风湿性关节炎、骨关节炎、急性痛风、牛皮癣、全身性红斑狼疮、多发性硬化、炎性肠病(克罗恩氏病和溃疡性结肠炎)、哮喘、慢性阻塞性气管疾病、肺炎、心肌炎、心包炎、肌炎、湿疹、皮炎(包括异位性皮炎)、秃头症、白癜风、大疱性皮肤病、肾炎、脉管炎、高胆固醇血症、动脉粥样硬化、阿尔兹海默氏病、抑郁症、舍格伦综合征(Sjögren's syndrome)、涎腺炎、视网膜中央静脉栓塞、视网膜分支静脉栓塞、欧文-加斯综合征(Irvine-Gass syndrome；白内障后和手术后)、色素性视网膜炎、睫状体平坦部炎、鸟枪弹丸样视网膜脉络膜病变、视网膜前膜、囊性黄斑水肿、旁中心凹毛细管扩张(parafoveal telengiectasis)、牵引性黄斑病、玻璃体黄斑牵引综合征、视网膜脱落、视神经视网膜炎、特发性黄斑水肿、视网膜炎、干眼症(干燥性角膜结膜炎)、春季角膜结膜炎、异位性角膜结膜炎、葡萄膜炎(诸如前葡萄膜炎、全葡萄膜炎、后葡萄膜炎、葡萄膜炎相关的黄斑水肿)、巩膜炎、糖尿病性视网膜病变、糖尿病斑点水肿、年龄相关性黄斑营养不良、肝炎、胰脏炎、原发性胆汁性肝硬化、硬化性胆管炎、阿狄森氏病(Addison's disease)、下垂体炎、甲状腺炎、I型糖尿病、II型糖尿病、巨细胞动脉炎、肾炎(包括狼疮肾炎)、涉及器官的血管炎(诸如肾小球性肾炎)、血管炎(包括巨细胞动脉炎)、韦格纳氏肉芽肿病(Wegener's granulomatosis)、结节性多动脉炎、白塞氏病(Behcet's disease)、川崎病(Kawasaki disease)、高安氏动脉炎(Takayasu's Arteritis)、坏疽性脓皮病、涉及器官的血管炎和移植器官的急性排斥。

在一个实施方案中，急性或慢性自身免疫和/或炎性病况是经由调节APO-A1的脂质代谢病症，诸如高胆固醇血症、动脉粥样硬化和阿尔兹海默氏病。

在另一个实施方案中，急性或慢性自身免疫和/或炎性病况是呼吸病症，诸如哮喘或慢性阻塞性气管疾病。

在另一个实施方案中，急性或慢性自身免疫和/或炎性病况是全身性炎性病症，诸如类风湿性关节炎、骨关节炎、急性痛风、牛皮癣、全身性红斑狼疮、多发性硬化或炎性肠病(克罗恩氏病和溃疡性结肠炎)。在一个具体实施方案中，急性或慢性自身免疫和/或炎性病况是类风湿性关节炎，具体而言难治性(抗治疗性)类风湿性关节炎。

在另一个实施方案中，急性或慢性自身免疫和/或炎性病况是多发性硬化。

在另一个实施方案中，急性或慢性自身免疫和/或炎性病况是I型糖尿病。

布罗莫结构域抑制剂可用于治疗涉及对细菌、病毒、真菌、寄生物或其毒素感染的炎性反应的疾病或病况，诸如败血症、急性败血症、脓毒症综合征、败血性休克、内毒素血症、全身性炎性反应综合征(SIRS)、多器官功能障碍综合征、毒性休克综合征、急性肺损伤、ARDS(成人呼吸窘迫综合征)、急性肾衰竭、爆发性肝炎、烧伤、急性胰脏炎、手术后综合征、肉状瘤病、赫氏反应(Herxheimer reaction)、脑炎、脊髓炎、脑膜炎、疟疾和与病毒感染(诸如流感、带状疱疹、单纯疱疹和冠状病毒)相关的SIRS。

