作为PDE1抑制剂的三唑并吡嗪酮的制作方法

本发明提供了作为PDE1酶抑制剂的化合物及其作为药剂的用途，特别是用于治疗神经退行性疾病和精神疾病。本发明还提供了包括本发明的化合物的药物组合物以及使用本发明的化合物治疗障碍的方法。

发明背景

贯穿本申请，不同出版物是以完整地引用。这些出版物的披露通过引用而特此结合在本申请中，以便更加完整地描述本发明涉及的现有技术情况。

第二信使环核苷酸(cN)、环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)在胞内信号转导级联中发挥重要作用，这是通过调控cN-依赖性蛋白激酶(PKA和PKG)、EPAC(由cAMP激活的交换蛋白)、磷蛋白磷酸酶和/或cN-门控的阳离子通道。在神经元中，这包括cAMP-和cGMP-依赖性激酶的激活和在突触传递的敏锐调控以及神经元分化和存活中涉及的蛋白质的随后磷酸化。cAMP和cGMP的胞内浓度由通过环化酶的生物合成速率并且由通过磷酸二酯酶(PDE，EC 3.1.4.17)的降解速率严格调控。PDE是通过3’-酯键的催化水解而失活cAMP/cGMP，从而形成失活的5’单磷酸的双金属水解酶。由于PDE提供了在细胞内降解环核苷酸cAMP和cGMP的仅有手段，所以PDE在环核苷酸信号转导中发挥必不可少的作用。PDE的催化活性在所有细胞中在一系列cN-浓度上提供了cN的分解，并且其变化的调控机制提供了与无数信号转导通路的整合和串话。靶向特定PDE，以离散它们控制cN水平并且为多种cN信号小体(signalosome)塑造微环境的细胞内的区室(Sharron(沙龙)H.Francis(弗朗西斯)，Mitsi(米斯)A.Blount(布朗特)，和Jackie(杰基)D.Corbin(科尔宾)Physiol Rev(生理学评论)2011，91:651-690)。

在底物特异性的基础上，PDE家族可以被分为三组：1)cAMP-特异性PDE，包括PDE4、PDE7和PDE8；2)cGMP-选择性酶PDE5和PDE9；以及3)双底物PDE，包括PDE1、PDE2、PDE3以及PDE10和PDE11。

先前被命名为钙调蛋白-刺激的PDE(CaM-PDE)的PDE1是独特的，因为它经由与四个Ca2+-复合的钙调蛋白(CaM，一种16kDa Ca2+-结合蛋白)而被Ca2+-依赖性地调控(关于评论，参见Sharron(沙龙)H.Francis(弗朗西斯)，Mitsi(米斯)A.Blount(布朗特)，和Jackie(杰基)D.Corbin(科尔宾)Physiol Rev(生理学评论)2011，91:651-690)。因此，这一家族代表环核苷酸与胞内Ca2+之间的一个感兴趣的调控连接。PDE1家族由三种基因编码：PDE1A(定位在人类染色体2q32)、PDE1B(人类染色体位置，hcl：12q13)和PDE1C(hcl：7p14.3)。它们具有可变启动子并且通过可变剪接而产生众多蛋白质，这些蛋白质的区别在于其调控特性、底物亲和力、特异性活性、CaM的激活常数、组织分布以及分子量。鉴定了超过10种人类同种型。它们的分子量在从58至86kDa/单体变化。N-末端调控结构域区分其对应的蛋白并且调节其生化功能，该N-末端调控域包含两个Ca2+/CaM结合结构域和两个磷酸化位点。PDE1是一种双底物PDE并且PDE1C-亚型针对cAMP和cGMP具有相等活性(Km≈1-3μM)，而亚型PDE1A和PDE1B对cGMP具有偏好(对cGMP的Km≈1-3μM并且对cAMP的Km≈10-30μM)。

PDE1亚型高度富集于脑中并且尤其定位于纹状体(PDE1B)、海马体(PDE1A)和皮层(PDE1A)中并且这一定位跨物种是保守的(Amy Bernard(艾米·伯纳德)等人Neuron(神经元)2012，73，1083-1099)。在皮质中，PDE1A主要存在于深皮质层5和6(输出层)中，并且被用作深皮质层的特异性标记物。PDE1抑制剂增强第二信使cN的水平，从而导致增强的神经元兴奋性。

因此，PDE1是一种用于调控胞内信号转导通路的治疗靶标(优选在神经系统中)并且PDE1抑制剂可以增强第二信使cAMP/cGMP的水平，从而导致神经过程的调节并且导致神经元可塑性相关基因、神经营养因子以及神经保护分子的表达。这些神经元可塑性增强特性与突触传递的调节一起使得PDE1抑制剂在许多神经和精神病症中成为作为治疗剂的良好候选物。动物模型中的PDE1抑制剂评估(关于评论，参见例如Blokland(布劳克兰德)等人Expert Opinion on Therapeutic Patents(治疗专利专家意见)(2012)，22(4)，349-354；和Medina(梅迪纳)，A.E.Frontiers in Neuropharmacology(神经药理学前沿)(2011)，5(2月)，21)已经说明了PDE1抑制剂在神经障碍(像例如阿尔茨海默病、帕金森氏病和亨廷顿氏病)和在精神疾病(像例如注意缺陷多动障碍(ADHD)、下肢不宁综合征、抑郁、发作性睡病、认知缺损以及与精神分裂症相关的认知缺损(CIAS))中的治疗用途的潜力。还存在专利申请，其声称PDE1抑制剂在可以通过增强孕酮信号转导而减轻的疾病方面(例如女性性功能障碍)是有用的。

本发明的化合物可以为神经退行性和/或精神疾病的当前市售治疗提供替代方案，这些当前市售治疗并非在所有患者中是有效的。因此，对替代性治疗方法仍存在需要。

两种化合物，即7-[(4-氯苯基)甲基]-3-甲基-1,2,4-三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(CAS登记号：946270-18-4)和7-[(4-氯苯基)甲基]-3-丙基-1,2,4-三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(CAS登记号：946237-23-6)在本领域中是已知的，但是还没有将其披露为PDE1抑制剂或用作药剂。

发明概述

PDE1酶表达于中枢神经系统(CNS)中，使得这一基因家族成为用于治疗精神和神经退行性疾病的新靶标的有吸引力的来源。

本发明的目的是提供作为PDE1抑制剂并且照此有用于治疗神经退行性疾病和精神疾病的化合物。

因此，本发明涉及具有化学式(I)的化合物

其中

n是0或1；

R₁选自下组，该组由以下各项组成：直链或支链C₁-C₈烷基，比如C₁到C₃烷基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基以及饱和单环C₃-C₈环烷基；或

R₁选自下组，该组由以下各项组成：各自被甲基或羟基取代一次或两次的氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、饱和单环C₃-C₈环烷基、以及被氟取代一次或多次，优选一次、两次或三次的直链或支链C₁-C₈烷基；并且

R₂选自下组，该组由以下各项组成：直链或支链C₁-C₈烷基、苯基、饱和单环C₃-C₈环烷基、饱和二环C₄-C₁₀环烷基、饱和三环C₇-C₁₀环烷基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基以及四氢吡喃基；或

R₂选自下组，该组由以下各项组成：被取代基取代的苯基，该取代基选自下组，该组由以下各项组成：卤素、直链或支链C₁-C₃烷基、二氟甲基、三氟甲基和甲氧基；被取代基取代一次或两次的饱和单环C₃-C₈环烷基，这些取代基选自下组，该组由以下各项组成：氟和甲基；以及各自被取代基取代一次或两次的氧杂环丁烷基、四氢呋喃基和四氢吡喃基，这些取代基选自下组，该组由以下各项组成：氟和甲基；

R₃选自下组，该组由以下各项组成：：直链或支链C₁-C₄烷基、苯基、取代的苯基、卤素、四氢呋喃基、苄基，其中苄基的苯环可以任选地被选自以下项的一个或多个取代基取代：卤素、甲基、烷氧基，或苄基的苯环可以被芳环或杂芳环，像例如吡啶取代；

R₄选自下组，该组由以下各项组成：直链或支链C₁-C₄烷基、卤素和四氢呋喃基。

对化合物I的提及包括化合物I的游离碱、化合物I的药学上可接受的盐(如化合物I的酸加成盐)、化合物I的外消旋混合物、或化合物I的相应的对映异构体和/或旋光异构体以及化合物I的多晶形式或无定形形式连同化合物I的互变异构形式。

发明的详细说明

本发明的实施例

应用了以下符号：本发明的实施例被标识为Ei，其中i是指明该实施例的编号的整数。详细说明具体实施例(先前列出的实施例Ei)的实施例Ei’被标识为Ei’(Ei)，例如E2(E1)表示“在实施例E1的实施例E2中”。

当实施例为两个实施例的组合时，该符号类似地为Ei”(Ei和Ei’)，例如E3(E2和E1)表示“在实施例E2和E1任一者的实施例E3中”。

当实施例为两个以上实施例的组合时，该符号类似地为Ei”’(Ei、Ei’和Ei”)，例如E4(E1、E2和E3)表示“在实施例E1、E2和E3任一者的实施例E4中”。

在第一实施例E1中，本发明涉及具有化学式(I)的化合物(化合物I)：

化合物(I)

其中

n是0或1；

R₁选自下组，该组由以下各项组成：直链或支链C₁-C₈烷基，比如C₁到C₃烷基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基以及饱和单环C₃-C₈环烷基；或

R₁选自下组，该组由以下各项组成：各自被甲基或羟基取代一次或两次的氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、饱和单环C₃-C₈环烷基、以及被氟取代一次或多次，优选一次、两次或三次的直链或支链C₁-C₈烷基；并且

R₂选自下组，该组由以下各项组成：直链或支链C₁-C₈烷基、苯基、饱和单环C₃-C₈环烷基、饱和二环C₄-C₁₀环烷基、饱和三环C₇-C₁₀环烷基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基以及四氢吡喃基；或

R₂选自下组，该组由以下各项组成：被取代基取代的苯基，该取代基选自下组，该组由以下各项组成：卤素、C₁-C₃烷基、二氟甲基、三氟甲基和甲氧基；被取代基取代一次或两次的饱和单环C₃-C₈环烷基，这些取代基选自下组，该组由以下各项组成：氟和甲基；以及各自被取代基取代一次或两次的氧杂环丁烷基、四氢呋喃基和四氢吡喃基，这些取代基选自下组，该组由以下各项组成：氟和甲基；

R₃选自下组，该组由以下各项组成：直链或支链C₁-C₄烷基、苯基、取代的苯基、卤素和四氢呋喃基；苄基，其中苄基的苯环可以任选地被选自以下项的一个或多个取代基取代：卤素、甲基、烷氧基，或苄基的苯环可以被芳环或杂芳环，像例如吡啶取代；

R₄选自下组，该组由以下各项组成：直链或支链C₁-C₄烷基、卤素和四氢呋喃基；

条件是化合物I不是7-[(4-氯苯基)甲基]-3-甲基-1,2,4-三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(CAS登记号：946270-18-4)或7-[(4-氯苯基)甲基]-3-丙基-1,2,4-三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(CAS登记号：946237-23-6)。

E2(E1)R₁选自甲基、乙基、丙基和异丙基。

E3(E2)R₁是丙基

E4(E1)R₂是苯基

E5(E1)R₂是取代的苯基，其中该取代基选自下组，该组由以下各项组成：氟、氯和甲氧基。

E6(E1)R₂是取代的苯基，其中该取代基选自下组，该组由以下各项组成：二氟甲基和三氟甲基。

E7(E1)R₂是饱和单环C₅-C₇环烷基。

E8(E1、E3和E7)R₁是丙基，并且R₂是饱和单环C₅-C₇环烷基。

E9(E1)R₂是金刚烷基。

E10(E1)R₂是饱和螺辛烷(spirooctan)。

E11(E1)n是0。

E12(E1)n是1。

E13(E1)R₃是甲基或乙基。

E14(E1)R₃是取代的苯基，其中该取代基选自下组，该组由以下各项组成：苯基、氟和甲基。

E15(E1)R₃是溴。

E16(E1)R₄是甲基或乙基。

E17(E1)R₄是溴。

E18(E1)，具有化学式(I)的化合物选自表1中所列出的呈游离碱形式的化合物、其一种或多种互变异构体或其药学上可接受的盐。

E19(E1到E18)正如在“PDE1抑制测定”部分中确定的，该化合物具有10微摩尔或更低、比如5微摩尔或更低、比如4微摩尔或更低、比如3微摩尔或更低、比如2微摩尔或更低、比如1微摩尔或更低、比如500nM或更低、比如400nM或更低、比如300nM或更低、比如200nM或更低、比如100nM或更低的PDE1A、PDE1B或PDE1C IC50值。

E20(E1)一种选自在表1中列出的化合物的化合物或其药学上可接受的盐。

E21(E1到E20)该化合物用作药剂。

E22(E1到E21)该化合物用于在注意缺陷/多动障碍(ADHD)的治疗中使用。

E23(E1到E15)一种药物组合物，其包含治疗有效量的实施例(E1)到(E20)的任一项所述的化合物、以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂和赋形剂。

E24(E23)该药物组合物用于治疗注意缺陷/多动障碍(ADHD)。

E25(E1到E20)一种治疗患有注意缺陷/多动障碍(ADHD)的受试者的方法，该方法包括向所述受试者给予一定量的有效抑制PDE1的具有化学式I的化合物。

E26(E1to E21)该化合物用于治疗认知问题，例如用于治疗精神分裂症或阿尔茨海默病。

定义

PDE1酶

PDE1同工酶家族包括众多剪接变体PDE1同种型。它具有三种亚型，PDE1A、PDE1B和PDE1C，这些亚型被进一步分为不同的同种型。在本发明的上下文中，除非另有说明，PDE1和PDE1酶是同义的并且是指PDE1A、PDE1B和PDE1C酶、以及它们的同种型。

取代基

如在本发明的上下文中所使用，术语“卤代”与“卤素”可以互换使用并且是指氟、氯、溴或碘。

可用“-”(短横线)或“到”互换地指示给定的范围，例如术语“C₁-C₃烷基”等同于“C₁到C₃烷基”。

术语“C₁-C₃烷基”、“C₁-C₄烷基”、“C₁-C₅烷基”、“C₁-C₆烷基”、“C₁-C₇烷基”和“C₁-C₈烷基”是指具有一到八个碳原子(包括端值)的直链(即，不分支的)或分支的饱和烃。此类基团的实例包括但不限于，甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、1-丁基、2-丁基、2-甲基-2-丙基、2-甲基-1-丁基、正己基、正庚基以及正辛基。

术语饱和单环C₃到C₁₀环烷基是指环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基和环癸基。

相应地，术语饱和单环C₃到C₈环烷基是指环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基。

术语饱和二环C₄到C₁₀环烷基是指包含碳原子和氢原子的二环。饱和二环C₄到C₁₀环烷基包括螺环、稠合环和桥环，例如但不限于，二环[1.1.0]丁烷基二环丁烷基、二环[2.1.0]戊烷基二环戊烷基、二环[2.2.0]己烷基二环己烷基、二环[2.2.1]庚烷基二环庚烷基、二环[2.2.2]辛烷基二环辛烷基、二环[3.2.2]壬烷基和十氢萘基二环癸基。

术语饱和三环C₇到C₁₀环烷基是指包含碳原子和氢原子的三环，例如但不限于，金刚烷基。

表述“C₁-C₃烷氧基”是指具有从一个至三个(包含端值)碳原子并且开放原子价在氧上的直链或支链饱和烷氧基。此类基团的实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基和异丙氧基。

同分异构形式

在本发明的化合物包含一个或多个手性中心的情况下，除非另外说明，否则提及这些化合物的任一个将涵盖对映异构体纯的或非对映异构体纯的化合物以及处于任何比例的对映异构体或非对映异构体的混合物。

例如，在没有任何进一步说明的情况下提及化合物3-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮涵盖(R)-3-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮、(S)-3-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮以及处于任何比例的对映异构体的混合物，包括外消旋混合物(±)3-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。

以上情况也适用于本发明的化合物包含超过两个手性中心的情况。

PDE1抑制剂

在本发明的上下文中，如果达到三种PDE1同种型中的任何一种的IC₅₀水平所需的量是10微摩尔或更低，更优选低于9微摩尔，比如8微摩尔或更低、比如7微摩尔或更低、比如6微摩尔或更低、比如5微摩尔或更低、比如4微摩尔或更低、比如3微摩尔或更低，更优选2微摩尔或更低、比如1微摩尔或更低，尤其是500nM或更低，则该化合物被视为PDE1抑制剂。在优选的实施例中，达到PDE1B的IC₅₀水平所需的PDE1抑制剂的量是400nM或更低，比如300nM或更低、200nM或更低、100nM或更低、或甚至80nM或更低，比如50nM或更低，例如25nM或更低。

药学上可接受的盐

本发明还包括本发明的化合物的盐，典型地是药学上可接受的盐。此类盐包括药学上可接受的酸加成盐。酸加成盐包括无机酸和有机酸的盐。

适合的无机酸的代表性实例包括盐酸、氢溴酸、氢碘酸、磷酸、硫酸、氨基磺酸、硝酸以及类似物。适合的有机酸的代表性实例包括甲酸、乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、丙酸、苯甲酸、肉桂酸、柠檬酸、反丁烯二酸、乙醇酸、衣康酸、乳酸、甲烷磺酸(methanesulfonic)、顺丁烯二酸、苹果酸、丙二酸、苯乙醇酸、草酸、苦味酸、丙酮酸、水杨酸、丁二酸、甲烷磺酸(methane sulfonic)、乙烷磺酸、酒石酸、抗坏血酸、帕莫(pamoic)酸、双亚甲基水杨酸、乙烷二磺酸、葡萄糖酸、柠康酸、天冬氨酸、硬脂酸、棕榈酸、EDTA、乙醇酸、对氨基苯甲酸、谷氨酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、茶碱乙酸以及8-卤代茶碱，例如8-溴茶碱以及类似物。药学上可接受的无机或有机酸加成盐的另外的实例包括在Berge(贝尔热)，S.M.等人，J.Pharm.Sci.(药物科学杂志)1977，66，2中列出的药学上可接受的盐，将其内容通过引用特此结合。

此外，本发明的化合物能以未溶剂化形式存在以及以与药学上可接受的溶剂如水、乙醇等的溶剂化形式存在。通常，将溶剂化形式视为等效于非溶剂化形式用于本发明的目的。

治疗有效量

在此上下文中，术语化合物的“治疗有效量”意指足以在包括给予所述化合物的治疗性介入中治愈、缓解或部分阻滞给定疾病及其并发症的临床表现的量。将足以实现以上的量定义为“治疗有效量”。用于各目的的有效量将取决于疾病或损伤的严重程度以及受试者的体重及一般状态。将理解的是，确定适当剂量可以使用常规实验，通过构筑值矩阵并测试矩阵中的不同点来实现，这均在受训医师的普通技术内。

在本文中，术语“治疗(treatment和treating)”意指出于抗击病症(例如疾病或障碍)的目的管理并护理患者。该术语意欲包括对患者所患的给定病症的治疗的完整范围，例如给予活性化合物以缓解症状或并发症、以延迟疾病、障碍或病症的进展、以缓解或减轻症状及并发症、和/或以治愈或消除疾病、障碍或病症以及以预防病症，其中将预防理解为出于抗击疾病、病症或障碍的目的管理并护理患者并且包括给予活性化合物以预防症状或并发症的发作。然而，预防性(prophylactic，preventive)和治疗性(治愈性)治疗是本发明的两个个别方面。欲治疗的患者优选是哺乳动物，特别是人类。

药物组合物

本发明进一步提供了药物组合物，该药物组合物包括治疗有效量的具有化学式(I)的化合物以及药学上可接受的载体或稀释剂。本发明还提供了药物组合物，该药物组合物包括治疗有效量的在本文的实验部分披露的具体化合物之一以及药学上可接受的载体或稀释剂。

本发明的化合物能以单剂量或多剂量形式单独给予或与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂组合给予。根据本发明的药物组合物可以用药学上可接受的载体或稀释剂以及任何其他已知的佐剂和赋形剂根据常规技术配制，这些常规技术是例如在以下中披露的技术：Remington:The Science and Practice of Pharmacy(雷明顿：药学科学与实践)，第21版，Gennaro(热纳罗)编，Mack Publishing Co.(马克出版公司)，伊斯顿，宾夕法尼亚，2005。

