本发明涉及化合物的纯化方法，具体涉及妥布霉素的纯化方法。
背景技术：
妥布霉素化学名称：o-3-氨基-3-脱氧-α-o-葡吡喃糖基-(1→6)-o-[2，6-二氨基-2，3，6-三脱氧-α-d-核-己吡喃糖基-(1→4)]-2-脱氧-d-链霉胺；分子式为：c18h37n5o9，分子量为：467.52，化学结构式为：
妥布霉素是美国礼来(lilly)公司在1967年从黑暗链霉素(s.tenebrarius)发酵液中分离的得到的，是世界临床广泛使用的氨基糖苷类抗生素之一。临床主要用于敏感细菌引起的严重感染，如革兰阴性菌特别是绿脓杆菌、大肠杆菌及肺炎杆菌等引起的烧伤感染、败血症、呼吸系统感染、泌尿系统感染、胆囊胆道感染及软组织严重感染等。
《中国医药工业杂志》(chinesejournalofpharmaceuticals2003.34(1))中《妥布霉素结晶工艺的改进》，文章讨论了乙醇加量与发酵液体积比与收率的关系，添加晶种与产品效价的关系，以及结晶时搅拌、结晶分离时洗涤与产品效价之间的关系。
《山东医药工业》2002年第二十一卷第2期《妥布霉素结晶工艺的研究》尝试了用甲醇、乙醇、丁二醇、丙酮作为溶析剂，对妥布霉素进行结晶，讨论了直接、搅拌、静置、共沸和加入晶种结晶的结晶方法，对产品质量、收率的影响。
现有技术对于妥布霉素结晶工艺的探讨，得出经过滴加乙醇、温度变化、加晶种、控制搅拌速度的传统结晶方法，使产品纯度和收率提高，另外还提及了高纯度结晶液条件下的共沸结晶。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种纯化妥布霉素的方法。本发明通过大量的结晶工艺实验研究惊奇地发现，在结晶过程中添加(s)-(+)-乳酸盐，能增加溶剂环境对妥布霉素粗品中杂质的溶解度，获得高纯度、易分离的晶体，提高产品质量。
本发明所述妥布霉素粗品，是由黑暗链霉素发酵液中提取出来的卡拉霉素b经水解后获得。上述妥布霉素粗品的制备方法为本领域公知的成熟技术方案，本发明不做特殊限定。
具体而言，本发明提供了一种纯化妥布霉素的方法，所述方法包括以下步骤：将妥布霉素粗品溶解在水中，加热条件下滴加(s)-(+)-乳酸盐的低级醇溶液，降温结晶，分离结晶后洗涤、干燥，即得。
其中，所述(s)-(+)-乳酸盐选自(s)-(+)-乳酸铵、(s)-(+)-乳酸钠、(s)-(+)-乳酸钾、(s)-(+)-乳酸锂中的一种或多种；优选为(s)-(+)-乳酸钠。
所述低级醇为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇中的一种或多种；优选为乙醇。
作为本发明的优选方案，所述(s)-(+)-乳酸盐的低级醇溶液浓度为0.5～10g/100ml，优选为1～5g/100ml，更优选为2～5g/100ml。
为了提高所述杂质的去除效果，且避免对最终产品的收率造成不利影响，本发明优选所述妥布霉素粗品与(s)-(+)-乳酸盐的重量比为1：0.1～20，优选为1：0.4～5。
在溶解妥布霉素粗品时，每1g妥布霉素粗品用1.8～25ml水溶解，优选用3～18ml水溶解，更优选用5～10ml水溶解。
为了提高结晶效果，确保所得产物具有良好的收率以及纯度，本发明对加热温度以及降温终点温度进行优选。具体而言，所述加热条件为55～85℃
水浴加热，优选为65℃水浴加热；所述降温具体为：缓慢降温至-15℃20℃，优选为0～15℃。