在一个实施方案中，适用布罗莫结构域抑制剂的疾病或病况为败血症、脓毒症综合征、败血性休克和内毒素血症。在另一个实施方案中，布罗莫结构域抑制剂适用于治疗急性或慢性胰脏炎。在另一个实施方案中，布罗莫结构域抑制剂适用于治疗烧伤。

在一个实施方案中，涉及对细菌、病毒、真菌、寄生物或其毒素感染的炎性反应的疾病或病况是急性败血症。

布罗莫结构域抑制剂可用于治疗与局部缺血再灌注损伤相关的病况，诸如心肌梗塞、脑血管局部缺血(中风)、急性冠状动脉综合征、肾再灌注损伤、器官移植、冠状动脉旁路移植、心肺转流术(cardio-pulmonary bypass procedures)、肺、肾、肝、胃肠或周肢栓塞。

布罗莫结构域抑制剂可用于治疗心血管疾病，诸如冠状动脉疾病(例如，心绞痛和心肌梗塞)、脑血管局部缺血(中风)、心脏衰竭、肺动脉高血压(PAH)、高血压性心脏病、风湿性心脏病、心肌病、心房颤动、先天性心脏病、心内膜炎、主动脉瘤和外周动脉疾病。

在一个实施方案中，适用布罗莫结构域抑制剂的疾病或病况是肺动脉高血压(PAH)。

布罗莫结构域抑制剂可用于治疗纤维化病况，诸如特发性肺部纤维化、肾纤维化、手术后狭窄、瘢痕瘤疤形成、硬皮病(包括硬斑病)和心肌纤维化。

在一个实施方案中，适用布罗莫结构域抑制剂的疾病或病况是硬皮病(全身性硬化症)。

布罗莫结构域抑制剂可用于治疗病毒感染，诸如单纯疱疹感染和再活化、唇疱疹、带状疱疹(herpes zoster)感染和再活化、水痘、带状疱疹(shingle)、人类乳头状瘤病毒(HPV)、人类免疫缺陷病毒(HIV)、宫颈肿瘤、腺病毒感染，包括急性呼吸疾病、痘病毒感染(诸如牛痘和天花)和非洲猪瘟病毒。在一个实施方案中，病毒感染是皮肤或宫颈上皮的HPV感染。在另一个实施方案中，病毒感染是潜伏HIV感染。

布罗莫结构域抑制剂可用于治疗多种骨病症，诸如骨质疏松和骨质减少。

布罗莫结构域抑制剂可用于治疗癌症，包括血液肿瘤(诸如白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤)，上皮肿瘤(包括肺癌、乳腺癌和结肠癌)，中线癌，间叶细胞、肝、肾和神经肿瘤。布罗莫结构域抑制剂进一步可用于治疗一种或多种选自以下的癌症：脑癌(神经胶质瘤)、成胶质细胞瘤、Bannayan-Zonana综合征、考登病(Cowden disease)、Lhermitte-Duclos病、乳腺癌、炎性乳腺癌、结肠直肠癌、肾母细胞瘤(Wilm's tumor)、尤因氏肉瘤(Ewing's sarcoma)、横纹肌肉瘤、室管膜瘤、成神经管细胞瘤、结肠癌、头颈癌、肾癌、肺癌、肝癌、黑色素瘤、鳞状细胞癌、卵巢癌、胰脏癌、前列腺癌、去势耐受性前列腺癌、肉瘤癌、骨肉瘤、骨巨细胞瘤、甲状腺癌、淋巴母细胞性T细胞白血病、慢性骨髓性白血病、慢性淋巴细胞白血病、毛细胞白血病、急性成淋巴细胞性白血病、急性骨髓性白血病、慢性中性粒细胞白血病、急性成淋巴细胞性T细胞白血病、浆细胞瘤、免疫母细胞性大细胞白血病、套细胞白血病、多发性骨髓瘤、巨核母细胞性白血病、急性巨核细胞性白血病、前髓细胞性白血病、混合谱系白血病、红白血病、恶性淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkins lymphoma)、非霍奇金氏淋巴瘤、淋巴母细胞性T细胞淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤(Burkitt's lymphoma)、滤泡性淋巴瘤、成神经细胞瘤、膀胱癌、泌尿上皮癌、外阴癌、宫颈癌、子宫内膜癌、肾癌、间皮瘤、食道癌、唾液腺癌、肝细胞癌、胃癌、鼻咽癌、颊癌、口癌、GIST(胃肠道间质瘤)、NUT-中线癌和睾丸癌。

