本发明属于药物技术领域，涉及一类新型羟嗪衍生物及其制备方法、其在抗肿瘤药物中的用途和制剂。
技术背景
前列腺癌已成为威胁老年男性健康的重要疾病。前列腺癌是西方国家男性发病率最高、死亡率居第二位的实体肿瘤(J.Radiat.Res,2011,52,743-751)。在美国，前列腺癌的发病率已经超过肺癌，成为第一位危害男性健康的肿瘤。据美国癌症协会估计，2013年美国大约有238590例新发前列腺癌，有29720例将死于此病(CACancer J.Clin.2013,63,11-30)。在欧洲，每年得到确诊的新发前列腺癌病例大约有416700人，前列腺癌占全部男性癌症的22.8％，占全部男性癌症死亡人数的9.5％(Eur.J.Cancer,2013,49,1374-1403)。2012年我国肿瘤登记地区前列腺癌发病率为9.92/10万，列男性恶性肿瘤发病率的第6位。
羟嗪是第一代抗组胺药，毒性低，具有松驰横纹肌的作用、抗组胺作用和胆碱作用，具有镇静、弱安定及肌肉松弛作用，并有抗组胺作用。适用于轻度的焦虑、紧张、情绪激动状态以及绝经期的焦虑和不安等精神和神经症状；亦用于失眠、麻醉前镇静、急慢性荨麻疹以及其它过敏性疾思、神经性皮炎等。
发明人长期从事抗肿瘤的研发，设计、筛选并合成了如式(I)结构的新型羟嗪衍生物。
技术实现要素：
本发明的目的之一是提出一种新型羟嗪衍生物，体外抗肿瘤细胞测试证明这类化合物对人前列腺癌细胞具有明显抑制活性。
本发明的目的之二是提供一种上述新型羟嗪衍生物的制备方法。
本发明的目的之三是提供一种上述新型羟嗪衍生物在抗肿瘤药物中的用途。
本发明的目的之四是提供一种包含上述新型羟嗪衍生物的药物制剂。
发明人发现，式(I)的化合物或其互变异构体、对映异构体、非对映异构体、外消旋体、代谢物、前药、水合物、溶剂化物及其盐，及其季铵化的氮类似物针对三种常见的人前列腺癌细胞株PC-3、LNCaP和DU145具有显著抑制作用。与现有技术已知的抗肿瘤药物Naftopidil相比，IC50值显著降低。
为实现上述目的，一方面，本发明提供了一种新型羟嗪衍生物，其为式(I)的化合物，或其互变异构体、对映异构体、非对映异构体、外消旋体、代谢物、前药、水合物、溶剂化物、盐，及其季铵化的氮类似物，
其中，
R1和R2各自独立地为氢、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、羧基、1至20个碳原子的烷基、1至20个碳原子的烷氧基、2至20个碳原子的烯基、2至20个碳原子的烯氧基、5至14个碳原子的环烷基、5至14个碳原子的杂环烷基、5至14个碳原子的环烯氧基、5至14个碳原子的杂环烯氧基、5至14个碳原子的环烷基烷基、5至14个碳原子的杂环烷基烷基、5至14个碳原子的环烯氧基烷基、5至14个碳原子的杂环烯氧基烷基、1至20个碳原子的氨烷基、1至20个碳原子的烷氨基、2至20个碳原子的酰基、2至20个碳原子的酰氨基、1至20个碳原子的烷氧基酰基、1至20个碳原子的硫代烷基、1至20个碳原子的卤代烷基、1至20个碳原子的卤代烷氧基；
m和n各自独立地为1-10的整数；
条件是，R1和R2至少其中之一为卤素。
当描述本发明的化合物时，除非上下文另有说明，否则，术语按照下述定义解释：术语“卤素”本身或作为其它取代基的一部分是指氟、氯、溴和碘。
