本发明涉及制备具有抗增殖活性以及用于温血动物比如人的癌症治疗或预防的化合物的改进方法。更具体地说，本发明涉及制备具有抗药物耐受性肿瘤的活性的紫杉醇类似物的化学方法。
更具体地说，本发明涉及制备紫杉醇类似物2-去苯甲酰基-2-(3-叠氮基苯甲酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基三尖杉宁碱的改进方法。
该化合物具有式I的结构，
通用名为阿齐他赛(aziditaxel)，化学文摘登记号是944454-56-2。
背景技术：
该化合物公开于中国专利(申请号：CN 200610080890，公开号：CN 101074218，授权日期：2013年1月16日)的实施例中，其可促进微管聚合并稳定微管，具有抗增殖活性如抗肿瘤活性等。与其他紫杉烷类药物相比，其尤其具有抗多重机制的药物耐受性肿瘤的活性，因此，可用于人或动物的增殖性疾病如肿瘤的治疗方法中，特别地是可用于对其他紫杉烷类药物具有药物耐受特征的肿瘤的治疗方法中。
虽然中国专利CN 101074218和CN 103420954中分别记载了合成阿齐他赛的两种有效方法，但是这两种方法使用了天然来源的三尖杉宁碱作为起始物料，成本较高；且现有路线步骤较多，需要重复使用色谱分离提纯步骤和分离大量的中间体，因而总收率并不高，分别为39％和24％。所以，需要一种起始物料成本更 低、更简便有效、收率更高的适于生产大量化合物的合成方法。
因此本发明的目的在于提供一种阿齐他赛的制备方法，用该方法可以显著提高阿齐他赛的产率和纯度，且容易地大规模生产。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种阿齐他赛的制备方法，其利用式II所示的化合物10-去乙酰基巴卡亭III(简称10-DAB)作为起始物料
本发明提供了用式II化合物制备的式I化合物的方法，包括以下反应步骤：
步骤1：用三取代硅烷基选择性保护式II的10位羟基得到式III化合物；
步骤2：丙酰化式III的10-DAB衍生物的7位羟基，得到式IV化合物；
步骤3：使式IV化合物与式V表示的试剂进行偶联反应，最优选的V表示的试剂为(3R,4S)-1-((E)-2-甲基-2-丁烯酰基)-4-苯基-3-三烷基硅氧基氮杂环丁烷基-2-酮
生成式VI化合物；
步骤4：脱除式VI化合物中的2位的苯甲酰基，得到式VII化合物；
步骤5：将式VII化合物的2位羟基进行3-叠氮基苯甲酰化，得到式VIII化合物；
步骤6：脱除式VIII化合物的硅基保护基，得到式I化合物。
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6为相同或不同，并且独立选自氢、取代或未取代的C1-C10烷基、C3-C10环烷基、C6-C10芳基、C1-C10杂芳基，其中，所述的取代基选自C1-C5环烷基、C6-C10芳基。
此外，本发明还提供了式I化合物的制备中用到的关键中间体，及其制备方法。
发明详述
根据本发明，式I化合物可以如下制备：
对于步骤1，
欧洲专利EP 1170292中公开了用式IX表示的硅烷化试剂选择性保护10-DAB中的10位羟基的方法，因此该反应可以依照该方法顺利进行。其中，所述的硅烷化试剂中R1、R2、R3为相同或不同，并且独立选自氢、取代或未取代的C1-C10烷基、C3-C10环烷基、C6-C10芳基、C1-C10杂芳基。其中，所述的取代基选自C1-C5环烷基、C6-C10芳基。R1、R2、R3独立优选甲基、乙基、叔丁基、异丙基、苯基，最优选甲基或乙基。
使用式IX试剂的该硅烷基保护反应可在合适的有机溶剂存在下完成，例如非 质子溶剂如乙腈、乙酸乙酯、四氢呋喃或1,4-二氧六环等；或偶极非质子溶剂如N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮或二甲亚砜等。该反应还适宜在合适的催化剂的存在下进行，例如使用含氟离子的盐类(如氟化钠、氟化钾或四丁基氟化铵等)，有机金属试剂(如双(三甲基硅基)氨基锂、双(三甲基硅基)氨基钠、正丁基锂、叔丁基锂等)。反应适宜进行的温度范围例如为-10至25℃，优选-5至5℃。
对于步骤2，