在一个实施方案中，癌症为白血病，例如选自急性单核细胞性白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、慢性淋巴细胞性白血病和混合谱系白血病(MLL)的白血病。在一个具体的实施方案中，癌症为急性骨髓性白血病(AML)。在另一个实施方案中，癌症为NUT-中线癌。在另一个实施方案中，癌症为多发性骨髓瘤。在另一个实施方案中，癌症为肺癌，诸如小细胞肺癌(SCLC)。在另一个实施方案中，癌症为神经母细胞瘤。在另一个实施方案中，癌症为伯基特氏淋巴瘤。在另一个实施方案中，癌症为子宫颈癌。在另一个实施方案中，癌症为食道癌。在另一个实施方案中，癌症为卵巢癌。在另一个实施方案中，癌症为乳腺癌。在另一个实施方案中，癌症为结肠直肠癌。

术语“适用布罗莫结构域抑制剂的疾病或病况”意欲包括以上疾病或病况中的每种或全部。

尽管可能对于用于疗法，2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐可以作为原料化学品施用，但通常使活性成分与一种或多种药学上可接受的赋形剂呈现为药物组合物。药物组合物可用于治疗本文所述的病况中的任一种。

因此，在一个进一步方面，本发明提供包含2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐和一种或多种药学上可接受的赋形剂的药物组合物。所述赋形剂在与组合物的其他成分相容且对其受体无害的意义上必须是“可接受的”。

在一个实施方案中，本发明涉及包含固态结晶形式、具体而言如本文具体描述的结晶固态形式的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的药物组合物。在另一个实施方案中，本发明涉及包含2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的药物组合物，其中至少10重量%、或至少20重量%、或至少30重量%、或至少40重量%、或至少50重量%、或至少60重量%、或至少70重量%、或至少80重量%、或至少90重量%的苯磺酸盐作为如本文所述的结晶固态形式存在。在另一个实施方案中，本发明涉及包含2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的药物组合物，其中至少95重量%、或至少96重量%、或至少97重量%、或至少98重量%、或至少99重量%、或至少99.5重量%、或至少99。8重量%、或至少99.9重量%的苯磺酸盐作为如本文具体描述的结晶固态形式存在。

在另一个实施方案中，本发明涉及包含2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的药物组合物，其中不超过90重量%的苯磺酸盐是无定形的。在另一个实施方案中，本发明涉及包含2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的药物组合物，其中不超过80重量％、或不超过70重量％、或不超过60重量％、或不超过50重量％、或不超过40重量％、或不超过30重量％、或不超过20重量％、或不超过10重量％的苯磺酸盐是无定形的。在另一个实施方案中，本发明涉及包含2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的药物组合物，其中不超过5重量％、或不超过4重量％、或不超过3重量％、或不超过2重量％、或不超过1重量％、或不超过0.5重量％、或不超过0.2重量％、或不超过0.1重量％的苯磺酸盐是无定形的。

在另一个实施方案中，本发明涉及包含2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的药物组合物，其中不超过90重量％的苯磺酸盐以除了如本文具体描述的结晶固态形式以外的形式存在。在另一个实施方案中，本发明涉及包含2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的药物组合物，其中不超过80重量％、或不超过70重量％、或不超过60重量％、或不超过50重量％、或不超过40重量％、或不超过30重量％、或不超过20重量％、或不超过10重量％的苯磺酸盐以除了如本文具体描述的结晶固态形式以外的结晶固态形式存在。在另一个实施方案中，本发明涉及包含2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的药物组合物，其中不超过5重量％、或不超过4重量％、或不超过3重量％、或不超过2重量％、或不超过1重量％、或不超过0.5重量％、或不超过0.2重量％、或不超过0.1重量％的苯磺酸盐以除了如本文具体描述的结晶固态形式以外的结晶固态形式存在。