术语“烷基”本身或作为其它取代基的一部分是指式CxH2x+1的完全饱和的烃(基)，其中x是大于或等于1的数字。一般地，本发明的烷基包含1至20个碳原子。烷基可以是直链或支链的，并且可以是如本文指出的被取代的。当本文使用的下标在碳原子后时，所述下标是指命名的基团可以含有的碳原子数目。例如，“C1-C10”等同于C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9或C10。“C1-C20”等同于C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、C12、C13、C14、C15、C16、C17、C18、C19、C20。“C2-C10”、“C3-C10”等定义类似，不再赘述。优选，烷基是C1-C20烷基，C1-C10烷基，C1-C8烷基，C1-C6烷基，或C1-C4烷基。进一步地，例如，C1-C6烷基包括所有具有1至6个碳原子的直链，支链的烷基，从而包括甲基，乙基，正丙基，异丙基，丁基和其异构体(例如正丁基，异丁基和叔丁基)，戊基和其异构体，己基和其异构体。
术语“烷氧基”表示具有式-ORb的残基，其中Rb是烷基。优选，烷氧基是C1-C20烷氧基，C1-C10烷氧基，C1-C8烷氧基，C1-C6烷氧基，或C1-C4烷氧基。烷氧基的非限制性实例包括甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，丁氧基，异丁氧基，仲-丁氧基，叔-丁氧基，戊氧基和己氧基。
术语“烯基”本身或作为其它取代基的一部分是指式CxH2x+1中的任意一个或多个CH2-CH2被C＝C双键替代的不饱和烃(基)，其中x是大于或等于2的数字。一般地，本发明的烯基包含2至20个碳原子。烯基可以是直链或支链的，并且可以是如本文指出的被取代的。当本文使用的下标在碳原子后时，所述下标是指命名的基团可以含有的碳原子数目。例如，“C2-C10”等同于C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9或C10。“C2-C20”等同于C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、C12、C13、C14、C15、C16、C17、C18、C19、C20。“C2-C10”、“C3-C10”等定义类似，不再赘述。优选，烷基是C2-C20烯基，C2-C10烯基，C2-C8烯基，C2-C6烯基，或C2-C4烯基。进一步地，例如，C2-C6烯基包括所有具有2至6个碳原子的直链，支链的烯基，从而包括乙烯基，正丙烯基，异丙烯基，丁烯基和其异构体(例如正丁烯基，异丁烯基和叔丁烯基)，戊烯基和其异构体，己烯基和其异构体。
术语“烯氧基”表示具有式-ORc的残基，其中Rc是烯基。优选，烯氧基是C2-C20烯氧基，C2-C10烯氧基，C2-C8烯氧基，C2-C6烯氧基，或C2-C4烯氧基。烯氧基的非限制性实例包括乙烯氧基，丙烯氧基，异丙烯氧基，丁烯氧基，异丁烯氧基，仲-丁烯氧基，叔-丁烯氧基，戊烯氧基和己烯氧基。
术语“氨烷基”表示烷基中的一个或多个CH2中的H原子被氨基或取代氨基(即胺基)的烷基。优选，氨烷基是C1-C20氨烷基，C1-C10氨烷基，C1-C8氨烷基，C1-C6氨烷基，或C1-C4氨烷基。氨烷基的非限制性实例包括氨甲基，氨乙基，氨丙基，氨异丙基，氨丁基，氨异丁基，氨仲-丁基，氨叔-丁基，氨戊基和氨己基。
术语“烷氨基”表示氨基中的一个或两个H原子被烷基或取代的烷基所进一步取代的氨基。优选，烷氨基是C1-C20烷氨基，C1-C10烷氨基，C1-C8烷氨基，C1-C6烷氨基，或C1-C4烷氨基。烷氨基的非限制性实例包括甲氨基，二甲氨基，乙氨基，二乙氨基，丙氨基，二丙氨基，异丙氨基，二异丙氨基，丁氨基，二丁氨基，异丁氨基，二异丁氨基，仲-丁氨基，二仲-丁氨基，叔-丁氨基，二叔-丁氨基，戊氨基，二叔-丁氨基，己氨基和二己氨基。
术语“烷基酰基”本身或作为其它取代基的一部分是指-C(＝O)Rc，其中Rc是如前文针对烷基所定义。优选，烷基酰基是C1-C20烷基酰基，C1-C10烷基酰基，C1-C8烷基酰基，C1-C6烷基酰基，或C1-C4烷基酰基。烷基酰基的非限制性实例包括甲烷基酰基，乙烷基酰基，丙烷基酰基，异丙烷基酰基，丁烷基酰基，异丁烷基酰基，仲-丁烷基酰基，叔-丁烷基酰基，戊烷基酰基和己烷基酰基。