涉及对10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基巴卡亭III中7位羟基的选择性丙酰化反应。该丙酰化反应例如可以在碱存在的条件下与丙酸适宜的活化形式进行。适宜的碱可以是有机胺碱，优选三级胺，如吡啶、三甲基胺、三乙基胺或N,N-二异丙基乙基胺等。丙酸适宜的活化形式可以是丙酸酐或丙酰氯等。本反应还可以被合适的催化剂促进，例如吡啶类化合物(如2,6-二甲基吡啶、2,6-二叔丁基吡啶、2,4,6-三甲基吡啶、2,6-二叔丁基-4-甲基吡啶等)。本反应可以方便地在合适的有机溶剂存在下进行，例如非质子溶剂乙腈、苯、甲苯、四氢呋喃或二氯甲烷等。反应进行的温度范围在-10至100℃，优选-10℃至25℃，特别优选在-10℃至10℃。
作为另一种选择，步骤2的酰化反应，也可以在合适的脱水剂存在下很便利地与丙酸以缩合反应的方式进行，所用的脱水剂为碳二亚胺试剂，如二环己基碳二亚胺、二异丙基碳二亚胺或1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳二亚胺等。脱水反应可以在合适的有机溶剂存在下进行，如卤化溶剂二氯甲烷、氯仿或四氯化碳等。本反应还可以被合适的催化剂促进，合适的催化剂为吡啶类化合物，如2,6-二甲基吡啶、2,6-二叔丁基吡啶、2,4,6-三甲基吡啶、2,6-二叔丁基-4-甲基吡啶等。反应温度范围为0至100℃，优选10至40℃，特别优选在20至30℃。
本步骤对国际专利WO 2001057027中所述实施例1中步骤2进行了改进。我们发现，虽然巴卡亭III结构中7位羟基的反应性要优于13位羟基的反应性，然而对于该反应收率不佳的原因在于13位羟基仍参与了丙酰化反应。本发明发现使 用更低的反应温度，或使用合适的脱水剂如碳二亚胺试剂活化丙酸，均可减少13位羟基参与酰化反应，从而提高了该7位羟基酰化反应反应的收率。
对于步骤3，
其中，所用的式V表示的试剂中，R4、R5、R6为相同或不同，并且独立选自氢、取代或未取代的C1-C10烷基、C3-C10环烷基、C6-C10芳基、C1-C10杂芳基。其中，所述的取代基选自C1-C5环烷基、C6-C10芳基。R4、R5、R6独立优选甲基、乙基、叔丁基、异丙基、苯基，最优选甲基或叔丁基。
该偶联反应可以在合适的碱性条件下进行。适宜的碱例如可以是有机金属试剂，譬如正丁基锂、叔丁基锂、双(三甲基硅基)氨基锂或双(三甲基硅基)氨基钠等。本反应可以在适宜的有机溶剂存在下进行，例如非质子溶剂如乙腈、甲苯、四氢呋喃或乙醚等。反应进行的温度范围在-80至10℃，优选-60至0℃，特别优选-55至-40℃。
该偶联反应还适宜在无机碱如碱金属氢化物(如氢化钠、氢化钾等)的存在下进行，温度范围在-40至25℃，适宜在0℃或其附近。
对于步骤4，
该反应适宜在合适的碱性条件下进行。合适的碱是季铵碱(如四甲基氢氧化铵、四乙基氢氧化铵、四丙基氢氧化铵、四丁基氢氧化铵或苄基三甲基氢氧化铵等)、碱金属或碱土金属的碳酸盐或氢氧化物(如碳酸钠、碳酸钾、碳酸钙、氢氧化钠或氢氧化钾等)、有机金属试剂(如叔丁醇钾等)。该反应可以方便地在适宜 的有机溶剂存在下进行，例如质子溶剂(如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇或戊醇等)、非质子溶剂(如乙腈、甲苯、乙酸乙酯、四氢呋喃、1,4-二氧六环、二氯甲烷、氯仿或四氯化碳等)、或偶极非质子溶剂(如N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮或二甲亚砜等)。温度范围例如在-80至10℃，优选-60至-40℃，特别优选-55至-45℃。
本步骤还对中国专利CN 101074218中的实施例8的步骤5进行了改进。我们发现，使用更低的反应温度和适当的溶剂可以减少脱苯甲酰反应过程中副产物的生成，从而提高了脱苯甲酰反应的收率。由中国专利CN 101074218中的实施例8的步骤5公开的73％的收率，提高至本发明实施例4的81％的收率。
对于步骤5，