合适的组合物可通过药剂学领域中已知的任何方法(例如通过将活性成分与赋形剂组合)来制备。用于配制2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的合适方法包括本文所述的那些、专利申请WO2011/054553中描述的方法和/或本领域技术人员熟悉的方法，其描述于Remington:The Science and Practice of Pharmacy，第21版2006年。根据本发明的另一个方面，还提供制备药物组合物的方法，其包括将2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐与一种或多种药学上可接受的赋形剂混合。

药物组合物可适用于通过任何适当途径施用，例如通过经口(包括经颊或舌下)、直肠、吸入、鼻内、局部(包括经颊、舌下或经皮)、经眼(包括局部、眼内、结膜下、巩膜上、筋膜下(sub-Tenon))、阴道或肠胃外(包括皮下、肌肉内、静脉内或皮内)途径。

在一个实施方案中，药物组合物适用于肠胃外施用，尤其静脉内施用。

在一个实施方案中，药物组合物适用于局部施用。

在一个具体实施方案中，药物组合物适用于经口施用。

尽管2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐在标准稳定性研究中没有分解，已经发现当与某些常用的药物赋形剂(例如崩解剂诸如交联羧甲基纤维素钠)配制为片剂剂型时，可以发生歧化。

因此，本发明提供包含2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐和抑制歧化的药学上可接受的赋形剂的片剂形式的药物组合物。在一个实施方案中，抑制歧化的药物赋形剂是崩解剂交联聚维酮。

应当理解，本申请的药物制剂可以包含其他药物赋形剂，诸如稀释剂、润滑剂、填料、填充剂等。

在一个进一步实施方案中，提供片剂形式的药物组合物，其包含：

a) 2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐；

b) 交联聚维酮；

c) 一种或多种填料或填充剂；

d) 一种或多种稀释剂；和

e) 一种或多种润滑剂；

在一个实施方案中，片剂形式的药物组合物是薄膜包衣的。

2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐通常以0.1 – 50%w/w、更通常1 – 20% w/w的量存在于根据本发明的片剂形式的药物组合物中。

崩解剂交联聚维酮通常以1 – 10%、具体地2 – 6% w/w的量存在于所述制剂中。

用于本发明的药物组合物中的潜在填料或填充剂是本领域技术人员熟悉的并且如Rowe等人(编)(Handbook of Pharmaceutical Excipients，第7版，London: Pharmaceutical Press 2012)(其内容通过引用并入本文)中所述。在一个实施方案中，所述填料是纤维素衍生物，诸如微晶纤维素(例如Avicel PH112)。通常，所述填料或填充剂以制剂的10 – 90% w/w、更通常25 – 75% w/w、甚至更具体地35 – 65% w/w或35 – 50% w/w的量存在。

用于本发明的药物组合物中的潜在稀释剂是本领域技术人员熟悉的并且如Rowe等人(编)(Handbook of Pharmaceutical Excipients，第7版，London: Pharmaceutical Press 2012)(其内容通过引用并入本文)中所述。通常，所述稀释剂以制剂的10 – 90% w/w、更通常25 – 75% w/w、甚至更具体地35 – 65% w/w或35 – 50% w/w的量存在。在一个实施方案中，所述稀释剂是甘露醇。

用于本发明的药物组合物中的潜在润滑剂是本领域技术人员熟悉的并且如Rowe等人(编)(Handbook of Pharmaceutical Excipients，第7版，London: Pharmaceutical Press 2012)(其内容通过引用并入本文)中所述。通常，所述润滑剂以制剂的0.1 – 5% w/w、更通常0.5 – 2.5 % w/w的量存在。在一个实施方案中，所述润滑剂是硬脂酸镁。在另一个实施方案中，所述润滑剂是硬脂酰富马酸钠(sodium stearyl fumerate)。

