一种玉米转化事件及其特异性鉴定方法和应用与流程

文档序号:11804064阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种玉米转化事件,其特征在于所述转化事件以SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列为外源基因的左侧翼区,以SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列为外源基因的右侧翼区或者以SEQ ID NO.14所示的核苷酸序列为外源基因的左侧翼区,以SEQ ID NO.15所示的核苷酸序列为外源基因的右侧翼区。

2.如权利要求1所述的玉米转化事件,其特征在于所述外源基因包括抗虫基因和抗草甘膦基因。

3.如权利要求2所述的玉米转化事件,其特征在于所述抗虫基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.4所示。

4.如权利要求2所述的玉米转化事件,其特征在于所述抗草甘膦基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.5所示。

5.如权利要求1所述的玉米转化事件,其特征在于所述外源基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示。

6.一种权利要求1所述玉米转化事件的特异性PCR鉴定方法,其特征在于以SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列为外源基因的左侧翼区,以SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列为外源基因的右侧翼区,用于特异性PCR鉴定的引物:

SP1:5’-TTTCTCCATAATAATGTGTGAGTAGTTCCC-3’;

RB-Test:5’-CTCGTCATCGACCAAGTCATGAAG-3’。

R1:5’-CGTCGTTTTACAACGTCGTGACTGG-3’;

LB-test:5’-AAGACGTCCGGGGGAACCGTTGTTC-3’。

7.一种权利要求1所述玉米转化事件的特异性PCR鉴定方法,其特征在于以SEQ ID NO.14所示的核苷酸序列为外源基因的左侧翼区,以SEQ ID NO.15所示的核苷酸序列为外源基因的右侧翼区,用于特异性PCR鉴定的引物:

LB-15T:5’-CTAAAACCAAAATCCAGTACTAAAATCC-3’;

LB-15G:5’-GCCGTACGTTTCCCAGCC-3’。

RB-15T:5’-AGCTTGAGCTTGGATCAGATTGTCGT-3’;

RB-15G:5’-CGTACAGGGAGCTTAGGGGG-3’。

8.一种含权利要求1所述玉米转化事件的植物细胞,其特征在于所述植物细胞含以SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列为外源基因的左侧翼区,以SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列为外源基因的右侧翼区的转化事件,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号CCTCC NO:P201506,保藏日期:2015年4月27日,保藏地址:中国武汉武汉大学,邮编430072。

9.一种含权利要求1所述玉米转化事件的植物细胞,其特征在于所述植物细胞含以SEQ ID NO.14所示的核苷酸序列为外源基因的左侧翼区,以SEQ ID NO.15所示的核苷酸序列为外源基因的右侧翼区的转化事件,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号CCTCC NO:P201607,保藏日期:2016年4月11日,保藏地址:中国武汉武汉大学,邮编430072。

10.一种权利要求1所述玉米转化事件在制备抗虫抗草甘膦玉米细胞中的应用,其特征在于所述方法为:利用含有所述玉米转化事件的玉米材料与玉米育种材料进行杂交后,进一步进行回交,获得所述抗虫抗草甘膦玉米细胞。

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