该酰化反应可以在碱性条件下与3-叠氮基苯甲酸适宜的活化形式进行。适宜的碱是有机胺碱，优选三级胺，如吡啶、三甲基胺、三乙基胺、N,N-二异丙基乙基胺、4-二甲氨基吡啶或4-吡咯烷基吡啶、2,6-二甲基吡啶、2,6-二叔丁基吡啶、2,4,6-三甲基吡啶、2,6-二叔丁基-4-甲基吡啶等。3-叠氮基苯甲酸适宜的活化形式可以是3-叠氮基苯甲酸酐或3-叠氮基苯甲酰氯等。本反应可以方便地在合适的有机溶剂存在下进行，如非质子溶剂(如乙腈、苯、甲苯、四氢呋喃或二氯甲烷等)。反应进行的温度范围在10至150℃，优选40至100℃，最优选65至75℃。
本步骤继续对中国专利CN 101074218中的实施例8的步骤6进行了改进。之前的反应中使用了适当的碳二亚胺试剂，如二环己基碳二亚胺，进行2位羟基的酰化反应。反应中有大量的二环己基脲产生，该物质通常很难除尽，从而增加最终产物纯化的难度。避免使用碳二亚胺试剂可以明显改善最终产物的纯度。因此，本步骤采用在碱性条件下与3-叠氮基苯甲酸适宜的活化形式进行酰化反应，从而有效地避免了杂质的残留。
对于步骤6，
可以参照已知方法顺利进行。该反应适宜在合适的酸存在下进行。合适的酸可以是无机酸(如盐酸或氢溴酸)、有机酸(如甲酸、乙酸或三氟乙酸等)。该反应更适宜在合适的含氟离子的盐类存在下进行，如氟化氢吡啶复合物、氟化铯或四丁基氟化铵等。该反应可以方便地在合适的有机溶剂存在下进行，如非质子溶剂(如乙腈、甲苯、乙酸乙酯、四氢呋喃、1,4-二氧六环、二氯甲烷、氯仿或四氯化碳等)。本反应适宜进行的温度范围在0至100℃，优选在25至40℃。
与现有技术相比，本发明具有如下显著效果：
1)本发明所述制备阿齐他赛的方法，起始物料是10-去乙酰基巴卡亭III(10-DAB)，市场销售价格约为现有路线中的三尖杉宁碱的一半左右，且商业化已成熟，使得该方法成本明显低于现有方法。
2)本发明所述制备阿齐他赛的方法，涉及路线步骤为6步，比中国专利CN101074218中公开的7步合成的方法、以及中国专利CN 103420954中公开的9步合成的方法更短，最终产物的收率更高，其摩尔收率可达49％，而中国专利CN101074218和CN 103420954中公开的收率分别为39％和24％，因此本发明所述的制备方法更符合工业化生产要求。
3)本发明所述制备阿齐他赛的方法中的步骤2，避免了13位羟基参与酰化反应，使得起始物料利用率高，从而提高收率。
4)本发明所述制备阿齐他赛的方法，避免了副产物的生成和杂质的引入，纯度高，便于分离。
总之，本发明能实现利用价廉易得的原料、低成本高收率合成阿齐他赛的目的，满足阿齐他赛的工业化生产需求。
具体实施方式
本发明由以下的实施例来更进一步阐明，然而这些实施例并不是用来限制上文所定义的或要求保护的本发明的范围。
实施例1
10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基巴卡亭III(式X化合物)的制备
0℃下，将N,O-双三乙基硅基三氟乙酰胺(467mL)和二(三甲基硅基)氨基锂(1M的正己烷溶液；4.1mL)在氩气氛下加入到搅拌着的10-去乙酰基巴卡亭III(75.2g)的四氢呋喃(2.6L)溶液中，加毕继续搅拌5分钟。向反应混合物中加入饱和氯化铵水溶液(2.8L)，再用乙酸乙酯(1.4L)萃取，用饱和氯化钠水溶液(400mL)洗合并的有机萃取液。经过蒸馏浓缩有机相，得到的固体用柱层析硅胶进行色层分离，流动相选用二氯甲烷：丙酮＝10：1。由此可得10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基巴卡亭III，收率95％。NMR光谱：(CDCl3)8.10(d,J＝7.2Hz,2H),7.60(t,J＝7.2Hz,1H),7.47(t,J＝7.2Hz,2H),5.64(d,J＝7.2Hz,1H),5.26(s,1H),4.97(d,J＝8.4Hz,1H),4.85(t,J＝7.6Hz,1H),4.30(d,J＝8.4Hz,1H),4.23(dd,J＝10.8,6.8Hz,1H),4.15(d,J＝8.4Hz,1H),4.00(d,J＝7.2Hz,1H),2.58(ddd,J＝15.6,9.6,6.4Hz,1H),2.33-2.23(m,1H),2.28(s,3H),2.09-2.03(m,1H),2.02(s,3H),1.82-1.69(m,1H),1.67(s,3H),1.18(s,3H),1.06(s,3H),0.98(t,J＝7.9Hz,9H),0.67(m,6H)；质谱：[M+Na]+681.3.