此外，当需要或必要时，也可以将合适的缓冲剂、粘合剂、助流剂、甜味剂、香料和着色剂并入混合物中。

药物组合物可以每单位剂量含有预定量的活性成分的单位剂型呈现。优选的单位剂量组合物为含有日剂量或亚剂量或其适当部分的活性成分的那些。因此，此类单位剂量可一天施用超过一次。优选的单位剂量组合物是含有如上文所述的每日剂量或亚剂量(用于一天施用多于一次)或其适当部分的活性成分的那些。

治疗有效量的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐将取决于多种因素，包括例如主体的年龄和体重、需要治疗的精确病况和其严重程度、制剂性质和施用途径，并将最终由主治医师决定。在药物组合物中，用于经口或肠胃外施用的各剂量单位优选含有0.01至3000mg、更优选0.5至1000mg的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐(其被计算为游离碱)。用于经鼻或吸入施用的各剂量单位优选含有0.001至50mg、更优选0.01至5mg的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐(其被计算为游离碱)。

2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐可以以下日剂量施用(对于成年患者)：例如每天0.01mg至3000mg、每天0.5mg至1000mg或每天100mg至2500mg的经口或肠胃外剂量，或每天0.001mg至50mg或每天0.01mg至5mg的经鼻或吸入剂量的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐。该量可以每天单剂量或更通常以每天多次(诸如两次、三次、四次、五次或六次)的亚剂量给予，使得总日剂量是相同的。

2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐可单独采用或与其他治疗剂组合采用。本发明的组合疗法包括施用2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐和至少一种其他治疗活性剂。2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐和其他治疗活性剂可在单一药物组合物中一起或分开施用，并且在分开施用时，这可同时或以任何顺序依次进行。将选择2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐和其他治疗活性剂的量和施用的相对时机以实现所需的组合治疗效果。因此，在另一个方面，提供包含2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐以及一种或多种其他治疗活性剂的组合药物产品。

因此，在一个实施方案中，2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐和包含此类根据本发明的化合物的药物组合物可与一种或多种其他治疗剂组合使用或包括一种或多种其他治疗剂，所述一种或多种其他治疗剂例如选自抗生素、抗病毒剂、糖皮质类固醇、蕈毒碱拮抗剂β-2激动剂和维生素D3类似物。在另一个实施方案中，2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐可与适用于治疗癌症的另一治疗剂组合使用。此类其他治疗剂的实例描述于V.T. Devita和S. Hellman(编辑)的Cancer Principles and Practice of Oncology，第6版(2001), Lippincott Williams & Wilkins Publishers中。基于药物和所涉及癌症的特定特征，本领域普通技术人员将能够辨别何种药剂组合是有用的。待与作为2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的化合物组合使用的其他治疗剂包括但不限于抗微管剂(诸如二萜类化合物类和长春花生物碱类)；铂配位化合物；烷基化剂(诸如氮芥类、氧氮磷环类(oxazaphosphorines)、烷基磺酸盐类(alkylsulphonates)、亚硝基脲类和三氮烯类)；抗生素剂(诸如蒽环类(anthracyclins)、放线菌素类和博来霉素类)；拓扑异构酶II抑制剂(诸如表鬼臼毒素类)；抗代谢物(诸如嘌呤和嘧啶类似物和抗叶酸化合物)；拓扑异构酶I抑制剂(诸如喜树碱类；激素和激素类似物)；信号转导途径抑制剂(诸如酪氨酸受体抑制剂)；非受体酪氨酸激酶血管生成抑制剂；免疫治疗剂；促凋亡剂；表观遗传或转录调节剂(诸如组蛋白脱乙酰基酶抑制剂)、细胞周期信号传导抑制剂和激素核受体的抑制剂。

应理解，当2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐与通常通过吸入、静脉内、经口或鼻内途径施用的其他治疗剂组合施用时，所得药物组合物可通过相同途径施用。或者，组合物的个别组分可通过不同途径施用。

