本发明涉及一种天然产物的纯化方法,特别是二十二碳六烯酸的纯化方法。
背景技术:
二十二碳六烯酸,英文名称为docosahexaenoicacid,英文简称dha,是人体所必需的一种多不饱和脂肪酸,鱼油中含量较多,一种含有22个碳原子和6个双键的直链脂肪酸,只有其n-3家族的22:6δ4c,7c,10c,13c,16c,19c异构体以天然形式大量存在于鱼油中(占脂肪酸总量的10%~15%),动物的甘油磷脂则含有不等量的该酸,在代谢过程中,可从α亚麻酸生成。
超临界萃取简单介绍:超临界co2流体萃取(sfe)分离过程的原理是利用超临界流体的溶解能力与其密度的关系,即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。在超临界状态下,将超临界流体与待分离的物质接触,使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小的成分依次萃取出来。当然,对应各压力范围所得到的萃取物不可能是单一的,但可以控制条件得到最佳比例的混合成分,然后借助减压、升温的方法使超临界流体变成普通气体,被萃取物质则完全或基本析出,从而达到分离提纯的目的,所以超临界co2流体萃取过程是由萃取和分离过程组合而成的。
技术实现要素:
本发明采用的技术方案如下:使用裸硅胶、c18、c8、二醇基等硅胶基质类填料作为固定相,超临界co2做流动相,甲醇、乙醇、乙腈做夹带剂,纯化的得到纯度大于99%的二十二碳六烯酸,包括以下步骤:
(1)使用甲醇溶解鱼油粗品,0.45um的微孔滤膜过滤;
(2)配置甲醇:乙醇:乙腈=2:3:1的夹带剂;
(3)使用低比例的夹带剂的流动相体系平衡系统20min,然后进样,约50min后开始收集目标组分,收集约10min后,再使用高比例的夹带剂进行洗脱;
(4)将收集的馏分使用旋转蒸发仪进行后处理,得到的白色粉末即为目标产物。
本发明具有以下技术优势:使用超临界流体色谱纯化得到纯度大于99%的二十二碳六烯酸,此方法使用co2做流动相,仅添加少量有机溶剂,减少了有机溶剂对环境的污染,绿色环保,同时,制备过程简单,易于操作。
具体实施方式
实施方式1
使用甲醇溶解鱼油粗品,0.45um的微孔滤膜过滤,配置甲醇:乙醇:乙腈=2:3:1的夹带剂,裸硅胶作为固定相,使用超临界co2:夹带剂=92:8的流动相体系平衡系统20min,进样,洗脱约50min后开始收集目标组分,收集约10min后,再使用超临界co2:夹带剂=8:92的流动相进行洗脱,将收集的馏分使用旋转蒸发仪进行后处理,得到的白色粉末即为目标产物。
实施方式2
使用甲醇溶解鱼油粗品,0.45um的微孔滤膜过滤,配置甲醇:乙醇:乙腈=2:3:1的夹带剂,c18硅胶作为固定相,使用超临界co2:夹带剂=95:5的流动相体系平衡系统20min,进样,洗脱约50min后开始收集目标组分,收集约10min后,再使用超临界co2:夹带剂=5:95的流动相进行洗脱,将收集的馏分使用旋转蒸发仪进行后处理,得到的白色粉末即为目标产物。
实施方式3
使用甲醇溶解鱼油粗品,0.45um的微孔滤膜过滤,配置甲醇:乙醇:乙腈=2:3:1的夹带剂,c18硅胶作为固定相,使用超临界co2:夹带剂=97:3的流动相体系平衡系统20min,进样,洗脱约50min后开始收集目标组分,收集约10min后,再使用超临界co2:夹带剂=3:97的流动相进行洗脱,将收集的馏分使用旋转蒸发仪进行后处理,得到的白色粉末即为目标产物。