药物组合物可以被具体配制以通过任何适合途径给予，例如经口、经直肠、经鼻、经肺、局部(包括经颊及舌下)、经皮、脑池内、腹膜内、经阴道及非经肠(包括皮下、肌肉内、鞘内、静脉内及皮内)途径。将领会的是，该途径将取决于待治疗的受试者的一般状况和年龄、待治疗的病症的性质以及活性成分。

用于经口给予的药物组合物包括固体剂型，例如胶囊、片剂、糖衣丸、丸剂、锭剂、粉剂以及颗粒剂。适当时，根据本领域中熟知的方法，这些组合物可以制备为具有包衣，例如肠溶衣，或着它们可以被配制以提供活性成分的控制释放，例如持续或长久释放。用于经口给予的液体剂型包括溶液、乳液、悬浮液、糖浆以及酏剂。

用于非经肠给予的药物组合物包括无菌水性及非水性可注射溶液、分散液、悬浮液或乳液以及欲在使用之前在无菌可注射溶液或分散液中复水的无菌粉剂。其他适合的给予形式包括但不限于，栓剂、喷雾剂、软膏剂、乳膏剂、凝胶剂、吸入剂、皮肤贴片以及植入物。

典型的经口剂量范围在每日约0.001mg/kg体重至约100mg/kg体重。典型的经口剂量范围还在每日约0.01mg/kg体重至约50mg/kg体重。典型的经口剂量范围进一步在每日约0.05mg/kg体重至约10mg/kg体重。经口剂量通常以每日一剂量或多剂量，通常一至三剂量给予。精确剂量将取决于给予频率及模式，所治疗的受试者的性别、年龄、体重及一般状况，所治疗的病症以及任何欲治疗的伴随疾病的性质及严重程度以及本领域的普通技术人员显而易见的其他因素。

这些配制品还可以通过本领域的普通技术人员已知的方法以单位剂型呈现。用于说明性目的，用于经口给予的典型单位剂型可以含有从约0.01mg至约1000mg、从约0.05mg至约500mg，或从约0.5mg至约200mg。

本发明还提供了一种用于制造药物组合物的方法，该方法包括将治疗有效量的具有化学式(I)的化合物和至少一种药学上可接受的载体或稀释剂混合。在本发明的一个实施例中，上述方法中所用的化合物是在本文的实验部分中所披露的具体化合物之一。

本发明的化合物通常以游离物质形式或以其药学上可接受的盐形式利用。一个实例是与游离碱具有相同效用的化合物的酸加成盐。当具有化学式(I)的化合物含有游离碱时，此类盐以常规方式通过用药学上可接受的酸处理具有化学式(I)的游离碱的溶液或悬浮液来制备。适合的有机酸及无机酸的代表性实例描述于上文。

对于肠胃外给药，可以采用具有化学式(I)的化合物在无菌水溶液、水性丙二醇、水性维生素E或芝麻油或花生油中的溶液。必要时应该适当缓冲此类水溶液并且首先用足够盐水或葡萄糖使液体稀释剂变得等张。水溶液特别适于静脉内、肌肉内和皮下给药。可以使用本领域的普通技术人员已知的标准技术将具有化学式(I)的化合物容易地掺入已知的无菌水性介质中。

适合的药物载体包括惰性固体稀释剂或填料、无菌水溶液以及不同有机溶剂。固体载体的实例包括乳糖、白土、蔗糖、环糊精、滑石、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯胶、硬脂酸镁、硬脂酸以及纤维素的低级烷基醚。液体载体的实例包括但不限于，糖浆、花生油、橄榄油、磷脂、脂肪酸、脂肪酸胺、聚氧化乙烯以及水。类似地，该载体或稀释剂可以包括单独或与蜡混合的本领域中已知的任何持续释放物质，例如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。通过组合具有化学式(I)的化合物与药学上可接受的载体而形成的药物组合物接着以多种适于所披露的给予途径的剂型容易地给予。这些配制品可以方便地通过药学领域已知的方法以单位剂型呈现。

适于经口给予的本发明的配制品能以不连续单位形式呈现，例如各自含有预定量的活性成分以及任选地适合的赋形剂的胶囊或片剂。此外，经口可用配制品可以呈粉剂或颗粒剂、水性或非水性液体中的溶液或悬浮液，或水包油或油包水液体乳液的形式。

若将固体载体用于经口给予，则该制剂可以被压片、以粉剂或丸粒形式置于硬明胶胶囊中或它可呈糖锭或锭剂形式。固体载体的量将广泛变化，但将在每剂量单位从约25mg至约1g的范围。若使用液体载体，则该制剂可以呈糖浆、乳液、软明胶胶囊或无菌可注射液体(例如水性或非水性液体悬浮液或溶液)形式。

可以通过本领域中的常规方法制备本发明的药物组合物。例如，可以如下制备片剂：混合活性成分与普通佐剂和/或稀释剂，并且随后在常规压片机中压缩该混合物以制备片剂。佐剂或稀释剂的实例包括：玉米淀粉、马铃薯淀粉、滑石、硬脂酸镁、明胶、乳糖、树胶以及类似物。可以使用通常用于此类目的的任何其他佐剂或添加剂，例如着色剂、调味剂、防腐剂等，其条件是它们与活性成分兼容。

障碍的治疗

如上所提及，具有化学式(I)的化合物是PDE1酶抑制剂，并且照此有用于治疗相关的神经和精神疾病。

本发明因此提供了一种用于在治疗哺乳动物(包括人类)中的神经退行性疾病、精神疾病或药物成瘾中使用的具有化学式(I)的化合物或其药学上可接受的酸加成盐，以及包含这样的一种化合物的药物组合物；其中该神经退行性疾病选自下组，该组由以下各项组成：阿尔茨海默病，多发梗塞性痴呆，酒精性痴呆或其他药物相关痴呆，与颅内肿瘤或脑外伤相关的痴呆，与亨廷顿氏病或帕金森氏病相关的痴呆，或AIDS-相关痴呆；谵妄；遗忘症；创伤后应激障碍；智力低下；学习障碍，例如阅读障碍、数学障碍或书面表达障碍；注意缺陷/多动障碍；以及与年龄相关的认知衰退；并且其中该精神疾病选自下组，该组由优选各项组成：精神分裂症，例如偏执型、错乱型、紧张型、未分化型或残余型精神分裂症；精神分裂症样障碍；分裂情感性障碍，例如妄想型或抑郁型分裂情感性障碍；妄想症；物质诱导性精神疾病，例如由酒精、苯丙胺、大麻、可卡因、迷幻剂、吸入剂、类鸦片或苯环己哌啶诱导的精神病；偏执型人格障碍；以及精神分裂症型人格障碍；并且其中该药物成瘾是酒精、苯丙胺、可卡因、或鸦片剂成瘾。

具有化学式(I)的化合物或其药学上可接受的盐可以与一种或多种其他药物组合用于治疗本发明的化合物对其有效用的疾病或病症，其中药物在一起的组合比单独任一药物更安全或更有效。另外，本发明的化合物可以与一种或多种治疗、预防、控制、改善或减少本发明的化合物的副作用或毒性的风险的其他药物组合使用。此类其他药物可以通过一种途径并且以用于其一种常用量与本发明的化合物同时或依次给予。因此，本发明的药物组合物包括除了包含本发明的化合物外，还包含一种或多种其他活性成分的那些药物组合物。这些组合可以作为单位剂型组合产品的一部分给予，或以套组或治疗方案形式给予，其中一种或多种另外的药物以单独剂型作为治疗方案的一部分给予。

本发明提供了一种治疗患有选自认知障碍或运动障碍的神经退行性疾病的哺乳动物(包括人类)的方法，该方法包括向该受试者给予治疗有效量的具有化学式(I)的化合物。

本发明进一步提供了一种治疗哺乳动物(包括人类)的神经退行性疾病或病症的方法，该方法包括向所述哺乳动物给予有效抑制PDE1的量的具有化学式(I)的化合物。

本发明还提供了一种治疗患有精神疾病的受试者的方法，该方法包括向该受试者给予治疗有效量的具有化学式(I)的化合物。可以根据本发明治疗的精神疾病的实例包括但不限于，注意缺陷多动障碍(ADHD)；精神分裂症，例如偏执型、错乱型、紧张型、未分化型或残余型精神分裂症；精神分裂症样障碍；分裂情感性障碍，例如妄想型或抑郁型分裂情感性障碍；妄想症；物质诱导性精神疾病，例如由酒精、苯丙胺、大麻、可卡因、迷幻剂、吸入剂、类鸦片或苯环己哌啶诱导的精神病；偏执型人格障碍；以及精神分裂症型人格障碍；并且该焦虑障碍选自惊恐性障碍；广场恐惧症；特定恐惧症；社交恐惧症；强迫症；创伤后应激障碍；急性应激障碍；以及广泛性焦虑障碍。

已经发现，具有化学式(I)的化合物或其药学上可接受的盐可以有利地与至少一种精神抑制剂(可以是一种典型的或非典型的抗精神病剂)组合给予，以提供精神疾病(例如精神分裂症)的改进的治疗。本发明的组合、用途及治疗方法还可以在治疗未能充分响应其他已知治疗或对其具有抗性的患者中提供优势。

本发明因此提供了一种治疗患有精神疾病(例如精神分裂症)的哺乳动物的方法，该方法包括向该哺乳动物给予治疗有效量的具有化学式(I)的化合物，单独的或作为与至少一种精神抑制剂的联合治疗。

如在此使用，术语“精神抑制剂”是指对减小患有精神病的患者的混乱、妄想、幻觉及精神运动性激动的抗精神病剂药物的认知和行为具有影响的药物。也称作强安定药及抗精神病药物，精神抑制剂包括但不限于：典型抗精神病药物(包括吩噻嗪)，其被进一步分为脂族化合物、哌啶及哌嗪；噻吨(例如珠氯噻醇(cisordinol))；丁酰苯(例如氟哌啶醇)；二苯氧氮平(dibenzoxazepine)(例如洛沙平)；二氢吲哚酮(例如吗茚酮)；二苯丁基哌啶(例如哌迷清)；以及非典型抗精神病药物，包括苯异噁唑(例如利培酮)、舍吲哚、奥氮平、喹硫平、奥沙奈坦及齐拉西酮。

用于在本发明中使用的特别优选的精神抑制剂是舍吲哚、奥氮平、利培酮、喹硫平、阿立哌唑、氟哌啶醇、氯氮平、齐拉西酮及奥沙奈坦。

本发明进一步提供了一种治疗患有认知障碍的受试者的方法，该方法包括向该受试者给予治疗有效量的具有化学式(I)的化合物。可以根据本发明治疗的认知障碍的实例包括但不限于，阿尔茨海默病，多发梗塞性痴呆，酒精性痴呆或其他药物相关痴呆，与颅内肿瘤或脑外伤相关的痴呆，与亨廷顿氏病或帕金森氏病相关的痴呆，或AIDS-相关痴呆；谵妄；遗忘症；创伤后应激障碍；智力低下；学习障碍，例如阅读障碍、数学障碍或书面表达障碍；注意缺陷/多动障碍；以及与年龄相关的认知衰退。

本发明还提供了一种治疗运动障碍的方法，该方法包括向该受试者给予治疗有效量的具有化学式(I)的化合物。可以根据本发明治疗的运动障碍的实例包括但不限于，亨廷顿氏病和与多巴胺激动剂疗法相关的异动症。本发明进一步提供了一种治疗选自帕金森氏病和下肢不宁综合征的运动障碍的方法，该方法包括向该受试者给予治疗有效量的具有化学式(I)的化合物。

本发明还提供了一种治疗心境障碍的方法，该方法包括向该受试者给予治疗有效量的具有化学式(I)的化合物。可以根据本发明治疗的心境障碍和情绪发作的实例包括但不限于，轻度、中度或重度类型的重性抑郁发作，躁狂或混合情绪发作，轻躁狂情绪发作；具有典型特征的抑郁发作；具有忧郁特征的抑郁发作；具有紧张症特征的抑郁发作；产后发病的情绪发作；卒中后抑郁；重性抑郁障碍；心境恶劣障碍；轻郁病；轻型抑郁症；经前烦躁症；精神分裂症的后精神病抑郁障碍；重性抑郁障碍并精神疾病，如妄想症或精神分裂症；双相障碍，例如I型双相障碍，II型双相障碍及循环型障碍。应理解的是，心境障碍是一种精神疾病。

本发明进一步提供了一种治疗哺乳动物(包括人类)的障碍(包括作为症状的注意和/或认知缺陷)的方法，该方法包括向所述哺乳动物给予有效治疗所述障碍的量的具有化学式(I)的化合物。

可以根据本发明治疗的其他障碍是强迫(obsessive/compulsive)症、图雷特综合征(Tourette's syndrome)以及其他抽动障碍。

如在此使用并且除非另外指示，否则“神经退行性疾病或病症”是指由中枢神经系统中的神经元的功能障碍和/或死亡导致的障碍或病症。可以通过给予以下试剂来促进这些障碍和病症的治疗：在这些障碍或病症中预防处于风险中的神经元的功能障碍或死亡和/或以补偿由处于风险中的神经元的功能障碍或死亡导致的功能损失的方式增强受损或健康神经元的功能。如在此使用，术语“神经营养剂”是指具有一些或所有这些特性的物质或试剂。

可以根据本发明治疗的神经退行性疾病和病症的实例包括但不限于，帕金森氏病；亨廷顿氏病；痴呆，例如阿尔茨海默病，多发梗塞性痴呆，AIDS-相关痴呆以及额颞痴呆；与脑外伤相关的神经退行性变；与卒中相关的神经退行性变，与脑梗塞相关的神经退行性变；低血糖诱发的神经退行性变；与癫痫发作相关的神经退行性变；与神经毒素中毒相关的神经退行性变；以及多系统萎缩。

在本发明的一个实施例中，该神经退行性疾病或病症涉及哺乳动物(包括人类)中纹状体的中型多棘神经元的神经退行性变。

在本发明的一个另外的实施例中，该神经退行性疾病或病症是亨廷顿氏病。在此所引用的所有文献(包括出版物、专利申请以及专利)均通过引用以其全部内容特此结合，并且引用的程度如同每个文献被单独地并且明确地指示通过引用结合并且以其全部内容在此阐述(至法律允许的最大程度)。

标题和副标题在此仅为方便而使用，并且不应以任何方式被解释为限制本发明。

除非另外指示，否则在本说明书中使用的任何及所有实例或示例性语言(包括“例如”(for instance)、“比如”(for example)、e.g.)及“照此(as such)”均仅意欲更好地阐明本发明，并且不会对发明的范围造成限制。

在此引用及并入专利文件仅是为了便利，并且不反映此类专利文件的有效性、专利性和/或可执行性的任何观点。

如适用的法律所允许，本发明包括随附在此的权利要求书中所述的主题的所有修改及等效物。

本发明的化合物

表1：本发明的化合物

n.d.表示“未确定”

a)IC50是指在规定底物浓度时达到酶的50％抑制所需的该化合物的浓度(nM)，％抑制是指在该化合物的10微摩尔浓度时的该酶的抑制％。

实验部分

本发明的化合物的制备

通用方法

使用以下鉴定的方法之一获得分析型LC-MS数据。

方法1：使用沃特斯(Waters)Acquity UPLC-MS。柱：Acquity UPLC BEH C18 1.7μm；2.1x 50mm；柱温：60℃；溶剂系统：A＝水/三氟乙酸(99.965:0.035)和B＝乙腈/水/三氟乙酸(94.965:5:0.035)；方法：线性梯度洗脱，其中A:B＝90:10，在1.0分钟内至0:100并且流速为1.2mL/分钟。

方法2：使用沃特斯Acquity UPLC-MS。柱：Acquity UPLC BEH C18 1.7μm；2.1x 50mm；柱温：60℃；溶剂系统：A＝水/甲酸(99.9:0.1)和B＝乙腈/水/甲酸(94.9:5:0.1)；方法：线性梯度洗脱，其中A:B＝90:10，在1.0分钟内至0:100并且流速为1.2mL/分钟。

方法3：使用具有ELS检测器的安捷伦(Agilent)1200LCMS系统。柱：安捷伦TC-C18 5μm；2.1x 50mm；柱温：50℃；溶剂系统：A＝水/三氟乙酸(99.9:0.1)和B＝乙腈/三氟乙酸(99.95:0.05)；方法：线性梯度洗脱，其中A:B＝99:1，在4.0分钟内至0:100并且流速为0.8mL/分钟。

方法4：使用具有ELS检测器的安捷伦1200LCMS系统。柱：XBridge ShieldRP18，5μm，50x 2.1mm；柱温：40℃；溶剂系统：A＝水/NH₃*H₂O(99.95:0.05)和B＝乙腈；方法：线性梯度洗脱，其中A:B＝95:5，在3.4分钟内至0:100并且流速为0.8mL/分钟。

方法5：使用沃特斯Acquity UPLC-MS。柱：Acquity UPLC HSS T3C18 1.8μm；2.1X50mm；柱温：60℃；溶剂系统：A＝水/三氟乙酸(99.965:0.035)和B＝乙腈/水/三氟乙酸(94.965:5:0.035)；方法：线性梯度洗脱，其中A:B＝98:02，在1.0分钟内至0:100并且流速为1.2mL/min。

方法6：使用具有ELS检测器的安捷伦1200LCMS系统。柱：沃特斯XBridge ShieldRP18，2.1*50mm，5μm；柱温：40℃；溶剂系统：A＝水/氨水(99.95:0.05)和B＝乙腈；方法：线性梯度洗脱，其中A:B＝95:5，在4.0分钟内至0:100并且流速为0.8mL/min。

方法7：使用配备有大气压光电离离子源和岛津(Shimadzu)LC-20AB系统的岛津20MS仪器。柱：MERCK，RP-18e25-2mm；柱温：50℃；溶剂系统：A＝水/三氟乙酸(99.9625:0.0375)和B＝乙腈/三氟乙酸(99.981:0.019)；方法：线性梯度洗脱，在0.7分钟内，A:B＝95:5至A:B＝5:95，然后A:B＝5:95持续0.4分钟，然后线性梯度洗脱至A:B 95:5持续0.4分钟并且恒定流速为1.5mL/min。

方法8：使用具有ELS检测器的安捷伦1100LCMS系统。柱：YMC ODS-AQ 5μm；2.0x 50mm；柱温：50℃；溶剂系统：A＝水/三氟乙酸(99.9:0.1)和B＝乙腈/三氟乙酸(99.95:0.05)；方法：线性梯度洗脱，其中A:B＝99:1，在3.5分钟内至5:95并且流速为0.8mL/min。

方法9：使用具有ELS检测器的安捷伦1100LCMS系统。柱：YMC ODS-AQ 5μm；2.0x 50mm；柱温：50℃；溶剂系统：A＝水/三氟乙酸(99.9:0.1)和B＝乙腈/三氟乙酸(99.95:0.05)；方法：线性梯度洗脱，其中A:B＝90:10，在3.5分钟内至0:100并且流速为0.8mL/min。

在Thar 80仪器上进行制备型SFC。示例条件可以是但不限于：具有20μm粒度的柱AD 250x 30mm；柱温：38℃，流动相：超临界CO₂/EtOH(0.2％NH₃H₂O)＝45/55。

使用了下列缩写：

DME 二甲氧基乙烷

DCM 二氯甲烷

TEA 三乙胺

THF 四氢呋喃

EtOAc 乙酸乙酯

DMF N,N-二甲基甲酰胺

DIPEA N,N-二异丙基乙胺

MeOH 甲醇

MTBE 甲基叔丁基醚

HATU 1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸酯

RT 室温

SFC 超临界流体色谱法

实例1

中间体1：

3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向二氯甲烷(200mL)中的可商购2-氯-3-肼基吡嗪(28g，0.19mol)的溶液加入丁醛(14.7g，0.20mol)，并且在冷却到0℃之前将反应在50℃搅拌2小时。在0℃加入二乙酰氧基碘苯(71.8g，0.223mol)。去除冷却并且将混合物在20℃下搅拌2小时。将Na₂CO₃(80mL)的饱和水溶液缓慢倒入反应中，并且将该混合物搅拌10分钟。将有机相分离，用盐水(3×50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并且在真空下浓缩。使用乙酸乙酯和石油醚的梯度通过快速色谱法在硅胶上纯化残余物，以给出8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪20g(53％)。

将二噁烷(120mL)和H₂O(50mL)中的8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(10g，51mmol)和浓HCl水溶液(21mL)的混合物在100℃搅拌12小时。将该溶液冷却到20℃，并且加入饱和NaHCO₃水溶液，将pH调整到8。将该混合物在真空下浓缩，将残余物用水洗涤，然后干燥，以给出3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮8g(88％)。