术语“烷基酰胺基”本身或作为其它取代基的一部分是指-NHC(＝O)Rd，其中Rd是如前文针对烷基所定义。优选，烷基酰胺基是C1-C20烷基酰胺基，C1-C10烷基酰胺基，C1-C8烷基酰胺基，C1-C6烷基酰胺基，或C1-C4烷基酰胺基。烷基酰胺基的非限制性实例包括甲烷基酰胺基，乙烷基酰胺基，丙烷基酰胺基，异丙烷基酰胺基，丁烷基酰胺基，异丁烷基酰胺基，仲-丁烷基酰胺基，叔-丁烷基酰胺基，戊烷基酰胺基和己烷基酰胺基。
术语“烷氧基酰基”本身或作为其它取代基的一部分是指-C(＝O)ORe，其中Re是如前文针对烷基所定义。优选，烷氧基酰基是C1-C20烷氧基酰基，C1-C10烷氧基酰基，C1-C8烷氧基酰基，C1-C6烷氧基酰基，或C1-C4烷氧基酰基。烷氧基酰基的非限制性实例包括甲烷氧基酰基，乙烷氧基酰基，丙烷氧基酰基，异丙烷氧基酰基，丁烷氧基酰基，异丁烷氧基酰基，仲-丁烷氧基酰基，叔-丁烷氧基酰基，戊烷氧基酰基和己烷氧基酰基。
术语“硫代烷基”表示烷基中的一个或多个CH2中的H原子被巯基(-SH)或取代巯基(即烷硫基)的烷基。优选，硫代烷基是C1-C20硫代烷基，C1-C10硫代烷基，C1-C8硫代烷基，C1-C6硫代烷基，或C1-C4硫代烷基。硫代烷基的非限制性实例包括甲硫代烷基，乙硫代烷基，丙硫代烷基，异丙硫代烷基，丁硫代烷基，异丁硫代烷基，仲-丁硫代烷基，叔-丁硫代烷基，戊硫代烷基和己硫代烷基。
术语“烷硫基”表示巯基(-SH)中的H原子被烷基或取代的烷基所进一步取代的巯基。优选，烷硫基是C1-C20烷硫基，C1-C10烷硫基，C1-C8烷硫基，C1-C6烷硫基，或C1-C4烷硫基。烷硫基的非限制性实例包括甲烷硫基，乙烷硫基，丙烷硫基，异丙烷硫基，丁烷硫基，异丁烷硫基，仲-丁烷硫基，叔-丁烷硫基，戊烷硫基，和己烷硫基。
术语“卤代烷(氧)基”表示烷基中的一个或多个CH2中的H原子被卤素取代的烷(氧)基。卤素选自氟，氯，溴和碘。优选，卤代烷(氧)基是C1-C20卤代烷(氧)基，C1-C10卤代烷(氧)基，C1-C8卤代烷(氧)基，C1-C6卤代烷(氧)基，或C1-C4卤代烷(氧)基。卤代烷(氧)基的非限制性实例包括卤代甲烷(氧)基，卤代乙烷(氧)基，卤代丙烷(氧)基，卤代异丙烷(氧)基，卤代丁烷(氧)基，卤代异丁烷(氧)基，卤代仲-丁烷(氧)基，卤代叔-丁烷(氧)基，卤代戊烷(氧)基，和卤代己烷(氧)基。进一步地，例如卤代烷基的非限制性实例包括氯代甲(氧)基，1-溴代乙(氧)基，氟代甲(氧)基，二氟甲(氧)基，三氟甲(氧)基，1,1,1-三氟乙(氧)基，等等。
术语“环烷基”指的是饱和且环状的烷基，其本身或作为另一基团的部分表示但不限于5至14个碳-原子脂肪环或环系。环烷基一般地含有5至14个环原子，更优选5-12，更加优选5-10个；以及最优选5-8个。环烷基的非限制性实例包括环戊基，环己基，2-，或3-甲基环戊基，环庚基，和2-，3-，或4-甲基环己基。
术语“杂环烷基”指的是饱和且环状的烷基，其本身或作为另一基团的部分表示但不限于5至14个碳-原子脂肪环或环系。一般地含有5至14个环原子，更优选5-12，更加优选5-10个；以及最优选5-8个；其中这些环的一个或多个中的一个或多个碳原子被O，N或S原子取代，其中氮和硫杂原子可以任选地被氧化，并且氮杂原子可以任选地被季铵化。杂环烷基的非限制性实例包括2-，或3-氧杂环戊基，1，2-，或3-氮杂环戊基，2-，或3-硫杂环戊基，2-，3-，或4-氧杂环己基，1-，2-，3-，或4-氮杂环己基，2-，3-，或4-硫杂环己基，等等。