作为本发明的一种优选实施方案，所述方法包括以下步骤：将妥布霉素粗品以1g/8～10ml溶于水，60～70℃热水浴条件下滴加800～880ml浓度为2～5g/100ml的(s)-(+)-乳酸钠乙醇溶液，静置，缓慢冷却至10℃，抽滤收集晶体，用乙醇洗涤晶体，真空干燥，即得。
本发明提供的方法创造性地提出利用(s)-(+)-乳酸盐的低级醇溶液改变杂质的溶解性，从而提高妥布霉素的收率和产品质量。该方法工艺简单，操作简便，所得产物收率高，纯度可达99％以上，具有很强的推广和实用价值。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
以下各实施例中，妥布霉素粗品按照常规方法制备而成，具体为：取发酵液，经732树脂吸附、分离后氨水解吸，浓缩，水解，上151柱，解吸，脱色，一次结晶，分离，干燥，即得。经常规hplc法检测，所述粗品中妥布霉素的含量为89.86％。
以下各实施例中，(s)-(+)-乳酸、(r)-(-)-乳酸钠和(s)-(+)-乳酸钠得自武藏野化学有限公司；(s)-(+)-乳酸铵是通过将(s)-(+)-乳酸加入到甲醇中，通干燥的氨气，饱和后减压除去甲醇而获得；(s)-(+)-乳酸锂是通过将(s)-(+)-乳酸加入到甲醇中，加入等摩尔数的氢氧化锂，摇匀减压在蒸干而得；(s)-(+)-2-丁醇得自杭州邦进出口有限公司。
实施例1
按照以下方法纯化妥布霉素：
取10g妥布霉素粗品，80ml水溶解，热水浴65℃，30min滴加乙醇560ml，静置结晶；逐步冷却至10℃，抽滤，用95％乙醇80ml洗涤，真空干燥，得成品7.52g；经常规hplc法检测，纯度为98.27％。
实施例2
按照以下方法纯化妥布霉素：
取10g妥布霉素粗品，80ml水溶解，热水浴65℃，35min滴加乙醇800ml，静置结晶；逐步冷却至10℃，抽滤，用95％乙醇80ml洗涤，真空干燥，得成品8.43g；经常规hplc法检测，纯度为97.69％。
实施例3
按照以下方法纯化妥布霉素：
取10g妥布霉素粗品，80ml水溶解，热水浴65℃，35min滴加含有19.89g(s)-(+)-乳酸钠的乙醇溶液800ml，静置结晶；逐步冷却至10℃，抽滤，用95％乙醇80ml洗涤，真空干燥，得成品8.04g；经常规hplc法检测，纯度为99.41％。
实施例4
按照以下方法纯化妥布霉素：
取10g妥布霉素粗品，80ml水溶解，热水浴65℃，40min滴加含有21.88g(s)-(+)-乳酸钠的乙醇溶液880ml，静置结晶；逐步冷却至10℃，抽滤，用95％乙醇80ml洗涤，真空干燥，得成品8.51g；经常规hplc法检测，纯度为99.33％。
实施例5
按照以下方法纯化妥布霉素：
取10g妥布霉素粗品，80ml水溶解，热水浴65℃，35min滴加含有4.95g(s)-(+)-乳酸钠的乙醇溶液800ml，静置结晶；逐步冷却至10℃，抽滤，用95％乙醇80ml洗涤，真空干燥，得成品7.55g；经常规hplc法检测，纯度为98.10％。
实施例6
按照以下方法纯化妥布霉素：
取10g妥布霉素粗品，80ml水溶解，热水浴65℃，35min滴加含有49.72g(s)-(+)-乳酸钠的乙醇溶液800ml，静置结晶；逐步冷却至10℃，抽滤，用95％乙醇80ml洗涤，真空干燥，得成品4.16g；经常规hplc法检测，纯度为99.02％。
实施例7
按照以下方法纯化妥布霉素：
取10g妥布霉素粗品，70ml水溶解，热水浴65℃，30min滴加乙醇640ml，静置结晶；逐步冷却至4℃，抽滤，用95％乙醇80ml洗涤，真空干燥，得成品7.86g；经常规hplc法检测，纯度为98.19％。