实施例2
7-丙酰基-10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基巴卡亭III(式XI化合物)的制备
方法一：0℃下，将丙酸酐(870mL)加入到搅拌着的混合有10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基巴卡亭III(81.8g)、三乙基胺(993mL)和4-二甲氨基吡啶(15.1g)的二氯甲烷(1.2L)浆液中，加毕继续搅拌30分钟。反应混合物用二氯甲烷(2.5L)稀释，再加入盐酸(2M；370mL)同时持续搅拌该反应混合物。反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(370mL)中和过量的盐酸，再用饱和氯化钠水溶液(400mL)洗。经过蒸馏浓缩有机相，得到的固体用柱层析硅胶进行色层分离，流动相选用二氯甲烷：丙酮＝15：1。由此可得7-丙酰基-10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基巴卡亭III,收率94％。NMR光谱：(CDCl3)8.08(d,J＝8.0Hz,2H),7.58(t,J＝7.1Hz,1H),7.45(t,J＝7.6Hz,2H),5.63(d,J＝6.8Hz,1H),5.45(dd,J＝10.0,7.6Hz,1H),5.26(s,1H),4.92(d,J＝9.2Hz,1H),4.80(t,J＝8.0Hz,1H),4.28(d,J＝8.4Hz,1H),4.15(d,J＝8.4Hz,1H),4.04(d,J＝6.8Hz,1H),2.59-2.47(m,1H),2.38-2.28(m,1H),2.28(s,3H),2.26(q,J＝7.6Hz,2H),2.10-2.04(m,1H),2.05(s,3H),1.85-1.70(m,1H),1.78(s,3H),1.15(s,3H),1.07(t,J＝7.6Hz,3H),1.02(s,3H),0.95(t,J＝8.0Hz,9H,0.56(q,J＝8.0Hz,6H)；质谱：[M+Na]+737.3.
方法二：将丙酸(22mL)加入到搅拌着的混合有10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基巴卡亭III(40.5g)、4-二甲氨基吡啶(7.3g)和1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳二亚胺(79.3g)的二氯甲烷(400mL)的浆液中，加毕继续搅拌2小时。反应混合物用二氯甲烷(500mL)稀释，再加入盐酸(2M；300mL)同时持续搅拌该反应混合物。反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(600mL)中和过量的盐酸，再用饱和氯化钠水溶液(400mL)洗。经过蒸馏浓缩有机相，得到的固体用柱层析硅胶进行色层分离，流动相选用二氯甲烷：丙酮＝15：1。由此可得7-丙酰基-10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基巴卡亭III,收率95％。
实施例3
7-丙酰基-10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基-2’-叔丁基二甲基硅氧基三尖杉宁碱(式XII化合物)的制备
-40℃下,将二(三甲基硅基)氨基锂(1M的正己烷溶液；161.9mL)在氩气氛下加入到搅拌着的7-丙酰基-10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基巴卡亭III(77.1g)的四氢呋喃(770mL)的溶液中。加毕后搅拌反应10分钟，再加入(3R,4S)-1-((E)-2-甲基-2-丁烯酰基)-4-苯基-3-叔丁基二甲基硅氧基氮杂环丁烷基-2-酮(58.2g)。加毕后搅拌反应1小时。反应混合物用饱和氯化铵水溶液(6.5L)洗，再用乙酸乙酯(2.1L)萃取。