实例2

3-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：在0℃下向二氯甲烷(10mL)中的(四氢-2H-吡喃-3-基)甲醇(300mg，2.58mmol)和TEA(522mg，5.17mmol)的溶液中加入甲磺酰氯(355mg，3.10mmol)并且允许将反应加温至20℃并搅拌1小时。将该溶液用饱和的NaHCO₃水溶液(2mL)、H₂O(3×2mL)、盐水(1mL)洗涤，干燥并浓缩，以给出(四氢-2H-吡喃-3-基)甲基甲磺酸酯(500mg)，其直接用于下一步中。

步骤2：向DMF(30mL)中的(四氢-2H-吡喃-3-基)甲基甲磺酸酯(500mg，2.58mmol)和3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(413mg，2.32mmol)的溶液中加入K₂CO₃(534mg，3.87mmol)。将该混合物在60℃下搅拌4小时。将该反应冷却至RT，并且用DCM(100mL)稀释。将有机相用H₂O(2×10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并蒸发。将该残余物用MeOH(2mL)洗涤，以给出3-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮400mg(56％)。

通过SFC纯化3-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮的外消旋物400mg，并且根据对映异构体的洗脱顺序将它们编号。

立体异构体1：160mg(40％)，¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ6.93(d,J＝6.0Hz,1H),6.66(d,J＝6.0Hz,1H),4.03-3.94(m,1H),3.89-3.74(m,3H),3.60-3.50(m,1H),3.37(dd,J＝11.6,7.6Hz,1H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),2.23-2.12(m,1H),1.97-1.80(m,3H),1.78-1.68(m,1H),1.62-1.53(m,1H),1.50-1.40(m,1H),1.06(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝277.2,t_R(分钟，方法3)＝1.99

[α]_D²⁰＝-11.33(c＝0.10,MeOH)。

立体异构体2：170mg(42％),¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ6.94(d,J＝6.0Hz,1H),6.66(d,J＝6.4Hz,1H),4.01-3.94(m,1H),3.89-3.74(m,3H),3.60-3.51(m,1H),3.37(dd,J＝11.6,7.6Hz,1H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),2.23-2.12(m,1H),1.97-1.80(m,3H),1.78-1.68(m,1H),1.62-1.53(m,1H),1.50-1.40(m,1H)，1.06(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝277.2,t_R(分钟，方法3)＝1.99

[α]_D²⁰＝+12.33(c＝0.10,MeOH)。

实例3

7-(环己基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(2mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.1mmol)和(溴甲基)环己烷(239mg，1.35mmol)的溶液加入K₂CO₃(310mg，2.2mmol)。将该反应在60℃下搅拌4小时，进而冷却到室温。加入DCM(20mL)，并且将有机相用水(2×5mL)洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥并蒸发。将残余物用MeOH(2mL)洗涤，以给出7-(环己基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮190mg(61％)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ6.90(d,J＝5.6Hz,1H),6.62(d,J＝5.6Hz,1H),3.79(d,J＝7.2Hz,2H),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),1.93-1.88(m,3H),1.75-1.61(m,5H),1.21-1.18(m,3H),1.08-1.01(m,5H)。LCMS(MH+):m/z＝275.2,t_R(分钟，方法3)＝2.57

实例4

7-(环戊基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(2mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.1mmol)和(溴甲基)环戊烷(283mg，1.35mmol)的溶液加入K₂CO₃(310mg，2.2mmol)。将该反应在60℃下搅拌4小时，进而冷却到室温。将该混合物用DCM(20mL)稀释，并且用水(2×5mL)洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥并蒸发。将粗产物用MeOH(2mL)洗涤，以给出7-(环戊基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮120mg(41％)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ6.91(d,J＝5.6Hz,1H),6.66(d,J＝5.6Hz,1H),3.89(d,J＝8.0Hz,2H),2.94(t,J＝7.6Hz,2H),2.37-2.31(m,1H),1.92-1.86(m,2H),1.73-1.68(m,4H),1.63-1.56(m,2H),1.32-1.27(m,2H),1.04(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝261.1,t_R(分钟，方法3)＝2.41

实例5

3-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(2mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.1mmol)和4-(溴甲基)四氢-2H-吡喃(241mg，1.35mmol)的溶液加入K₂CO₃(310mg，2.2mmol)。将该混合物在60℃下搅拌4小时，进而冷却到室温。将该反应混合物用DCM(20mL)稀释，并且用水(2×5mL)洗涤。有机相经Na₂SO₄干燥并蒸发。将粗产物用MeOH(2mL)洗涤，以给出3-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮120mg(54％)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ6.91(d,J＝6.0Hz,1H),6.62(d,J＝6.0Hz,1H),3.96(dd,J＝11.6,3.2Hz,2H),3.82(d,J＝7.6Hz,2H),3.34(td,J＝11.6,1.6Hz,2H),2.94(t,J＝7.6Hz,2H),2.20-2.10(m,1H),1.91-1.86(m,2H),1.61-1.58(m,2H),1.40(dq,J＝4.0,12.0Hz,2H),1.04(t,J＝7.6Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝277.1,t_R(分钟，方法3)＝1.93

实例6

7-异丁基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(2mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.1mmol)和1-溴-2-甲基丙烷(231mg，1.68mmol)的溶液加入K₂CO₃(185mg，1.34mmol)。将该混合物在60℃下搅拌12小时，并且然后冷却到室温。将该反应混合物用DCM(20mL)稀释，并且用水(2×5mL)洗涤。有机相经Na₂SO₄干燥并蒸发。将残余物用MeOH(2mL)洗涤，以给出7-异丁基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮160mg(61％)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ6.93(d,J＝6.0Hz,1H),6.65(d,J＝6.0Hz,1H),3.78(d,J＝7.6Hz,2H),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),2.20-2.14(m,1H),1.95-1.88(m,2H),1.06(t,J＝7.4Hz,3H),0.98(d,J＝6.6Hz,6H)。LCMS(MH+):m/z＝235.2,t_R(分钟，方法3)＝2.16

实例7

7-(环丙基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(2mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.1mmol)和(溴甲基)环丙烷(227mg，1.68mmol)的溶液加入K₂CO₃(186mg，1.35mmol)。将该混合物在60℃下搅拌12小时，并且然后冷却到室温。向该反应混合物加入DCM(20mL)，并且将其用水(2×5mL)洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥并蒸发。将残余物用MeOH(2mL)洗涤，以给出7-(环丙基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮60mg(23％)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ6.97(d,J＝6.0Hz,1H),6.82(d,J＝5.6Hz,1H),3.85(d,J＝7.2Hz,2H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),1.94-1.87(m,2H),1.15-1.27(m,1H),1.06(t,J＝7.4Hz,3H),0.60-0.68(m,2H),0.45-0.42(m,2H)。LCMS(MH+):m/z＝233.2,t_R(分钟，方法3)＝2.06

实例8

7-乙基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(2mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.1mmol)和碘乙烷(262mg，1.68mmol)的溶液加入K₂CO₃(186mg，1.34mmol)。将该混合物在60℃下搅拌12小时，并且然后冷却到室温。将该反应混合物用DCM(20mL)稀释，并且用H₂O(2×5mL)洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥并蒸发。将残余物用MeOH(2mL)洗涤，以给出7-乙基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮60mg(26％)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ6.96(d,J＝5.8Hz,1H),6.69(d,J＝5.8Hz,1H),4.03(q,J＝7.1Hz,2H),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),1.95-1.86(m,2H),1.38(t,J＝7.2Hz,3H),1.06(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝207.1,t_R(分钟，方法3)＝1.81

实例9

7-(氧杂环丁-3-基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：在0℃下向DCM(20mL)中的氧杂环丁-3-基甲醇(500mg，5.67mmol)和Et₃N(1.15g，11.4mmol)的溶液中加入甲磺酰氯(780mg，6.81mmol)。去除冷却并且将混合物在20℃搅拌1小时。将反应混合物用2M NaHCO₃(5mL)然后用盐水(5mL)稀释。有机层经Na₂SO₄干燥并蒸发，以给出氧杂环丁-3-基甲基甲磺酸酯920mg(97％)。

步骤2：向DMF(2mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.1mmol)和氧杂环丁-3-基甲基甲磺酸酯(249mg，1.35mmol)的溶液中加入K₂CO₃(310mg，2.20mmol)。将该混合物在60℃下搅拌4小时，进而冷却到室温。将该反应混合物用DCM(20mL)稀释，并且用水(2×5mL)洗涤。有机相经Na₂SO₄干燥并蒸发。将残余物用乙酸乙酯(4mL)洗涤，以给出7-(氧杂环丁-3-基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮40mg(14％)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ6.88(d,J＝6.0Hz,1H),6.62(d,J＝6.0Hz,1H),4.75(t,J＝7.2Hz,2H),4.46(t,J＝6.4Hz,2H),4.22(d,J＝7.2Hz,2H),3.50-3.40(m,1H),2.89(t,J＝7.6Hz,2H),1.89-1.79(m,2H),0.99(t,J＝7.6Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝249.1,t_R(分钟，方法3)＝1.38

实例10

7-(环庚基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

将溶液冷却至20℃并且加入MeOH(4mL)。将反应在65℃下搅拌2小时，之后将它冷却至室温并在真空中浓缩。使用乙酸乙酯石油醚的梯度通过快速色谱法在硅胶上纯化残余物，以给出环庚基甲醇150mg(83％)。

步骤2：在0℃下向DCM(5mL)中的环庚基甲醇(150mg，1.17mmol)和TEA(236mg，2.34mmol)的溶液中加入甲磺酰氯(201mg，2.75mmol)并且允许将它加温至20℃并搅拌0.5小时。将该溶液用饱和的NaHCO₃水溶液(2mL)、H₂O(3×2mL)、盐水(1mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩，以给出环庚基甲基甲磺酸酯(250mg)，其直接用于下一步中。

步骤3：向DMF(5mL)中的环庚基甲基甲磺酸酯(250mg)和3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(187mg，1.05mmol)的溶液中加入K₂CO₃(241mg，1.75mmol)。将该混合物在60℃下搅拌12小时。将该反应混合物用DCM(20mL)稀释，并且用水(2×5mL)洗涤。有机相经Na₂SO₄干燥并蒸发。将残余物用MeOH(2mL)洗涤，以给出7-(环庚基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮100mg(33％)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ6.91(d,J＝6.0Hz,1H),6.64(d,J＝6.0Hz,1H),3.79(d,J＝7.2Hz,2H),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),2.08-2.00(m,1H),1.96-1.87(m,2H),1.71-1.65(m,4H),1.61-1.38(m,6H),1.30-1.21(m,2H),1.07(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝289.1,t_R(分钟，方法3)＝2.31

实例11

3-丙基-7-((四氢呋喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：在0℃下向THF(15mL)中的四氢呋喃-3-甲酸(600mg，5.17mmol)的溶液中加入THF中的1M BH₃·THF(10.3mL，10.3mmol)溶液。将该反应加热至65℃并且搅拌12小时。然后将该溶液冷却到20℃并加入MeOH(4mL)。然后将反应在65℃下搅拌2小时，然后冷却到室温，并在真空中浓缩。使用乙酸乙酯和石油醚的梯度通过快速色谱法在硅胶上纯化残余物，以给出(四氢呋喃-3-基)甲醇200mg(38％)。

步骤2：在0℃下向DCM(15mL)中的(四氢呋喃-3-基)甲醇(200mg，1.96mmol)和TEA(396mg，3.92mmol)的溶液中加入甲磺酰氯(448mg，3.92mmol)。将该反应在20℃加热并且搅拌1小时。将该溶液用饱和的NaHCO₃水溶液(2mL)、H₂O(3×2mL)、盐水(1mL)洗涤，干燥并浓缩，以给出(四氢呋喃-3-基)甲基甲磺酸酯(400mg)，其直接用于下一步中。

步骤3：向DMF(10mL)中的(四氢呋喃-3-基)甲基甲磺酸酯(400mg)和3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(348mg，1.95mmol)的溶液中加入K₂CO₃(539mg，3.91mmol)。将该混合物在60℃下搅拌12小时。将该混合物用DCM(100mL)稀释并且用H₂O(2×10mL)洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥并蒸发。将残余物用MeOH(2mL)洗涤以给出3-丙基-7-((四氢呋喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮200mg(39％)。

通过SFC纯化3-丙基-7-((四氢呋喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮的外消旋物200mg，并且根据对映异构体的洗脱顺序将它们编号。

立体异构体1：160mg(40％),¹H NMR(CDCl₃瓦里安400MHz):δ6.95(d,J＝5.9Hz,1H),6.68(d,J＝6.1Hz,1H),4.08(dd,J＝13.5,7.3Hz,1H),4.00-3.94(m,1H),3.86-3.74(m,3H),3.63(dd,J＝9.1,4.9Hz,1H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),2.91-2.80(m,1H),2.13-2.02(m,1H),1.96-1.87(m,2H),1.77-1.69(m,1H),1.06(t,J＝7.6Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝263.1,t_R(分钟，方法3)＝1.85

[α]_D²⁰＝+9.33°(c＝0.10,MeOH)。

立体异构体2：170mg(43％),¹H NMR(CDCl₃瓦里安400MHz):δ6.94(d,J＝6.0Hz,1H),6.68(d,J＝6.0Hz,1H),4.09(dd,J＝13.5,7.3Hz,1H),4.00-3.94(m,1H),3.86-3.74(m,3H),3.63(dd,J＝9.1,4.9Hz,1H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),2.91-2.80(m,1H),2.13-2.02(m,1H),1.96-1.87(m,2H),1.77-1.69(m,1H),1.06(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝263.1,t_R(分钟，方法3)＝1.86

[α]_D²⁰＝-7.67°(c＝0.10,MeOH)。

实例12

7-苄基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

将8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(101mg，0.514mmol)和苯甲醇(100mg，0.925mmol)溶解在二甲氧基乙烷(3mL)中，加入矿物油(41mg，1.0mmol)中的60％NaH，并且将该混合物在室温下搅拌1小时。加入碘化钠(154mg，1.03mmol)并将该反应在微波辐射下在200℃加热20分钟。过滤反应物并在真空中浓缩。使用(石油醚:EtOAc:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通过柱色谱法纯化粗产物，以提供7-苄基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮65mg(45％)。％),¹H NMR(CDCl₃500MHz):δ7.38(m,5H),6.92(d,J＝6.0Hz,1H),6.68(d,J＝6.0Hz,1H),5.17(s,2H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),1.96-1.87(m,2H),1.06(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝269.2,t_R(分钟，方法1)＝0.50

实例13

7-(2-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

将8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(116mg，0.590mmol)、(2-氟苯基)甲醇(134mg，1.06mmol)溶解在二甲氧基乙烷(3.5mL)中，加入矿物油(43mg，1.1mmol)中的60％NaH，并且将该反应在室温下搅拌2小时。加入碘化钠(177mg，1.18mmol)并将该反应在微波辐射下在200℃加热20分钟。过滤反应物并在真空中浓缩。使用(石油醚:EtOAc:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通过柱色谱法纯化粗产物，以提供7-(2-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮8mg(9％)。％),¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.56(m,1H),7.35(m,1H),7.17(m,1H),7.12(m,1H),6.92(d,J＝6.0Hz,1H),6.82(d,J＝6.0Hz,1H),5.22(s,2H),2.94(t,J＝7.6Hz,2H),1.92(m,2H),1.06(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝287.2,t_R(分钟，方法1)＝0.51

实例14

中间体2：

1-(3-氟苄基)-3-肼基吡嗪-2(1H)-酮：

步骤1：在0℃下向THF(40mL)中的(3-氟苯基)甲胺(10.0g，80.0mmol)的溶液中缓慢加入2-氯-2-氧代乙酸乙酯(9.78mL，87.9mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟。然后将乙酸乙酯(40mL)中的2,2-二甲氧基乙烷-1-胺(10.5mL，95.9mmol)和DIPEA(41.8mL，239mmol)加入到该混合物中。将该反应混合物在回流下加热过夜并且然后冷却至室温。向该反应混合物加入饱和的NaHCO₃水溶液(50mL)，并且将其用乙酸乙酯(50mL)萃取。有机相经Na₂SO₄干燥，过滤，在真空中浓缩，并且使用DCM和甲醇的梯度(DCM/MeOH＝100/1至20/1)通过柱色谱法在硅胶上进行纯化，以给出N1-(2,2-二甲氧基乙基)-N2-(3-氟苄基)草酰胺15g(66％)。

步骤2：向乙酸(20mL)中的N1-(2,2-二甲氧基乙基)-N2-(3-氟苄基)草酰胺(1.00g，3.52mmol)的溶液中加入三氟乙酸(0.3mL)。然后将该反应在140℃下加热2小时，并且冷却到室温。将粗混合物浓缩，并且将残余物加入MTBE(50mL)和饱和的NaHCO₃水溶液(50mL)中。通过过滤收集生成的沉淀物，用H₂O(50mL)和MTBE(50mL)洗涤，以给出1-(3-氟苄基)-1,4-二氢吡嗪-2,3-二酮500mg(64％)。

LCMS(MH+):m/z＝221.1,t_R(分钟，方法3)＝1.95

步骤3：将1-(3-氟苄基)-1,4-二氢吡嗪-2,3-二酮(8.0g，36mmol)缓慢加入POCl₃(35mL)中。将该混合物在80℃下加热1小时，进而冷却到室温。将粗反应混合物倾倒到冰水(100mL)上，通过添加饱和的NaHCO₃水溶液(1L)将pH调整到大约7。将混合物用DCM(2×500mL)萃取。合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且使用乙酸乙酯和DCM的梯度(DCM/EtOAc＝100/1至30/1)通过柱色谱硅胶进行纯化，以给出3-氯-1-(3-氟苄基)吡嗪-2(1H)-酮6g(69％)。

步骤4：向EtOH(30mL)中的3-氯-1-(3-氟苄基)吡嗪-2(1H)-酮(1g，4.19mmol)的溶液中加入NH₂NH₂·H₂O(1mL)。将混合物在40℃下搅拌过夜，进而冷却到0℃。滤出沉淀物并且用水(20mL)、冷EtOH(20mL)洗涤，并且干燥，以给出1-(3-氟苄基)-3-肼基吡嗪-2(1H)-酮800mg(81％)。

实例15

7-(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：向DCM(8mL)中的1-(3-氟苄基)-3-肼基吡嗪-2(1H)-酮(300mg，1.28mmol)的冷(0℃)溶液中逐滴加入DCM(2mL)中的四氢-2H-吡喃-4-碳酰氯(209mg，1.41mmol)的溶液。将该混合物加温至室温并且搅拌1小时。向该混合物加入H₂O(5mL)。有机层用水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥和浓缩，以给出粗制的N'-(4-(3-氟苄基)-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)四氢-2H-吡喃-4-碳酰肼400mg(90％)，其可在下一步反应中使用，而不需要进一步纯化。

步骤2：向二噁烷(10mL)中的N'-(4-(3-氟苄基)-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)四氢-2H-吡喃-4-碳酰肼(400mg，1.16mmol)的溶液中加入POCl₃(884mg，5.78mmol)。将混合物在回流下加热1.5h，并且然后冷却至室温。将反应物在真空中浓缩，并且通过添加饱和的NaHCO₃水溶液，将残余物调整pH为7-8。将混合物用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，在真空中浓缩，并且使用DCM/甲醇的梯度(DCM/MeOH＝50/1至20/1)通过快速色谱法进行纯化，以给出7-(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮122mg(32％)。¹H NMR(DMSO-d₆瓦里安400):δ7.69(d,J＝5.6Hz,1H),7.41-7.36(m,1H),7.28(d,J＝6.0Hz,1H),7.21-7.12(m,3H),5.11(s,2H),3.94(d,J＝11.6Hz,2H),3.52-3.46(m,2H),1.87-1.81(m,4H)。LCMS(MH+):m/z＝329.1,t_R(分钟，方法3)＝1.68

实例16

7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：向氯仿(20mL)中的2-((3-氟苄基)氧基)-3-肼基吡嗪(1.5g，6.4mmol)的溶液中加入丁醛(0.508g，7.04mmol)，并且将混合物在室温下搅拌6小时并且随后在冰浴上冷却。加入二乙酸碘苯(2.27g，7.04mmol)，并且去除冷却。将反应在室温下搅拌16小时。将粗反应物在硅藻土上浓缩，并且使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通过快速色谱法进行纯化，以产生8-((3-氟苄基)氧基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪1.5g(82％)。