本发明的一个实施方案涵盖包含一或两种其他治疗剂的组合。

本领域技术人员应清楚，当适当时，其他治疗成分可以以盐(例如作为碱金属或胺盐或作为酸加成盐)或前药的形式、或作为酯(例如低级烷基酯)、或作为溶剂合物(例如水合物)使用，以优化治疗成分的活性和/或稳定性和/或物理特征(诸如溶解度)。还应清楚，当适当时，治疗成分可以光学纯形式使用。

以上所提及的组合可便利地以药物组合物形式呈现用于使用且因此包含如上文定义的组合连同药学上可接受的赋形剂的药物组合物代表本发明的另一个方面。

以下实施例用来说明本发明，但不被视为以任何方式限制本发明的范围。

实施例1

2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的乙腈溶剂合物的制备

将无定形2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺(例如如WO2011/054553中所述制备，1份重量)在加热(至回流)时溶解于乙腈(20份体积)中。然后将溶液蒸馏至10份体积，通过调节真空保持温度50℃-60℃。在蒸馏的最后阶段期间发生成核现象。然后将浆料保持在60℃，然后冷却至20℃并过滤。然后用乙腈(2份体积)洗涤滤饼。将滤饼在约60℃下在真空下用氮气流(nitrogen bleed)干燥，以提供标题产物。

实施例2

结晶固态形式的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的制备

制备例1

将2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的乙腈溶剂合物(对于制备，参见实施例1，2.58 g)在乙腈(7 mL)和2-甲基四氢呋喃(7 mL)中制浆。将苯磺酸(1.17 g)溶解于乙腈(7 mL)中。将所得溶液装入2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺乙腈溶剂合物于乙腈和2-甲基四氢呋喃中的浆料中。将额外的乙腈(1.4 mL)和2-甲基四氢呋喃(0.7mL)的冲洗液添加至浆料中。然后将浆料温热至60℃以溶解。然后经30分钟添加2-甲基四氢呋喃(50 mL)。在该添加期间形成晶体。然后将所得悬浮液以0.5℃/分钟的受控线性速率冷却至5℃。将浆料陈化1小时。然后将结晶产物通过过滤分离，并用2-甲基四氢呋喃和乙腈的5:1混合物(15 mL)冲洗。然后将产物在真空烘箱中在55℃下干燥过夜。

制备例2

将2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的乙腈溶剂合物(例如诸如上述实施例1的方法中制备，1份重量)在65℃下溶解于9份体积2-甲基四氢呋喃中。一旦冷却至20℃，将溶液过滤至结晶容器中。将溶解容器和串联过滤器(inline filter)用1份体积2-甲基四氢呋喃冲洗。然后将溶液加热至45℃。

将1.05当量的苯磺酸溶解于1份体积的过滤的乙腈中。将10％的该溶液添加至反应器中，所述反应器中装入有0.05 wt%的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐微粉化晶种(例如如上制备例1中制备)浆料。经2小时以稳定速率装入剩余的苯磺酸溶液，将反应器保持在45℃。

将浆料以不大于0.2℃/分钟冷却至0℃。过滤浆料。向结晶器中装入第一洗涤液，3份体积的过滤的2-甲基四氢呋喃，将其冷却至<10℃，同时在结晶器中搅拌，然后用于洗涤滤饼。向结晶器中装入第二洗涤液，3份体积的过滤的2-甲基四氢呋喃，将其冷却至<10℃，同时在结晶器中搅拌，然后用于洗涤滤饼。向结晶器中装入第三洗涤液，4份体积的过滤的2-MeTHF，将其冷却至<10℃，同时在结晶器中搅拌，然后用于洗涤滤饼。将滤饼吹扫，直到所移取的溶剂减少至细流。然后将标题化合物在50℃的真空烘箱中干燥，直到干燥失重(LOD)表明<0.2重量％损失(LOD方法：在120℃下10分钟)。然后将产物使用comil去块(delumped)。