术语“环烯基”、“杂环烯基”、“环烷基烷基”、“杂环烷基烷基”、“环烯氧基烷基”、“杂环烯氧基烷基”与上述“烷基”和“(杂)环烷(烯)基”类似，可以具有一个或多个双键，但同时不具备芳香性，不再赘述。
术语“1-10的整数”指的是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10。此外，术语“1-10的整数”还包括其任意子范围，例如“1-6的整数”、“1-4的整数”和“2-8的整数”。这些子范围同样表示所述范围内的任意整数。例如，“1-6的整数”指的是1、2、3、4、5、6。“1-4的整数”指的是1、2、3、4。
进一步地，本发明提供了一种新型羟嗪衍生物，其为式(I)的化合物，或其互变异构体、对映异构体、非对映异构体、外消旋体、代谢物、前药、水合物、溶剂化物、盐，及其季铵化的氮类似物，
其中，
R1和R2各自独立地为氢、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、羧基、1至6个碳原子的烷基、1至6个碳原子的烷氧基、2至6个碳原子的烯基、2至6个碳原子的烯氧基、1至6个碳原子的氨烷基、1至6个碳原子的烷氨基、2至6个碳原子的酰基、2至6个碳原子的酰氨基、1至6个碳原子的烷氧基酰基、1至6个碳原子的硫代烷基、1至6个碳原子的卤代烷基、1至6个碳原子的卤代烷氧基；
m和n各自独立地为1-6的整数；
条件是，R1和R2至少其中之一为卤素。
更进一步地，本发明提供了一种新型羟嗪衍生物，其为式(I)的化合物，或其互变异构体、对映异构体、非对映异构体、外消旋体、代谢物、前药、水合物、溶剂化物、盐，及其季铵化的氮类似物，
其中，
R1和R2各自独立地为氢、卤素、氨基、羟基、硝基、氰基、羧基、1至6个碳原子的烷基、1至6个碳原子的烷氧基、1至6个碳原子的卤代烷基、1至6个碳原子的卤代烷氧基；
m和n各自独立地为1-4的整数；
条件是，R1和R2至少其中之一为氟或氯原子。
在一个具体的实施方式中，本发明新型羟嗪衍生物，其选自式(II)或式(III)的化合物：
除非上下文另有说明，术语“本发明化合物”可以宽泛地表示包括式(I)化合物和任意衍生物。术语“衍生物”表示本发明化合物的互变异构体、对映异构体、非对映异构体、外消旋体、代谢物、N-氧化物、前药、水合物、溶剂化物及其盐，以及它们的季铵化的氮类似物，等等。
例如，本发明化合物可以以不同的互变异构体的形式存在，所述互变异构体包括但不限于几何异构体，构象异构体，E/Z-异构体，立体化学异构体，和相应于在本发明的化合物中存在的环不同的位置上存在的相同取代基的异构体。全部这种可能的互变异构体和其混合物包括在本发明的范围中。
本发明化合物可以含有一个或多个不对称碳原子，所述不对称碳原子充当手性中心，其可以导致不同的旋光形式(例如对映异构体、非对映异构体和外消旋体)。本发明包含全部可能构型的全部这种旋光形式，以及其混合物。
本发明化合物的季铵化的氮类似物表示其中一个或几个N原子被季铵化的本发明化合物。
本发明化合物的水合物和溶剂化物表示水分子或溶剂分子以结晶或非结晶形式参与形成本发明化合物固体形式的物质。
本发明化合物的盐包括式(I)所示的化合物的药学上可接受的盐。药学上可接受的盐包括，其中可应用的、衍生自可药用无机以及有机酸的酸性加成盐如氢氯酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、4-甲氧基苯甲酸盐、2-或4-羟基苯甲酸盐、4-氯苯甲酸盐、苯磺酸盐、烟酸盐、甲磺酸盐、抗坏血酸盐、乙酸盐、琥珀酸盐、乳酸盐、戊二酸盐、葡糖酸盐、羟基萘羧酸盐、油酸盐及氨基酸盐，常用的氨基酸盐是指甘氨酸盐、丙氨酸盐、苯丙氨酸盐、天冬氨酸盐、门冬氨酸盐、蛋氨酸盐、赖氨酸盐、色氨酸盐、谷氨酸盐和苏氨酸盐等；以及从可药用无机以及有机碱制备的盐，衍生自无机碱的盐包括铝、铵、钙、铜、铁、亚铁、锂、镁、锰、亚锰、钾、钠、锌以及铋盐，特别优选的为铵、钙、镁、钾、钠盐。衍生自可药用有机碱的盐包括伯、仲以及叔胺、环状胺如精氨酸甜菜碱、胆碱等的盐。