步骤2：向DME(30mL)中的8-((3-氟苄基)氧基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(1.43g，4.99mmol)的溶液中加入碘化钠(1.5g，1.0mmol)，并且将反应在微波辐射下在200℃下加热20分钟。向该反应物添加H₂O(50mL)，并且将其用DCM(3×60mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，在真空中浓缩，并且使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通过快速色谱法进行纯化，以产生7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮1.14g(80％)。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.38(m,1H),7.15(m,1H),7.08(m,2H),6.92(d,J＝6.0Hz,1H),6.66(d,J＝6.0Hz,1H),5.18(s,2H),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),1.91(m,2H),1.08(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝287.1,t_R(分钟，方法1)＝0.52

实例17

7-(3-甲基苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

在室温下向DME(3mL)中的8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(94mg，0.48mmol)和间甲基苯甲醇(105mg，0.860mmol)的溶液加入矿物油(34mg，0.86mmol)中的NaH 60％，并且将该反应搅拌1小时。

加入碘化钠(143mg，0.956mmol)并将反应在微波辐射下在200℃下加热20分钟。将粗制的反应混合物在真空中浓缩，并且使用(石油醚:EtOAc:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通过快速色谱法进行纯化，以产生44mg的7-(3-甲基苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(33％)。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.25(m,1H),7.13(m,3H),6.89(d,J＝6.0Hz,1H),6.64(d,J＝6.0Hz,1H),5.11(s,2H),2.92(t,J＝7.5Hz,2H),2.33(s,3H),1.89(m,2H),1.02(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝283.3,t_R(分钟，方法1)＝0.57

实例18

3-丙基-7-(4-(三氟甲基)苄基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

在室温下向DME(3.5mL)中的8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(82mg，0.42mmol)和(4-(三氟甲基)苯基)甲醇(114mg，0.646mmol)的溶液加入矿物油(47mg，1.2mmol)中的NaH 60％，并且将该混合物搅拌2小时。加入碘化钠(140mg，0.932mmol)并将反应在微波辐射下在200℃下加热20分钟。将粗制的反应混合物在真空中浓缩，并且使用(石油醚:EtOAc:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通过快速色谱法进行纯化，以产生31mg的3-丙基-7-(4-(三氟甲基)苄基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(19％)。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.65(m,2H),7.50(m,2H),6.94(d,J＝6.0Hz,1H),6.65(d,J＝6.0Hz,1H),5.21(s,2H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),1.91(m,2H),1.07(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH⁺):m/z＝337.2，t_R(分钟，方法1)＝0.62

实例19

7-(3-氟苄基)-3-((四氢呋喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：向2-(四氢呋喃-3-基)乙酸(1.00g，7.68mmol)和SOCl₂(10mL)的混合物中加入一滴DMF，并且将反应混合物在室温下搅拌45分钟。

使温度恢复至85℃，并且在真空中浓缩之前搅拌4小时。

粗产物用于下一个步骤，而不用进一步纯化。

步骤2：向DCM(30mL)中的2-氯-3-肼基吡嗪(1.1g，7.7mmol)和DIPEA(2.98g，23.1mmol)的冰冷溶液中加入DCM(8.0ml)中的2-(四氢呋喃-3-基)乙酰氯(1.1g，7.7mmol)。然后允许反应升温至室温并搅拌过夜。

将该反应混合物倾倒入H₂O(100mL)中并且用DCM(3×50mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并在真空中浓缩。使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通过快速色谱法纯化粗产物，以产生N'-(3-氯吡嗪-2-基)-2-(四氢呋喃-3-基)乙酰肼714mg(36％)。

步骤3：将乙腈(4.5mL)中的N'-(3-氯吡嗪-2-基)-2-(四氢呋喃-3-基)乙酰肼(200mg，0.779mmol)和POCl₃(597mg，3.90mmol)的混合物在微波辐射下在100℃下加热60分钟。向该反应中小心地加入饱和的K₂CO₃水溶液(15mL)，然后加入H₂O(20mL)。将混合物用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并在真空中浓缩。使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通过快速色谱法纯化粗产物，以产生8-氯-3-((四氢呋喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪73mg(39％)。

步骤4：在0℃下向溶解于DME(2mL)中的8-氯-3-((四氢呋喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(72mg，0.30mmol)和(3-氟苯基)甲醇(46mg，0.36mmol)的溶液中加入矿物油中的NaH 60％(22mg，0.54mmol)。允许将混合物加温至室温并搅拌3小时。加入碘化钠(90mg，0.60mmol)并将该反应在微波辐射下在200℃加热20分钟。将该反应混合物倾倒入H₂O(25mL)中并且用乙酸乙酯(3x 25mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，在真空中浓缩，并且使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通过快速色谱法进行纯化，以产生26mg(26％)的7-(3-氟苄基)-3-((四氢呋喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 600MHz):δ7.32(m,1H),7.13(m,1H),7.06(m,2H),7.00(d,J＝6.0Hz,1H),6.72(d,J＝6.0Hz,1H),5.14(s,2H),3.93(m,2H),3.79(m,1H),3.54(m,1H),3.02(m,2H),2.91(m,1H),2.18(m,1H),1.72(m,1H)。LCMS(MH⁺):m/z＝329.0，t_R(分钟，方法2)＝0.47

实例20

3-丙基-7-(2-(三氟甲基)苄基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

在室温下向二甲氧基乙烷(3.5mL)中的8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(88mg，0.45mmol)和(2-(三氟甲基)苯基)甲醇(111mg，0.629mmol)的溶液加入矿物油(35mg，0.88mmol)中的NaH 60％，并且将该反应搅拌2小时。加入碘化钠(110mg，0.734mmol)并将反应在微波辐射下在200℃下加热20分钟。将反应混合物在真空中浓缩，并且使用(石油醚:EtOAc:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通过快速色谱法进行纯化，以产生31mg的(17％)3-丙基-7-(2-(三氟甲基)苄基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.76(m,1H),7.56(m,1H),7.45(m,1H),7.40(m,1H),6.93(d,J＝6.0Hz,1H),6.60(d,J＝6.0Hz,1H),5.40(s,2H),2.98(t,J＝7.6Hz,2H),1.92(m,2H),1.09(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH⁺):m/z＝337.2，t_R(分钟，方法1)＝0.60。

实例21

7-(2-氯苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

在室温下向二甲氧基乙烷(3mL)中的8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(108mg，0.549mmol)和(2-氯苯基)甲醇(153mg，1.07mmol)的溶液加入矿物油(40mg，0.99mmol)中的NaH 60％。将反应搅拌2小时。加入碘化钠(165mg，1.10mmol)并将反应在微波辐射下在200℃下加热20min。将粗制的混合物在真空中浓缩，并且使用(石油醚:EtOAc:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通过快速色谱法进行纯化，以产生15mg(9％)的7-(2-氯苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.44(m,2H),7.28(m,2H),6.90(d,J＝6.0Hz,1H),6.76(d,J＝6.0Hz,1H),5.30(s,2H),2.94(t,J＝7.6Hz,2H),1.88(p,J＝7.5Hz,2H),1.03(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH⁺):m/z＝303.2，t_R(分钟，方法1)＝0.56

实例22

7-(4-氯苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(0.8mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(201mg，1.13mmol)的冰冷溶液加入矿物油(122mg，3.05mmol)中的氢化钠60％。去除冷却并继续搅拌1小时。向该反应加入1-(溴甲基)-4-氯苯(624mg，3.04mmol)，并且继续搅拌另外的3¹/₂小时。通过滴加饱和的水性NH₄Cl(2mL)将反应淬灭。然后将其倾入H₂O(20mL)中，并且用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并在真空中浓缩。使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通过快速色谱法纯化粗产物，以产生13mg(4％)的7-(4-氯苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 600MHz):δ7.35(m,2H),7.32(m,2H),6.91(d,J＝6.0Hz,1H),6.61(d,J＝6.0Hz,1H),5.12(s,2H),2.93(t,J＝7.6Hz,2H),1.89(m,2H),1.04(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH⁺):m/z＝303.2t_R(分钟，方法1)＝0.59

实例23

7-己基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

将DMF(1.5mL)中的3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮盐酸盐(100mg，0.390mmol)、1-溴己烷(148mg，0.898mmol)、K₂CO₃(193mg，1.40mmol)和NaI(5.84mg，0.039mmol)的溶液在80℃搅拌过夜。将该反应混合物倾倒入H₂O(20mL)中并且用乙酸乙酯(3x 20ml)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并在真空中浓缩。使用庚烷、乙酸乙酯和乙酸乙酯+20％MeOH(庚烷/EtOAc/EtOAc+20％MeOH 1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通过快速色谱法在二氧化硅上将残余物纯化，以产生26mg(22％)的7-己基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.02(d,J＝6.0Hz,1H),6.71(d,J＝6.0Hz,1H),4.13(m,2H),3.96(m,2H),3,61(m,2H),3.23(m,1H),2.21(m,2H),1.96(m,2H),1.77(m,2H),1.35(m,6H),0.91(m,3H)。LC-MS:m/z＝305.2[M+H]⁺，t_R(分钟，方法1)＝0.55。

实例24

7-(4-氯苄基)-3-(四氢呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：向DMF(15mL)中的四氢呋喃-3-甲酸(1.0g，8.6mmol)的溶液中加入HATU(3.60g，9.47mmol)、DIPEA(1.22g，1.66ml，9.47mmol)并且最后加入2-氯-3-肼基吡嗪(1.37g，9.47mmol)。将混合物在室温下搅拌3小时。将该反应混合物倾倒入饱和的Na₂CO₃(20mL)水溶液中并且用乙酸乙酯(3x20mL)萃取。将合并的有机相用盐水(3x 25mL)洗涤，经MgSO₄干燥，并在真空中浓缩。使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通过快速色谱法纯化粗产物，以产生1.1g(53％)的N'-(3-氯吡嗪-2-基)四氢呋喃-3-碳酰肼。

步骤2：将N'-(3-氯吡嗪-2-基)四氢呋喃-3-碳酰肼(1.1g，4.5mmol)和POCl₃(20mL)的混合物在回流下加热2小时。将反应混合物在真空中浓缩，并用DCM(50mL)稀释。将该溶液倾到冰水(50mL)上，并且将pH调整为碱性。将这些相分离并且用DCM(2x 50mL)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，在真空中浓缩，并且使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通过快速色谱法进行纯化，以产生285mg(28％)的8-氯-3-(四氢呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪。

步骤3：在室温下向溶解于二甲氧基乙烷(2.2mL)中的8-氯-3-(四氢呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(80mg，0.36mmol)和(4-氯苯基)甲醇(91mg，0.64mmol)的溶液中加入矿物油中的NaH 60％(26mg，0.64mmol)。将反应在室温下搅拌2小时。加入碘化钠(107mg，0.712mmol)并将反应在微波辐射下在200℃下加热20分钟。将粗反应物倾倒入H₂O(25mL)中并且用乙酸乙酯(3x 25mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并在真空中浓缩。使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通过快速色谱法纯化粗产物，以产生22mg(19％)的7-(4-氯苄基)-3-(四氢呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 600MHz):δ7.35(m,2H),7.32(m,2H),7.11(d,J＝6.0Hz,1H),6.61(d,J＝6.0Hz,1H),5.12(m,2H),4.13(m,3H),3.89(m,2H),2.48(m,1H),2.42(m,1H)。LCMS(MH⁺):m/z＝331.2t_R(分钟，方法1)＝0.53.

实例25

7-(4-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

在室温下向二甲氧基乙烷(3.5mL)中的8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(112mg，0.570mmol)和(4-氟苯基)甲醇(129mg，1.03mmol)的溶液加入矿物油(41mg，1.0mmol)中的NaH 60％，并且将该混合物搅拌2小时。向该反应中加入碘化钠(171mg，1.14mmol)并将该反应在微波辐射下在200℃加热20分钟。将粗反应物在真空中浓缩，并且使用(石油醚:EtOAc:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通过快速色谱法进行纯化，以产生28mg(16％)的7-(4-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。4-氯苄基)-3-(四氢呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.39(m,2H),7.08(m,2H),6.91(d,J＝6.0Hz,1H),6.63(d,J＝6.0Hz,1H),5.13(s,2H),),2.94(t,J＝7.6Hz,2H),1.91(m,2H),1.07(t,J＝7.4Hz,3H)。(t,J＝.LCMS(MH+):m/z＝287.2,t_R(分钟，方法1)＝0.52

实例26

7-(4-氯苄基)-3-乙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：向DCM(73mL)中的2-氯-3-肼基吡嗪(2.00g，13.8mmol)的溶液中加入丙醛(0.804g，13.8mmol)，并且将混合物在回流下加热1小时，并且然后在冰浴上冷却。

向该冷溶液加入二乙酸碘苯(5.12g，15.9mmol)，并允许它升温至室温过夜。用H₂O(25mL)然后用盐水(25mL)洗涤反应物，并且在真空中浓缩。使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通过快速色谱法纯化粗产物，以产生1.84g(73％)的8-氯-3-乙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪。

步骤2：在室温下向二甲氧基乙烷(4.5mL)中的8-氯-3-乙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(101mg，0.553mmol)和(4-氯苯基)甲醇(142mg，0.996mmol)的溶液中加入矿物油中的NaH 60％(40mg，1.0mmol)，并且将混合物搅拌2小时。向该反应中加入碘化钠(107mg，0.712mmol)并将该反应在微波辐射下在200℃加热20分钟。将该反应混合物倾倒入H₂O(25mL)中并且用乙酸乙酯(3x 25mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并在真空中浓缩。使用乙酸乙酯以及乙酸乙酯+10％甲醇的梯度通过快速色谱法纯化粗产物，以产生21mg(13％)的7-(4-氯苄基)-3-乙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 600MHz):δ7.36(m,2H),7.31(m,2H),6.91(d,J＝6.0Hz,1H),6.62(d,J＝6.0Hz,1H),5.13(s,2H),),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),1.46(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH⁺):m/z＝389.1，t_R(分钟，方法1)＝0.53

实例27

7-(3-氯苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

在室温下向二甲氧基乙烷(3mL)中的8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(97mg，0.49mmol)和(3-氯苯基)甲醇(127mg，0.888mmol)的溶液加入矿物油(40mg，1.0mmol)中的NaH 60％，并且将该混合物搅拌2小时。向该溶液中加入碘化钠(148mg，0.987mmol)并将该反应在微波辐射下在200℃加热20分钟。将粗反应物在真空中浓缩，并且使用(石油醚:EtOAc:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通过快速色谱法进行纯化，以产生30mg(20％)的7-(3-氯苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.32(m,3H),7.22(m,1H),6.92(d,J＝6.0Hz,1H),6.64(d,J＝6.0Hz,1H),5.11(s,2H),),2.93(t,J＝7.6Hz,2H),1.89(m,2H),1.04(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH⁺):m/z＝303.2，t_R(分钟，方法1)＝0.58

实例28

7-(4-甲基苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮

在微波辐射下将DMF(2mL)中的8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(106mg，0.539mmol)和1-(溴甲基)-4-甲苯(100mg，0.539mmol)的溶液在200℃加热20分钟。将粗反应物倾入饱和的NaHCO₃水溶液中并且用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并在真空中浓缩。使用(石油醚:EtOAc:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:0:1)的梯度通过快速色谱法纯化粗产物，以产生24mg(13％)的7-(4-甲基苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.24(m,2H),7.17(m,2H),6.93(d,J＝6.0Hz,1H),6.70(d,J＝6.0Hz,1H),5.11(s,2H),),2.91(t,J＝7.6Hz,2H),1.85(m,2H),1.02(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH⁺):m/z＝283.3，t_R(分钟，方法1)＝0.58

实例29

7-(2-甲基苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

在微波辐射下将DMF(2mL)中的8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(105mg，0.534mmol)和1-(溴甲基)-2-甲苯(104mg，0.562mmol)的溶液在200℃加热20分钟。将粗反应物倾入饱和的NaHCO₃水溶液中并且用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并在真空中浓缩。使用(庚烷:乙酸乙酯:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通过柱速色谱法纯化粗产物，以产生1.4mg(1％)的7-(2-甲基苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 600MHz):δ7.25(m,3H),7.19(m,1H),6.86(d,J＝6.0Hz,1H),6.49(d,J＝6.0Hz,1H),5.19(s,2H),),2.92(t,J＝7.6Hz,2H),1.89(m,2H),1.04(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH⁺):m/z＝283.3，t_R(分钟，方法1)＝0.56

实例30

7-异戊基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

将DMF(1.5mL)中的3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮盐酸盐(100mg，0.390mmol)、1-溴3-甲基丁烷(136mg，112μl，0.898mmol)、K₂CO₃(192mg，1.389mmol)和NaI(5.84mg，0.039mmol)的溶液在80℃搅拌过夜。将该反应混合物倾倒入H₂O中并且用乙酸乙酯(3x 20ml)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并在真空中浓缩。使用(庚烷/EtOAc/EtOAc+20％MeOH 1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通过快速色谱法在二氧化硅上将残余物纯化，以产生31mg(27％)的7-异戊基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.01(d,J＝6Hz,1H),6.69(d,J＝6Hz,1H),4.16(d,J＝7.6Hz,2H),4.01(m,2H),3.61(m,2H),3.22(m,1H),2.21(m,2H),1.98(m,2H),1.65(m,3H),1.00(m,6H)。LC-MS m/z＝291.2[M+H]⁺:t_R(分钟,方法5)＝0.58。

实例31

6-溴-7-(环戊基甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：向DCM(500mL)中的5-溴-3-氯-2-肼基吡嗪(44.50g，199.14mmol)的溶液中加入四氢-2H-吡喃-4-甲醛(23.87g，209.10mmol)。将混合物在30℃下搅拌1.5h。LCMS显示反应完成。将作为棕色液体的混合物直接用于下一步。然后，将其冷却至0℃，分部分地加入PhI(OAc)₂(73.76g，229.01mmol)。在添加之后，将混合物在30℃下搅拌2h。LCMS显示反应完成。将饱和的K₂CO₃水溶液(100mL)缓慢加入至混合物中并且将其搅拌10min。将有机相分离并且用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出粗产物。将粗产物用MTBE(100mL)和DCM(200mL)洗涤，以给出6-溴-8-氯-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(48.00g，75.90％产率)。

步骤2：向THF(300mL)和H₂O(60mL)中的6-溴-8-氯-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(20.0g，62.98mmol)的溶液中加入NaOH(5.04g，125.96mmol)。将混合物在70℃下加热2h。LCMS显示反应完成。将混合物冷却至28℃并通过1N HCl酸化至pH 5-6。将混合物过滤并且将滤饼用水(200mL)洗涤并在真空中干燥，以给出6-溴-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8-醇(15.00g，79.62％产率)。

步骤3：向DMF(40mL)中的6-溴-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8-醇(4.0g，13.37mmol)的悬浮液中加入(溴甲基)环戊烷(2.62g，16.04mmol)和K₂CO₃(2.77g，20.06mmol)。将混合物在80℃下加热24h。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(50mL)和H₂O(50mL)中。将有机层用H₂O(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出粗产物。通过从DCM(50mL)和EA(30mL)中重结晶纯化残余物，以给出6-溴-7-(环戊基甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(1.20g，23.54％产率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ7.20(s,1H),4.24(d,J＝7.6Hz,2H),4.16-4.12(m,2H),3.63-3.57(m,2H),3.19-3.10(m,1H),2.45-2.35(m,1H),2.21-2.18(m,2H),1.98-1.95(m,2H),1.73-1.70(m,4H),1.62-1.55(m,2H),1.44-1.31(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.54min(方法3),m/z＝381.0[M+H]⁺。

实例32

6-溴-7-(环己基甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMSO(50mL)中的6-溴-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8-醇(5.0g，16.72mmol)的悬浮液中加入(溴甲基)环己烷(3.55g，20.06mmol)和K₂CO₃(3.47g，25.07mmol)。将混合物在80℃下加热12h。LCMS显示出40％的希望的产物。将混合物冷却至28℃并加入水(50mL)。将水层用DCM(100mL,两次)萃取。将合并的有机物用水(100mL,两次,两次)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过快速色谱法在硅胶上纯化(DCM/MeOH＝100/1～20/1)，以给出6-溴-7-(环己基甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(1.90g，28.75％产率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.19(s,1H),4.17-4.10(m,4H),3.63-3.57(m,2H),3.19-3.16(m,1H),2.22-2.18(m,2H),1.98-1.94(m,2H),1.90-1.82(m,1H),1.73-1.70(m,2H),1.66-1.61(m,3H),1.19-1.10(m,5H)。LC-MS:t_R＝2.66min(方法3),m/z＝395.1[M+H]⁺。