实施例8
按照以下方法纯化妥布霉素：
取10g妥布霉素粗品，30ml水溶解，热水浴58℃，35min滴加含有8.20g(s)-(+)-乳酸钠的甲醇330ml，静置结晶；逐步冷却至5℃，抽滤，用95％乙醇80ml洗涤，真空干燥，得成品8.47g；经常规hplc法检测，纯度为97.83％。
实施例9
按照以下方法纯化妥布霉素：
取10g妥布霉素粗品，30ml水溶解，热水浴58℃，35min滴加甲醇330ml，静置结晶；逐步冷却至5℃，抽滤，用95％乙醇80ml洗涤，真空干燥，得成品8.63g；经常规hplc法检测，纯度为96.04％。
实施例10
按照以下方法纯化妥布霉素：
取10g妥布霉素粗品，70ml水溶解，热水浴65℃，35min滴加含有16.36g(s)-(+)-乳酸锂的乙醇溶液800ml，静置结晶；逐步冷却至4℃，抽滤，用95％乙醇80ml洗涤，真空干燥，得成品8.24g；经常规hplc法检测，纯度为98.51％。
实施例11
按照以下方法纯化妥布霉素：
取10g妥布霉素粗品，180ml水溶解，热水浴65℃，40min滴加含有41.84g(s)-(+)-乳酸銨的乙醇溶液1760ml，静置结晶；逐步冷却至0℃，抽滤，用95％乙醇80ml洗涤，真空干燥，得成品6.47g；经常规hplc法检测，纯度为98.23％。
实施例12
按照以下方法纯化妥布霉素：
取10g妥布霉素粗品，80ml水溶解，热水浴65℃，35min滴加含有19.89g(r)-(-)-乳酸钠的乙醇溶液800ml，静置结晶；逐步冷却至10℃，抽滤，用95％乙醇80ml洗涤，真空干燥，得成品6.92g；经常规hplc法检测，纯度为97.28％。
实施例13
按照以下方法纯化妥布霉素：
取10g妥布霉素粗品，80ml水溶解，热水浴65℃，35min滴加含有16g(s)-(+)-2-丁醇的乙醇溶液800ml，静置结晶；逐步冷却至10℃，抽滤，用95％乙醇80ml洗涤，真空干燥，得成品7.72g；经常规hplc法检测，纯度为96.43％。
实施例14
按照以下方法纯化妥布霉素：
取10g妥布霉素粗品，80ml水溶解，热水浴65℃，35min滴加含有9.95g(s)-(+)-乳酸钠和9.51g(s)-(+)-乳酸銨的乙醇溶液800ml，静置结晶；逐步冷却至10℃，抽滤，用95％乙醇80ml洗涤，真空干燥，得成品7.90g；经常规hplc法检测，纯度为98.72％。
实施例15
按照以下方法纯化妥布霉素：
取10g妥布霉素粗品，100ml水溶解，热水浴85℃，35min滴异丙醇800ml，静置结晶；逐步冷却至15℃，抽滤，用95％乙醇80ml洗涤，真空干燥，得成品8.03g；经常规hplc法检测，纯度为96.92％。
实施例16
按照以下方法纯化妥布霉素：
取10g妥布霉素粗品，100ml水溶解，热水浴85℃，35min滴加含有19.89g((s)-(+)-乳酸钠的异丙醇溶液800ml，静置结晶；逐步冷却至15℃，抽滤，用95％乙醇80ml洗涤，真空干燥，得成品7.94g；经常规hplc法检测，纯度为98.40％。
将以上各实施例中主要参数进行汇总，如表1所示。
表1：纯化妥布霉素的参数
由表1数据可以看出，妥布霉素粗品结晶过程中，加入适量的(s)-(+)-乳酸盐对结晶收率和产品质量有明显提高作用。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。