本发明化合物的衍生物还可以进一步涉及其代谢物和前药。这些形式均是本领域技术人员所熟知的。
另一方面，本发明还提供了一种上述新型羟嗪衍生物的制备方法，其特征在于，分别制备下列式(III)中间体和式(IV)中间体，
其中，
R1、R2、m和n如上定义，X为离去基团；
然后，式(III)中间体和式(IV)中间体反应得到产物。
如上所述的制备方法，其中，式(IV)中间体由相应的羧酸及其衍生物在硼烷二甲基硫醚络合物还原下制备得到。
如上所述的制备方法，其中，式(III)中间体和式(IV)中间体在碱性条件下回流反应得到产物。
如上所述的制备方法，其中，所述碱选自氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、乙醇钠、乙醇钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾、氨基钠、三乙胺、三丁胺或N-甲基吗啉。优选地，所述碱选自氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾。更优选地，所述碱选自碳酸钠、碳酸钾。最优选地，所述碱选自碳酸钾。
如上所述的制备方法，其中，反应所用溶剂选自甲醇、乙醇、乙醚、乙腈、丙醇、丁醇、四氢呋喃、苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、甲基叔丁基醚、二氧六环、DMF、DMSO中的一种或其中几种的混合溶剂。
在一个具体的实施方式中，当本发明新型羟嗪衍生物选自式(II)或式(III)的化合物时，制备方法如下：
首先制备下列式(III)中间体，
然后按照下列反应路线制备式(II)或式(III)的化合物：
最后，本发明还提供了一种所述羟嗪衍生物在制备抗肿瘤药物中的用途。
如上所述的用途，其中，所述肿瘤是前列腺癌。
对于药物用途，本发明的羟嗪衍生物可以配制为药物制剂或药物组合物的形式，所述药物制剂或药物组合物包含至少一种本发明的羟嗪衍生物和至少一种药学上可接受的载体，稀释剂或赋形剂和/或助剂，以及任选地包含一种或多种其他药学活性的化合物。
例如，本发明的药物制剂可以是适于经口给药的形式，适于用于局部给药(包括眼的)的形式，适于用于通过吸入，通过皮肤贴剂，通过植入物，通过栓剂，等给药的形式。这种适宜的给药形式(例如固体，半固体或液体，取决于给药方式)以及用于其制备的方法和载体，稀释剂和赋形剂。
本发明的药物制剂包括片剂，丸剂，粉末，糖锭，小袋，扁囊剂，悬浮液，乳液，溶液，糖浆剂，气雾剂，软膏剂，霜剂，洗剂，软和硬明胶胶囊，栓剂，滴剂，无菌可注射的溶液和无菌包装粉末。用于药丸形式的给药和/或用于连续的给药，其可以采用载体，赋形剂，和稀释剂配制，所述载体，赋形剂，和稀释剂本身是适用于这种配制剂，比如乳糖，葡萄糖，蔗糖，山梨醇，甘露醇，淀粉，阿拉伯树胶，磷酸钙，藻酸盐，黄蓍胶，明胶，硅酸钙，微晶纤维素，聚乙烯基吡咯烷酮，聚乙二醇，纤维素，无菌水，甲基纤维素，甲基-和丙基羟基苯甲酸酯，滑石，硬脂酸镁，可食用油，植物油和矿物油或其适宜的混合物。所述配制剂能够任选地含有其它药学活性的物质和在药物配制剂中一般使用的其它物质，比如润滑剂，润湿剂，乳化和助悬剂，分散剂，崩解剂，填充剂，填料，防腐剂，甜味剂，矫味剂，流动调节剂，脱模剂，等。所述组合物还可以被配制以，提供其中含有的活性的化合物的快速的，持续的或延缓的释放，例如采用基于天然凝胶或合成的聚合物的脂质体或亲水高分子基质。为了增强根据本发明药物组合物的化合物的溶解度和/或稳定性，能够有利的是采用α-，β-或γ-环糊精或它们的衍生物。