用饱和氯化钠水溶液(700mL)洗合并的有机萃取液。经过蒸馏浓缩有机相，得到的固体用柱层析硅胶进行色层分离，流动相选用石油醚：乙酸乙酯＝5：1。由此得到7-丙酰基-10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基-2’-叔丁基二甲基硅氧基三尖杉宁碱，收率91％。NMR光谱：(CDCl3)8.12(d,J＝7.6Hz,2H),7.60(t,J＝7.2Hz,1H),7.51(t,J＝7.6Hz,2H),7.37(t,J＝7.2Hz,2H),7.29(m,3H),6.70(d,J＝8.8Hz,1H),6.48(q,J＝6.4Hz,1H),6.20(t,J＝8.8Hz,1H),5.73(d,J＝6.8Hz,1H),5.56(d,J＝8.8Hz,1H),5.47(dd,J＝10.0,7.6Hz,1H),5.27(s,1H),4.94(d,J＝9.2Hz,1H),4.59(s,1H),4.33(d,J＝8.4Hz,1H),4.22(d,J＝8.4Hz,1H),4.01(d,J＝6.8Hz,1H),2.59-2.47(m,1H),2.57(s,3H),2.39(dd,J＝15.2,9.6Hz,1H),2.29(q,J＝7.6Hz,3H),2.22-2.11(m,1H),1.89-1.93(m,1H),1.93(s,3H),1.84(s,3H),1.81(s,3H),1.74(d,J＝6.4Hz,3H),1.21(s,6H),1.10(t,J＝7.6Hz,3H),0.97(t,J＝7.6Hz,9H),0.80(s,9H),0.67-0.49(m,6H),-0.03(s,3H),-0.32(s,3H)；质谱：[M+H]+1074.4.
实施例4
2-去苯甲酰基-7-丙酰基-10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基-2’-叔丁基二甲基硅氧基三尖杉宁碱(式XIII化合物)的制备
-50℃下,将苄基三甲基氢氧化铵(质量分数40％的甲醇溶液；88.9mL)加入到搅拌着的7-丙酰基-10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基-2’-叔丁基二甲基硅氧基三尖杉宁碱(105.4g)的四氢呋喃(2.0L)的溶液中，加毕继续搅拌反应2小时。反应混合物用饱和氯化铵水溶液(3L)洗，再用乙酸乙酯(2L)萃取。用饱和氯化钠水溶液(600mL)洗合并的有机萃取液。经过蒸馏浓缩有机相，得到的固体用柱层析硅胶进行色层分离，流动相选用石油醚：乙酸乙酯＝1：1.5。由此得到2-去苯甲酰基-7-丙酰基-10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基-2’-叔丁基二甲基硅氧基三尖杉宁碱，收率81％。NMR光谱：(CDCl3)7.35(t,J＝7.0Hz,2H),7.29(d,J＝7.0Hz,1H),7.23(d,J＝7.5Hz,2H),6.69(d,J＝9.0Hz,1H),6.47(q,J＝8.0Hz,1H),6.13(t,J＝8.5Hz,1H),5.51(d,J＝9.5Hz,1H),5.44(dd,J＝10.0,7.0Hz,1H),5.19(s,1H),4.94(d,J＝8.5Hz,1H),4.66(2H,brs),4.51(d,J＝1.5Hz,1H),3.95(d,J＝7.0Hz,1H),3.64(d,J＝6.5Hz,1H),2.53-2.47(m,1H),2.37(s,3H),2.27(q,J＝7.0Hz,2H),2.17-2.14(m,2H),1.90(m,1H),1.87(s,3H),1.86(s,3H),1.81(s,3H),1.77(d,J＝6.8Hz,3H),1.18(s,3H),1.08(s,4H),1.06(t,J＝7.6Hz,3H),0.95(t,J＝7.5Hz,9H),0.80(s,9H),0.62-0.51(m,6H),-0.07(s,3H),-0.31(s,3H)；质谱：[M+H]+970.4.