实施例3

结晶固态形式的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的表征

XRPD

使用X’Celerator检测器在PANalytical X’Pert Pro粉末衍射仪(型号PW3050/60)上获取X-射线粉末衍射(XRPD)数据。获取条件为：辐射：Cu Kα，发电机电压：45 kV，发电机电流：40 mA，步长：0.017 °2θ，每步时间：500秒，发散狭缝类型：固定，发散狭缝尺寸：0.4354 °，测量温度：20-25 °C，测角器半径：240 mm。通过将样品包装在0.9 mm毛细管中来制备样品。使用PANalytical X’Pert Highscore Plus软件获得峰位置。对于每个峰分配，误差界限为约± 0.1º 2θ。

X-射线粉末衍射(XRPD)图谱显示于图1中，并且显示在5.5、7.4、9.1、10.0、10.4、13.3、13.6、14.9、18.7、20.4、20.9、22.8和23.1° ( ± 0.1°)处以度2θ表示的特征峰。

¹³C固态NMR (SSNMR)

在273K下在以100.56 MHz的频率操作的光谱仪(用于¹³C观察)上使用交叉极化脉冲序列以Bruker 4-mm三重共振魔角旋转探头在8 kHz的转子频率下获得¹³C SSNMR光谱。对于每个峰分配，误差界限为± 0.2 ppm。

¹³C SSNMR光谱显示于图2中，并且包含在169.6、167.5 165.6、160.1、159.4、157.1、155.9、154.3、152.4、146.9、145.8、140.0、137.9、135.9、133,4、132.0、130.6、129.9、128.3、127.1、125.6、123.5、120.6、119.1、114.1、113.7、58.0、53.6、53.1、40.7、37.0、34.9、15.8、14.7和12.0 ( ±0.2 ppm)处的化学位移(ppm)。

实施例4

适用于经口施用的包含2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐的药物组合物

制备如表1中所述的组合物。将结晶固态形式的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐(活性剂)、甘露醇、微晶纤维素和交联聚维酮在箱式混合器中混合。随后在进一步混合下添加硬脂酸镁。将所得混合物在旋转式压片机中压制。将片剂用Opaday^®包衣进行包衣。

还制备如表2中所述的组合物，其包含结晶固态形式的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐作为活性组分。将所述组合物制成片剂，且提供有Opaday^®包衣。

实施例5

对结晶固态形式的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐进行的稳定性研究

将一批结晶固态形式的2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-1-甲基-8-(甲基氧基)-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂䓬-4-基]-N-乙基乙酰胺的苯磺酸盐包装在两个聚乙烯袋中，用塑料扎带密封，并置于具有和不具有干燥剂的HDPE瓶中。将样品置于在25℃/60％ RH、30℃/65％ RH、40℃/75％ RH、50℃/AmbH下储存，并暴露于根据ICH Q1B的光稳定性条件(暴露的和保护的) 。定期进行通过XRPD的描述、含量、药物相关杂质含量、手性纯度、水和固态形式的测试。

结果表明，在非干燥条件下在25℃/60% RH下储存12个月，在干燥和非干燥条件下在30℃/65% RH下储存12个月，在干燥和非干燥条件下在40℃/75% RH下储存6个月，和在干燥和非干燥条件下在50℃/AmbH下储存3个月之后的化学和物理稳定性。在描述、含量、药物相关杂质含量和手性纯度中没有观察到显著变化。另外，在固态形式中未观察到变化。仅在50℃/AmbH下在无干燥剂的情况下(0.15％)，在25℃/60% RH下在无干燥剂的情况下储存12个月后(0.12％)，和在30℃/65% RH下在有或无干燥剂的情况下储存12个月后(0.10%)，水含量可测量地增加。没有观察到形式或杂质概况的其他变化。暴露的光稳定性样品显示从初始时的“白色至几乎白色固体”至光应激(light stressing)后的“白色和微黄色固体”的颜色变化。在光稳定性暴露的样品中杂质水平只有可测量的增加(总杂质概况为0.44％)。