实例33

6-溴-7-(环庚基甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：在0℃下将BH₃.THF(1M，98.45mL，98.45mmol)逐滴加入THF(50mL)中的环庚烷甲酸(7.0g，49.23mmol)的溶液中。然后，将混合物在70℃下加热12h。通过TLC检查反应。将混合物冷却至0℃并且将MeOH(50mL)逐滴加入混合物中。将混合物浓缩并且通过快速色谱法在硅胶上纯化残余物(PE/EA＝20/1～3/1)，以给出环庚基甲醇(6.0g，95.06％产率)。

步骤2：向DCM(40mL)中的环庚基甲醇(4.00g，31.20mmol)的冷却(0℃)溶液中逐滴加入TEA(6.31g，62.40mmol)和甲磺酰氯(9.28g，81.01mmol)。将混合物在0℃下搅拌1h。TLC显示反应完成。将水(20mL)加入混合物中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出环庚基甲基甲磺酸酯(6.00g，93.22％产率)。

步骤3：向无水DMF(50mL)中的6-溴-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8-醇(5.0g，16.72mmol)的悬浮液中加入环庚基甲基甲磺酸酯(4.48g，21.74mmol)和CsF(5.08g，33.44mmol)。将混合物在80℃下加热12h。LCMS显示出21％的希望的产物。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(50mL)和H₂O(30mL)中。将水层用DCM(50mL)萃取。将有机层用H₂O(30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过快速色谱法在硅胶上纯化(DCM/MeOH＝100/1～20/1)并且进一步通过制备型HPLC(碱性)纯化，以给出6-溴-7-(环庚基甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(465.00mg，6.79％产率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ7.20(s,1H),4.15-4.09(m,4H),3.63-3.57(m,2H),3.19-3.17(m,1H),2.21-2.02(m,3H),1.97-1.94(m,2H),1.75-1.65(m,4H),1.60-1.45(m,4H),1.44-1.27(m,4H)。LC-MS:t_R＝2.81min(方法3),m/z＝409.1[M+H]⁺。

实例34

6-溴-7-(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(2mL)中的6-溴-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8-醇(5.00g，16.72mmol)的悬浮液中加入1-(溴甲基)-3-氟苯(3.79g，20.06mmol)和K₂CO₃(3.47g，25.07mmol)。将混合物在60℃下加热12h。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(50mL)和H₂O(50mL)中。将有机层用H₂O(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，并且通过快速色谱法在硅胶上纯化(DCM/MeOH＝100/1～20/1)，以给出6-溴-7-(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(3.90g，57.28％产率)。¹H NMR(CDCl3瓦里安(varian)400):δ7.30-7.26(m,1H),7.22(s,1H),7.13(d,J＝8.0Hz,1H),7.04-6.99(m,2H),5.45(s,2H),4.14-4.11(m,2H),3.61-3.55(m,2H),3.21-3.16(m,1H),2.22-2.13(m,2H),1.96-1.93(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.42min(方法3),m/z＝407.0[M+H]⁺。

实例35

6-溴-7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：向EtOH(700mL)中的2,3-二氯吡嗪(150g,1.01mol)的溶液中加入一水合肼(124.53g，2.11mmol，85％，在水中)。将反应混合物在回流下加热过夜。将反应混合物冷却并且过滤沉淀物。将所得固体用水(100mL,两次)，然后用冷EtOH(150ml,两次)洗涤并在减压下干燥，以给出2-氯-3-肼基吡嗪(140g，产率96％)。

步骤2：向在0℃下冷却的THF(1.2L)中的2-氯-3-肼基吡嗪(156.5g，1.05mol)的悬浮液中逐滴加入THF(0.3L)中的TFAA(295.6g，1.41mol)的溶液。将反应混合物在室温下搅拌过夜并且然后倾倒入H₂O(500mL)中。将有机相分离并且将水相用EtOAc(500mL*3)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥并在减压下浓缩，以给出N'-(3-氯吡嗪-2-基)-2,2,2-三氟乙酰肼(300g，纯度85％，产率98％)。

步骤3：向DCM(1.5L)中的N'-(3-氯吡嗪-2-基)-2,2,2-三氟乙酰肼(150g，纯度85％，0.53mol)的悬浮液中分部分地加入NBS(141.5g，0.79mol)。添加之后，将混合物在室温下搅拌2hr。将反应混合物在真空下浓缩。通过快速色谱法在硅胶上纯化残余物(PE/EtOAc＝5/1-3/1)，以给出N'-(5-溴-3-氯吡嗪-2-基)-2,2,2-三氟乙酰肼(80g，纯度75％，产率94％)，为黑色固体。

步骤4：向EtOH(1.2L)中的N'-(5-溴-3-氯吡嗪-2-基)-2,2,2-三氟乙酰肼(150g，纯度75％，0.35mol)的溶液中逐滴加入12N HCl(100mL)。将溶液在回流下搅拌6h。将溶液冷却至室温并在减压下浓缩。将水(300mL)加入烧瓶中并且将它用饱和的NaHCO₃处理直到pH＝8(缓慢加入)。将溶液用EtOAc(500mL*3)萃取。将合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在减压下浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物(PE/EA＝2:1)，以给出5-溴-3-氯-2-肼基吡嗪(75g，95％产率)，为棕褐色粉末。¹H NMR(DMSO-d6瓦里安400MHz):δ8.55(s,1H),8.24(s,1H),4.40(s,2H)。LC-MS:t_R＝1.74min(方法3),m/z＝224.9[M+H]⁺

步骤5：在室温下向DCM(600mL)中的5-溴-3-氯-2-肼基吡嗪(25.0g，0.11mol)的混合物中一次性加入丁醛(8.47g，0.12mol)。将混合物在室温下搅拌1.5h。然后，将其冷却至0℃，分部分地加入PhI(OAc)₂(37.9g，0.12mol)。添加之后，将反应混合物在室温下搅拌另外的1.5h。将饱和的K₂CO₃(水溶液)(50mL)倾倒入反应混合物中并搅拌10min。将有机相分离并用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并蒸发。通过硅胶色谱法纯化残余物(PE/EA＝2:1)，以提供6-溴-8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(22.00g，71％产率)。

步骤6：在室温下向THF(150mL)和H₂O(30mL)中的6-溴-8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(12.0g，43.6mmol)的混合物中一次性加入NaOH(3.5g，87.1mmol)。将混合物在70℃下搅拌2.5h。将混合物通过1N HCl(水性)调整至pH＝5-6，并且在减压下浓缩。将残余物溶解于MeOH(20mL)中并过滤。将滤液在真空中浓缩，以提供6-溴-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8-醇(11.0g，98％产率)。

步骤7：在室温下向DMF(8mL)中的6-溴-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8-醇(550mg，2.1mmol)和1-(溴甲基)-3-氟-苯(485mg，2.57mmol)的悬浮液中一次性加入K₂CO₃(443.6mg，3.2mmol)。将混合物在60℃下搅拌3h。并且然后将混合物在减压下浓缩。将残余物用水(30mL)稀释并用DCM(70mL,两次)萃取。将合并的有机相用饱和盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物(PE/EA＝1:1-1:3)，以提供6-溴-7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(380.00mg，49％产率)，为黄色固体。¹H NMR(DMSO-d6瓦里安400MHz):δ8.09(s,1H),7.42-7.37(m,1H),7.19-7.10(m,3H),5.38(s,2H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),1.79-1.73(m,2H),0.98(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.62min(方法3),m/z＝365.0[M+H]⁺。

实例36

7-(3-氟苄基)-6-甲基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

在N₂下，在室温下，向二噁烷(5mL)中的6-溴-7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(300mg，0.82mmol)和[三氟(甲基)-硼烷基]钾(1+)(501mg，4.1mmol)的混合物中加入1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(60mg，0.08mmol)和K₂CO₃(681mg，4.9mmol)。将混合物在80℃下搅拌12h。将混合物浓缩并用水稀释，用EtOAc(30mL，两次，两次)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，在真空中浓缩并且通过制备型HPLC纯化残余物，以给出7-(3-氟苄基)-6-甲基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(20mg，8％产率)，为灰色固体。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400MHz):δ7.26-7.19(m,1H),6.94-6.83(m,3H),6.70(s,1H),5.24(s,2H),2.88(t,J＝8.0Hz,2H),2.18(s,3H),1.89-1.80(m,2H),0.99(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.47min(方法3),m/z＝301.1[M+H]⁺。

实例37

6-乙基-7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：在N₂下，在室温下，向THF(5mL)中的6-溴-7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(300mg，0.82mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧硼戊环(190mg，1.2mmol)的混合物中加入K₂CO₃(227mg，1.64mmol)和1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(60mg，82.2微摩尔)。将混合物在70℃下搅拌12h。然后，将混合物冷却并加入水(10mL)。然后将其用EtOAc(30mL,两次)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并在真空中浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物(石油醚:乙酸乙酯＝1:1-1:2)，以提供7-(3-氟苄基)-3-丙基-6-乙烯基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，57％产率)。

步骤2：向MeOH(4mL)中的7-(3-氟苄基)-3-丙基-6-乙烯基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，0.48mmol)的溶液中加入Pd/C(湿的，具有50％水的10％Pd，0.1g)。将悬浮液在真空下脱气并用H₂吹扫若干次。将混合物在H₂(15psi)下在室温下搅拌10min。将反应混合物过滤并且将滤液浓缩。通过硅胶色谱法纯化粗产物(DCM/MeOH＝50:1)，以给出6-乙基-7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(80mg，53％产率)。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400MHz):δ7.29-7.26(m,1H),6.97-6.86(m,3H),6.72(s,1H),5.32(s,2H),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),2.60-2.54(m,2H),1.95-1.88(m,2H),1.26(t,J＝6.8Hz,3H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.60min(方法3),m/z＝315.1[M+H]⁺。

实例38

7-(3-氟苄基)-6-(3-羟基四氢呋喃-3-基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立体异构体1和2：

步骤1：在N₂下，在室温下，向MeOH(100mL)中的6-溴-8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(9.0g，32.7mmol)的悬浮液中一次性加入甲醇钠(3.53g，65.3mmol)。将混合物在60℃下搅拌4hr。将混合物在减压下浓缩。将残余物悬浮于DCM(100mL)中，用水(20mL)和饱和盐水(20mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并在真空中浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物(洗脱液石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，以提供6-溴-8-甲氧基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(7.40g，84％产率)。

步骤2：在N₂下，在0℃下，向THF(20mL)中的6-溴-8-甲氧基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(2.0g，7.4mmol)的浅黄色溶液中逐滴加入i-PrMgCl-LiCl(17.02mL，22.1mmol，1.3M)。添加之后，将红色溶液在0℃下搅拌30min。然后加入作为THF(2mL)中的溶液的二氢呋喃-3(2H)-酮(1.91g，22.1mmol)并在0℃下搅拌1hr。将混合物用饱和NH₄Cl(水溶液)淬灭并用EtOAc萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤并浓缩，通过硅胶色谱法纯化残余物(PE:EA＝1:1-1:5)以提供3-(8-甲氧基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-6-基)四氢呋喃-3-醇(250mg，12％产率)。

步骤3：在室温下向MeOH(8mL)中的3-(8-甲氧基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-6-基)四氢呋喃-3-醇(8mL)的溶液中一次性加入2M HCl(水性)(8mL)。将溶液在50℃下搅拌20hr。将混合物在减压下在50℃下浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物(DCM:MeOH＝10:1)，以给出6-(3-羟基四氢呋喃-3-基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8-醇(270mg，65％产率)，为黄色固体。

步骤4：向DMF(2mL)中的6-(3-羟基四氢呋喃-3-基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8-醇(250mg，0.95mmol)和1-(溴甲基)-3-氟-苯(214.6mg，1.14mmol)的溶液中一次性加入K₂CO₃(261mg，1.89mmol)。将悬浮液在60℃下搅拌4hr。将混合物在减压下浓缩。将残余物用EtOAc(20mL)稀释，用水(10mL)、饱和盐水(5mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物，以提供7-(3-氟苄基)-6-(3-羟基四氢呋喃-3-基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(40mg，11％产率)。

步骤5：通过SFC纯化7-(3-氟苄基)-6-(3-羟基四氢呋喃-3-基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(50mg，134.3微摩尔)，以提供7-(3-氟苄基)-6-(3-羟基四氢呋喃-3-基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立体异构体1(27mg，54％产率)。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ7.75(s,1H),7.28-7.15(m,3H),6.97-6.95(m,1H),5.53(s,2H),4.17-4.13(m,1H),4.07～4.04(m,1H),3.93(d,J＝9.6Hz,1H),3.76(d,J＝9.6Hz,1H),2.98(t,J＝7.6Hz,2H),2.68(brs,1H),2.53-2.50(m,1H),2.08-2.05(m,1H),1.88-1.82(m,2H),0.99(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.48min(方法3),m/z＝373.1[M+H]⁺。SFC-MS:t_R＝8.05min,ee％＝100.00％,[α]_D²⁰＝-58.67°(c＝0.10,MeOH)。

和7-(3-氟苄基)-6-(3-羟基四氢呋喃-3-基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立体异构体2(17mg，34％产率)，为白色固体。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ7.82(s,1H),7.33-7.23(m,3H),7.21-7.00(m,1H),5.58(s,2H),4.22-4.19(m,1H),4.12～4.09(m,1H),3.99(d,J＝9.6Hz,1H),3.82(d,J＝9.6Hz,1H),3.04(t,J＝7.6Hz,2H),2.83(s,1H),2.58-2.55(m,1H),2.08-2.05(m,1H),1.93-1.88(m,2H),1.04(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.47min(方法3),m/z＝373.1[M+H]⁺。SFC-MS:t_R＝8.39min,ee％＝92.28％,[α]_D²⁰＝+52.67(c＝0.10,MeOH)。

实例39

7-(3-氟苄基)-3-丙基-6-(四氢呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立体异构体1和2：

步骤1：向二噁烷(4mL)和H₂O(2mL)中的6-溴-7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(300mg，821.5微摩尔)和2-(2,5-二氢呋喃-3-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环(242mg，1.23mmol)的混合物中一次性加入K₂CO₃(227mg，1.64mmol)和1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(60mg，82.2微摩尔)。将混合物在70℃-80℃下搅拌16h。将混合物在减压下浓缩。将残余物用EtOAc(20mL)稀释，用水(10mL)、饱和盐水(10mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物(DCM/MeOH＝20/1)，以提供6-(2,5-二氢呋喃-3-基)-7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(260mg，76％产率，85％纯度)，为黄色固体。

步骤2：向MeOH(2mL)中的6-(2,5-二氢呋喃-3-基)-7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(340mg，959.4微摩尔)的溶液中一次性加入Pd/C(50mg，湿的，具有50％的水的10％Pd)。将混合物在室温下搅拌1hr。将混合物过滤并且将滤液在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物，以提供7-(3-氟苄基)-3-丙基-6-(四氢呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(60mg，17％产率)。

步骤3：通过手性SFC纯化7-(3-氟苄基)-3-丙基-6-(四氢呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(60mg，168.34微摩尔)，以提供7-(3-氟苄基)-3-丙基-6-(四氢呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立体异构体1(10mg，17％产率)。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ7.26-7.20(m,1H),6.93-6.87(m,3H),6.80(d,J＝9.6Hz,1H),5.54(d,J＝13.6Hz,1H),5.10(d,J＝14.4Hz,1H),3.96-3.94(m,1H),3.86-3.76(m,3H),3.28-3.24(m,1H),2.89(t,J＝7.6Hz,2H),2.26-2.21(m,1H),1.88-1.83(m,3H),1.01(t,J＝7.6Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.44min(方法3),m/z＝357.1[M+H]⁺。SFC-MS:t_R＝7.91min,ee％＝100％。

和7-(3-氟苄基)-3-丙基-6-(四氢呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立体异构体2(9mg，14％产率)，为白色固体。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ7.33-7.30(m,1H),7.01-6.87(m,4H),5.70-5.55(brs,1H),5.25-5.10(brs,1H),4.03-4.02(m,1H),3.93-3.84(m,3H),3.33(brs,1H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),2.33-2.28(m,1H),1.95-1.92(m,3H),1.08(t,J＝7.6Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.43min(方法3),m/z＝357.1[M+H]⁺。SFC-MS:t_R＝8.46min,ee％＝97.35％。

实例40

6-苄基-7-(环戊基甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：向二噁烷(10mL)和H₂O(5mL)中的6-溴-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(500mg，1.67mmol)的悬浮液中加入2-苄基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环(547mg，2.51mmol)、Cs₂CO₃(1.09g，3.34mmol)和1,1’-双((二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(122mg，167.16微摩尔)。将混合物用N₂脱气并在N₂下在100℃下加热12h。LCMS显示反应完成。将混合物冷却至25℃并用EA(20mL，两次，两次)萃取。将有机层用水(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，并且通过快速色谱法在硅胶上纯化(DCM/MeOH＝100/1～20/1)，以给出6-苄基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(230mg，41.05％产率)。

步骤2：向DMF(2mL)中的6-苄基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(50mg，161.11微摩尔)的悬浮液中加入(溴甲基)环戊烷(32mg，193.33微摩尔)和K₂CO₃(33mg，241.67微摩尔)。将混合物在60℃下加热12h。LCMS显示反应完成。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。将有机层用H₂O(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型HPLC纯化，以给出6-苄基-7-(环戊基甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(9.7mg，15％产率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.41-7.34(m,3H),7.18(d,J＝6.8Hz,2H),6.64(s,1H),4.13-4.10(m,2H),3.97(s,2H),3.90(d,J＝7.6Hz,2H),3.58-3.52(m,2H),3.12-3.10(m,1H),2.30-2.18(m,1H),2.16-2.15(m,2H),1.94-1.91(m,2H),1.71-1.68(m,4H),1.56-1.55(m,2H),1.32-1.31(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.83min(方法3),m/z＝393.2[M+H]⁺

实例41

6-苄基-7-(环己基甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(2mL)中的6-苄基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(70mg，225.55微摩尔)的悬浮液中加入(溴甲基)环己烷(48mg，270.66微摩尔)和K₂CO₃(47mg，338.33微摩尔)。将混合物在60℃下加热12h。LCMS显示反应完成。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。将有机层用H₂O(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型HPLC(碱性)纯化，以给出6-苄基-7-(环己基甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(5.50mg，5.83％产率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.41-7.34(m,3H),7.17(d,J＝6.8Hz,2H),6.65(s,1H),4.13-4.10(m,2H),3.95(s,2H),3.78(d,J＝6.8Hz,2H),3.58-3.53(m,2H),3.12-3.10(m,1H),2.20-2.15(m,2H),1.94-1.91(m,2H),1.75-1.66(m,3H),1.63-1.58(m,4H),1.17-1.03(m,4H)。LC-MS:t_R＝2.46min(方法6),m/z＝407.2[M+H]⁺

实例42

6-苄基-7-(环庚基甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向无水DMF(5mL)中的6-苄基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，644.43微摩尔)的悬浮液中加入环庚基甲基甲磺酸酯(173mg，837.76微摩尔)和K₂CO₃(134mg，966.65微摩尔)。将混合物在60℃下加热24h。LCMS显示出26％的希望的产物。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(30mL)和H₂O(30mL)中。将有机层用H₂O(30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型HPLC(碱性)纯化，以给出6-苄基-7-(环庚基甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(22.60mg，8.27％产率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.40-7.34(m,3H),7.17-7.15(m,2H),6.65(s,1H),4.13-4.10(m,2H),3.94(s,2H),3.77(d,J＝7.6Hz,2H),3.58-3.53(m,2H),3.12-3.10(m,1H),2.19-2.12(m,2H),2.05-1.94(m,1H),1.92-1.85(m,2H),1.67-1.64(m,4H),1.57-1.54(m,4H),1.45-1.30(m,2H),1.23-1.20(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.66min(方法4),m/z＝421.3[M+H]⁺

实例43

6-苄基-7-(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向H₂O(0.5mL)和THF(1mL)中的6-溴-7-(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(100mg，245.56微摩尔)的悬浮液中加入2-苄基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环(80mg，368.33微摩尔)、K₂CO₃(68mg，491.11微摩尔)和1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(18mg，24.56微摩尔)。将混合物用N₂脱气并在N₂下在80℃下加热12h。LCMS显示反应完成。将该混合物冷却至25℃，并且用乙酸乙酯(10mL，两次)萃取。将有机层用水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型TLC纯化(DCM/MeOH＝10/1)，以给出粗产物，将其通过制备型HPLC纯化，以给出6-苄基-7-(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(5.90mg，5.74％产率)。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ7.39-7.36(m,3H),7.31-7.30(m,1H),7.13(d,J＝7.2Hz,2H),6.99-6.95(m,1H),6.94(d,J＝8.0Hz,1H),6.85-6.80(m,1H),6.74(s,1H),5.15(s,2H),4.13(d,J＝12.0Hz,2H),3.79(s,2H),3.58(t,J＝10.0Hz,2H),3.19-3.13(m,1H),2.24-2.15(m,2H),1.96-1.93(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.70min(方法3),m/z＝419.2[M+H]⁺

