本发明属于兽用生物制品领域，尤其是一种提高鸡组织中球虫卵囊回收率的溶液及其制备方法
背景技术：
家禽球虫病是集约化、规模化形势下危害最大寄生虫病，国内外在食品安全的倡导下逐渐由药物治疗转变为病前预防，于是球虫疫苗的研发与生产成为畜牧行业内抗击家禽球虫病的新宠。目前国内疫苗获得的球虫卵囊大部分是采用饱和盐水漂浮法、蔗糖溶液漂浮法、饱和硫酸镁溶液漂浮法、铬硫酸分离等方法从粪便中获取，其虽然简单易行，可以将大部分球虫卵囊和杂质分开，但分离出来的卵囊中往往混杂少量与球虫卵囊相近的杂质，一些卵囊被一些饲料中的粗纤维、脂粒包埋难以分离。毒害艾美尔球虫和柔嫩艾美尔球虫有性生殖是在盲肠中，如果从粪便中收取卵囊杂质太多，获得卵囊数量太少，并且所获得卵囊有可能被其他卵囊污染，因此，根据球虫生物学特点，研发一种提高组织中获取球虫卵囊的方法势在必行。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种提高鸡组织中球虫卵囊回收率的溶液及其制备方法，相比较饱和盐水漂浮法、蔗糖溶液漂浮法、饱和硫酸镁溶液漂浮法等粪便中收取卵囊提高了卵囊的收率，提高卵囊的浮集速率，降低杂质的比例，分离纯化快，本发明可用于高强度感染的样本分离纯化，更可用于弱感染的样本。
本发明的另一个目的在于提供一种提高组织中球虫卵囊回收率及其制备方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种提高鸡组织中球虫卵囊回收率的溶液及其制备方法，其保护溶液的组分及其重量百分比为：
而且，该保护溶液组分及其最优重量份数比分别为：
一种提高鸡组织中球虫卵囊回收率的溶液及其制备方法，其制备方法的步骤为：
(1)按照重量配比依次称取乙二胺四乙酸二钠、聚合氯化铝、瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵、次氯酸钠放入配液罐内，然后加入灭菌水至没过上述投料，在室温下浸泡1小时后，再继续加入剩余灭菌水，搅拌均匀，至投料完全溶解，再用0.45um聚醚砜滤芯过滤得溶液a，储存至配液罐中；
(2)将配液罐加热以蒸汽压力0.05mpa为宜，蒸发器15分钟排放冷凝水一次，每两小时排放加热器的冷凝汽一次。室内自然冷却，备用，得溶液b备用；
(3)用0.22um聚醚砜滤芯过滤步骤(2)中所得溶液b，并调节溶液ph值至6.0-7.0，搅拌15分钟，再次用0.22um聚醚砜滤芯过滤，得溶液c，其通过管道直接进入灌装机；
(4)将步骤(3)中所得溶液c灌装到烘干后的医用瓶内，即可得到一种提高鸡组织中球虫卵囊回收率的溶液。
本发明的优点及有益效果是：
1.本发明的目的在于提供一种提高鸡组织中球虫卵囊回收率的溶液及其制备方法，本发明配方组成科学合理，工艺简单，使用方便，成本较低。
2.本发明溶液相比较饱和盐水漂浮法、蔗糖溶液漂浮法、饱和硫酸镁溶液漂浮法等粪便中收取卵囊提高了卵囊的收率，提高卵囊的浮集速率，降低杂质的比例，分离纯化快。
3.本发明可用于高强度感染的样本分离纯化，更可用于弱感染的样本。
具体实施方式
本发明通过以下实施例进一步详述。需要说明的是：下述实施例是说明性的，不是限定性的，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。
本发明组分中的聚合氯化铝、乙二胺四乙酸四钠；瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵、次氯酸钠均可以在市场上购买得到。
实施例1
一种提高鸡组织中球虫卵囊回收率的溶液，其保护溶液的组分及其重量分别为：聚合氯化铝5kg、乙二胺四乙酸四钠5kg、瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵0.1kg、次氯酸钠5kg、灭菌水10kg。
一种提高鸡组织中球虫卵囊回收率及其制备方法，其制备方法的步骤为：
(1)按照重量配比依次称取乙二胺四乙酸二钠、聚合氯化铝、瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵、次氯酸钠放入配液罐内，然后加入灭菌水至没过上述投料，在室温下浸泡1小时后，再继续加入剩余灭菌水，搅拌均匀，至投料完全溶解，再用0.45um聚醚砜滤芯过滤得溶液a，储存至配液罐中；
(2)将配液罐加热以蒸汽压力0.05mpa为宜，蒸发器15分钟排放冷凝水一次，每两小时排放加热器的冷凝汽一次。室内自然冷却，备用，得溶液b备用；
(3)用0.22um聚醚砜滤芯过滤步骤(2)中所得溶液b，并调节溶液ph值至6.0-7.0，搅拌15分钟，再次用0.22um聚醚砜滤芯过滤，得溶液c，其通过管道直接进入灌装机；
(4)将步骤(3)中所得溶液c灌装到烘干后的医用瓶内，即可得到一种提高鸡组织中球虫卵囊回收率的溶液。
实施例2
一种提高鸡组织中球虫卵囊回收率的溶液，其保护溶液的组分及其重量分别为：聚合氯化铝30kg、乙二胺四乙酸四钠30kg、瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵0.5kg、次氯酸钠30kg、灭菌水90kg。
其制备方法的步骤同实施例1。
实施例3
一种提高鸡组织中球虫卵囊回收率的溶液，其保护溶液的组分及其重量分别为：聚合氯化铝15kg、乙二胺四乙酸四钠15kg、瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵0.3kg、次氯酸钠15kg、灭菌水60kg。
其制备方法的步骤同实施例1。
临床应用
试验说明：
取实验室保存的毒害艾美尔球虫孢子化卵囊、柔嫩艾美尔球虫孢子化卵囊，给spf15日龄鸡接种，每只10万，每个虫种每组各接种20只，共四组。用灭菌水和无抗饲料至隔离器中饲养。接种后的第五天开始查潜在期，收取最小潜在期后的24h进行解剖收取盲肠，进行组织绞碎，四组分别用饱和盐水漂浮法、蔗糖溶液漂浮法、饱和硫酸溶液漂浮法、本发明溶液漂浮法、进行对比。计算回收率。
表饱和盐水漂浮法和本发明溶液收取粪便卵囊对比表
结论：同一组组织用饱和盐水漂浮法、蔗糖溶液漂浮法、饱和硫酸镁溶液漂浮法的卵囊回收率均未超过70％；而本发明溶液漂浮法卵囊的回收率超过了90％，说明本发明组完全可以替代其他卵囊纯化的方法。