此外，共溶剂例如醇类溶剂可以改善化合物的溶解度和/或稳定性。在含水组合物的制剂中，加入本发明羟嗪衍生物的盐能够是更适宜的，其原因在于盐有利于增加的水溶解度。
药物制剂可以是以本领域已知的方式制备，通常涉及混合至少一种根据本发明的羟嗪衍生物和一个或多个药学上可接受的载体，优选在无菌的条件下进行。
本发明还提供了一种药用制剂，所述制剂由本发明的羟嗪衍生物以及药用载体辅料或稀释剂所组成；其中，所述药用制剂的给药途径选自以乳剂、溶液、混悬剂、气雾剂以及干粉制剂的形式进行局部给药，或以片剂、胶囊、糖浆、散剂或颗粒口服制剂给药，或以溶液或混悬液的形式进行肠胃外给药，或进行皮下给药；或以栓剂的形式经直肠给药，或透皮给药。
本发明的羟嗪衍生物具有明显的前列腺癌肿瘤细胞抑制活性。
本发明的羟嗪衍生物的剂量可以随给药方式和病人的年龄、体重和病情而变化。例如，当以针剂形式给药时，剂量通常在大约0.001-100mg/kg/天的范围，优选在大约0.1-10mg/kg/天的范围。当以口服制剂形式给药时，剂量通常在大约0.1-200mg/kg/天的范围，优选在大约0.1-80mg/kg/天的范围。
与现有技术已知的抗肿瘤药物Naftopidil相比，针对三种常见的人前列腺癌细胞株PC-3、LNCaP和DU145，本发明羟嗪衍生物的IC50值显著降低。因此，可望成为一种更加高效的抗前列腺癌药物。
具体实施方式
下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
通过下述实施例将有助于理解本发明，但不能限制本发明的范围。
实施例1：中间体(IV)的制备
在250mL圆底烧瓶中加入5g(0.021mol)4-(溴乙烷)苯乙酸，100mL四氢呋喃，在0℃下缓慢加入21.9mL硼烷二甲基硫醚络合物(BMS，2M in THF)。反应混合物在0℃下反应1h后，然后逐渐恢复常温。反应结束后缓慢加入水终止反应，用乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合并有机相，有机相分别用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。粗产物没有纯化直接用于下一步反应。
实施例2：式(II)化合物的制备
在250mL圆底烧瓶中加入4g(18.7mmol)中间体2，5.34g(18.7mmol)1-((4-chlorophenyl)(phenyl)methyl)piperazine，10.32g(74.8mmol)碳酸钾，150mL乙腈，在65℃下反应16h。TLC显示原料反应完全。停止反应，过滤，浓缩。粗产物经硅胶柱层析纯化，洗脱剂：V(乙酸乙酯):V(石油醚)＝1:10，得5.89g白色固体，收率：75％(以原料4-(溴乙烷)苯乙酸计算)。
M.p.:130-131℃；MS(ESI,m/z):421.1[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.89–7.13(m,13H),4.29(s,2H),3.66(br s,10H),3.57(t,J＝6.9Hz,2H),2.71(t,J＝6.9Hz,2H)。
熔点测定用a Fisher Johns hot-stage测定仪(温度计未校正)。衍生物的1HNMR用瑞士Bruker AVANCE AV-400NB测定，TMS做内标。ESI质谱用Thremo DSQ质谱仪测定。以下测定条件相同。
实施例3：式(III)化合物的制备