实施例5
2-去苯甲酰基-2-(3-叠氮基苯甲酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基-2’-叔丁基二甲基硅氧基三尖杉宁碱(式XIV化合物)的制备
将4-二甲氨基吡啶(11.7g)和3-叠氮基苯甲酰氯(10.8mL)加入到搅拌着的2-去苯甲酰基-7-丙酰基-10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基-2’-叔丁基二甲基硅氧基三尖杉宁碱(15.9g)的甲苯(318mL)的溶液中。反应混合物加热至70℃搅拌反应72小时。反应混合物用乙酸乙酯(636mL)稀释，再加入盐酸(2M；100mL)同时持续搅拌该反应混合物。之后反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)洗， 再用饱和氯化钠水溶液(100mL)洗。经过蒸馏浓缩有机相，得到无需进一步纯化可直接使用的2-去苯甲酰基-2-(3-叠氮基苯甲酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基-2’-叔丁基二甲基硅氧基三尖杉宁碱。[部分2-去苯甲酰基-2-(3-叠氮基苯甲酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基-2’-叔丁基二甲基硅氧基三尖杉宁碱(式XIV化合物)用以下方法分离：用柱层析硅胶进行色层分离，流动相选用石油醚：乙酸乙酯＝5：1。由此得到固体的2-去苯甲酰基-2-(3-叠氮基苯甲酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基-2’-叔丁基二甲基硅氧基三尖杉宁碱。NMR光谱：(CDCl3)7.90(d,J＝7.6Hz,1H),7.82(s,1H),7.50(t,J＝7.6Hz,1H),7.42-7.26(m,5H),7.24(d,J＝8.4Hz,1H),6.70(d,J＝8.4Hz,1H),6.47(q,J＝8.8Hz,1H),6.15(t,J＝8.8Hz,1H),5.72(d,J＝6.8Hz,1H),5.53(d,J＝8.4Hz,1H),5.47(dd,J＝10.0,7.6Hz,1H),5.27(s,1H),4.95(d,J＝9.2Hz,1H),4.55(s,1H),4.35(d,J＝8.4Hz,1H),4.21(d,J＝8.4Hz,1H),4.02(d,J＝6.8Hz,1H),2.57-2.51(m,1H),2.51(s,3H),2.45-2.34(m,1H),2.29(q,J＝7.4Hz,2H),2.25-2.17(m,1H),1.92(s,3H),1.85(s,3H),1.90-1.84(m,1H)1.81(s,3H),1.74(d,J＝8.8Hz,3H),1.20(s,6H),1.10(t,J＝7.4Hz,3H),0.97(t,J＝8.0Hz,9H),0.82(s,9H),0.68-0.49(m,6H),-0.03(s,3H),-0.31(s,3H)；质谱：[M+H]+1115.4.]
实施例6
2-去苯甲酰基-2-(3-叠氮基苯甲酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基三尖杉宁碱(式I化合物)的制备
0℃下，将吡啶(144mL)和氟化氢水溶液(质量分数40％；77.6mL)加入到搅拌着的2-去苯甲酰基-2-(3-叠氮基苯甲酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-10-三乙基硅氧基-2’-叔丁基二甲基硅氧基三尖杉宁碱(19.5g)的乙腈(560mL)的溶液中。反应混合物加热至25℃搅拌反应12小时。用饱和碳酸氢钠水溶液调节反应液pH至8—9之间，再用乙酸乙酯(800mL)对反应混合物进行萃取，用饱和氯化钠水溶 液(240mL)洗。经过蒸馏浓缩有机相，得到的固体用柱层析硅胶进行色层分离，流动相选用石油醚：乙酸乙酯＝2：1。由此得到2-去苯甲酰基-2-(3-叠氮基苯甲酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基三尖杉宁碱，合并实施例5两步总收率74％。NMR光谱：(CDCl3)7.89(d,J＝7.6Hz,1H),7.79(s,1H,H-2),7.48(t,J＝7.6Hz,1H),7.44-7.29(m,5H),7.24(d,J＝8.0Hz,1H),6.60(d,J＝8.8Hz,1H),6.42(q,J＝6.8Hz,1H),6.14(t,J＝8.8Hz,1H),5.66(d,J＝6.8Hz,1H),5.59(d,J＝8.8Hz,1H),5.42(dd,J＝10.0,7.6Hz,1H),5.30(s,1H),4.93(d,J＝9.2Hz,1H),4.69(s,1H),4.32(d,J＝8.4Hz,1H),4.20(d,J＝8.4Hz,1H),3.98(d,J＝6.8Hz,1H),2.57-2.46(m,1H),2.35(s,3H),2.30-2.22(m,2H),2.27(q,J＝7.2Hz,2H),1.97-1.87(m,1H),1.84(s,3H),1.83(s,3H),1.80(s,3H),1.72(d,J＝6.8Hz,3H),1.21(s,3H),1.09(t,J＝7.2Hz,3H),1.09(s,3H,Me-16)；质谱：[M+H]+887.4。