实例44

7-(环戊基甲基)-6-(2-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：向H₂O(10mL)和二噁烷(20mL)中的6-溴-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(1.20g，4.01mmol)的悬浮液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基苄基)-1,3,2-二氧硼戊环(1.40g，6.02mmol)、1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(294mg，401.00微摩尔)和Cs₂CO₃(2.61g，8.02mmol)。将混合物用N₂脱气并在N₂下在100℃下加热12h。TLC显示反应完成。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(10mL)中。将水层用DCM(20mL)萃取。将有机物用水(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，并且通过快速色谱法在硅胶上纯化(DCM/MeOH＝100/1-20/1)，以给出6-(2-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(500mg，20.％产率)。

步骤2：向无水DMF(5mL)中的6-(2-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，462.42微摩尔)的悬浮液中加入(溴甲基)环戊烷(91mg，554.90微摩尔)和K₂CO₃(96mg，693.63微摩尔)。将混合物在60℃下加热12h。LCMS显示出45％的希望的产物。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。将水层用DCM(20mL)萃取。将合并的有机物用H₂O(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型HPLC(碱性)纯化，以给出7-(环戊基甲基)-6-(2-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(26.94mg，13％产率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.29-7.28(m,2H),7.23-7.19(m,1H),6.99(d,J＝7.6Hz,1H),6.37(s,1H),4.08-4.06(m,2H),3.95(d,J＝7.2Hz,2H),3.91(s,2H),3.52-3.46(m,2H),3.05-2.95(m,1H),2.36-2.33(m,4H),2.11-2.08(m,2H),1.85-1.82(m,2H),1.73-1.71(m,4H),1.57-1.56(m,2H),1.40-1.31(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.92min(方法3),m/z＝407.2[M+H]⁺

实例45

7-(环己基甲基)-6-(2-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向无水DMF(5mL)中的6-(2-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，462.42微摩尔)的悬浮液中加入(溴甲基)环已烷(98mg，554.90微摩尔)和K₂CO₃(96mg，693.63微摩尔)。将混合物在60℃下加热12hr。LCMS显示出26％的希望的产物。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。将有机层用H₂O(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型HPLC纯化，以给出7-(环己基甲基)-6-(2-甲基苄基)-3-四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(21.94mg，11％产率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.29-7.27(m,2H),7.23-7.19(m,1H),6.99(d,J＝7.2Hz,1H),6.36(s,1H),4.08-4.04(m,2H),3.88(s,2H),3.79-3.75(m,2H),3.52-3.46(m,2H),3.00-2.99(m,1H),2.33(s,3H),2.12-2.08(m,2H),1.86-1.82(m,2H),1.73-1.67(m,6H),1.19-1.17(m,3H),1.09-1.06(m,2H)。LC-MS:t_R＝3.02min(方法3),m/z＝421.2[M+H]⁺

实例46

7-(环庚基甲基)-6-(2-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向无水DMF(5mL)中的6-(2-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，462.42微摩尔)的悬浮液中加入环庚基甲基甲磺酸酯(124mg，601.15微摩尔)和K₂CO₃(96mg，693.63微摩尔)。将混合物在60℃下加热12h。LCMS显示出22％的希望的产物。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。将有机层用H₂O(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型HPLC(碱性)纯化，以给出7-(环庚基甲基)-6-(2-甲基苄基)-3-四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(10.5mg，5.22％产率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.29-7.27(m,2H),7.23-7.19(m,1H),6.99(d,J＝7.2Hz,1H),6.35(s,1H),4.08-4.06(m,2H),3.88(s,2H),3.80-3.79(m,2H),3.52-3.46(m,2H),3.00-2.99(m,1H),2.33(s,3H),2.11-2.08(m,3H),1.85-1.83(m,2H),1.69-1.67(m,4H),1.57-1.52(m,4H),1.45-1.30(m,2H),1.27-1.24(m,2H)。LC-MS:t_R＝3.11min(方法3),m/z＝435.2[M+H]⁺

实例47

7-(3-氟苄基)-6-(2-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向二噁烷(4mL)和H₂O(2.00mL)中的6-溴-7-(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，491.11微摩尔)的悬浮液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基苄基)-1,3,2-二氧硼戊环(171mg，736.67微摩尔)、K₂CO₃(136mg，982.22微摩尔)和1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(36mg，49.11微摩尔)。将混合物用N₂脱气并在N₂下在80℃下加热12h。LCMS显示反应完成。将混合物冷却至25℃并用EA(20mL，两次)萃取。将有机层用水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型TLC纯化(DCM/MeOH＝20/1)，以给出粗产物，将其通过制备型HPLC(碱性)纯化，以给出7-(3-氟苄基)-6-(2-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(13.75mg，6.47％产率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ7.33-7.30(m,1H),7.26-7.25(m,3H),7.01-6.99(m,3H),6.97-6.90(m,1H),6.41(s,1H),5.27(s,2H),4.10-4.06(m,2H),3.76(s,2H),3.52-3.46(m,2H),3.02-2.99(m,1H),2.15-2.09(m,5H),1.87-1.84(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.84min(方法3),m/z＝433.2[M+H]⁺

实例48

7-(环戊基甲基)-6-(3-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：向无水二噁烷(20mL)中的1-(氯甲基)-3-甲基苯(2.00g，14.22mmol)的溶液中加入4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼戊环)(5.42g，21.34mmol)、KOAc(4.19g，42.67mmol)和1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(1.04g，1.42mmol)。将混合物用N₂脱气并在N₂下在80℃下加热1h。将混合物浓缩并且将残余物用MTBE(100mL)稀释并通过硅胶垫过滤。将滤液浓缩，以给出4,4,5,5-四甲基-2-(3-甲基苄基)-1,3,2-二氧硼戊环(4.00g，粗品)。将粗品用于下一步，而不用进一步纯化。

步骤2：向H₂O(10mL)和二噁烷(20mL)中的6-溴-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(1.50g，5.01mmol)的悬浮液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(3-甲基苄基)-1,3,2-二氧硼戊环(3.00g，粗品)、1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(367mg，501.00微摩尔)和K₂CO₃(1.38g，10.02mmol)。将混合物用N₂脱气并在N₂下在100℃下加热12h。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(30mL)和H₂O(30mL)中。将水层用DCM(30mL)萃取。将有机物用水(30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，并且通过快速色谱法在硅胶上纯化(DCM/MeOH＝100/1-20/1)，以给出6-(3-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(800mg，31.50％产率)。

步骤3：向无水DMF(5mL)中的6-(3-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，462.42微摩尔)的悬浮液中加入(溴甲基)环戊烷(90mg，554.90微摩尔)和K₂CO₃(96mg，693.63微摩尔)。将混合物在60℃下加热12h。LCMS显示出35％的希望的产物。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。将水层用DCM(20mL)萃取。将合并的有机物用H₂O(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型HPLC纯化，以给出7-(环戊基甲基)-6-(3-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(25.60mg，13.62％产率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ7.28-7.24(m,1H),7.15(d,J＝7.6Hz,1H),6.96-6.94(m,2H),6.68(s,1H),4.13-4.09(m,2H),3.92-3.88(m,4H),3.59-3.53(m,2H),3.14-3.13(m,1H),2.35(s,3H),2.17-2.10(m,3H),1.95-1.90(m,2H),1.71-1.67(m,4H),1.55-1.54(m,2H),1.31-1.30(m,2H)。LC-MS:t_R＝3.10min(方法3),m/z＝407.2[M+H]⁺

实例49

7-(环己基甲基)-6-(3-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向无水DMF(5mL)中的6-(3-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，462.42微摩尔)的悬浮液中加入(溴甲基)环已烷(98mg，554.90微摩尔)和K₂CO₃(96mg，693.63微摩尔)。将混合物在60℃下加热12h。LCMS显示出32％的希望的产物。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。将水层用DCM(20mL)萃取。将合并的有机物用H₂O(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型HPLC(碱性)纯化，以给出7-(环己基甲基)-6-(3-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(12.60mg，6.48％产率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.28-7.24(m,1H),7.14(d,J＝7.6Hz,1H),6.96-6.94(m,2H),6.68(s,1H),4.13-4.10(m,2H),3.91(s,2H),3.77-3.75(m,2H),3.59-3.53(m,2H),3.14-3.12(m,1H),2.35(s,3H),2.20-2.14(m,2H),1.95-1.92(m,2H),1.73-1.72(m,2H),1.65-1.60(m,5H),1.17-1.15(m,2H),1.08-1.02(m,2H)。LC-MS:t_R＝3.21min(方法3),m/z＝421.2[M+H]⁺

实例50

7-苄基-6-(3-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向无水DMF(5mL)中的6-(3-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，462.42微摩尔)的悬浮液中加入1-(溴甲基)-3-氟苯(105mg，554.90微摩尔)和K₂CO₃(96mg，693.63微摩尔)。将混合物在60℃下加热12h。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。将水层用DCM(20mL)萃取。将合并的有机物用H₂O(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型HPLC(碱性)纯化，以给出7-苄基-6-(3-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(46.0mg，23.00％产率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.33-7.29(m,1H),7.26-7.25(m,1H),7.15(d,J＝7.6Hz,1H),6.99-6.95(m,1H),6.94-6.87(m,3H),6.85-6.81(m,1H),6.80(s,1H),5.15(s,2H),4.15-4.12(m,2H),3.76(s,2H),3.60-3.54(m,2H),3.22-3.18(m,1H),2.34(s,3H),2.23-2.17(m,2H),1.98-1.95(m,2H)。LC-MS:t_R＝3.01min(方法3),m/z＝433.1[M+H]⁺

实例51

7-(环戊基甲基)-6-(4-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：向H₂O(10mL)和二噁烷(20mL)中的6-溴-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(1.00g，3.34mmol)的悬浮液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(4-甲基苄基)-1,3,2-二氧硼戊环(1.16g，5.01mmol)、1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(245mg，334.31微摩尔)和Cs₂CO₃(2.18g，6.69mmol)。将混合物用N₂脱气并在N₂下在100℃下加热12h。LCMS显示反应完成。将混合物冷却至25℃并用EA(20mL，两次)萃取。将有机层用水(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，并且通过快速色谱法在硅胶上纯化(DCM/MeOH＝100/1～20/1)，以给出6-(4-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(500mg，38.62％产率)。

步骤2：向无水DMF(5mL)中的6-(4-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，462.42微摩尔)的悬浮液中加入(溴甲基)环戊烷(91mg，554.90微摩尔)和K₂CO₃(96mg，693.63微摩尔)。将混合物在60℃下加热12h。LCMS显示出44％的希望的产物。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。将水层用DCM(20mL)萃取。将合并的有机物用H₂O(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型HPLC(碱性)纯化，以给出7-(环戊基甲基)-6-(4-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(47.00mg，24.74％产率)。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ7.17(d,J＝7.6Hz,2H),7.03(d,J＝8.0Hz,2H),6.65(s,1H),4.11-4.08(m,2H),3.90-3.86(m,4H),3.56-3.51(m,2H),3.12-3.09(m,1H),2.34(s,3H),2.35-2.25(m,1H),2.16-2.13(m,2H),1.92-1.89(m,2H),1.67-1.63(m,4H),1.53-1.51(m,2H),1.31-1.26(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.95min(方法3),m/z＝407.2[M+H]⁺

实例52

7-(环己基甲基)-6-(4-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向无水DMF(5mL)中的6-(4-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，462.42微摩尔)的悬浮液中加入(溴甲基)环已烷(98mg，554.90微摩尔)和K₂CO₃(96mg，693.63微摩尔)。将混合物在60℃下加热12h。LCMS显示出32％的希望的产物。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。将水层用DCM(20mL)萃取。将合并的有机物用H₂O(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型HPLC(碱性)纯化，以给出7-(环己基甲基)-6-(4-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(23.90mg，12.29％产率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ7.19(d,J＝8.0Hz,2H),7.05(d,J＝8.0Hz,2H),6.67(s,1H),4.13-4.10(m,2H),3.90(s,2H),3.77-3.75(m,2H),3.59-3.53(m,2H),3.14-3.11(m,1H),2.36(s,3H),2.20-2.15(m,2H),1.94-1.92(m,2H),1.74-1.72(m,2H),1.65-1.62(m,5H),1.17-1.15(m,2H),1.06-1.02(m,2H)。LC-MS:t_R＝3.04min(方法3),m/z＝421.3[M+H]⁺

实例53

7-(环庚基甲基)-6-(4-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向无水DMF(10mL)中的6-(4-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，616.56微摩尔)的悬浮液中加入环庚基甲基甲磺酸酯(165mg，801.53微摩尔)和K₂CO₃(128mg，924.84微摩尔)。将混合物在60℃下加热12h。LCMS显示出26％的希望的产物。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。将水层用DCM(20mL)萃取。将合并的有机物用H₂O(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型HPLC(碱性)纯化，以给出7-(环庚基甲基)-6-(4-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(26.50mg，9.89％产率)。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ7.17(d,J＝8.0Hz,2H),7.02(d,J＝8.0Hz,2H),6.65(s,1H),4.11-4.09(m,2H),3.87(s,2H),3.74-3.72(m,2H),3.57-3.52(m,2H),3.15-3.11(m,1H),2.34(s,3H),2.18-2.14(m,2H),2.05-1.90(m,3H),1.63-1.60(m,4H),1.53-1.47(m,4H),1.37-1.34(m,2H),1.21-1.18(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.82min(方法4),m/z＝435.3[M+H]⁺

实例54

7-(3-氟苄基)-6-(4-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向二噁烷(4mL)和H₂O(1mL)中的6-溴-7-(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,2]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(100mg，245.56微摩尔)的悬浮液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(4-甲基苄基)-1,3,2-二氧硼戊环(86mg，368.33微摩尔)、K₂CO₃(68mg，491.11微摩尔)和1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(18mg，24.56微摩尔)。将混合物用N₂脱气并在N₂下在80℃下加热12h。LCMS显示反应完成。将混合物冷却至25℃并用EA(10mL，两次)萃取。将有机层用水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型TLC纯化(DCM/MeOH＝20/1)，以给出粗产物，将其通过制备型HPLC(碱性)纯化，以给出7-(3-氟苄基)-6-(4-甲基苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(8.89mg，8.04％产率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.32-7.30(m,1H),7.20(d,J＝7.6Hz,2H),7.02-6.99(m,3H),6.94-6.92(m,1H),6.85-6.80(m,1H),6.77(s,1H),5.15(s,2H),4.16-4.12(m,2H),3.75(s,2H),3.61-3.54(m,2H),3.18-3.17(m,1H),2.37(s,3H),2.23-2.19(m,2H),1.98-1.94(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.43min(方法6),m/z＝433.2[M+H]⁺

实例55

7-(环戊基甲基)-6-(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：向H₂O(4mL)和二噁烷(10mL)中的6-溴-3-(四氢3H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(1.50g，5.01mmol)的悬浮液中加入2-(3-氟苄基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环(1.78g，7.52mmol)、1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(734mg，1.0mmol)和Cs₂CO₃(3.27g，10.03mmol)。将混合物用N₂脱气并在N₂下在100℃下加热16h。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(10mL)中。将水层用DCM(20mL)萃取。将有机物用水(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，并且通过快速色谱法在硅胶上纯化(DCM/MeOH＝100/1～20/1)，以给出6-(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(190mg，11.6％产率)，为黑色固体。

步骤2：向无水DMF(3mL)中的6-(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(70mg，213.2微摩尔)的悬浮液中加入(溴甲基)环戊烷(42mg，255.8微摩尔)和K₂CO₃(44mg，320微摩尔)。将混合物在60℃下加热36h。将混合物冷却并过滤。通过制备型HPLC纯化滤液，以给出7-(环戊基甲基)-6-(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(15mg，17％产率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.37-7.34(m,1H),7.06-7.03(m,1H),6.96(d,J＝8.0Hz,1H),6.88(d,J＝9.2Hz,1H),6.71(s,1H),4.14-4.11(m,1H),3.97(s,2H),3.88(d,J＝7.2Hz,2H),3.59-3.53(m,2H),3.16-3.12(m,1H),2.28-2.16(m,3H),1.95-1.92(m,2H),1.70-1.54(m,6H),1.31-1.30(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.82min(方法3),m/z＝411.2[M+H]⁺。

实例56

7-(环己基甲基)-6-(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向无水DMF(3mL)中的6-(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(70mg，213.2微摩尔)的悬浮液中加入(溴甲基)环己烷(45mg，255.8微摩尔)和K₂CO₃(44mg，320微摩尔)。将混合物在60℃下加热36h。将混合物冷却并过滤。通过制备型HPLC纯化滤液，以给出7-(环己基甲基)-6-(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(18mg，19％产率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.37-7.34(m,1H),7.06-7.03(m,1H),6.95(d,J＝7.6Hz,1H),6.88(d,J＝9.6Hz,1H),6.71(s,1H),4.14-4.11(m,1H),3.95(s,2H),3.74(d,J＝7.2Hz,2H),3.59-3.54(m,2H),3.18-3.13(m,1H),2.23-2.14(m,2H),1.96-1.93(m,2H),1.74-1.60(m,7H),1.75-1.03(m,4H)。LC-MS:t_R＝2.92min(方法3),m/z＝425.2[M+H]⁺。

实例57

6,7-双(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向无水DMF(3mL)中的6-(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(70mg，213.2微摩尔)的悬浮液中加入(溴甲基)-3-氟苯(48mg，255.8微摩尔)和K₂CO₃(44mg，320微摩尔)。将混合物在60℃下加热16h。将混合物冷却并用水(5mL)稀释，用DCM(5mL，两次)萃取。将有机层用盐水洗涤，干燥并在真空中浓缩。通过制备型TLC纯化残余物(DCM/MeOH＝10/1)，以给出6,7-双(3-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(5mg，5％产率)。¹H NMR(CDCl₃400MHz):δ7.38-7.32(m,2H),7.05-7.00(m,2H),6.94-6.92(m,2H),6.86-6.84(m,2H),6.85-6.80(m,1H),6.79(s,2H),5.15(s,2H),4.16-4.13(m,2H),3.80(s,2H),3.61-3.55(m,2H),3.22-3.16(m,1H),2.28-2.17(m,2H),1.98-1.95(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.46min(方法3),m/z＝437.2[M+H]。

实例58

7-(环戊基甲基)-6-(4-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：向H₂O(4mL)和二噁烷(20mL)中的6-溴-3-(四氢4H-吡喃-4-基)-[1,2,10]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(1.50g，5.01mmol)的悬浮液中加入2-(3-氟苄基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环(1.78g，7.52mmol)、1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(367mg，501.47微摩尔)和Cs₂CO₃(3.27g，10.03mmol)。将混合物用N₂脱气并在N₂下在100℃下加热12h。LCMS显示反应完成。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(10mL)中。将水层用DCM(20mL)萃取。将有机物用水(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，并且通过快速色谱法在硅胶上纯化(DCM/MeOH＝100/1-20/1)，以给出6-(4-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(600mg，24.80％产率)。

步骤2：向无水DMF(4mL)中的6-(5-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，456.84微摩尔)的悬浮液中加入(溴甲基)环戊烷(89.mg，548.21微摩尔)和K₂CO₃(95mg，685.27微摩尔)。将混合物在60℃下加热12h。LCMS显示出23％TM。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。将水层用DCM(20mL)萃取。将合并的有机物用H₂O(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型TLC纯化(DCM/MeOH＝50/1)，以给出7-(环戊基甲基)-6-(4-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(25.90mg，13.67％产率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ7.17-7.13(m,2H),7.11-7.06(m,2H),6.64(s,1H),4.13-4.10(m,2H),3.94(s,2H),3.90(d,J＝7.2Hz,2H),3.59-3.53(m,2H),3.13-3.12(m,1H),2.28-2.10(m,1H),2.19-2.16(m,2H),1.94-1.91(m,2H),1.71-1.68(m,4H),1.54-1.45(m,2H),1.33-1.28(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.84min(方法3),m/z＝411.2[M+H]⁺

