绵羊胸膜肺炎支原体病毒荧光探针及快速检测方法与流程

文档序号:12249872阅读:来源:国知局

技术特征:

1.绵羊胸膜肺炎支原体病毒荧光探针,其特征在于:是由猝灭材料以及染料标记的人工序列构成;其中,所述的猝灭材料选自氧化石墨、还原石墨烯或二氧化锰中的一种;所述的染料为Cy3、Cy5、FAM、罗丹明B中的一种;所述的人工序列为下述中的一种:

5′-tgttgttcctaggtcaatacctaaaattatttcttttgccatat-3’;

5′-ttcctaggtcaatacctaaaattatttcttttgcc-3′;

5′-aggtcaatacctaaaattatttctt-3′;

5′-tgttgttcctaggtcaatacctaaaattatttcttttgccatat-3′;

5′-tgttgttcctaggtcaatacctaaaattatttcttttgccatat-3′;

5′-tgttgttcctaggtcaatacctaaaattatttcttttgccatat-3′。

2.根据权利要求1所述的绵羊胸膜肺炎支原体病毒荧光探针,其特征在于:所述染料标记的人工序列为下述中的一种:

Cy5-ssDNA-1:5′-Cy5-tgttgttcctaggtcaatacctaaaattatttcttttgccatat-3’;

Cy5-ssDNA-2:5′-Cy5-ttcctaggtcaatacctaaaattatttcttttgcc-3′;

Cy5-ssDNA-3:5′-Cy5-aggtcaatacctaaaattatttctt-3′;

Cy3-ssDNA-1:5′-Cy3-tgttgttcctaggtcaatacctaaaattatttcttttgccatat-3′;

FAM-ssDNA-1:5′-FAM-tgttgttcctaggtcaatacctaaaattatttcttttgccatat-3′;

罗丹明B-ssDNA-1:5′-RB-tgttgttcctaggtcaatacctaaaattatttcttttgccatat-3′。

3.根据权利要求1所述的绵羊胸膜肺炎支原体病毒荧光探针,其特征在于:所述的二氧化锰材料为二氧化锰纳米微球或二氧化锰纳米片层。

4.根据权利要求1所述的绵羊胸膜肺炎支原体病毒荧光探针,其特征在于:所述的猝灭材料选自下述中的一种:氧化石墨片径0.5-5μm,单层厚度0.8~1.2nm;还原石墨烯片径0.2~5μm,单层厚度0.8~1.2nm;二氧化锰片层片径300~500nm,单层厚度0.4~0.8nm,二氧化锰微球粒径0.8~1.2μm。

5.根据权利要求1所述的绵羊胸膜肺炎支原体病毒荧光探针,其特征在于:所述探针为下述的一种:

探针1:二氧化锰纳米微球以及Cy5-ssDNA-1;

探针2:二氧化锰纳米微球以及Cy5-ssDNA-2;

探针3:二氧化锰纳米微球以及Cy5-ssDNA-3;

探针4:二氧化锰纳米微球以及Cy3-ssDNA-1;

探针5:二氧化锰纳米微球以及FAM-ssDNA-1;

探针6:二氧化锰纳米微球以及罗丹明B-ssDNA-1;

探针7:二氧化锰纳米片层以及Cy5-ssDNA-1;

探针8:二氧化锰纳米片层以及Cy5-ssDNA-2;

探针9:二氧化锰纳米片层以及Cy5-ssDNA-3;

探针10:二氧化锰纳米片层以及FAM-ssDNA-1;

探针11:二氧化锰纳米片层以及Cy3-ssDNA-1;

探针12:二氧化锰纳米片层以及罗丹明B-ssDNA-1;

探针13:氧化石墨以及Cy5-ssDNA-1;

探针14:氧化石墨以及FAM-ssDNA-1;

探针15:氧化石墨以及Cy3-ssDNA-1;

探针16:氧化石墨以及罗丹明B-ssDNA-1;

探针17:还原石墨烯以及Cy5-ssDNA-1;

探针18:还原石墨烯以及FAM-ssDNA-1;

探针19:还原石墨烯以及Cy3-ssDNA-1;

探针20:还原石墨烯以及罗丹明B-ssDNA-1。

6.利用权利要求1所述的荧光探针的检测方法,其特征在于:检测MO时,先将经过92-97℃加热3-8mins后热解的MO加入测试液,然后在60-70℃下加入权利要求1所述的荧光探针,进行特异性互补配对3-8mins;最后根据荧光强度变化对MO病毒浓度的变化可以实现MO病毒的特异性检测。

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