在250mL圆底烧瓶中加入4g(18.7mmol)中间体2，5.38g(18.7mmol)1-(bis(4-fluorophenyl)methyl)piperazine，10.32g(74.8mmol)碳酸钾，150mL乙腈，在65℃下反应16h。TLC显示原料反应完全。停止反应，过滤，浓缩。粗产物经硅胶柱层析纯化，洗脱剂：V(乙酸乙酯):V(石油醚)＝1:10，得5.52g白色固体，收率：70％(以原料4-(溴乙烷)苯乙酸计算)。M.p.:133-134℃；MS(ESI,m/z):423.2[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.70(br s,4H),7.46(d,J＝8.0Hz,2H),7.22(d,J＝8.0Hz,2H),7.18(t,J＝8.2Hz,4H),4.27(s,2H),3.66(br s,10H),3.55(t,J＝6.9Hz,2H),2.68(t,J＝6.9Hz,2H)。
实施例4：体外抗肿瘤细胞活性测试
(1)材料：
(1.1)CCK-8试剂盒购于日本同仁化学研究所。
(1.2)靶细胞的制备：人前列腺癌细胞系PC-3、LNCaP、DU145以及正常的前
列腺上皮细胞WPMY-1的复苏与培养。
a.分别从液氮罐中取出人前列腺癌细胞系PC-3、LNCaP、DU145以及正常的前列腺上皮细胞WPMY-1的冷存管，迅速置入37℃水浴箱中，不停摇动使之迅速溶化，无菌操作移入离心管中；
b.分别加DMEM完全培养液到PC-3细胞及WPMY-1细胞的离心管至10mL，F12完全培养基到LNCaP细胞的离心管至10mL，1640完全培养基到DU145细胞的离心管至10mL，1000rmp离心5min，弃上清。
c.PC-3、WPMY-1细胞分别加DMEM完全培养基3-4mL吹打使细胞混匀后移入培养瓶中，LNCaP细胞加3-4mL的F12完全培养基吹打使细胞混匀后移入培养瓶中，DU145细胞加3-4mL的1640完全培养基吹打使细胞混匀后移入培养瓶中，5％CO2，37℃培养；
d.观察细胞生长情况，及时更换培养液，分瓶。
(1.3)细胞计数：
a.选取对数生长期细胞，胰酶消化，分别对应的完全培养基终止，移入离心管中，加相应的完全培养基至10mL；
b.取10μL细胞悬液滴入计数板一侧凹槽中，显微镜下计数四个大格的细胞总数、除以4，乘104，即为每毫升培养液所含细胞数；
c.调整细胞数至1×105cells/mL。
(1.4)醚类芳基哌嗪衍生物溶液配置：
取醚类芳基哌嗪衍生物加入DMSO溶剂，调整初浓度为10mmol，配置浓度为1mmol待用，4℃保存。
(2)试验方法
(2.1)96孔板各孔加入人前列腺癌细胞系PC-3、LNCaP、DU145以及正常的前列腺上皮细胞WPMY-1100μL(1×105cells/mL)，37℃培养过夜。
(2.2)弃液，加入不同浓度的受试对象100μL，对照加DMEM完全培养基100μL，继续培养24h。.
(2.3)各孔加入CCK-8检测试剂10μL，继续培养20min至1h。
(2.4)酶标仪450nm下测定每孔OD值。
(2.5)计算抑制率：
肿瘤细胞抑制率％＝[(对照组测定的平均OD值—加药组测定的平均OD值)/对照组测定的平均OD值]×100％。
(2.6)以抑制率对药物浓度的对数作图，求得IC50值：
以lgc为横坐标，抑制率为纵坐标，求得IC50值。
表1是本发明化合物的体外抗肿瘤细胞活性结果。
表1
与现有技术已知的抗肿瘤药物Naftopidil相比，针对三种常见的人前列腺癌细胞株PC-3、LNCaP和DU145，本发明羟嗪衍生物的IC50值显著降低。因此，可望成为一种更加高效的抗前列腺癌药物。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均包含在本发明的保护范围之内。