实例59

7-(环己基甲基)-6-(4-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向无水DMF(4mL)中的6-(5-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，456.84微摩尔)的悬浮液中加入(溴甲基)环己烷(97mg，548.21微摩尔)和K₂CO₃(95mg，685.27微摩尔)。将混合物在60℃下加热12h。LCMS显示出36％的希望的产物。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。将水层用DCM(20mL)萃取。将合并的有机物用H₂O(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型TLC纯化(DCM/MeOH＝50/1)，以给出7-(环己基甲基)-6-(4-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(23.50mg，12.00％产率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ7.17-7.06(m,4H),6.65(s,1H),4.13-4.10(m,2H),3.92(s,2H),3.76-3.74(m,2H),3.59-3.54(m,2H),3.13-3.12(m,1H),2.20-2.16(m,2H),1.94-1.91(m,2H),1.77-1.72(m,3H),1.65-1.60(m,4H),1.18-1.15(m,2H),1.06-1.03(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.92min(方法3),m/z＝425.2[M+H]⁺

实例60

7-(环庚基甲基)-6-(4-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向无水DMF(5mL)中的6-(4-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，456.84微摩尔)的悬浮液中加入环庚基甲基甲磺酸酯(122mg，593.90微摩尔)和K₂CO₃(95mg，685.27微摩尔)。将混合物在60℃下加热12h。LCMS显示出21％的希望的产物。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。将水层用DCM(20mL)萃取。将合并的有机物用H₂O(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型HPLC(碱性)纯化，以给出7-(环庚基甲基)-6-(4-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(6.00mg，2.96％产率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ7.16-7.06(m,4H),6.65(s,1H),4.13-4.10(m,2H),3.92(s,2H),3.74-3.72(m,2H),3.59-3.54(m,2H),3.13-3.10(m,1H),2.19-2.16(m,2H),2.05-1.95(m,1H),1.94-1.91(m,2H),1.67-1.65(m,4H),1.56-1.51(m,4H),1.40-1.30(m,2H),1.23-1.20(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.67min(方法4),m/z＝439.2[M+H]⁺

实例61

7-(3-氟苄基)-6-(4-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向无水DMF(4mL)中的6-(5-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，456.84微摩尔)的悬浮液中加入(溴甲基)-3-氟苯(104mg，548.21微摩尔)和K₂CO₃(95mg，685.27微摩尔)。将混合物在60℃下加热12h。LCMS显示出35％的希望的产物。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。将水层用DCM(20mL)萃取。将合并的有机物用H₂O(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型HPLC(碱性)纯化，以给出7-(3-氟苄基)-6-(4-氟苄基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(37.90mg，19.01％产率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.33-7.30(m,1H),7.11-7.08(m,4H),7.00-6.95(m,1H),6.93-6.92(m,1H),6.85-6.80(m,1H),6.74(s,1H),5.16(s,2H),4.16-4.11(m,2H),3.78(s,2H),3.60-3.54(m,2H),3.17-3.14(m,1H),2.25-2.16(m,2H),1.97-1.93(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.75min(方法3),m/z＝437.2[M+H]⁺

实例62

5-溴-7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：将MeOH(400mL)中的3,5-二溴吡嗪-2-胺(40g，158.17mmol)、亚硝酸异戊酯(56g，474.51mmol)和HCl/MeOH(8mL，1M)的溶液在60℃下搅拌3h。将溶液在真空下浓缩。将残余物用DCM(150mL)稀释，用NaHCO₃(水性)洗涤直到pH＝7，经Na₂SO₄干燥并在真空下浓缩。通过快速色谱法在硅胶上纯化残余物(乙酸甲酯/石油醚＝0/1-1/20)，以给出3,5-二溴-2-甲氧基吡嗪(46g，产率：96.4％)，为黄色液体。

步骤2：将EtOH(250mL)中的3,5-二溴-2-甲氧基吡嗪(45g，0.167mol)和NH₂NH₂.H₂O(15.7g，0.252mol，80％)的溶液在70℃下搅拌5小时。将混合物在真空下浓缩，将残余物用水洗涤，过滤并干燥，以给出5-溴-3-肼基-2-甲氧基吡嗪(32g，产率：86.9％)。

步骤3：将DCM(60mL)中的5-溴-3-肼基-2-甲氧基吡嗪(5g，22.83mmol)和丁醛(1.73g，23.97mmol)的溶液在50℃下搅拌2小时。将溶液冷却至0℃并分部分地加入二乙酸碘苯(8.45g，26.23mmol)并且将反应混合物在30℃下搅拌2小时。然后，将Na₂CO₃(20mL，饱和的水性)缓慢倾倒入反应混合物中并搅拌30min。将有机相分离并用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并在减压下蒸发。通过快速色谱法在硅胶上纯化粗品((EA/PE＝1/10～1/1)，以给出5-溴-8-甲氧基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(2g，产率：32.4％)。

步骤4：在0℃下向DCM(260mL)中的5-溴-8-甲氧基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(3.7g，13.6mmol)的溶液中加入BBr₃(17.1g，68.2mmol，80％)并将其在20℃下搅拌12小时。将溶液用水(100mL)淬灭并在20℃下搅拌0.5小时。加入NaHCO₃(饱和的水溶液)直到pH＝8。将它过滤并且将滤液在真空下浓缩。将残余物用DCM(200mL)稀释，过滤并在真空下浓缩，以给出5-溴-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(2.6g，产率：74％)。

步骤5：将DMF(60mL)中的5-溴-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(2.0g，7.78mmol)、1-(溴甲基)-3-氟苯(1.47g，7.78mmol)和K₂CO₃(2.15g，15.56mmol)的混合物在60℃下搅拌5小时。将混合物用水(80mL)稀释并用EA(50mL*3)萃取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥并蒸发。将残余物用MTBE(20mL，两次)洗涤，以给出5-溴-7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(2g，产率：71.4％)。¹H NMR(CDCl3,400MHz TMS):δ7.39-7.34(m,1H),7.15-7.13(m,1H),7.09-7.05(m,2H),6.67(s,1H),5.11(s,2H),3.30(t,J＝7.6Hz,2H),1.99-1.89(m,2H),1.08(t,J＝7.6Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.069min(方法3),m/z＝365.0[M+H]⁺

实例63

5-乙基-7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：将THF/H₂O(2mL/1mL)中的5-溴-7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，410.73微摩尔)、4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧硼戊环(127mg，821.47微摩尔)和K₂CO₃(170mg，1.23mmol)的混合物在80℃下搅拌12小时。将混合物冷却至20℃，并且在减压中在30℃下浓缩。将残余物倾倒入水(10mL)中并搅拌20min。将水相用EA(10mL*3)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(5mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中浓缩，以提供7-(3-氟苄基)-3-丙基-5-乙烯基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(110mg，85.74％产率)。LC-MS:t_R＝0.693min(方法7),m/z＝312.9[M+H]⁺。

步骤2：在N₂下，向MeOH(5mL)中的7-(3-氟苄基)-3-丙基-5-乙烯基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(100mg，320.16微摩尔)的溶液中加入Pd/C(10mg，10％Pd，50％水)。将悬浮液在真空下脱气并用H₂吹扫若干次。将混合物在H₂(气囊)下在20℃下搅拌10min。将混合物过滤并在减压中在30℃下浓缩。通过制备型TLC纯化残余物(DCM/MeOH＝12/1)，以提供5-乙基-7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(24.3mg，23％产率)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ7.37-7.31(m,1H),7.14-7.11(m,1H),7.05-7.01(m,2H),6.20(s,1H),5.11(s,2H),3.12(t,J＝7.6Hz,2H),2.89-2.83(m,2H),2.01-1.92(m,2H),1.27(t,J＝7.2Hz,3H),1.08(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.595min(方法3),m/z＝315.1[M+H]⁺

实例64

7-(3-氟苄基)-5-甲基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向二噁烷/H₂O(10mL/3mL)中的5-溴-7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，547.65微摩尔)和三氟(甲基)-硼烷,钾盐(200mg，1.64mmol)的混合物中加入1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(40mg，54.76微摩尔)。将褐色溶液在90℃下搅拌12小时。将混合物在真空下浓缩，通过柱色谱法纯化残余物(柱高：250mm，直径：100mm，100-200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝10/1，3/1)并且随后通过制备型HPLC纯化，以提供7-(3-氟苄基)-5-甲基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(25.5mg，15％产率)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ.7.35-7.31(m,1H),7.13-7.12(m,1H),7.05-7.02(m,2H),6.23(s,1H),5.09(s,2H),3.14(t,J＝7.6Hz,2H),2.49(s,3H),1.99-1.90(m,2H),1.08(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.448min(方法3),m/z＝301.1[M+H]⁺

实例65

7-(3-氟苄基)-3-丙基-5-(四氢呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立体异构体1和2：

步骤1：向二噁烷/H₂O(5mL/1mL)中的5-溴-7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(400mg，1.10mmol)和2-(2,5-二氢呋喃-3-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环(237mg，1.21mmol)的混合物中加入1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(80mg，109.53微摩尔)并在70℃下搅拌5小时。将混合物在真空下浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物(柱高：250mm，直径：100mm，100-200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝10/1，1/1)并且随后通过制备型HPLC纯化，以提供5-(2,5-二氢呋喃-3-基)-7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(100mg，25.65％产率)，为白色固体。

步骤2：在N₂下，向MeOH(6mL)中的5-(2,5-二氢呋喃-3-基)-7-(3-氟苄基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(90mg，253.96微摩尔)的溶液中加入Pd/C(10mg，10％Pd，50％水)。将悬浮液在真空下脱气并用H₂吹扫若干次。将混合物在H₂(气囊)下在20℃下搅拌1小时。将混合物过滤并在减压中在30℃下浓缩。通过制备型TLC纯化残余物(EA/PE＝1/0)，以提供7-(3-氟苄基)-3-丙基-5-(四氢呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(60mg，65％产率)，为白色固体。LC-MS:t_R＝0.659min(方法7),m/z＝356.9[M+H]⁺。

步骤3：通过SFC纯化7-(3-氟苄基)-3-丙基-5-(四氢呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(60mg，168.35微摩尔)，以给出7-(3-氟苄基)-3-丙基-5-(四氢呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立体异构体1(15.10mg，25.16％产率)¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ7.37-7.31(m,1H),7.13-7.11(m,1H),7.05-7.01(m,2H),6.47(s,1H),5.16-5.06(m,2H),3.93-3.89(m,4H),3.68-3.71(m,1H),3.18-3.06(m,2H),2.44-2.39(m,1H),2.03-1.96(m,3H),1.10(t,J＝7.6Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.423min(方法3),m/z＝357.2[M+H]⁺。SFC:t_R＝10.2min,ee％＝100％。[α]_D²⁰＝+81.67°(c＝0.10,CHCl₃)。

和7-(3-氟苄基)-3-丙基-5-(四氢呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立体异构体2_10(18.70mg，30％产率)¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ7.37-7.31(m,1H),7.13-7.11(m,1H),7.05-7.01(m,2H),6.47(s,1H),5.16-5.06(m,2H),4.00-3.95(m,4H),3.81-3.69(m,1H),3.18-3.08(m,2H),2.44-2.39(m,1H),2.03-1.96(m,3H),1.10(t,J＝7.6Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.424min(方法3),m/z＝357.1[M+H]⁺。SFC:t_R＝10.76min,ee％＝97.89％。[α]_D²⁰＝-81.67(c＝0.10,CHCl₃)。

实例66

3-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(2mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.1mmol)和4-(溴甲基)四氢-2H-吡喃(241mg，1.35mmol)的溶液加入K₂CO₃(310mg，2.2mmol)。将该混合物在60℃下搅拌4小时。将混合物用DCM(20mL)稀释并用水(5mL，两次)洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥并蒸发。将该残余物用MeOH(2mL)洗涤，以给出3-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(120mg，产率：54％)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ6.91(d,J＝6.0Hz,1H),6.62(d,J＝6.0Hz,1H),3.96(dd,J＝11.6,3.2Hz,2H),3.82(d,J＝7.6Hz,2H),3.34(td,J＝11.6,1.6Hz,2H),2.94(t,J＝7.6Hz,2H),2.20-2.10(m,1H),1.91-1.86(m,2H),1.61-1.58(m,2H),1.40(dq,J＝4.0,12.0Hz,2H),1.04(t,J＝7.6Hz,3H)。LC-MS:t_R＝1.93min(方法3),m/z＝277.1[M+H]⁺。

实例67

3-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立体异构体1和2：

步骤1：在0℃下向DCM(10mL)中的(四氢-2H-吡喃-3-基)甲醇(300mg，2.58mmol)和TEA(522mg，5.17mmol)的溶液中加入MsCl(355mg，3.10mmol)并且将其在20℃下搅拌1小时。将溶液用NaHCO₃(水溶液2mL)、水(三次2mL)、盐水(1次1mL)洗涤，干燥并浓缩，以给出(四氢-2H-吡喃-3-基)甲基甲磺酸酯(500mg)，将其直接用于下一步中。

步骤2：向DMF(30mL)中的(四氢-2H-吡喃-3-基)甲基甲磺酸酯(500mg，2.58mmol)和3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(413mg，2.32mmol)的溶液中加入K₂CO₃(534mg，3.87mmol)。将该混合物在60℃下搅拌4小时。将混合物用DCM(100mL)稀释并且用水(2次10mL)洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥并蒸发。将该残余物用MeOH(2mL)洗涤，以给出3-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(400mg，产率：56％)。

步骤3：通过SFC纯化3-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(400mg，1.45mmol)，以提供3-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立体异构体1(160mg，产率：40.0％),¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ6.93(d,J＝6.0Hz,1H),6.66(d,J＝6.0Hz,1H),4.03-3.94(m,1H),3.89-3.74(m,3H),3.60-3.50(m,1H),3.37(dd,J＝11.6,7.6Hz,1H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),2.23-2.12(m,1H),1.97-1.80(m,3H),1.78-1.68(m,1H),1.62-1.53(m,1H),1.50-1.40(m,1H),1.06(t,J＝7.4Hz,3H)。LC-MS:t_R＝1.99min(方法3),m/z＝277.2[M+H]⁺。SFC-MS:t_R＝9.60min,ee％＝99.68％。[α]_D²⁰＝-11.33(c＝0.10,MeOH)。

和3-丙基-7-((四氢-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立体异构体2(170mg，产率：42.5％)。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ6.94(d,J＝6.0Hz,1H),6.66(d,J＝6.4Hz,1H),4.01-3.94(m,1H),3.89-3.74(m,3H),3.60-3.51(m,1H),3.37(dd,J＝11.6,7.6Hz,1H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),2.23-2.12(m,1H),1.97-1.80(m,3H),1.78-1.68(m,1H),1.62-1.53(m,1H),1.50-1.40(m,1H)，1.06(t,J＝7.4Hz,3H)。LC-MS:t_R＝1.99min(方法3),m/z＝277.2[M+H]⁺。SFC-MS:t_R＝10.81min,ee％＝99.50％.[α]_D²⁰＝+12.33°(c＝0.10,MeOH)。

实例68

7-(((1r,3r,5r,7r)-金刚烷-2-基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：在0℃下将硼烷-四氢呋喃络合物(1M，4.44mL，2.00当量)逐滴加入THF(15mL)中的(1r,3r,5r,7r)-金刚烷-2-甲酸(400mg，2.22mmol，1.00当量)的溶液中。然后，将混合物在60℃下加热12h。将混合物冷却至0℃并且将MeOH(3mL)逐滴加入混合物中。将混合物浓缩并且通过快速色谱法在硅胶上纯化残余物(DCM/MeOH＝100/1～20/1)，以给出((1r,3r,5r,7r)-金刚烷-2-基)甲醇(250.00mg，1.35mmol，60.96％产率，90％纯度)。

步骤2：向DCM(10mL)中的((1r,3r,5r,7r)-金刚烷-2-基)甲醇(250mg，1.50mmol，1.00当量)的冷却(0℃)溶液中加入Et₃N(304mg，3.01mmol，2.00当量)和MsCl(207mg，1.80mmol，1.20当量)。将混合物在0℃下搅拌1h。通过TLC检查反应。将水(5mL)加入混合物中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出((1r,3r,5r,7r)-金刚烷-2-基)甲基甲磺酸酯(350mg，95.49％产率)，为浅黄色油。

步骤3：向DMF(10mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.12mmol，1.00当量)的悬浮液中加入((1r,3r,5r,7r)-金刚烷-2-基)甲基甲磺酸酯(328mg，1.34mmol，1.20当量)和K₂CO₃(310mg，2.24mmol，2.00当量)。将混合物在70℃下加热48h。通过LCMS检查反应。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，并且通过制备型TLC纯化(DCM/MeOH＝50/1)，以给出7-(((1r,3r,5r,7r)-金刚烷-2-基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(9.00mg，2.46％产率)。¹H NMR(CDCl3400MHz):δ6.90(d,J＝6.0Hz,1H),6.64(d,J＝6.0Hz,1H),4.10(d,J＝8.0Hz,2H),2.95(t,J＝7.2Hz,2H),2.17-2.10(m,1H),2.05-2.00(m,2H),1.93-1.84(m,6H),1.75-1.64(m,6H),1.61-1.59(m,2H),1.06(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.26min(方法4),m/z＝327.2[M+H]⁺。

实例69

7-(((3r,5r,7r)-金刚烷-1-基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：向DCM(10mL)中的((3r,5r,7r)-金刚烷-1-基)甲醇(250mg，1.50mmol)的冷却(0℃)溶液中加入Et₃N(304mg，3.01mmol)和MsCl(207mg，1.80mmol)。将混合物在0℃下搅拌1h。通过TLC检查反应。将水(5mL)加入混合物中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出((3r,5r,7r)-金刚烷-1-基)甲基甲磺酸酯(350mg，95.49％产率)。

步骤2：向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(160mg，897.92微摩尔)的悬浮液中加入((3r,5r,7r)-金刚烷-1-基)甲基甲磺酸酯(263mg，1.08mmol)和K₂CO₃(248mg，1.80mmol)。将混合物在100℃下加热20h。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出粗产物。将粗产物用MeOH(10mL)洗涤，以给出7-(((3r,5r,7r)-金刚烷-1-基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(51mg，17.43％产率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ6.85(d,J＝5.6Hz,1H),6.59(d,J＝6.0Hz,1H),3.68(s,2H),2.96(t,J＝7.2Hz,2H),2.00(s,3H),1.94-1.89(m,2H),1.72-1.63(m,12H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝3.07min(方法9),m/z＝327.1[M+H]⁺。

实例70：

7-((4,4-二甲基环己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.12mmol)的悬浮液中加入4-(溴甲基)-1,1-二甲基环已烷(276mg，1.35mmol，1.20当量)和K₂CO₃(310mg，2.24mmol，2.00当量)。将混合物在60℃下加热12h。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出粗产物。将粗产物用MeOH(10mL)洗涤，以给出7-((4,4-二甲基环己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(102mg，30％产率)。¹H NMR(CDCl₃400MHz):δ6.90(d,J＝6.0Hz,1H),6.62(d,J＝6.0Hz,1H),3.83(d,J＝7.2Hz,2H),2.95(t,J＝7.6Hz,2H),1.93-1.88(m,2H),1.80-1.70(m,1H),1.50-1.42(m,2H),1.33-1.39(m,2H),1.25-1.14(m,4H),1.06(t,J＝7.6Hz,3H),0.89(s,6H)。LC-MS:t_R＝2.84min(方法3),m/z＝303.2[M+H]⁺。

实例71

3-丙基-7-(螺[2.5]辛-6-基甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：向DCM(10mL)中的螺[2.5]辛-6-基甲醇(200mg，1.43mmol)的冷却(0℃)溶液中加入Et₃N(289mg，2.86mmol)和MsCl(197mg，1.72mmol)。将混合物在0℃下搅拌1hr。通过TLC检查反应。将水(5mL)加入混合物中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出螺[2.5]辛-6-基甲基甲磺酸酯(310mg，99.3％产率)，为浅黄色油。

步骤2：向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.12mmol)的悬浮液中加入螺[2.5]辛-6-基甲基甲磺酸酯(293mg，1.34mmol)和K₂CO₃(310mg，2.24mmol)。将混合物在60℃下加热12h。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出粗产物。将粗产物用MeOH(10mL)洗涤，以给出3-丙基-7-(螺[2.5]辛-6-基甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(90mg，27％产率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ6.91(d,J＝6.0Hz,1H),6.63(d,J＝6.0Hz,1H),3.84(d,J＝7.6Hz,2H),2.95(t,J＝7.6Hz,2H),1.93-1.88(m,3H),1.69-1.65(m,4H),1.25-1.43(m,2H),1.06(t,J＝7.6Hz,3H),0.92-0.88(m,2H),0.29-0.26(m,2H),0.20-0.18(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.71min(方法3),m/z＝301.2[M+H]⁺。

实例72

7-((4-甲基环己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：向DCM(10mL)中的(4-甲基环己基)甲醇(250mg，1.95mmol)的冷却(0℃)溶液中加入TEA(395mg，3.90mmol)和MsCl(268.05mg，2.34mmol)。将混合物在0℃下搅拌1hr。将水(5mL)加入混合物中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出(4-甲基环己基)甲基甲磺酸酯(400mg，99％产率)，为浅黄色油。

步骤2：向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(250mg，1.40mmol)的悬浮液中加入(4-甲基环己基)甲基甲磺酸酯(376mg，1.82mmol)和K₂CO₃(388mg，2.81mmol)。将混合物在60℃下加热12h。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出粗产物。将粗产物用MeOH(10mL)洗涤，以给出7-((4-甲基环己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(69mg，17.09％产率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ6.90(dd,J＝6.0,2.0Hz,1H),6.62(t,J＝6.0Hz,1H),3.90(d,J＝7.6Hz,1H),3.80(d,J＝7.2Hz,1H),2.95(t,J＝7.6Hz,2H),1.93-1.88(m,2H),1.72-1.69(m,2H),1.49-1.47(m,2H),1.45-1.30(m,2H),1.08-1.04(m,5H),0.96-0.86(m,5H)。LC-MS:t_R＝2.70min(方法3),m/z＝289.2[M+H]⁺。

通过SFC分离两种非对映异构体，顺式和反式，以产生7-(((1s,4s)-4-甲基环己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮和7-(((1r,4r)-4-甲基环己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。

实例73

7-((3-甲基环己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：在0℃下将硼烷-四氢呋喃络合物(1M，7.03mL，2.00当量)逐滴加入THF(15mL)中的3-甲基环已烷-1-甲酸(500mg，3.52mmol)的溶液中。然后，将混合物在60℃下加热12h。将混合物冷却至0℃并且将MeOH(3mL)逐滴加入混合物中。将混合物浓缩并且通过快速色谱法在硅胶上纯化残余物(石油醚/乙酸乙酯＝50/1-10/1)，以给出(3-甲基环己基)甲醇(440mg，97.50％产率)，为无色油。

步骤2：向DCM(10mL)中的(3-甲基环己基)甲醇(200mg，1.56mmol)的冷却(0℃)溶液中加入Et₃N(316mg，3.12mmol)和MsCl(790mg，6.90mmol)。将混合物在0℃下搅拌1h。通过TLC检查反应。将水(5mL)加入混合物中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出(3-甲基环己基)甲基甲磺酸酯(320mg，99.43％产率)，为黄色油。

步骤3：向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.12mmol)的悬浮液中加入(3-甲基环己基)甲基甲磺酸酯(278mg，1.35mmol)和K₂CO₃(310mg，2.24mmol)。将混合物在60℃下加热12h。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型TLC纯化(DCM/MeOH＝50/1)，以给出作为顺/反异构体的混合物的7-((3-甲基环己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(119.20mg，413.33微摩尔，36％产率)。¹H NMR(CDCl3瓦里安400):δ6.90(d,J＝5.6Hz,1H),6.61(d,J＝6.0Hz,1H),3.91-3.84(m,0.48H),3.76(d,J＝7.6Hz,1.52H),2.95(t,J＝7.6Hz,2H),2.21-2.05(m,0.2H),1.92-1.84(m,3H),1.77-1.70(m,1.3H),1.62-1.45(m,1.7H),1.41-1.15(m,3H),1.04(t,J＝7.6Hz,3H),0.95-0.85(m,5H),0.68-0.65(m,0.8H)。LC-MS:t_R＝2.70min(方法3),m/z＝289.2[M+H]⁺。

实例74

7-((2-甲基环己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：在0℃下将硼烷-四氢呋喃络合物(1M，7.03mL，2.00当量)逐滴加入THF(15mL)中的3-甲基环已烷-1-甲酸(500.00mg，3.52mmol，1.00当量)的溶液中。然后，将混合物在60℃下加热12h。将混合物冷却至0℃并且将MeOH(3mL)逐滴加入混合物中。将混合物浓缩并且通过快速色谱法在硅胶上纯化残余物(PE/EA＝50/1～10/1)，以给出(3-甲基环己基)甲醇(440mg，97％产率)。

步骤2：向DCM(5mL)中的(3-甲基环己基)甲醇(200mg，1.56mmol)的冷却(0℃)溶液中加入Et₃N(316mg，3.12mmol)和甲磺酰氯(214mg，1.87mmol)。将混合物在0℃下搅拌1h。通过TLC检查反应。将水(5mL)加入混合物中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出(2-甲基环己基)甲基甲磺酸酯(320mg，99％产率)。

步骤3：向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.12mmol)的悬浮液中加入(2-甲基环己基)甲基甲磺酸酯(277mg，1.34mmol)和K₂CO₃(310mg，2.24mmol)。将混合物在60℃下加热12h。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，并且通过制备型TLC纯化(DCM/MeOH＝50/1)，以给出作为顺/反异构体的混合物的7-((2-甲基环己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(89mg，27.68％产率)。¹H NMR(CDCl3瓦里安400):δ6.87-6.83(m,1H),6.60-6.53(m,1H),4.12-4.07(m,0.3H),3.92-3.85(m,0.1H),3.81-3.77(m,1.3H),3.68-3.64(m,0.3H),2.89(t,J＝7.2Hz,2H),1.96-0.91(m,18H)。LC-MS:t_R＝2.66min(方法3),m/z＝289.2[M+H]⁺。

实例75：

7-((1-甲基环己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.12mmol)的悬浮液中加入1-(溴甲基)-1-甲基环已烷(257mg，1.34mmol)和K₂CO₃(310mg，2.24mmol)。将混合物在100℃下加热20h。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出粗产物。将粗产物用MeOH(10mL)洗涤，以给出7-((1-甲基环己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(36mg，10.99％产率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ6.86(d,J＝6.4Hz,1H),6.63(d,J＝6.0Hz,1H),3.84(s,2H),2.95(t,J＝7.6Hz,2H),1.94-1.88(m,2H),1.60-1.56(m,5H),1.46-1.38(m,5H),1.06(t,J＝7.6Hz,3H),0.99(s,3H)。LC-MS:t_R＝2.66min(方法3),m/z＝289.2[M+H]⁺。

实例76

7-((4-氟环己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：在0℃下将硼烷-四氢呋喃络合物(1M，4.11mL,2.00当量)逐滴加入THF(15mL)中的4-氟环已烷-1-甲酸(300mg，2.05mmol)的溶液中。然后，将混合物在60℃下加热12h。将混合物冷却至0℃并且将MeOH(3mL)逐滴加入混合物中。将混合物浓缩并且通过快速色谱法在硅胶上纯化残余物(PE/EA＝50/1～5/1)，以给出(4-氟环己基)甲醇(200mg，73.81％产率)，为无色油。

步骤2：向DCM(10mL)中的(4-氟环己基)甲醇2(200mg，1.51mmol)的冷却(0℃)溶液中加入TEA(306mg，3.03mmol)和MsCl(208mg，1.82mmol)。将混合物在0℃下搅拌1h。通过TLC检查反应。将水(5mL)加入混合物中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出(4-氟环己基)甲基甲磺酸酯(310mg，97.64％产率)，为黄色油。

步骤3：向DMF(10mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(190mg，1.07mmol)的悬浮液中加入(4-氟环己基)甲基甲磺酸酯(269mg，1.28mmol)和K₂CO₃(295mg，2.13mmol)。将混合物在60℃下加热12h。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出粗产物。将粗产物用MeOH(10mL)洗涤，以给出作为顺/反异构体的混合物的7-((4-氟环己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(62mg，19.88％产率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ6.92(app.dd,J＝6.0,8.8Hz,1H),6.61(app.dd,J＝4.0,6.0Hz,1H),4.90-4.78(m,0.5H),4.58-4.40(m,0.5H),3.81(t,J＝7.2Hz,2H),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),2.18-1.75(m,4H),1.63-1.41(m,6H),1.20-1.09(m,1H),1.06(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.26min(方法3),m/z＝293.2[M+H]⁺。

实例77

7-((4,4-二氟环己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：向DCM(10mL)中的(4,4-二氟环己基)甲醇(200mg，1.33mmol)的冷却(0℃)溶液中加入TEA(270mg，2.66mmol)和MsCl(183mg，1.60mmol)。将混合物在0℃下搅拌1h。通过TLC检查反应。将水(5mL)加入混合物中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出(4,4-二氟环己基)甲基甲磺酸酯(300mg，98.82％产率)。

步骤2：向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.12mmol)的悬浮液中加入(4,4-二氟环己基)甲基甲磺酸酯(307mg，1.35mmol)和K₂CO₃(310mg，2.24mmol)。将混合物在60℃下加热12h。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出粗产物。将粗产物用MeOH(10mL)洗涤，以给出7-((4,4-二氟环己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(28mg，7.94％产率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ6.93(d,J＝6.0Hz,1H),6.62(d,J＝6.0Hz,1H),3.85(d,J＝7.6Hz,2H),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),2.16-2.11(m,3H),1.93-1.88(m,2H),1.79-1.62(m,4H),1.42-1.38(m,2H),1.06(t,J＝7.6Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.83min(方法8),m/z＝311.0[M+H]⁺。

实例78

6-([1,1'-联苯基]-4-基甲基)-7-(环己基甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：在氩下将6-溴-8-甲氧基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(225mg，0.719mmol)和双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基))膦)二氯化钯(II)(A-taPhos)₂PdCl₂(90mg，0.127mmol)溶解于无水THF(8800mg，10ml，122mmol)中并脱气20min。逐滴加入([1,1'-联苯基]-4-基甲基)氯化锌(II)(4.31ml，2.156mmol，0.5摩尔，THF)并且将反应搅拌过夜。将反应混合物倾倒入饱和NH₄Cl水溶液(10mL)中并用乙酸乙酯(20mL)萃取。将水相用乙酸乙酯(10mL)反萃取，并且将合并的有机相用盐水洗涤并蒸发至干燥。用柱色谱法纯化粗产物(庚烷至乙酸乙酯)，以产生6-([1,1'-联苯基]-4-基甲基)-8-甲氧基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(232mg，0.579mmol，81％)，为固体。LC-MS:t_R＝0.79min(方法5),m/z＝401.1[M+H]⁺。

步骤2：将6-([1,1'-联苯基]-4-基甲基)-8-甲氧基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(248mg，0.619mmol)与HCl(2.333ml，4.67mmol，2摩尔，H₂O)和MeOH(5544mg，7ml，173mmol)混合。将反应在100℃下在微波炉中加热20min。将反应在真空中浓缩。以给出粗品6-([1,1'-联苯基]-4-基甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮盐酸盐(233mg，0.540mmol，87％产率)，将其用于下一步，而不用进一步纯化。

步骤3：将6-([1,1'-联苯基]-4-基甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮盐酸盐((233mg，0.540mmol，98％)、(溴甲基)环已烷(220mg，0.174ml，1.244mmol)、碘化钠(8.09mg，0.054mmol)和K₂CO₃(336mg，2.428mmol)溶解于DMF(6608mg，7ml，90mmol)中并在60℃下搅拌过夜。将反应倾倒入水中，并且用乙酸乙酯(2两次,10ml)萃取并浓缩。通过柱色谱法纯化粗产物(庚烷至乙酸乙酯)，以给出6-([1,1'-联苯基]-4-基甲基)-7-(环己基甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(80mg，0.164mmol，30％)。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ7.61-7.55(m,4H),7.46(t,J＝7.7Hz,2H),7.37(s,1H),7.23(d,J＝8.3Hz,2H),6.85(s,1H),4.13-4.07(m,2H),4.00(s,2H),3.78(bs,2H),3.55(td,J＝11.6,2.2Hz,2H),3.19(m,1H),2.23-2.14(m,2H),1.95(m,3H),1.81-1.75(m,2H),1.75-1.70(m,3H),1.65(d,J＝12.0Hz,2H),1.16(d,J＝8.3Hz,2H),1.06(s,1H)。LC-MS:t_R＝0.89min(方法5),m/z＝483.3[M+H]⁺。

实例79

6-甲基-7-((4-甲基环己基)甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立体异构体1和2：

步骤2：向DMF(5mL)中的3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(250mg，1.40mmol)的悬浮液中加入(4-甲基环己基)甲基甲磺酸酯(376mg，1.82mmol)和K₂CO₃(388mg，2.81mmol)。混合物将在60℃下加热12h。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出粗产物。将粗产物用MeOH(10mL)洗涤，以给出6-甲基-7-((4-甲基环己基)甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。通过SFC分离这两种立体异构体。

实例80

7-((4-甲氧基环己基)甲基)-6-甲基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立体异构体1和2：

向DMF(5mL)中的3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(250mg，1.40mmol)的悬浮液中加入(4-甲氧基环己基)甲基甲磺酸酯(376mg，1.82mmol)和K₂CO₃(388mg，2.81mmol)。混合物将在60℃下加热12h。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出粗产物。将粗产物用MeOH(10mL)洗涤，以给出6-甲基-7-((4-甲基环己基)甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。通过SFC分离这两种立体异构体。

实例81

6-甲基-7-((4-甲基环己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立体异构体1和2：

步骤2：向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(250mg，1.40mmol)的悬浮液中加入(4-甲基环己基)甲基甲磺酸酯(376mg，1.82mmol)和K₂CO₃(388mg，2.81mmol)。混合物将在60℃下加热12h。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出粗产物。将粗产物用MeOH(10mL)洗涤，以给出6-甲基-7-((4-甲基环己基)甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。通过SFC分离这两种立体异构体。

实例82

7-((4-甲氧基环己基)甲基)-6-甲基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立体异构体1和2：

向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(250mg，1.40mmol)的悬浮液中加入(4-甲氧基环己基)甲基甲磺酸酯(376mg，1.82mmol)和K₂CO₃(388mg，2.81mmol)。混合物将在60℃下加热12h。将混合物浓缩并且将残余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出粗产物。将粗产物用MeOH(10mL)洗涤，以给出6-甲基-7-((4-甲基环己基)甲基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。通过SFC分离这两种立体异构体。

实例83

7-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：在0℃下向干DCM(500mL)中的(4-甲氧基苯基)甲胺(30.00g，218.69mmol)和Et₃N(26.56g，262.43mmol)的溶液中逐滴加入2-氯-2-氧代乙酸乙酯(32.84g，240.56mmol)。将混合物在0℃下搅拌40min。将混合物用H₂O(15mL)淬灭，用DCM(10mL,三次)萃取。将合并的有机物经Na₂SO₄干燥并浓缩。获得2-((4-甲氧基苄基)氨基)-2-氧代乙酸乙酯(50.00g，96％产率)。

步骤2：向EtOH(200mL)中的2-((4-甲氧基苄基)氨基)-2-氧代乙酸乙酯(10.00g，42.15mmol)的溶液中加入1-氨基丙-2-醇(3.80g，50.58mmol)。将混合物在75℃下加热2小时。将混合物在真空下浓缩，用正己烷(150mL,两次)洗涤，过滤并在真空下干燥。获得N1-(2-羟基丙基)-N2-(4-甲氧基苄基)草酰胺(8.70g，77％产率)。

步骤3：向CH₃CN(100mL)中的N1-(2-羟基丙基)-N2-(4-甲氧基苄基)草酰胺(5.00g，18.78mmol)的溶液中加入H₂O(7.5mL)中的三氯钌水合物(42.33mg，187.80微摩尔)和水(15mL)中的NaBrO₃(3.12g，20.66mmol)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将水(250mL)加入混合物中并在25℃下搅拌2小时。将混合物过滤，用H₂O(200mL，三次)洗涤并在真空下干燥。获得N1-(4-甲氧基苄基)-N2-(2-氧代丙基)草酰胺(3.16g，43％产率，67.67％纯度)。

步骤4：向CH₃COOH(10mL)中的N1-(4-甲氧基苄基)-N2-(2-氧代丙基)草酰胺(3.00g，11.35mmol)的溶液中加入TFA(1.29g，11.35mmol)。将混合物在140℃下搅拌4小时。将混合物在真空下浓缩。获得棕色固体。将H₂O(2mL)加入固体中。通过饱和的NaHCO₃水溶液将混合物调整至pH＝7。将混合物过滤。将滤饼用水(30mL,三次)洗涤并在真空下干燥。获得1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-1,4-二氢吡嗪-2,3-二酮(2.10g，75％产率)。

步骤5：将1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-1,4-二氢吡嗪-2,3-二酮(4.50g，18.27mmol)加入PCl₃(49.50g，322.83mmol)中。将混合物在26℃下搅拌16hr。将混合物浓缩并且将残余物倾倒入水(50mL)中。通过饱和的NaHCO₃水溶液将混合物调整至pH＝7并用DCM(200mL，两次)萃取。将合并的有机层用H₂O(200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法在硅胶上纯化粗产物(石油醚中的5％-50％乙酸乙酯)。获得3-氯-1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基吡嗪-2(1H)-酮(3.78g。78％产率)。

步骤6：向EtOH(15mL)中的3-氯-1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基吡嗪-2(1H)-酮(970.00mg，3.66mmol)的溶液中加入NH₂NH₂^.H₂O(1.83g，36.60mmol)。将混合物在40℃下搅拌16小时。将混合物过滤。将滤饼用冷EtOH(10mL，三次)洗涤并在真空下干燥。获得3-肼基-1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基吡嗪-2(1H)-酮(760mg。79％产率)。

步骤7：向干DCM(5mL)中的3-肼基-1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基吡嗪-2(1H)-酮(100mg，384.19微摩尔)的溶液中加入丁醛(29mg，403.40微摩尔)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至25℃并且直接用于下一步。

步骤8：向上面获得的粗品(E)-3-(2-亚丁基肼基)-1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基吡嗪-2(1H)-酮的溶液中加入PhI(OAc)₂(142mg，441.81微摩尔)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将饱和的NaHCO₃水溶液(2mL)和H₂O(5mL)加入混合物中。将混合物用DCM(10mL,三次)萃取。将合并的有机物在真空下浓缩。通过CombiFlash纯化残余物(硅胶，100％乙酸乙酯)。获得7-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(47mg，38％产率，97％纯度)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.18(d,J＝8.4Hz,2H),6.85(d,J＝8.0Hz,2H),6.72(s,1H),5.25(s,2H),3.78(s,3H),2.93(t,J＝7.6Hz,2H),2.27(s,3H),1.92-1.87(m,2H),1.05(t,J＝7.6Hz,3H)。LC-MS:t_R＝1.844min(方法6),m/z＝313.1[M+H]⁺。

实例84

7-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步骤1：向DCM(20mL)中的3-肼基-1-(4-甲氧基苄基)-6-甲基吡嗪-2(1H)-酮(600mg，2.31mmol)的溶液中加入四氢-2H-吡喃-4-甲醛(276mg，2.43mmol)。将混合物在40℃下搅拌1.5小时。将混合物直接用于下一步。

步骤2：向上面获得的反应混合物中加入PhI(OAc)₂(71mg，220微摩尔)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将H₂O(5mL)加入混合物中。将混合物用DCM(10mL,三次)萃取。将合并的有机相在真空下浓缩。通过CombiFlash纯化残余物(硅胶，DCM中的10％MeOH)。获得7-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(17.00mg，24.69％产率，98.87％纯度)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.17(d,J＝8.4Hz,2H),6.84(d,J＝8.8Hz,2H),6.77(s,1H),5.24(s,2H),4.13(d,J＝11.6Hz,2H),3.78(s,3H),3.61-3.55(m,2H),2.21-3.16(m,1H),2.27(s,3H),2.20-2.14(m,2H),1.96-1.93(m,2H)。LC-MS:t_R＝1.984min(方法3),m/z＝355.1[M+H]⁺。PDE1抑制测定

如下进行PDE1A、PDE1B和PDE1C测定：在60μL样品中进行这些测定，这些样品包含固定量的PDE1酶(足够转化20％-25％的环核苷酸底物)、缓冲液(50mM HEPES pH 7.6；10mM MgCl₂；0.02％Tween20)、0.1mg/ml BSA、15nM氚标记的cAMP以及变化量的抑制剂。通过添加环状核苷酸底物来起始反应，并且在经由与20μL(0.2mg)硅酸钇SPA珠粒(珀金埃尔默公司(PerkinElmer))混合来终止之前，允许反应在室温下进行1h。在Wallac 1450Microbeta计数器中对板计数之前允许珠粒在黑暗中沉降1h。所测量的信号被转化为相对于未被抑制的对照物(100％)的活性并且使用XlFit(型号205，IDBS)来计算IC₅₀值。